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基因工程小鼠剖宫取胎的适宜条件
目的净化升级基因工程小鼠.方法采用统计学方法对基因工程小鼠剖宫取胎净化过程中的大量数据进行分析.结果①按规律准确判断妊娠天数,可使剖得的仔鼠成活率达到81.0%,②CD-1小鼠作为代乳母鼠剖得的仔鼠离乳成活率为51.5%.结论适宜的剖宫取胎条件是提高剖出仔鼠和离乳仔鼠成活率的关键.
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实验用斑马鱼主要疾病及其实验动物标准化研究过程面临的主要问题
斑马鱼是目前国际上用于实验研究广的鱼类,但是鱼类实验动物尚未实现实验动物的标准化,甚至还没有国家或地方统一的技术标准.本研究收集、分析整理了实验用斑马鱼的主要疾病以及培育饲养实验用斑马鱼所面临的生物净化问题的资料及数据,为我国鱼类实验动物标准的制订和标准化鱼种群的建立及其质量控制与评价提供技术依据.
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利用超数排卵技术进行优化 C57 BL／6 J小鼠的生物净化体系
目的：以近交系C57BL／6J小鼠为实验对象，通过注射不同剂量的孕马血清促性腺激素（ PMSG）和人绒毛膜促进腺激素（ hCG）对小鼠进行超数排卵、体外授精和胚胎移植，确定佳超排剂量，从而完善以C57BL ／6J小鼠为背景的转基因小鼠的生物净化体系。方法将5周龄的C57BL／6J雌鼠进行5 IU、10 IU、7.5 IU、15 IU四个剂量组的超数排卵，通过超数排卵与剖宫取胎、胚胎移植两种净化方法相结合，确定C57BL／6J小鼠的净化方法所需的佳剂量。结果剖宫取胎方法中，注射5 IU剂量组的C57BL／6J小鼠超排后合笼见栓率高，为（89.00±19.05）％，产仔数和见栓率与其它三组均差异不显著；胚胎移植方法中，10 IU剂量组平均卵母细胞数为30.33±0.89枚，平均体内2-细胞胚胎数为23.78±0.19枚，均显著高于其它三组。结论剖宫取胎法生物净化时，5 IU剂量组可以提高C57BL／6J小鼠的交配成功率；胚胎移植法生物净化时，10 IU剂量组可以获得多的体内和体外2-细胞胚胎，为C57BL／6J小鼠佳超排剂量。
关键词： C57BL /6J小鼠 超数排卵 胚胎移植 生物净化 -
长爪沙鼠的生物净化技术
目的：实现长爪沙鼠微生物质量升级和实验动物化目标，需对长爪沙鼠实施生物净化。方法在长爪沙鼠生物净化过程中，采取孕鼠选择和临产期判断、无菌剖宫产、仔鼠代乳以及独立通风笼盒（ IVC）饲养管理等措施，比较了ICR小鼠、SD大鼠、长爪沙鼠代乳和饲料中添加营养成分对仔鼠代乳的影响。结果本研究共实施长爪沙鼠无菌剖宫产达85胎次，通过ICR代乳鼠代乳并成功断乳167只。结论本研究顺利实现了长爪沙鼠生物净化，形成的关键技术有望为我国特色实验动物资源的生物净化提供参考。
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生物工程技术在实验小鼠生物净化上的应用
目的 采用体外受精的技术,对L858R、TL清洁级小鼠,以及来源于野外的中华小家鼠,和感染肺炎克来伯氏菌的Balb/c-nu裸鼠进行生物净化.方法 对于需要净化的小鼠的雄鼠,采集附睾的精子,放入HTF溶液中获能,然后加入经过超排的卵团,体外受精.20～22 h后,挑选形态正常的二细胞胚胎,在净化实验室,移植给假孕的SPF级ICR母鼠,待产仔.仔鼠断奶后,随机选择仔鼠及带奶母鼠送检.结果 体外受精的胚胎,经过移植后,均顺利产仔;仔鼠及母鼠的微生物级别,均达到SPF级.结论 对于微生物级别较低的实验小鼠,采用在洁净实验室内做体外受精、胚胎移植的方法,可以提高实验小鼠的微生物级别.
