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冷冻技术的相关危险及应对措施
近年来,随着冷冻技术的不断发展和在生殖领域的广泛应用,其安全性也逐渐受到人们的关注.冷冻精子、卵子、胚胎以及卵巢或睾丸组织是辅助生殖领域的重要服务项目.这些标本如何得到安全、妥善的保存,如何应对与冷冻有关的危险均成为敏感而重要的问题.从标本的采集、处理、冷冻保存到标本的解冻和终使用,无论在实施冷冻技术的过程中还是冷冻设备本身都存在许多危险因素,如:对工作人员的伤害,标本的丢失或混淆,标本提前意外解冻,标本间的交叉污染等[1],这些危险事件的发生与许多因素有关.提供冷冻服务的医学中心必须要有相关的评估系统,即对冷冻过程中可能出现的意外情况进行预先的评估并制定相应的预防和应急措施.在许多国家(如英国、澳大利亚、新西兰等)都有量化的评价系统,可以指导人们采取有效措施,尽量减少和避免意外事件的发生.本文将重点讨论在实施冷冻技术时应该特别注意的问题.
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玻璃化冷冻对卵母细胞和胚胎DNA甲基化影响的研究进展
低温保存技术是辅助生殖和生育力保存技术的重要组成部分。1983年,第1例人类冷冻胚胎成功移植并获得临床妊娠后,慢速程序化冷冻技术逐渐被用于临床工作,但是冷冻过程中冰晶的形成和渗透压的改变对胚胎造成的不可逆的损伤一直被广泛关注。玻璃化冷冻技术的出现无疑是巨大的进步,其通过快速降温从而抑制细胞内冰晶的形成,减少了渗透压及激冷等对细胞的损伤,提高了卵母细胞复苏后的存活率。由于其冷冻速度快、过程简单、无需昂贵的程序冷冻仪,以及高复苏率、高妊娠率等优势,已逐渐取代传统的慢速程序化冷冻。此外,玻璃化冷冻卵巢也常用于女性恶性肿瘤化疗前,为女性生育力保存问题提供了解决方法。然而,玻璃化冷冻过程引起的卵裂球丢失、卵泡超微结构受损等不可避免地在一定程度上影响了胚胎的发育潜能,但是否对表观遗传学修饰造成影响并没有确切的结论。
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冷冻手术过程中冰球形成物理参数的意义
一、材料与方法取预先配制的D-Hanks液,DMEM培养基,全血,G422胶质瘤细胞悬液(用D-Hanks液稀释,细胞浓度为1×107个/ml)和双蒸水各1000ml,分别盛于1000ml的烧杯中,在冷冻前1个小时将烧杯置于37℃的恒温浴槽中预热1小时,用直径3mm的LCS-3000型冷冻治癌机实施冷冻.冷冻过程中,分别在1,3,5,7,9,11,13,15分钟各复温一次,在各时间点用游标卡尺测定冰球的横径、纵径后溶解称重.将各参数与时间参数输入电脑,用EXCEL软件作图,得出一系列曲线.
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冷冻保存机采血小板第3因子活性、粘附和聚集功能的改变
近年来,随着成分输血的临床使用经验日益丰富,各种血液成分,特别是血小板的临床应用量不断上升.用血细胞分离机采集的血小板以其独具的优势逐渐取代传统手工制备血小板.鉴于临床对机采血小板的各种紧急和特殊需求,国内外输血医学界就机采血小板冷冻保存的方法学、冷冻过程中引起的细胞损伤及其临床使用效果等方面进行了深入研究[1~4].
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解密神奇的人体冷冻技术
很多人都知道人体冷冻技术,但具体的冷冻过程以及冷冻之后的复活技术,恐怕就没多少人能说出个所以然来了.
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振动切片法在胎儿角膜组化研究中的应用及探讨
胎儿角膜即小又薄且透明,将之完全剥离进行切片的可行性很小,所以要在完整眼球上切片.根据组织化学研究的要求在制片过程中需要保护酶的活性,常规技术都是采取冷冻切片法进行切片.但用此法进行试验,切出的均为碎片.作者分析认为,可能是在液氮冷冻过程中眼球内容物冰晶化所致.后来我们进行了探索,采用振动切片法取得了较好的效果.
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冻肉有学问,解冻有讲究
[速冻有优势]在冷冻过程中,肉先降温到-1℃~-5℃,这个温度区间叫做“冰晶生成带”,大多数水分会在这个温度结成冰.但如果长时间停留在此温度下,冰晶会不断生长,由于冰的体积比水大,冰晶会膨胀挤压周围的肌肉细胞及肌纤维结构,造成机械性损伤.因此推荐采用速冻的方式,形成的冰晶较小,对肉质的影响也相对较小.