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乳腺乳头部肿瘤及瘤样病变
胚胎发育第8个月末,乳线胸段的乳腺始基表面上皮开始下陷,形成乳凹.胎儿出生前后,乳凹深层的间充质增生,致使乳凹逐渐消失并凸出于体表,形成乳头.此外,胚胎发育过程中,从腋下到腹股沟的乳线均可有副乳的发育形成,这些副乳同样可包括镜下可见的正常乳头结构、乳管、平滑肌,在真皮深部也可能包含乳腺腺体组织.本文主要介绍发生在乳腺乳头部的肿瘤及瘤样病变.
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应用小鼠体外全胚胎培养研究金葡菌L型对胚胎发育的影响
金葡菌是细菌感染性疾病中常见的细菌之一,在体内外因素作用下可以缺壁变异成L型.金葡菌L型除可引起各种化脓性感染和败血症外,实验证明也可引起小鼠的不孕和肿瘤,可通过胎盘垂直感染并与子代先天畸形有一定的关系,但这些研究均是通过母体感染的体内试验,本实验采用体外全胚胎培养(WEC)方法观察金葡菌L型对体外胚胎发育的影响.
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运用树脂支撑体外培养系统观察小鼠食管胚胎发育的可行性研究
目的 探讨树脂支撑体外培养系统观察小鼠食管胚胎发育的可行性.方法 选用健康C57BL/6J小鼠,分离胚胎期(embryonic day,E)第16.5天(E16.5)小鼠食管组织,置于树脂片和硝酸纤维素膜上,培养于含20％胎牛血清、0.1％维生素C、1％L-谷氨酰胺和1％庆大霉素/链霉素的DMEM液,5％ CO2、37℃恒温箱中培养6d,与在体E16.5d和出生后(postnatal day,PN)第0.5天(PN0.5)食管组织一同进行苏木素-伊红染色,抗增殖细胞核抗原(PCNA)抗体、抗平滑肌肌动蛋白(SMA)抗体和抗肌细胞生成素(myogenin)抗体免疫组织化学染色.结果 ①培养后食管组织结构完整,上皮层与肌层较培养前明显增厚;②培养后食管各层仍广泛分布具有增殖能力的细胞,与E16.5相比PCNA阳性率差异无统计学意义(P=1.000);③培养后平滑肌仍保持清晰分层,骨骼肌成肌细胞增多,且分布模式与PN0.5一致.结论 树脂支撑体外培养系统可以为探索小鼠食管正常发育过程及疾病的发病机制提供一个较为简便实用的模型.
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卵黄囊超声显像及临床价值
本文应用超声显像观察早孕期卵黄囊变化及与胚胎发育的相关性.对190例早孕期卵黄囊超声显像结果分析报道如下.
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3例小儿先天性心脏病术后合并鸡胸的临床体会
小儿先天性心脏病(以下简称先心病)是威胁小儿健康的疾病之一,特别是重症、复杂的先心病易导致小儿早年夭折.小儿先心病是胎儿时期心脏血管发育异常而致畸形,一般认为在胚胎发育的第3-8周过程中任何内因与外因的变化影响了心脏胚胎发育,使心肌某一部分发育停顿或发育异常,即可造成各种先天性心脏畸形,是小儿常见的心脏病[1].
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生命早期环境与成人疾病关系的研究进展
生命早期(一般指胎儿期、婴幼儿期、儿童期)是生长发育的关键时期,这一阶段正是机体各器官、组织、细胞分化形成和发育成熟时期.大量的人群流行病学资料调查、前瞻性临床研究和动物实验研究结果表明,生命早期所处环境的不良刺激不仅影响出生前和出生后的生长发育,而且会对成年后的健康和生活质量产生远期乃至终生影响.现就这方面的研究进展综述如下.
