液相色谱-质谱/质谱法快速测定保健品中违禁成分麻黄碱、伪麻黄碱和盐酸芬氟拉明

[目的]建立快速测定保健品中违禁添加成分麻黄碱、伪麻黄碱和盐酸芬氟拉明的液相色谱-质谱/质谱(LC-MS/MS)检测方法.[方法]样品用甲醇-水(8+2)提取后,采用LC-MS/MS电喷雾正离子(ESI+)电离,多反应监测(MRM)模式检测,外标法定量.[结果]麻黄碱、伪麻黄碱和盐酸芬氟拉明的方法检测限分别为0.5mg/kg、0.5mg/kg、0.05 mg/kg.在添加水平为0.5-25mg/kg的范围内,麻黄碱和伪麻黄碱的回收率为82.0%～99.2%;相对标准偏差(RSD)不高于7.9%;在添加水平为0.05～2.5mg/kg的范围内,盐酸芬氟拉明的回收率为83.1%～99.6%;相对标准偏差(RSD)不高于6.8%.[结论]本方法准确、灵敏、快捷,能够满足对保健品中违法添加的麻黄碱、伪麻黄碱和盐酸芬氟拉明的检测要求.

选对药物轻松治感冒

刚暖和了几天,忽然又冷了起来,这种乍暖还寒的天气容易让人罹患感冒了.这不,早早换去冬装的小陈就不幸“中招”了,鼻涕、喷嚏不断,咽喉肿痛难忍,看来不吃药不行了,小陈赶紧去了药店.面对药店里琳琅满目的感冒药,小陈可是犯了难,选哪个呢?拿拿这个,看看那个,就是不知道哪个更适合自己.药店里的驻店药师见状,急忙走过来为小陈答疑解惑.药师告诉小陈,别看感冒药种类繁多,其实西药感冒药的成分主要分为四大类,第一类成分是针对感冒发热、头痛的解热镇痛剂,比如对乙酰氨基酚,布洛芬等,可退热、缓解头痛、肌肉酸痛;第二类成分是针对感冒鼻塞的鼻黏膜血管收缩剂,比如伪麻黄碱,可减轻感冒后鼻窦、鼻腔黏膜血管的充血,能解除鼻塞症状;第三类成分是针对打喷嚏的抗组胺药,比如马来酸氯苯那敏、苯海拉明等,可解除打喷嚏、流鼻涕、流眼泪等过敏症状;第四类成分是治疗感冒后咳嗽的镇咳药,比如氢溴酸右美沙芬,可缓解上呼吸道感染时伴发的咽痒、咳嗽等症状.

189 固相萃取-高效液相色谱法检测含麻黄方剂中的(+)-伪麻黄碱和(一)-麻黄碱

麻黄中的主要活性成分对原发性痛经模型小鼠的作用研究

目的 研究麻黄中的主要活性成分麻黄碱与伪麻黄碱对原发性痛经模型小鼠的影响,为阐明麻黄在葛根汤治疗原发性痛经中的作用积累实验理论基础.方法 采用缩宫素诱导的原发性痛经小鼠模型,以扭体反应次数和扭体潜伏期为主要观测指标,考察麻黄碱(Ephedrine)与伪麻黄碱(Pseudoephedrine)的镇痛作用.通过检测血清环磷酸腺苷(cAMP)和钙离子(Ca2+)的含量以及子宫组织中环氧合酶(COX-2)蛋白的表达,初步探讨麻黄碱与伪麻黄碱抑制小鼠子宫平滑肌收缩的作用机制.结果 麻黄碱中剂量组(6 mg/kg),高剂量组(12 mg/kg)和伪麻黄碱中剂量组(6 mg/kg),高剂量组(12 mg/kg)均能显著抑制原发性痛经模型小鼠的扭体反应次数;麻黄碱高剂量组能显著延长扭体反应潜伏期;麻黄碱中、高剂量组和伪麻黄碱高剂量组能显著增加血清cAMP含量,降低Ca2+的含量;麻黄碱和伪麻黄碱中、高剂量组均能显著下调COX-2蛋白的表达.结论 麻黄碱与伪麻黄碱剂量依赖性地缓解原发性痛经模型小鼠的疼痛反应,其发挥镇痛作用可能与参与调节Ca2+水平和抗炎作用有关,为进一步阐明麻黄在葛根汤治疗原发性痛经中的作用机制奠定了一定的理论依据.

