"采和Ⅰ号"辐照灭菌及治疗冻伤效果的观察

"采和Ⅰ号"是一种治疗烫、冻伤的纯中药制剂,对制剂的灭菌要求严格.中草药带菌经过煎煮,是杀菌的一个重要步骤.在此基础上,本实验①将瓶装的成品分批作60Co 4、6、8KGy吸收量辐照.结果表明,都可达到彻底灭菌.②将辐照过的和未经辐照的"采和Ⅰ号"对兔冻伤模型进行治疗试验,经过4d的治疗,辐照过的与未辐照的均收到显效,都达到基本治愈,而无明显差别.而对照组仍处于Ⅱ度冻伤的病理改变.用60Co对"采和Ⅰ号"作辐照灭菌既彻底,又保持药物的稳定,省工省时,不愧是极理想的灭菌方法.

猕猴产后感染治疗与仔猴护理的体会

猕猴产后感染,临床上一般采取抗菌消炎、抑制渗出、促排恶露、防止败血病产生等方法治疗,即可获得满意的疗效.仔猴采取保温、人工喂乳等护理措施也可存活率.

小型猪心肌梗死模型的制作和判定

制作小型猪心肌梗死和缺血模型,并建立活体判断模型建成与否的观察指标.方法:12只16～22 kg小型猪分为2组,每组6只,第一组结扎回旋支制作心肌梗死模型,第二组用ameroid环制作心肌缺血模型.用心肌99mTc-MIBI血流灌注显像在活体确定其梗死区或缺血区,并在处死动物后用TTC法验证其梗死或缺血灶.结果:成功建立小型猪心肌梗死和缺血的动物模型,99mTc-MIBI心肌血流灌注显像可在活体上显示小型猪模型心肌梗死灶的放射性缺损区和缺血灶灌注缺损区的放射性再充填.离体心肌TTC染色可显示相应的梗死或缺血灶.结论:结扎回旋支和ameroid环缩窄回旋支是制备小型猪心肌梗死和缺血模型的较好方法,可用99mTc-MIBI心肌灌注显像在活体上确定模型成与否.

骨髓内皮细胞衬里人工血管间置移植的实验研究

通过骨髓内皮细胞衬里人工血管间置移植的动物实验,为人工血管内皮化的临床应用作准备.方法:分离犬骨髓单核细胞,ePTFE人工血管以二种规格(4 mm×4 cm和8 mm×5 cm)完成内皮化.分别作犬颈总动脉和下腔静脉间置移植(各10条),术后作多谱勒超声检查,处死后作移植血管大体肉眼、病理、免疫组化、扫描电镜等检查.结果:颈总动脉移植组:2周和2月实验侧通畅率分别为100%(5/5)和60%(3/5),同期对照侧通畅率分别为40%(2/5)和0%(0/5);下腔静脉移植组:实验组和对照组2月移植血管通畅率为83.3%(5/6)和50%(2/4).扫描电镜显示:颈总动脉移植血管腔面内皮细胞覆盖率实验组和对照组2周时存在差异(84%±11% 与 43%±15%,P<0.05),下腔静脉移植实验组和对照组内皮细胞覆盖率也有差异(95%±6%与77%±13%, P<0.05);颈总动脉和下腔静脉移植物2月时,血管内膜厚度实验组小于对照组(116±28 μm与162±30 μm, P<0.05; 91±24 μm与143±35 μm, P<0.05).结论:骨髓内皮细胞衬里的ePTFE人工血管在体内能较快完成内皮化过程,能抑制内膜增生;循环内皮细胞作为内皮细胞的潜在来源,具有一定临床应用价值.

小鼠骨髓前体细胞来源的树突状细胞超微结构

无菌制备BALB/c小鼠骨髓细胞,按常规方法分离纯化出树突状细胞(DCs),采用GM-CSF和IL-4诱导后,以凋亡肿瘤细胞负载未成熟DCs,再分别加入mCD40L-CHO细胞和TNF-α继续培养48 h,按常规方法分别制备各发育阶段DCs的超薄切片.用透射电镜观察小鼠DCs在不同发育阶段的超微结构特征,并比较凋亡肿瘤细胞负载的小鼠DCs被CD40L和TNF-α刺激后超微结构的差别.实验结果证实DCs在分化发育成熟中存在异质性;DCs可通过吞噬凋亡的肿瘤细胞负载抗原;CD40配基化对DCs的分化成熟作用优于TNF-α.