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结缔组织生长因子与骨重建
结缔组织生长因子(CTGF)是即刻早期基因(CCN)家族的成员之一,早由Bradham等[1]在1991年用亲和色谱法从人脐静脉内皮细胞条件培养基中发现,研究表明,CTGF mRNA及其蛋白产物可在内皮细胞、成纤维细胞、软骨细胞、血管平滑肌细胞和成骨细胞等多种细胞中表达,在机体多种生物学过程,如胚胎发育、瘢痕组织、恶性肿瘤、软骨发生和诱导成骨细胞的分化、创伤愈合及促进多种细胞的黏附和运动等方面发挥着重要作用.
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microRNAs与心血管疾病的研究进展
miRNAs是一类长约19～23个核苷酸、单链、非编码蛋白的小分子RNA，起到对基因表达的负调控作用。研究发现， miRNAs能够特异性地结合靶基因mRNA的3′-非翻译区（un-translated region，UTR），抑制靶基因mRNA的翻译或促进其降解，从而起到在转录后水平的调节作用[1]。1993年，Lee等[2]研究者在秀丽新小杆线虫（Caenorhabditis elegan）中发现了调控胚胎后期发育的基因lin-4，这是第一个报道的miRNA，迄今为止已在多个物种包括动物、植物和病毒中，已经发现并鉴别出上万个miRNA，其中包括约2000条人类miRNA，生物信息学预测miRNA有可能调控着约1/3的人类基因[3-4]。miRNA靶基因的相关预测和研究尚在起步阶段，目前只有小部分miRNA的靶基因及功能得到了初步阐述。这些研究揭示了miRNA具有基因表达调节器作用，在胚胎发育、细胞分化、癌症发生等多个生物学过程中起到重要作用[5-6]，尤其在心血管系统发育及其疾病中起着重要的调节作用[7]。因此，对miRNA功能的深入探讨已成为当今心血管疾病研究领域的热点。本文就miRNAs在心脏发育及心脏疾病病理过程中的调控机制，目前的miRNAs的研究策略以及miRNA作为心脏疾病诊断标记物和药物治疗靶点的可能性作一综述（图1）。
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富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白与2型糖尿病动脉硬化的关系
SPARC(secreted protein,acidic and rich in cysteine)即富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白,由于它先发现是骨基质中的一种主要的非胶质蛋白,因此又被称作骨连接素(Osteonectin)、基底膜40蛋白(BM40).SPARC是由多种细胞分泌的小分子钙结合糖蛋白,通过与胞外基质蛋白相互作用而表现出多种生物活性,与胚胎发育、血管形成、组织重塑及修复、细胞更新等均密切相关[1].
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长链非编码RNA在中枢神经系统中的研究进展
长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类长度为200 nt至100 kb、缺乏显著开放阅读框(ORF)的非编码RNA(ncRNA).据估计,人类基因组大约含有7000～23 000条lncRNA.研究证实,lncRNA与生物进化、胚胎发育、物质代谢以及肿瘤发生等都有着密切的联系.在中枢神经系统的研究中,lncRNA参与了神经元分化、脑发育、突触可塑性以及神经退行性疾病及肿瘤的发生、发展.因此,对中枢神经系统中lncRNA功能和作用机制的深入研究将丰富我们对脑发育、功能和疾病的认识,同时也可为某些治疗药物的设计与研发提供新思路.
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椎间盘退变与再生:胚胎发育中的经验
多达85％的人在其一生中的某个阶段都经受过腰痛折磨,也因此产生了大量医疗保健及相关费用[1].椎间盘退变是其中一个常见的原因[2].因定义不明确并且与年龄密切相关,使得椎间盘退变的病因学研究成为了一个极富有挑战性的工作.椎间盘退变也许好被定义成为一个连续过程,即初椎间盘亚结构内细胞微环境改变通过数十年不断进展终结构破裂、功能受损[3].