双黄平喘颗粒中的成分鉴别及含量测定研究

目的：探索建立双黄平喘颗粒中矮地茶、黄芩、淫羊藿、女贞子的薄层鉴别，岩白菜素及盐酸麻黄碱等的含量测定方法，为制订双黄平喘颗粒的质量标准提供参考。方法矮地茶、黄芩等的鉴别采用薄层色谱法，盐酸麻黄碱、伪麻黄碱、岩白菜素的含量测定采用高效液相色谱法（HPLC）。结果所用的薄层方法鉴别矮地茶、黄芩、淫羊藿、女贞子，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑，阴性对照在对应位置无此斑点。含量测定中盐酸麻黄碱在范围0.0408~1.0200μg 内线性关系良好（r =0.9998），加样回收率为99.67%；伪麻黄碱在范围0.0294~0.5608μg 内线性关系良好（r =0.9999），加样回收率为98.88%；岩白菜素在范围0.05643~1.1286μg 内线性关系良好（r =0.9998），加样回收率为98.82%。结论该薄层鉴别方法操作简便、重现性好、专属性强，含量测定方法准确、稳定、可靠，可用作控制双黄平喘颗粒质量的方法。

麻黄汤中麻黄生物碱在人尿中的排泄研究

目的:研究人体口服中药复方麻黄汤煎液后,麻黄生物碱在人体内的代谢及排泄情况.方法:健康志愿者口服麻黄汤煎液后,收集不同时间的尿液,采用GC-MS法测定麻黄汤煎液以及人体口服麻黄汤煎液后尿液中的各麻黄生物碱的含量.结果:口服麻黄汤煎液中含去甲基伪麻黄碱(Norpseudoephedrine,NMP)4.38 mg,去甲基麻黄碱(Norephedrine,NME)3.24 mg,麻黄碱(Ephedrine,E)97.45 mg,伪麻黄碱(Pseudoephedrine,PE)26.15 mg,甲基麻黄碱(Methylephedrine,ME)6.16 mg.健康志愿者口服麻黄汤24 h后,尿液中NMP,NME,E,PE和ME的平均排泄量分别为5.20,9.46,68.39,23.73和2.35 mg,其平均累积排泄率分别为118.84%,291.96%,70.18%,90.74%和38.10%.结论:E作为麻黄汤煎液的主要活性成分之一,其在服药后(0～24)h各时间段排泄快,而ME排泄慢.口服麻黄汤煎液后,除一小部分的ME以原形排泄外,NMP,NME,E和PE则主要以原形代谢,通过肾脏从尿液中排出.

天杏咳喘贴中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的大鼠离体透皮试验

目的:测定天杏咳喘贴中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的大鼠离体透皮率.方法:以生理盐水为接受介质,采用HPLC测定盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱含量,考察天杏咳喘贴中2种成分的离体透皮率.结果:盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱24 h的离体透皮率分别为12.37％,12.04％,36 h的离体透皮率分别为14.81％,14.34％.结论:天杏咳喘贴中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的大鼠离体透皮率较高,为该制剂的临床疗效研究提供依据.

透皮特性结合正交试验优选麻芥平喘巴布剂有效组分的提取工艺

目的:优选麻芥平喘巴布剂的有效组分提取工艺.方法:以盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷的提取率和透过率为综合评价指标,采用正交试验优选提取工艺,提取物用Franz扩散池法进行体外透皮试验,HPLC测定伪麻黄碱、苦杏仁苷含量.结果:麻芥平喘有效组分的佳提取工艺为加6倍量80％乙醇回流提取2次,每次1.5h.结论:结合药效学指标优选的提取工艺符合实际应用需求,为麻芥平喘巴布剂的临床推广提供依据.