实验性股骨头缺血性坏死与修复对局部组织生化指标的影响

观察了犬缺血性坏死及修复过程中部分生化指标的变化,结果表明:(1) 股骨头坏死后局部组织胶原酶活性在短暂降低后趋向升高;(2) 坏死侧股骨头新生成胶原蛋白及成熟的酸溶性胶原蛋白含量持续下降,而不溶性胶原蛋白与胶原总含量变化不显著;(3) 钙含量在坏死侧呈轻微下降趋势.以上结果与组织学和力学观察结果相一致,提示胶原酶与胶原蛋白在骨组织坏死与修复过程中可能起重要作用.

软骨细胞三种凋亡模型的建立

为了观察药物对骨关节炎中软骨细胞凋亡的影响,建立了软骨细胞三种凋亡模型.将硝普钠(SNP)、全反式维甲酸(ATRA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分别加入软骨细胞培养体系,建立三种不同药物诱导的软骨细胞凋亡模型,采用Annexin v/PI双参数法以及透射电镜对软骨细胞凋亡进行定量、定性检测.在兔软骨细胞培养体系中分别加入2 mmol/L SNP,10-4 mol/L ATRA 24 h后,在人胚胎软骨细胞培养体系中加入30 μg/L人TNF-α 24 h后,均可成功建立软骨细胞凋亡模型.提示硝普钠、全反式维甲酸、肿瘤坏死因子-α加入软骨细胞培养体系中,可建立软骨细胞凋亡模型.

大鼠肝卵圆细胞增殖模型建立及其纯化鉴定

为建立大鼠卵圆细胞增殖模型,分离纯化卵圆细胞并对其特性进行研究,SD大鼠喂饲2-乙酰氨基芴(2-acetyailamifluorene,2-AAF),剂量分别为5、10、15、20 mg/kg,连续给药6 d,于第7天行三分之二部分肝切除,术后继续给药1周,每隔3 d取肝组织行常规组织学观察,作细胞增殖试验及免疫组化染色.通过免疫磁珠标记C-kit阳性细胞以纯化卵圆细胞(Magnetic activated cell sorting,MACS),用免疫细胞化学及RT-PCR对纯化细胞进行鉴定.结果:10、15、20 mg/kg三种剂量2-AAF均可成功建立卵圆细胞增殖模型,卵圆细胞增殖于第8天较明显,至第11天达高峰,第14天有所减少.卵圆细胞胞核Brdu染色阳性,其除表达卵圆细胞特异性抗原OV6外,尚表达肝细胞标记白蛋白及胆管细胞标记CK19.胚胎期肝细胞抗原AFP、连接蛋白43在卵圆细胞中亦有高表达,同时还表达造血干细胞标记C-kit.以MACS纯化的C-kit阳性卵圆细胞,90%以上为OV6阳性,并有AFP、白蛋白、CK19 mRNA转录.结论:2-AAF剂量为10～20 mg/kg时可获得满意的大鼠卵圆细胞增殖模型,增生的卵圆细胞为具有双向分化潜能的肝干细胞/前体细胞,利用C-kit标记通过MACS可纯化这种肝干细胞/前体细胞.

封闭群KM小鼠生物净化前后免疫功能指标观察

为了研究从普通级净化到SPF级前后的KM小鼠免疫功能变化的特点,对同一封闭群的KM小鼠在净化前后分别进行免疫功能的测定.结果KM小鼠净化前后抗体生成细胞分别是557.39±85.77和368.62±65.23;血清抗体水平分别是67.8±26.08和46.4±15.45、碳廓清指数K分别是5.24±0.96和4.61±0.61;碳廓清吞噬指数α分别是0.032±0.023和0.025 ±0.01;小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞的指数分别为0.41±0.06和0. 36±0.06,吞噬百分数分别为38.42±6.15和31.55±5.75;ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化能力OD值分别为0.032±0.02 和0.031±0.01;二硝基氟苯诱导小鼠迟发型变态反应(耳肿胀法)小鼠耳重差分别为10.85±4.34 mg和16.29±4.21 mg.结果表明, 净化后的KM小鼠的巨噬细胞活力、B淋巴细胞活性、抗体水平均小于净化前,有极显著的差异(P<0.01);二硝基氟苯诱导小鼠迟发型变态反应(DHT)大于净化前,有极显著的差异(P<0.01);ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化能力没有变化.

介绍一种简易的大鼠保定方法

用塑料矿泉水瓶制备了一种简易大鼠保定装置,使用效果良好.

