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珠海口岸出入境人员人间禽流感病毒抗体水平调查
[目的] 调查珠海口岸出入境人员中H5和H92种亚型禽流感病毒血清抗体水平,以了解上述2种禽类甲型流感病毒亚型以往隐性感染情况,为防治人间禽流感提供科学依据.[方法] 采集珠海口岸出入境健康体检人员血清508份,通过血凝抑制试验(HI)进行H5和H9型禽流感病毒抗体检测.[结果] 出入境人员中H9亚型抗体阳性率为9.65%,同时发现有1份血清H5抗体阳性,H5抗体阳性率为0.20%.[结论] H9亚型在出入境健康人群中存在隐性感染;出入境健康人员中H5亚型抗体的存在也应值得注意.
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禽流感HA基因密码子优化的DNA疫苗构建及其免疫原性的初步研究
目的 构建H5 N1亚型禽流感病毒株密码子优化的血凝素(HA)DNA疫苗并研究其免疫原性.方法 应用MacVector软件分析H5N1亚型禽流感病毒A/Viet Nam1203/04株HA(H5-VN HA)基因序列,对这些序列进行密码子优化处理,人工合成优化后的H5-VN HA基因.将密码子优化H5-VN HA基因与pSW3891质粒连接,并以人组织纤维蛋白溶酶原激活剂(tPA)信号肽取代H5-VNHA信号肽,构建成表达H5-VN HA基因的重组质粒,命名为HA-VN.tPA(即密码子优化的H5-VN HA基因DNA疫苗).以HA-VN.tPA转染293T细胞,应用蛋白质印迹法检测转染细胞中HA蛋白的表达.以HA-VN.tPA对2只新西兰兔进行DNA免疫,用ELISA方法检测分析免疫后兔血清中HA特异性抗体的产生.结果 密码子优化的H5-VN HA基因中哺乳动物细胞偏爱的密码子频率高于野生型H5-VN HA基因.蛋白质印迹法分析结果表明,HA-VN.tPA转染293T细胞后,细胞裂解液中检测出HA蛋白的表达.ELISA分析结果表明,以HA-VN.tPA免疫3次后,实验兔体内产生了较高水平的HA特异性抗体(血清中平台期抗体滴度达1:13 500).结论 成功构建了H5N1亚型禽流感病毒密码子优化的HA基因DNA疫苗,该疫苗可引导免疫后宿主体内产生高滴度特异性抗体.
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1例H5N1型高致病性人禽流感患者的护理
总结1例H5N1型高致病性人禽流感患者护理经验.重点介绍了消毒隔离、人工气道、机械通气、肠内营养及精神支持等方面的护理经验.该患者住院52d,出院时肺功能试验接近中等恢复水平,心、肝、肾和消化道功能正常.
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15例人感染H7N9禽流感重症患者的护理
总结15例人感染H7N9禽流感重症患者的护理要点.严密监测病情,做好机械通气、体外膜肺氧合(ECMO)、人工肝和连续性肾脏替代治疗(CRRT)的护理,落实各项消毒隔离及防护措施,是成功抢救人感染H7N9禽流感重症患者,提高危重患者生存率的关键.本组11例患者治愈出院,4例死亡.
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12例人感染H7N9禽流感重症患者应用体外膜肺氧合治疗的监护
总结了12例人感染H7N9禽流感重症患者应用体外膜肺氧合(ECMO)治疗的监护体会.包括体外膜肺氧合治疗期间仪器运转、机械通气、血流动力学、体温和感染的监护,特别是重视并发症的预防与处理是患者治疗成功的关键.本组12例患者7例成功撤离ECMO,其中5例康复出院,1例还在继续康复中,1例并发多器官功能衰竭死亡;5例在ECMO治疗过程中死亡.
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关于对人禽流感病例监控的思考
阐述了目前全球高度重视禽流感疫情的缘由;亦对人类禽流感人传人的可能性进行了分析;并针对在防控人类禽流感中,如何早期发现人禽流感感染病例以及实验室在诊断中如何遵循生物安全等问题,提出了建议.
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人高致病性禽流感一例并文献复习
目的 提高临床医师对人禽流感的认识.方法 分析辽宁省首例H5N1型人禽流感患者的临床资料及文献复习.结果 患者女性,31岁,来自辽宁省黑山县禽流感疫区,发病前与病死鸡有密切接触史,以"发热8 d,咳嗽、气短5 d,腹泻3 d"为主诉于2005年11月7日由黑山县医院转入中国医科大学附属第一医院发热门诊进行隔离治疗.患者入院时呈重症肺炎、呼吸衰竭的表现,入院后末梢血白细胞减少,细胞免疫功能低下,心肌受累,ALT等多种酶学异常.经积极支持疗法、对症及抗病毒、抗感染治疗,患者病情逐渐好转,于2005年11月29日痊愈出院.该患者于出院后第9天(2005年12月8日)被确诊为H5N1型人禽流感.结论 本例高致病性人禽流感的成功救治是多学科密切协作的结果,与恰当的支持、对症治疗以及积极预防和及时处理并发症密不可分.