基于含药肠吸收液的麻黄-杏仁药对物质基础与作用机制分析

目的:探讨不同配比的麻黄-杏仁药对含药肠吸收液中化学成分含量-效应指标之间的关联性,初步阐明该药对的物质基础及作用机制.方法:选用U6(64)均匀设计表安排药对配比,采用UPLC-Q-TOF-MS/MS分析麻黄-杏仁药对含药肠吸收液中主要差异性成分及其含量;观察含药肠吸收液对大鼠气管环舒张率及组织中白细胞介素-2(IL-2),IL-4,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的影响;经多元线性回归分析效应指标与主要成分含量的相关性.结果:通过变量重要性投影值＞1.5找出该药对的显著性差异成分为去甲基麻黄碱(X1),伪麻黄碱(X2),甲基麻黄碱(X3),苦杏仁苷(X4);该药对能明显增加气管环的舒张率(Y1),升高组织中IL-2(Y2)含量,降低IL-4(Y3)与TNF-α(Y4)含量;以差异性成分含量为自变量,效应指标为因变量,得回归方程分别为Y1=-4 810.119X1+3 516.816X2-2 663.871X3-81.310X4+ 33.562(r=0.937),Y2=4 203.354X1-2 567.853X2+1 445.790X3+ 47.460X4+ 237.192(r=0.996),Y3=587.549X1-456.975X2+ 366.365X3+6.239X4+ 27.519(r =0.951),Y4=-21 958.981X1-35 885.568X2 +40 943.441X3+ 944.167X4+4 465.528(r=0.968).结论:麻黄-杏仁药对平喘的主要物质基础为去甲基麻黄碱、伪麻黄碱、甲基麻黄碱和苦杏仁苷.其平喘机制与各效应成分双向调节气道舒张与收缩功能,以及改变IL-4,IL-2,TNF-α含量等有关.

五虎汤中伪麻黄碱、麻黄碱溶出率的测定

目的:测定中药复方五虎汤中伪麻黄碱、麻黄碱的溶出率.方法:用50%甲醇水超声提取样品,在ODS柱上以40%乙腈-水(以H3PO4调pH为2.2,加0.5%的SDS)为流动相,在波长210nm处紫外检测.结果:测得麻黄碱、伪麻黄碱的溶出率分别为86.3%、89.4%.结论:中药复方五虎汤中伪麻黄碱、麻黄碱有较高的溶出率.

高效液相色谱法测定人血浆中伪麻黄碱浓度

目的:建立测定人血浆中伪麻黄碱浓度的方法.方法:血浆样品经混合碱液碱化、甲基叔丁基醚萃取、0.5%盐酸溶液酸化反提处理后,采用反相HPLC法测定.色谱柱:kromasil C18(250 mm×4.6mm,5μm),柱温30℃:流动相:0.01 mol·L-1磷酸盐缓冲液(0.3%三乙胺和1%十二烷基硫酸钠)-乙腈(62:38),流速1.0 mL·min-1;紫外检测波长210 nm.结果:伪麻黄碱在(0.015～1.60)mg·L-1范围内线性关系良好,回归方程为:Y=4.63×103X+3.76(r=0.999 8),该方法平均回收率为101.7%,日内RSD为3.4%～4.2%,日间RSD为6.4%～9.6%.结论:该法简便、灵敏、快速、稳定性好,可用于临床血药浓度检测及药代动力学研究.

麻黄正交提取工艺的研究

目的:研究麻黄中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的佳提取工艺条件.方法:以HPLC法为含量测定方法,采用正交法安排试验,考察乙醇提取用量(A),温浸次数(B),温浸时间(C)3个因素,每个因素选取3个水平,选出佳工艺.结果:因素A和因素C为主要影响因素.结论:以60%酸性乙醇20倍量,温浸3次,每次120min为佳提取条件.

喘平方在大鼠与人体内药代动力学参数比较

目的:比较喘平方在大鼠与人体内药代动力参数.方法:采用HPLC测定SD大鼠血液与人尿中麻黄碱和伪麻黄碱质量浓度,通过3P87软件计算大鼠血液中药动学参数,尿药亏量法计算人尿中药动学参数.结果:喘平方在大鼠体内与人体内药代动力学参数不尽相同.复方中麻黄与洋金花相互作用对麻黄碱、伪麻黄碱在大鼠体内的代谢无明显影响,但对2种成分在人体内代谢有影响,结论:药物高剂量给药在动物体内代谢过程与止常服用剂量在人体内代谢过程存在差异,动物高剂量给药试验不能如实反映药物在人体内代谢过程.