弗劳地枸橼酸杆菌引起的猕猴腹泻

对从腹泻猕猴脓血便中分离的一株细菌,经ATB细菌分析仪,选用ID32E肠杆菌测试条鉴定为弗劳地枸橼酸杆菌(Citrobacter freundii),id%=99.9.用K-B纸片法做药敏试验,结果表明,该菌对诺氟沙星、环丙沙星、头孢噻肟、头孢曲松、头孢他定、氯霉素敏感.对庆大霉素、头孢拉定、痢特灵等十几种抗生素耐药.总之,在做腹泻病猴粪便培养时,应重视弗劳地枸橼酸菌的检测.

利用精子冷冻、体外受精技术进行昆明小鼠育种初探

在昆明(KM)小鼠标准化研究中,采集武汉生物制品研究所、上海第一生化制药厂普通级KM小鼠的精子并冷冻运输,冻融精子与中科院上海实验动物中心KM雌鼠的超排卵体外受精(IVF)得到杂交一代2细胞胚胎,用中科院动物中心KM鼠冻融精子对照.无菌条件下2细胞胚胎移植入SPF级假孕鼠,受体饲养于独立通气笼具(IVC)中.平均产仔率为51.9%,离乳率100%.三种群12周龄KM雄鼠精子冷冻复苏率,IVF率,移植成绩均无显著差异(P>0.05).仔鼠经微生物、寄生虫学检测达SPF标准.结果表明,利用冷冻精子,通过IVF、胚胎移植能够方便快速的建立种群间杂交一代,并实现生物净化.

树鼩超数排卵初探

研究不同的激素及其相同激素不同剂量对树鼠句超数排卵的影响.方法:将雌性树鼩分为6组,分别用不同剂量和组合的促卵泡生成激素(FSH)、那戈瑞林(GnRH)、人绝经期尿促性腺激素(HMG)和国产孕马血清促性腺激素(PMSG)、人绒毛膜促性腺激素(HCG)进行超数排卵实验.结果表明:PMSG 40IU+HCG20 IU组平均获卵母细胞数25.6±3.0个.明显高于其他实验组(P<0.05).结论:本实验中PMSG 40IU + HCG 20IU对雌性树鼩进行超数排卵处理可获得较好的超排效果.

紫杉醇对人SMMC-7721肝癌细胞增殖和荷瘤裸小鼠肿瘤生长抑制作用

为研究紫杉醇对人SMMC-7721肝癌细胞增殖和对荷瘤裸小鼠肿瘤生长的抑制作用,采用噻唑蓝(MTT)法观察紫杉醇对SMMC-7721细胞增殖的抑制作用;并在裸小鼠人肝癌模型上观察紫杉醇对荷瘤裸小鼠肿瘤生长的抑制作用.结果表明,紫杉醇对SMMC-7721细胞具有明显的抑制作用并有剂量时间依赖关系;荷瘤裸小鼠动物实验表明,紫杉醇对裸小鼠的肿瘤生长也具有明显的抑制作用,治疗组Ⅰ和治疗组II的抑瘤率为分别26.38%和39.04%.因此紫杉醇对SMMC-7721细胞的增殖和荷瘤裸小鼠肿瘤的生长具有明显的抑制作用.

猪原位心脏移植模型的建立

为在全麻体外循环下建立猪原位心脏移植的实验模型,选用小型猪进行供体心切取,在全麻体外循环下,切除受体心,进行原位心脏植入.术中进行血液动力学监测.发现移植后心脏全部复跳,辅助循环60 min后,均顺利脱离体外循环,血液动力学稳定.表明猪原位心脏移植模型的建立是成功的,为心脏移植的进一步基础及临床研究提供了方便.

大鼠子宫内膜异位症模型的建立及应用

子宫内膜异位症发病机理目前尚不明确,由于借助人体研究的局限性,目前,多利用动物模型作为研究对象.本文就大鼠子宫内膜异位症模型的建立、病理观察及其应用作一综述,探讨大鼠子宫内膜异位症模型的应用价值.

BNX小鼠生物学特性及其应用

本文综述了T、B和NK细胞联合免疫缺陷BNX小鼠的培育,详细介绍其一般的生物学特性及其在血液学、肿瘤学、免疫学和微生物学等方面的应用.

产-学-研一体化的带头人--记苏州大学动物实验中心主任薛智谋教授

IntroductionWorking with laboratory animals is a privilege and those of us involved must accept the stewardship entrusted to us and always exercise our responsibilities to ensure that the moral, ethical and environmental concerns of these animals are always prominent in our actions. Laboratory animals should only be used when there is no known allernative, so all in-vitro methods must always be considered before an animal is used.