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SE-HPLC测定刺糖多糖相对分子质量及纯度
目的 建立高效液相凝胶色谱法(SE-HPLC)测定刺糖多糖相对分子质量和纯度的方法;分析刺糖多糖的相对分子质量分布及并进行含量测定.方法 采用水提醇沉法及AB-8大孔吸附树脂和DEAE Sepharose CL-6B阴离子交换树脂分离纯化不同相对分子质量的多糖组分,用TSK-GEL G4000PWXL,7.8mm×300mm色谱柱,2414示差折光检测器,测定其相对分子质量分布和纯度.结果 得到刺糖多糖组分AP2-4,其多糖相对分子质量为4.9×104,纯度含量为(93±3)%;相对分子质量分布:重均分子量(Mr)为4.9733;数均分子量(Mn)为4.9518;峰值分子量(Mp)为6.3112,4.8732;多分散度(D)为1.0043.结论 建立了简便、快捷、精密度高的凝胶色谱柱方法,可较准确地测定刺糖多糖的纯度和相对分子质量分布.
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密花石斛酸性多糖的生物活性及相对分子质量研究
目的 研究密花石斛酸性多糖的生物活性与其相对分子质量,确定某一相对分子质量范围的多糖药效作用好.方法 密花石斛粗多糖过DEAE-52纤维素层析柱,分别用(0.05、0.1、0.2、0.3)tool·L-1 NaCl洗脱得4个酸性多糖(PGM1、PGM2、PGM3、PGM4),利用凝胶过滤法通过Sepbadex G-100柱层析测出它们的各自相对分子质量.通过对小鼠脾细胞增殖和对肿瘤细胞A549和G2增殖的影响.得出每个酸性糖之间的活性差异,结合它们的相对分子质量综合比较分析.结果 四个酸性多糖的药效作用不一,整体比较作用大小为PGM4>PGM2>PGM3>PGM1.结论 有药效作用的物质的相对分子质量集中在(70000~50000)、Ⅱ区(50000~28000)、Ⅲ区(10000~5000)这三个区域,其中以集中在Ⅲ区的酸性糖药效作用强.
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电喷雾质谱确定多肽化合物的精确相对分子质量
用电喷雾质谱测定多肽的精确相对分子质量。
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心肌锚定重复蛋白与心力衰竭之间的关系
心肌锚定重复蛋白(cardiac ankyrin repeat protein,CARP)由锚定蛋白重复域(ankyrin repeat domain,ANKRD)1基因编码,ANKRD1与ANKRD2及糖尿病相关锚定重复蛋白同属于肌肉锚定重复蛋白家族,在哺乳动物中的表达高度保守.人的ANKRD基因定位于10号染色体,其cDNA全长1 901 bp,编码含319个氨基酸的多肽,相对分子质量36 kD[1-3].CARP是心肌发生的标志分子之一,在胚胎和胎儿发育时期高水平表达,之后直到成年时期表达水平进行性减少[1-2].
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"彗星"分析法在放射生物学中的应用
"彗星"分析法(comet assay)又叫单细胞凝胶电泳(single cell gel eletrophoresis, SCGE)或微凝胶电泳,是一种比较理想的单细胞水平检测哺乳类有核细胞DNA损伤的新技术.由Ostling等[1]1984年首次提出,后经Singh等[2]逐渐改进.现主要分为中性SCGE和碱性SCGE.其原理如下:去污剂或高盐裂解溶液破坏细胞膜,使得95%以上的蛋白质及细胞内其他成分渗出膜进入溶解液,DNA由于相对分子质量大而留在原位.
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YKL-40在肿瘤中的研究进展
YKL-40又名人类软骨糖蛋白-39(HCgp-39),一项对新生骨蛋白的研究中发现在人骨肉瘤细胞系MG63的体外培养中发现一种蛋白的大量分泌,因为其一条肽链氨基端的起始3个氨基酸:酪氨酸、赖氨酸和亮氨酸的符号分别为Y、K和L,其相对分子质量约为40 000而被称为YKL-40.1993年,报道公布了人类软骨糖蛋白的完整氨基酸序列及cDNA序列,YKL-40含383个氨基酸,编码的蛋白序列与糖基水解酶相似,基于其氨基酸序列,发现YKL-40属于哺乳动物18糖基水解酶家族的成员.YKL-40结合不同长度的壳多糖的形式类似壳多糖酶18家族,但没有壳质酶活性.