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我国应对禽流感和流感大流行若干关键问题探讨
1 发生全球流感大流行的可能性发生全球流感大流行应具备四个条件:首先是病毒变异产生新的亚型,或者流行过的病毒亚型对人类的威胁重新出现;其次是人类普遍易感;第三是疾病能在人群中快速传播;后是疾病对人类有强大的杀伤力,造成大量死亡.
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人用禽流感疫苗H5N1株三级毒种库的建立
目的:建立人用禽流感疫苗H5N1株三级毒种库,为生产疫苗提供毒种.方法:用SPF鸡胚培养病毒.对型别、滴度和无菌等各项检测合格后,建立人用禽流感疫苗H5N1株三级毒种库.结果:在33℃培养52 h条件下,毒种滴度为1:640～1:1 280;厌氧茵、细菌、真菌、支原体、血吸附病毒、非血吸附病毒和外源性禽白血病病毒检测均为阴性.将毒种在鸡胚上传至12代,滴度在1:320～1:640之间,中和抗体滴度在1:160以上,EID50在6.7以上;毒种HA、NA基因序列检测与公布的HA、NA基因序列的同源性达99.O%,代次之间达99.9%.结论:本工作为研制人用禽流感疫苗贮备了标准毒种.
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禽类骨髓细胞染色体标本制备实验方法的改进
以鸡和鹌鹑为实验材料,介绍一种改进的禽染色体标本制备技术.通过选取适宜的实验动物,改进秋水仙素的剂量、低渗的温度和时间、离心速度等关键步骤,阐述了有关染色体标本制备的实验方法和条件,建立了一套实用性强、染色体标本清晰、结果稳定、成本较低、简单易行的禽类染色体制片技术,为农业院校本科生、研究生进一步研究染色体核型和带型提供实验方法.
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禽脑脊髓炎病毒VP3基因的克隆与表达
目的 对VP3进行克隆和测序后,在杆状病毒系统中表达获得重组蛋白,为AEV的分子诊断以及更深一层次的分子和基因工程研究打下基础.方法 利用RT-PCR技术,从AEV VR株感染的SPF鸡胚脑及内脏器官组织中提取病毒RNA并扩增出VP3目的 基因,而后克隆到pMD18-T载体中,鉴定后进行序列测定;应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,将VP3基因定向克隆到pFastBacHTa donor质粒中,经转座反应,筛选到VP3-Bacmid重组子,转染sf9昆虫细胞并盲传三代,提取DNA应用PCR方法鉴定证实获得含VP3的重组病毒,Western blot鉴定VP3在杆状病毒系统中得以表达.结果 AEV VR株VP3基因全长735 bp,共编码245个氨基酸,与AEV-1143标准毒株相应片段的核苷酸和氨基酸同源性分别为93%和97%;并将其与其它小RNA病毒进行了比较;Western blot鉴定结果,重组蛋白大小约27 ku.结论 本研究通过RT-PCR技术首次从体外成功扩增AEV Van-Roekel株VP3蛋白基因,并对其进行克隆、测序;应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统成功地表达了VP3基因并获得了具有良好免疫活性的重组蛋白.
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禽脑脊髓炎病毒VP3基因的克隆与序列测定
目的对VP3进行克隆和测序,为禽脑脊髓炎病毒(AEV)的分子诊断以及更深一层次的分子和基因工程研究打下基础.方法利用RT-PCR技术,从AEV VR株感染的SPF鸡胚脑及内脏器官组织中提取病毒RNA并扩增出VP3目的基因,而后克隆到pMD18-T载体中,鉴定后进行序列测定.结果 AEV VR株VP3基因全长735bp,共编码245个氨基酸,与AEV-1143标准毒株相应片段的核苷酸和氨基酸同源性分别为93%和97%;并将其与其他小RNA病毒进行了比较.结论本研究通过RT-PCR技术从体外成功扩增AEV Van-Roekel株VP3蛋白基因,并对其进行克隆、测序.