不同配伍比例对麻黄-甘草药对中麻黄类生物碱成分血浆药动学的影响

目的:研究麻黄-甘草(M H-GC)药对不同配比水煎液灌胃给予大鼠后,血浆中麻黄类生物碱含量的变化.方法:大鼠按体重随机等分成4组,分别为MH,MH-GC(12∶ 3),MH-GC(12∶ 6)和MH-GC(12∶ 12),于给药后不同时间点采血,给药量分别为7.42,9.28,11.13,14.84 g·kg-1.利用液液萃取法处理血浆样品,以盐酸金刚烷胺为内标,采用UPLC-MS/MS测定血浆样品中盐酸去甲基麻黄碱(NME),盐酸去甲基伪麻黄碱(NMP),盐酸麻黄碱(E),盐酸伪麻黄碱(PE)和盐酸甲基麻黄碱(ME)的血药浓度,利用DAS 3.0软件计算药动学参数.结果:与MH组相比,MH-GC(12∶3)组中NME和NMP的MRTo-t得到显著缩短,PE的t1/2z和Vz/F也显著降低;MH-GC(12∶ 6)组中NME,E和PE的AUCo-t均得到显著提高,PE的CL2/F和Vz/F显著降低;MH-GC(12∶ 12)组中E和PE的MRT0.t则显著延长,ME的CLJF显著提高.结论:麻黄与不同比例的甘草配伍后,5种麻黄类生物碱的部分药动学参数具有显著性差异.随着甘草用量的不同,所表现出的减毒或增效侧重点则不同,从药动学角度证明了古方用药针对不同病症药物用量不同的科学性与合理性.

HPLC法同时测定麻杏石甘汤中5种成分的含量

目的:建立同时测定麻杏石甘汤中麻黄碱、伪麻黄碱、苦杏仁苷、甘草苷和甘草酸5种成分含量的高效液相色谱法.方法:采用Agilent ZORBAX SB-Aq C18柱,流动相为乙腈-0.1％磷酸梯度洗脱,柱温为30℃,于207nm波长处测定麻黄碱、伪麻黄碱和苦杏仁苷,237nm处测定甘草苷和甘草酸,流速为1mL/min.结果:麻黄碱、伪麻黄碱、苦杏仁苷、甘草苷和甘草酸分别在24.9-498.5、10.0-199.8、107.3-2 145.0、11.0-243.3、32.5-698.3μg/mL浓度范围内线性关系良好(相关系数均大于0.999),5种成分的方法精密度(RSD)分别为1.40％、0.86％、1.49％、2.14％、1.20％,平均加样回收率分别为98.88％、99.03％、98.18％、97.31％、97.78％.结论:本法可同时测定麻杏石甘汤中上述5种成分,方法简便、重现性好,可用于麻杏石甘汤及其制剂的质量控制.

伪麻黄碱与麻黄碱对大鼠细胞色素P45O酶活性的影响

目的:分析伪麻黄碱与麻黄碱对大鼠细胞色素P450(CYP450)酶活性的影响.方法:大鼠CYP450酶探针底物双氯酚酸钠(CYP2C6)、奥美拉唑(CYP2C)、非那西丁(CYP1A2)、氯唑沙宗(CYP2E1)和睾酮(CYP3A)分别与不同作用浓度麻黄碱或伪麻黄碱在大鼠肝微粒体中共温孵反应适当时间后,用HPLC法测定探针底物的相对代谢清除率.结果:伪麻黄碱对CYP1A1/2、CYP2E1的IC50值分别为54.0和206.7μmoi/L,而麻黄碱(400μmol/L)能使非那西丁、双氯芬酸的相对代谢清除率分别提高了1.3倍和0.6倍.结论:伪麻黄碱对CYP1A1/2、CYP2E1活性一定抑制作用,而麻黄碱对CYP2C、CYP1A1/2活性有一定诱导作用.