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糖尿病治疗的新靶点——GLP-1类似物的临床应用
随着全球糖尿病发病率不断上升,糖尿病的发病机制和新药开发成为各国学术机构和开发商共同关注的目标,近年来糖尿病治疗的新靶点胰高血糖素样肽1(GLP-1)类似物也应运而生并开始应用于临床,GLP-1类似物作为糖尿病新药物的作用机制、疗效和安全性有待了解和经验总结.1 GLP-1的来源、结构及作用机制GLP-1是胰高血糖素原衍生肽,相对分子质量是3 298,有生物活性的GLP-1以GLP-1(7-36)酰胺或GLP-1(7-37)酰胺的形式出现;其中,GLP-1(7-36)酰胺是人体内GLP-1主要的天然形式,约占80%.进食数分钟后体内GLP-1浓度开始升高,并与胰岛β细胞膜上的特异性受体结合发挥其生理效应,餐后30 ~ 60 min内达到峰值,但很快被体内广泛表达的DPP-4所降解.
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利妥昔单抗在难治性肾病综合征的应用进展
利妥昔单抗( rituximab,RTX),商品名美罗华,是一种人鼠嵌合单克隆抗体,含1 328个氨基酸,相对分子质量约144 000,由鼠抗CD20单克隆抗体的可变区Fab和人IgG1抗体恒定区Fc片段构成.其人源性区域可以介导正常的宿主效应功能.RTX与前B细胞和成熟B淋巴细胞膜表面的CD20抗原特异性结合,引发B淋巴细胞溶解的免疫反应,而此种抗原在造血干细胞、后B细胞、正常血浆细胞及其他正常组织中不存在.RTX 1997年上市后,首先被用于治疗B细胞淋巴瘤,取得了很好的效果,大大提高了B细胞淋巴瘤的缓解率和生存时间.
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玻璃酸钠在眼科的应用评价
玻璃酸钠(Sodium hyaluronate,SH)为广泛存在于人体内的生理活性物质,是由D-葡萄糖醛酸和N-乙酰氨基组成的双糖单位交替连接而成的酸性黏多糖.它能溶于生理缓冲溶液中,呈无色透明状,溶液的pH值为7.0左右.相对分子质量(Mr)为8×104~500×104,Mr越大黏弹性越高.但黏度可因一些物理或化学因素如氧化剂、还原剂、紫外线、强酸、强碱及高温的影响而降低.近年来,临床利用SH的黏弹性,开发了软膏和液体等制剂,广泛应用于骨科、外科、眼科、皮肤科及医学美容化妆品等方面.本文就其在眼科方面的应用作一简述.
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固元胶囊多糖的分离纯化与初步结构研究
目的 对固元胶囊多糖的分离纯化与初步结构研究.方法 用高效分子排阻色谱(HPSEC-ELSD)法分析纯度、相对分子质量分布以及用高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)法测定单糖组成.结果 得到了固元胶囊结构的初步信息;要得到固元胶囊进一步的结构信息,可采用甲基化、部分以水解等得到糖链结构片段,通过核磁共振仪等仪器分析法得到其高级结构信息.结论 对固元胶囊多糖的分离纯化与初步结构研究能为固元胶囊的质量标准提供依据.
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黄芪多糖的氧化降解及其抗氧化和抗肿瘤活性研究
目的 探讨黄芪多糖及其氧化降解片段的抗氧化、抗肿瘤活性.方法 采用维生素C和过氧化氢体系诱导产生自由基并降解黄芪多糖,并对黄芪多糖及其降解产物的抗氧化、抗肿瘤活性进行研究.结果 不同浓度的诱导体系得到的黄芪多糖相对分子质量不同;体外抗氧化和抗肿瘤作用随着黄芪多糖降解片段相对分子质量降低而活性增强.结论 黄芪多糖的生物活性与其相对分子质量相关.
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百草枯致急性肺损伤及纤维化药物治疗的研究进展
枯(Paraquat,PQ)又名克芜踪、对草快,化学名称1,1'-二甲-4,4'一联吡啶,分子式为C12H14N·2Cl,相对分子质量257.2,属有机杂环类接触性脱叶剂和除草剂,纯品为白色结晶,以阳离子形式存在,易溶于水,微溶于酒精和丙酮,在酸性及中性溶液中稳定,可被碱水解,对普通金属有腐蚀性,常用剂型为20%的水溶液.