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剖宫产与体外授精技术在小鼠生物净化中的应用
目的 采用剖宫取胎和体外受精对微生物级别达不到SPF级的小鼠进行生物净化.方法 对于具有正常繁殖能力的小鼠品系,通过对阴道栓的检查和触诊确定剖宫产取胎时间,采用子宫摘除手术对小鼠进行剖宫产,取出仔鼠用SPF级受体母鼠代乳,观察代乳情况及代乳仔鼠成活率；对于繁殖力较差或者丧失繁殖能力的品系,采取辅助生殖的方式,采集小鼠精子和卵子,在HTF液中受精,培养3.5 d后的胚胎移植到SPF级受体母鼠子宫内,待产仔.结果 两种方式净化的小鼠断奶后进行微生物检测,均达到SPF级.结论 对微生物级别达不到SPF级但不含垂直传播病原体的小鼠,采用两种方式可有效提高小鼠的微生物等级.
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封闭群KM小鼠生物净化前后免疫功能指标观察
为了研究从普通级净化到SPF级前后的KM小鼠免疫功能变化的特点,对同一封闭群的KM小鼠在净化前后分别进行免疫功能的测定.结果KM小鼠净化前后抗体生成细胞分别是557.39±85.77和368.62±65.23;血清抗体水平分别是67.8±26.08和46.4±15.45、碳廓清指数K分别是5.24±0.96和4.61±0.61;碳廓清吞噬指数α分别是0.032±0.023和0.025 ±0.01;小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞的指数分别为0.41±0.06和0. 36±0.06,吞噬百分数分别为38.42±6.15和31.55±5.75;ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化能力OD值分别为0.032±0.02 和0.031±0.01;二硝基氟苯诱导小鼠迟发型变态反应(耳肿胀法)小鼠耳重差分别为10.85±4.34 mg和16.29±4.21 mg.结果表明, 净化后的KM小鼠的巨噬细胞活力、B淋巴细胞活性、抗体水平均小于净化前,有极显著的差异(P<0.01);二硝基氟苯诱导小鼠迟发型变态反应(DHT)大于净化前,有极显著的差异(P<0.01);ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化能力没有变化.
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利用精子冷冻、体外受精技术进行昆明小鼠育种初探
在昆明(KM)小鼠标准化研究中,采集武汉生物制品研究所、上海第一生化制药厂普通级KM小鼠的精子并冷冻运输,冻融精子与中科院上海实验动物中心KM雌鼠的超排卵体外受精(IVF)得到杂交一代2细胞胚胎,用中科院动物中心KM鼠冻融精子对照.无菌条件下2细胞胚胎移植入SPF级假孕鼠,受体饲养于独立通气笼具(IVC)中.平均产仔率为51.9%,离乳率100%.三种群12周龄KM雄鼠精子冷冻复苏率,IVF率,移植成绩均无显著差异(P>0.05).仔鼠经微生物、寄生虫学检测达SPF标准.结果表明,利用冷冻精子,通过IVF、胚胎移植能够方便快速的建立种群间杂交一代,并实现生物净化.
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东方田鼠种群的生物净化方法
目的 对普通级东方田鼠孕鼠实施剖宫取胎,获得一种东方田鼠种群的生物净化培育方法.方法 根据东方田鼠生殖特性,准确判断妊娠天数,实施剖宫取胎手术,用SPF级ICR小鼠和SD大鼠作为代乳母鼠带乳.结果 自2008年6月～2009年3月,总共对52只东方田鼠孕鼠实施剖宫取胎手术,成功实施手术35只,共获得东方田鼠幼仔186只,实际成活125只,成活率为67.2%.经检测无SPF等级大、小鼠要求排除的微生物和寄生虫.结论 东方田鼠生物净化获得成功,为其它特别是野生鼠类的生物净化提供可借鉴之处.
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生物净化前后长爪沙鼠微生物和寄生虫携带情况的比较
目的 比较生物净化前后长爪沙鼠微生物携带情况.方法 采集生物净化前后长爪沙鼠的气管、回盲部样本,经血平皿培养后,分离菌落进行纯培养,利用细菌鉴定仪进行菌种鉴定;气管经研磨后,转入选择性培养基鉴别培养；分离血清进行泰泽病原体抗体检测.结果 生物净化后F1代、F2代和F3代长爪沙鼠泰泽病原体血清抗体检测均为阴性,生物净化后的其他微生物和寄生虫普查结果也表明,各项检测中均未发现清洁级啮齿类动物中需排除的病原微生物和寄生虫.结论 剖宫产和代乳技术能有效减少长爪沙鼠携带的微生物和寄生虫.
