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大鼠颈动脉梭形动脉瘤模型的建立
动脉瘤的制作方法较多,但尚无一种模型能够解释人动脉瘤的临床、流行病学、病理、生化、分子等诸方面的特征,而利用酶诱导动脉瘤模型有一定的优势,本研究应用弹性蛋白水解酶灌注大鼠颈动脉在大鼠体内诱导颈动脉梭形动脉瘤.
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肝门型童虫免疫血清筛选日本血吸虫成虫cDNA文库
近年来,血吸虫疫苗研究进展迅速,国内外学者克隆表达了一系列血吸虫抗原基因,但至今它们在动物宿主体内诱导的保护性免疫未达到降低虫荷40%或更多预期的研究目的[1].因此继续筛选新的血吸虫疫苗候选分子成为当前血吸虫病研究的热点之一.我们用日本血吸虫肝门型童虫表膜抗原(SjHmAg)免疫兔血清筛选日本血吸虫成虫cDNA文库,以期发现特异的具有保护作用的日本血吸虫抗原基因,为血吸虫疫苗的研究提供新的候选分子.
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表达Ag85B-ESAT6的重组卡介苗在小鼠体内诱导的免疫应答及保护力
超表达分泌蛋白Ag85B的重组卡介苗免疫豚鼠获得的保护效力超过卡介苗[1],这为研究新型结核病疫苗提供了思路.为了全面评估我们构建的融合表达Ag85B与ESAT6的重组卡介苗免疫学特性,我们进一步研究了该菌株在小鼠体内诱发的免疫应答水平及其对结核分枝杆菌毒株感染的保护力.
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急性高血糖症与内皮细胞功能关系
内皮细胞功能受损是动脉粥样硬化和糖尿病大血管病变的早期病理生理变化.引起内皮细胞功能紊乱的因素众多,在糖尿病引起的血管病变中,高血糖是其关键因素.长期慢性高血糖与血管并发症的关系十分肯定,但是,对短暂的、急性高血糖对血管病变的影响往往重视不足.本文就体外、体内诱导的急性高血糖状态对血管内皮细胞功能的影响进行简述.
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骨形态发生蛋白7与肿瘤关系的研究进展
骨形态发生蛋白7(BMP7)属于转化生长因子-β(17GF-β)超家族的成员之一,初在研究体内诱导骨与软骨形成的因子时发现[1],对骨骼的胚胎发育和再生修复起重要作用.
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环境电磁场与人群超敏性
为了预防已知的电磁场对人体健康的不良影响,极低频(ELF)和射频(RF)频段的电磁场暴露限值已经制定且被广泛采用(ICNIRP 1998)[1].该导则的基本限值(basic limits)限定了电磁场的体内暴露剂量,例如ELF电场和(或)磁场在体内诱导的电流密度,以及RF电磁场(RF-EMF)在体内的比吸收率(SAR).
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血管内皮生长因子的研究进展
1983年,Senger等发现一种可使豚鼠皮肤血管通透性增高的因子,称其为血管通透性因子(VPF).1989年,Gospodarow等从牛垂体滤泡中分离纯化得到一种蛋白质,能特异作用于血管内皮细胞,引起血管内皮细胞增生,并在体内诱导血管形成,遂命名为血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF).后来Ferrara通过对VPF的cDNA序列分析,证实VPF即为VEGF.
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热休克蛋白-肽复合物(HSP-PCs)肿瘤疫苗的研究进展
在过去的几十年中,人们一直在努力寻找肿瘤的免疫治疗途径,结果导致了热休克蛋白(HSP)家族的发现.HSP是广泛存在于原核和真核生物细胞中的一类高度保守的蛋白质,在细胞生长、发育、分化、基因转录等方面发挥重要作用.在肿瘤细胞中,一些HSP家族成员表达增强,用从中提取的HSP-PCs免疫机体,可在体内诱导多个肿瘤特异的细胞毒T细胞(CTL)活性,特异地杀伤肿瘤细胞.许多动物实验[1]及初步的临床实验[2]表明,肿瘤来源的HSP-PCs可作为疫苗来阻止肿瘤的生长或治疗肿瘤.因此,HSP-PCs有可能成为新一代肿瘤疫苗而应用到临床.
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先天性心脏病与血管内皮生长因子-634G>C 的相关性研究
先天性心脏病(congenital heart disease,CHD)是先天性畸形中常见的一类,约占各种先天畸形的28%,它是指在胚胎发育时期由于心脏及大血管的形成障碍或发育异常而引起的解剖结构异常,或出生后应自动关闭的通道未能闭合(在胎儿属正常)的情形。先天性心脏病发病原因很多,以遗传因素和环境因素为主。血管内皮生长因子(vascular en-dothelial growth factor,VEGF)是血管内皮细胞特异性的肝素结合生长因子,可在体内诱导血管新生[1]。本研究通过检测血清中血管内皮生长因子基因多态性位点-634G>C 的单核苷酸多态性,探讨先天性心脏病与血管内皮生长因子-634G>C 基因型的相关性。
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成年神经干细胞的内在潜力
各种实验研究表明神经干细胞-神经元和神经胶质自我更新的祖细胞已能从胚胎和成年哺乳动物中枢神经系统分离培养[1].成人脑中的神经元祖细胞也已被识别,分离和培养的方法也已确立[2].它们可在培养中克隆增殖,为移植提供可更新材料;也可作为基因工程的理想载体,经基因转移表达神经递质、神经营养因子和代谢酶等外源性基因.但更直接的、更有效的治疗措施是充分调动干细胞的内在潜力,在体内诱导其增殖、神经元化、修复中枢神经系统功能.