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高效凝胶渗透色谱法测定羟乙基淀粉200/0.5氯化钠注射液的分子量
目的 采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPE)测定羟乙基淀粉200/0.5氯化钠注射液中的分子量.方法 以醋酸盐缓冲液为流动相;柱温35℃;流速0.7 mL·min~(-1);色谱柱为凝胶色谱柱Ultrohydrogel 1000(300 mm×7.8 m,10 μm).结果 重均分子量为1.9×10~5~2.9×10~5.结论 所建方法简便、准确、精密度好.
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新的人类白细胞分化抗原(CD)的命名及其功能
第8届国际人类白细胞分化抗原专题讨论会(HLDA8)从上届CD247后共命名了92个新的编号.其中正式CD编号68个,CDw编号6个,还预留了CD18个.现将CD和CDw共76种分子及其单克隆抗体(mAb)或代号,主要表达细胞和分组,相对分子质量(Mr),以及主要的生物学功能整理成表(表1),以飨读者.
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Tris-SDS-PAGE测定多肽的相对分子质量
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尿素 -SDS-PAGE快速测定多肽的相对分子质量
随着电泳技术的不断改进和完善,该技术已成为现代分子生物学实验不可缺少的基本实验技术之一。然而进行小分子多肽的电泳分析时,由于其相对分子质量 (Mr)小,易受电泳条件 (电泳缓冲系统、凝胶浓度、电泳时间、染色和脱色等 ) 的影响,极易引起条带扩散、不易着色,使分辨率降低,因而直接影响多肽 Mr的测定。现有多肽 Mr的电泳测定法 [1,2]操作复杂,且结果也不理想。因此,我们经反复实验,建立了对 Mr为 2 500~ 17 000多肽的尿素 -SDS-PAGE快速测定法。
关键词: 多肽尿素-SDS-PAGE 相对分子质量 -
蔗糖-SDS-PAGE测定多肽的相对分子质量
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)是测定蛋白质相对分子质量(Mr)常用的方法,尤其在低Mr蛋白质(10 000~100 000)测定中得到广泛应用;而对小分子多肽Mr的测定目前主要采用甘油SDS-PAGE法〔1,2〕和脲SDS-PAGE法〔3〕。这些方法操作繁琐、结果也不够理想。我们在多次实验的基础上,建立了用蔗糖-SDS-PAGE两层胶系统测定多肽(Mr为2 500~17 000)的新方法。
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巨分子酶的临床意义
血清中有时可出现相对分子质量远大于正常酶分子的一些酶,通常称为巨分子酶,简称为巨酶(macroenzyme).巨酶因其分子量大,在体内不易排出,也不易被巨噬细胞系统吞噬而降解,又因其有较长的半衰期,故在血中存留时间较长,它的存在将会严重干扰临床常规酶测定的正确性,极易造成对酶测定结果的错误判断和临床误诊.
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金属硫蛋白在皮肤疾病中的研究进展
金属硫蛋白(metallothionein,MT)是一种富含半胱氨酸、相对分子质量较低(6-7kDa)的金属结合蛋白[1],广泛存在于生物界,具有多种生物学功能.MT由Margoshes和Vallee于1957年首次从马的肾脏中分离出来,至今对MT的研究已走过半个多世纪,大多数研究集中在脊椎动物MT的结构、功能和基因调节等方面,研究成果丰富,涉及生物化学、卫生毒理学、食品科学、医学、农学、环境科学等各个领域.皮肤是人体大的器官,重量占人体总重的16%,具有抵御外来刺激、吸收紫外线、免疫调节等功能.MT在人类许多组织包括皮肤中[2]广泛表达,目前在皮肤领域中的研究主要涉及创面愈合、光保护、黑素合成、肿瘤表达等方面.本文拟对MT在皮肤相关疾病中的表达、调控等作综述,为MT在皮肤病中的临床应用和开发寻求新的靶点.
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胸腺五肽一级结构的电喷雾质谱分析
目的测定胸腺五肽的相对分子质量及其一级结构.方法应用电喷雾质谱法(ESI MS)及源内碰撞诱导解离技术对胸腺五肽进行测定,根据其典型碎片离子确证其氨基酸序列及相对分子质量.结果测得胸腺五肽准分子离子峰(M+H)+m/z 680.3及(M+Na)+m/z 702.2,(M+2Na-H)+m/z 724.3及(M+3Na-2H)+m/z746.2,表明胸腺五肽的相对分子质量为679.4,与理论值一致.结论胸腺五肽的相对分子质量及一级结构与理论值相符.