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禽流感病毒感染食蟹猴肺组织内抗原提呈细胞亚型分析
目的 分析禽流感病毒感染的食蟹猴肺组织内抗原提呈细胞的不同亚型.方法 收集中国医学科学院实验动物研究所病理室禽流感病毒H5N1亚型感染的食蟹猴肺组织蜡块标本,观察其病理学变化及运用免疫组织化学的方法进一步分析CD68、CD14及S-100在感染禽流感病毒食蟹猴肺组织中的表达.结果 禽流感病毒感染的肺组织内肺间隔增宽伴巨噬细胞为主的炎细胞浸润,肺泡腔内可见血浆蛋白及纤维素渗出.部分肺泡间隔断裂,巨噬细胞及淋巴细胞浸润.肺组织内HSN1病毒抗原染色呈阳性.肺间隔及肺泡内可见大量CD68阳性细胞,局部可见散在CD14和S-100阳性细胞.结论 禽流感病毒感染的食蟹猴肺组织内抗原提呈细胞主要以巨噬细胞为主.
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5例人感染H7N9禽流感患者的护理
目的:总结在5例人感染H7N9禽流感患者的护理经验,探讨临床护理方法.方法:在治疗5例H7N9禽流感过程中,严密监测病情,严密消毒隔离及防护措施,做好接触隔离、发热对症处理及心理护理.结果:5例患者其中4例完全康复出院,1例因多脏器功能衰竭死亡.结论:对于感染H7N9禽流感患者早发现、早报告、早诊断、早治疗,加强重症病例救治,注意中西医并重,是有效防控、提高治愈率、降低病死率的关键.
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国内首例存活成年男性H5N1人禽流感治疗分析
截至2006年7月27日,全球共有254例人感染H5N1高致病性禽流感病例,死亡141例,病死率55.5%.而据中国疾病预防控制中心(CDC)确认的国内人感染H5N1禽流感病例共19例,死亡12例,病死率63.1%[1].深圳市于2006年6月10日收治、后经卫生部和世界卫生组织确诊为人感染H5N1高致病性禽流感感染的成年男性患者1例,经过51天的临床治疗成功出院,成为国内首例救治成功的成年男性H5N1人禽流感患者,现分析报道如下.
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人类禽流感病的研究进展
人类禽流感是由禽流感(avian influenza,AI)病毒感染人体引起的一种传染性疾病.禽流感病毒属于正黏病毒科的甲型流感病毒,通常具有种属特异性,只感染禽类动物,偶尔可感染猪或其他哺乳动物,但某些亚型(例如此次导致亚洲禽流感爆发的H5N1亚型)的禽流感病毒能够跨种属感染,在人类接触被其感染的病禽、病禽的排泄物或者被病禽排泄物所污染的土壤和(或)尘土后,会导致人类的感染,从而引起人类禽流感.
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禽流感患者识别与救治
·诊断对伴或不伴流感样症状的发热患者、或不明原因肺炎患者,特别在冬春季节,应详细询问流行病学史.
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禽流感的流行病学与临床特征
禽流感(avian influenza)是禽流行性感冒的简称.根据禽流感致病性的不同,可将其分为高致病性、低致病性和非致病性禽流感.近国内外由H5N1血清型引起的禽流感传播快、危害大,为高致病性禽流感,被国际兽疫局定为A类传染病.不仅是鸡,其他一些家禽和野鸟都能感染禽流感.1997年香港第1次发生人的禽流感感染.
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禽流感的诊治及预防对策
禽流感(avian influenza)是由甲型流感病毒引起的一种禽类疾病.近年来已确定这类病毒可感染人类引起发病,称为禽流感病毒感染或禽流感病[1].禽流感给人类带来了巨大的经济损失.目前亚洲及我国内地部分地区流行的禽流感病毒为H5N1型,是禽流感病毒中的高毒株,截止到2004年1月30日仅越南被禽流感病毒感染的确诊病例和疑似病例就达76人,其中24人已经死亡.截止到2004年2月4日,我国已出现高致病性禽流感疫情(包括确诊和疑似)23起,合计病禽56 417只,死亡49 236只,扑杀1 215 057只][2].因此加强禽流感的预防工作刻不容缓.现就其诊治和一些预防措施简述如下.
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澳大利亚John Murtagh全科病案研究(八)——40岁农村医生三天来干咳、肌肉疼痛、发热和寒战
1 病例简介WW先生,40岁,农村医生,症状发生前体健,3 d前突然出现干咳、咽痛、剧烈头痛、发热并伴寒战、腹泻、双眼烧灼样疼痛、肌肉剧痛或隐痛.就诊前12 h只能卧床,身体极度虚弱.体格检查:急性病容,精神差、移动困难.生命体征:脉搏70次/min,律齐.呼吸频率18次/min,体温39.5 ℃,血压130/85 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa). 无颈部强直或畏光症状,无黄疸.病人有轻度结膜炎,轻度咽部充血.吸气通畅,伴有喘息音,肺部听诊可闻及尖锐肺泡音.胸部X线片示无增生或渗出.