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粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子质粒对小鼠树突状细胞前体的体内诱导研究
目的 观察粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)表达质粒体内转染对小鼠髓源性树突状细胞(DC)前体的诱导作用,为探索乙型肝炎新的免疫治疗提供研究基础.方法 30只BALB/c小鼠随机分为对照组、100μg剂量组和200 μg剂量组,注射1周,分离骨骼肌,抽提RNA,利用RT-PCR观察反转录水平;分离小鼠骨髓细胞,并以重组小鼠粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组小鼠白细胞介素-4(rmIL-4)诱导培养DC,倒置显微镜下观察其形态,并做扫描电镜检测.ELISA法检测小鼠血清中的GM-CSF表达量,流式细胞仪检测其表面分子(CD80,CD86,MHC-Ⅱ,CD11c)表达情况.结果 体内转染后,ELISA检测血清中GM-CSF表达量,与对照组比较,100 μg组和200 μg组表达量均有明显升高(P<0.01);流式细胞仪检测显示100 μg组和200 μg组CD11c和MHC-Ⅱ类分子表达较对照组明显升高(P<0.01),CD80和CD86有所升高(P<0.05).结论 GM-CSF质粒体内注射可以明显刺激诱导小鼠髓源性DC前体的增殖,增强DC的抗原提呈作用.
关键词: 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 树突状细胞 体内诱导 -
血吸虫重组BCG疫苗构建及其免疫机制研究进展
血吸虫病是一种严重危害人体健康的螺传寄生虫病,目的主要的防治措施是采用药物化疗,但化疗并不能阻断血吸虫病的传播,同时,某些血吸虫虫株已对一种或数种化疗药物产生抗药性,这就需要继续研究更有效的防治措施.人们发现血吸虫侵入宿主体内可刺激机体的免疫系统,产生免疫应答,对血吸虫发挥清除或杀伤效应,对同种血吸虫的再感染也具有一定抵抗力,提示血吸虫能在宿主体内诱导保护性免疫反应,这为研制血吸虫病疫苗提供了依据.
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弓形虫抗原表位研究进展
弓形虫是一种呈全球分布的专性细胞内寄生原虫,广泛寄生于人和动物的有核细胞内,能引起严重的人兽共患寄生虫病.因此,对弓形虫及弓形虫病的研究日趋得到学者们的重视.由于弓形虫生活史较复杂,抗原成分多,每种抗原在体内诱导的免疫效应不同,实验证明,单价亚单位疫苗免疫效果和单一抗原诊断试剂检测效果均不理想,研制多表位疫苗和诊断试剂必然是一个新的发展趋势.因此,正确而详细地了解蛋白质表位对疾病的诊断以及设计疫苗分子结构具有重要理论和现实意义.本文就弓形虫表位研究进展加以综述.
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SARS病毒N蛋白真核表达质粒的构建及其诱导的体液免疫应答
构建SARS病毒核衣壳蛋白(N)的真核表达质粒,并研究其在小鼠体内诱导的体液免疫应答.采用PCR方法体外扩增SARS病毒N蛋白基因片段,定向克隆入真核表达载体pVAC,构建pVAC-N重组质粒;大量制备该重组质粒,经基因枪腹部皮内注射免疫BALB/c小鼠三次,间接ELISA法测定免疫鼠IgG抗体效价.成功构建了重组表达质粒pVAC-N,免疫小鼠后可诱导产生出特异性的IgG抗体.构建的真核表达质粒pVAC-N能诱导小鼠产生特异性抗体,为SARS疫苗的进一步研究打下基础.
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抗独特型抗体抑制排斥反应的实验研究
我们运用抗独特型抗体诱导的方法,在移植受者体内诱导产生与移植物抗原具有相同抗原性的抗独特型抗体,观察其对排斥反应的抑制作用.
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成体干细胞移植对缺血性心脏疾病心功能的治疗进展
心肌梗死是发达国家冠心病导致心衰和死亡的原因之一.虽然近年来因治疗方法的改进(包括介入,药物)心梗存活率明显提高,但由于心肌细胞丧失疤痕形成而导致心功能减退仍是一个主要问题,因为心脏本身缺少干细胞没有再生能力[1].目前,缺血性心脏疾病治疗包括:内科药物治疗,介入治疗和手术治疗,它们虽然够改善心肌缺血和心衰症状,使闭塞血管再通,挽救缺血心肌,但对已坏死心肌或无功能心肌无作用.而心脏移植虽能取代受损心肌,但供体缺乏,费用高,排斥反应严重使之在临床难以推广,这使得致力于寻找恰当的心肌源性干祖细胞的研究大大增加[1].目前于细胞体外诱导分化为具有收缩功能的心肌细胞已获成功,动物体内诱导干细胞分化心肌组织也取得重大突破[2],使得应用干细胞植入心脏,诱导分化为有功能的心肌细织并取代坏死及无功能的心肌成为治疗缺血性心脏病的新希望.