麻黄碱和伪麻黄碱的毛细管电泳分离研究

目的：建立毛细管电泳分离麻黄碱与伪麻黄碱的方法。方法分别以甲基化-β-环糊精和羟丙基-β-环糊精为添加剂，采用毛细管电泳法分离麻黄碱和伪麻黄碱。考察添加剂的种类和浓度、缓冲溶液的浓度和pH值、运行电压、有机溶剂对麻黄碱和伪麻黄碱分离的影响。结果采用甲基化-β-环糊精和羟丙基-β-环糊精为添加剂均可以使麻黄碱和伪麻黄碱实现分离。前者的佳分离条件为：分离电压10 kV，25 mmol/L Tris-磷酸缓冲液（pH 2.42）含20 mg/mL甲基化-β-环糊精，此条件下麻黄碱和伪麻黄碱的分离度为1.56，在13 min内获得快速基线分离；后者的佳分离条件为：分离电压10 kV，25 mmol/L Tris-H3PO4缓冲液（pH 3.00）含50 mg/mL羟丙基-β-环糊精，此条件下麻黄碱和伪麻黄碱的分离度为2.73，在15 min内获得快速基线分离。结论此方法可靠、快速、重复性好，可作为麻黄碱和伪麻黄碱分离测定的方法。

盐酸伪麻黄碱生产工艺改革

目的:探讨盐酸伪麻黄碱生产新工艺流程,以解决长期存在的产品质量问题.方法:在研究精制伪麻黄碱的基础上,由伪麻黄碱制备盐酸伪麻黄碱.确定合成条件,考察产品质量和产率.结果:新工艺盐酸伪麻黄碱具良好稳定性,解决了产品结块问题,且较原工艺的产量有所提高.结论:在原生产工艺基础上的改革有生产应用价值.

毛细管区带电泳法测定麻黄及麻杏石甘汤中麻黄碱和伪麻黄碱的含量

目的:采用毛细管区带电泳法测定麻黄及麻杏石甘汤中麻黄碱和伪麻黄碱.方法:电泳缓冲液为50 mmol·L~(-1)硼砂/20 mmol·L~(-1)苏氨酸缓冲溶液(1 mol·L~(-1) NaOH溶液调pH至9.27);紫外检测波长210 nm,分离电压15 kV;以苯巴比妥为内标物,采用压力进样(10 cm×20 s),柱温室温.结果:麻黄碱与伪麻黄碱的线性范围分别为21.3～213,8.4～84 mg·L~(-1),相关系数分别为0.999 6,0.999 5,检测限分别为1.45,1.48 mg·L~(-1),定量限分别为4.81,4.93 mg·L~(-1).将该法用于麻黄中麻黄碱与伪麻黄碱的含量测定,平均回收率分别为97.5,98.6%.结论:本法操作简便、快速、经济、灵敏度高,麻黄及麻杏石甘汤中麻黄碱及伪麻黄碱可获得满意的分离,可作为麻黄和麻杏石甘汤中麻黄碱和伪麻黄碱的含量测定方法.

麻黄汤中臣佐使药对君药中伪麻黄碱的人体药代学的影响

目的:以君药效应成分伪麻黄碱(pseudo-ephedrine,PE)为指标,用GC-MS法考察不同配伍对PE药代学参数的影响规律,探索麻黄汤方中臣佐使药对君药人体内过程的影响.方法:对麻黄汤作正交设计拆成8个配伍组,每组8名健康男性志愿者,服药后在不同时间点抽取静脉血,测定血清中PE的含量,绘制药-时曲线;选用药代软件WinNonlin4.0.1求算药代学参数;采用SPSS 10.0软件对药代参数进行统计分析.结果:所有药时曲线均符合无滞后开放式一房室动力学模型;不同配伍对PE的部分药代学参数有显著影响(P＜0.05);方中各药味对PE的部分药代参数的影响有显著交互作用(P＜0.05).结论:臣佐使药对方中君药有效成分伪麻黄碱的药代学参数有一定影响.