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体内诱导法建立的Tca8113细胞耐卡铂细胞株的耐药性表达研究
目的 探讨通过体内诱导法得到的耐药细胞株的耐药性表达情况.方法 以人舌癌Tca8113细胞系为研究对象,实验组采用荷瘤耐药动物的肿瘤细胞培养获得,对照组为体外连续培养诱导其产生耐药性.用四唑蓝法检测细胞耐药指数,标记生物素链亲和素法免疫细胞化学检测耐药相关蛋白P糖蛋白、谷胱甘肽S转移酶π、多药耐药蛋白和拓扑异构酶Ⅱ的表达,逆转录PCR检测多药耐药基因、多药耐药蛋白、拓扑异构酶Ⅱ和谷胱甘肽S转移酶π的表达.结果 免疫细胞化学和逆转录PCR显示2组细胞多药耐药蛋白、谷胱甘肽S转移酶π、拓扑异构酶Ⅱ等表达均升高,但体内诱导较体外诱导可以获得更高、更稳定的耐药性.诱导后的Tca8113细胞对氨甲喋呤、卡铂、平阳霉素、长春新碱耐药性明显升高,而对5-氟尿嘧啶耐药性增加不明显.结论 体内诱导得到的细胞株耐药性明显高于体外诱导株,肿瘤细胞的耐药现象受多种基因的调节.体内诱导Tca8113卡铂耐药细胞株Tca8113/CBP-vo可以作为肿瘤耐药研究的平台.
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体内诱导人脐带间充质干细胞向男性生殖细胞分化的实验研究
目的 探讨人脐带间充质干细胞(HUCMSCs)在小鼠体内向男性生殖细胞分化的可能性.方法 HUC-MSCs纯化培养后,经显微注射方法移植到不育小鼠睾丸曲细精管,对体内移植后的细胞行免疫组化、免疫荧光及激光共聚焦,观察其存活、迁移及男性生殖细胞的特异性标记物表达等情况.结果 HUCMSC体内移植后免疫组化显示其在睾丸微环境中可以存活至少120 d并发生从管腔到基底膜的迁移;免疫组化、免疫荧光、激光共聚焦证明HUCMSCs移植后在睾丸微环境中可以进一步分化,表达生殖细胞特异性标记物.结论 体内外定向诱导HUC-MSCs可能可以向男性生殖细胞方向分化,HUCMSCs将可能为治疗男性不育提供一种新的细胞来源,提供一条新的治疗途径.
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移植前诱导抗独特型抗体对小鼠皮肤排斥反应的抑制作用
目的 探讨抗独特型抗体诱导对异品系小鼠皮肤移植排斥反应的影响. 方法 以C57BL/6小鼠脾细胞免疫BALB/c小鼠制备抗同种异品系抗体(Ab1). 将Ab1与KLH交联后,免疫BALB/c小鼠诱导产生抗独特型多克隆抗体(Ab2),并以之为受体,观察Ab2对小鼠皮肤移植排斥反应的影响. 结果 Ab1交联KLH加弗氏佐剂免疫可有效地诱导抗独特型抗体(Ab2)产生. 与对照组相比较,Ab2诱导组小鼠移植物存活时间明显延长. 结论 移植前在受体体内诱导产生以移植物抗原为模拟抗原的抗独特型抗体,可对移植排斥反应产生有效的抑制作用.
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类轮状病毒2/6/7颗粒经腹腔和直肠接种在小鼠体内诱导免疫原性的研究
以前我们使用稳定的细胞系研制了类轮状病毒( RV) VP2、VP6和VP7蛋白( VLP2/6/7)颗粒。为评估其免疫原性,我们评估腹腔和直肠免疫的BALB/c小鼠VLP2/6/7诱导的体液及细胞因子应答。采用酶联免疫吸附试验( ELISA )和相对定量( RQ)实时PCR来分别评估血清抗体( IgG和IgA)的水平及脾细胞中IL-6、IL-10和IFN-γ的mRNA水平。结果表明经腹腔( I.P .)和直肠( I.R.)免疫, VLP2/6/7能够诱导血清 IgG 和 IgA 应答。在经I.P.和I.R.途径免疫的粪便样品中检测到IgA。有趣的是I.R.途径诱导的IgA效价高于I.P.途径,且具有统计学意义。另外,与对照组相比用VLP2/6/7腹腔免疫小鼠的IL-6和IFN-γ的mRNA水平明显升高。因此,IFN-γ和IL-6平均变化值分别是7.4(P<0.050)和14.8(P<0.001)。在直肠免疫小鼠体内也发现了同样的情况。然而,与对照组相比, IL-10平均变化值的统计学意义并不明显。结果表明稳定的昆虫细胞系构建的VLP s能够诱导体液免疫和细胞免疫,在活RVs免疫后也观察到了相似的情况。