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弱畸形精子症与体外受精受精率和胚胎发育的相关性分析
目的 比较弱畸形精子症(同时患有弱精子症和畸形精子症者)和精液正常患者行常规体外受精(IVF)的受精率和胚胎发育的差异,分析原发性与继发性不育对于弱畸精子症患者IVF受精率的影响,同时分析弱畸精子行分半ICSI(H-ICSI)和早补救ICSI是否改善受精结局,为今后选择合适的治疗方案提供参考.方法 将2016年1月至12月在沈阳九州家圆医院生殖医学中心行IVF-胚胎移植(IVF-ET)的患者分为弱畸精子症组(A组)和精液正常组(B组),A组内分为原发不育组(P组)和继发不育组(S组).分别比较各组间的受精率、2PN受精率、卵裂率、2PN卵裂率、优质胚胎率、临床妊娠率等指标有无显著性差异.结果 A组受精率和2PN受精率显著低于B组(61.23％vs.75.19％,43.05％vs.56.58％,P<0.01),卵裂率、2PN卵裂率、优质胚胎率差异无统计学意义(P>0.05).P组受精率显著低于S组(56.35％vs.66.37％,P<0.01),妊娠率显著低于S组(33.333％vs.73.33％,P<0.05).R-ICSI中,ICSI优质胚胎率B组显著高于A组(60.61％vs.39.74％,P<0.01).结论 弱畸精子症显著影响IVF的受精率和2PN受精率,但是不影响后续胚胎发育和妊娠.原发不育的弱畸精子症会显著影响IVF周期中的受精率和临床妊娠率.对于这类患者,在IVF周期中应采取相应的短时受精以防止受精失败和低受精.精子活力和形态对受精和胚胎发育都有重要影响.
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邻苯二甲酸单(2-乙基己)酯对雌性大鼠妊娠早期胚胎着床及妊娠中晚期胚胎发育的影响
目的 探讨邻苯二甲酸单(2-乙基己)酯(MEHP)对雌性大鼠妊娠早期胚胎着床及妊娠中晚期胚胎发育的影响.方法 将40只大鼠分为4组,每组10只,分别喂以MEHP 5、25、50 mg/kg(分别为低、中、高剂量组),对照组为玉米油.妊娠早期(1～6 d)灌胃给予不同剂量MEHP,妊娠14d处死孕鼠剖腹检测MEHP对胚胎着床情况的影响.另外40只大鼠分组方法同上,在妊娠中晚期(7～20 d)给予低、中、高剂量MEHP,妊娠末期处死,剖腹检查胚胎畸形和胎盘发育情况.结果 MEHP妊娠早期干预各组和妊娠中晚期干预各组大鼠体重及摄食量与对照组没有显著差异.妊娠早期中剂量和高剂量MEHP干预后,胚胎着床数(11.11±2.17、9.87±2.41)较对照组(15.23±1.22)降低(t=5.23,P<0.05;t=6.28,P<0.01).妊娠中晚期中剂量和高剂量MEHP干预后,胚胎数、活胎数、胚胎重量、胎盘重量均低于对照组;高剂量组MEHP干预后,吸收胎数、畸胎数较对照组增加.结论 MEHP对母鼠的体重及摄食量没有明显影响,中高剂量MEHP可在妊娠早期影响胚胎着床过程,在妊娠中晚期影响胚胎及胎盘发育.
关键词： 妊娠 胚胎发育 大鼠 邻苯二甲酸单(2-乙基己)酯 -
促性腺激素释放激素激动剂降调节后月经第3天血清黄体生成素值对体外受精-胚胎移植的影响
目的 经过促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)降调节后,在月经第3天使用促性腺激素(Gn)前对血清黄体生成素(LH)进行测定,探讨不同血清LH值与体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结局的关系,以寻找合适的血清LH降调标准.方法 对2007年3月至2010年7月在海军总医院妇产科辅助生殖医学中心进行的254个取卵周期进行同顾性分析,按降调节后月经第3天血清LH值不同对254个周期进行分组,分析各组间实验室数据及临床妊娠率的差异.同时通过解冻周期胚胎存活率及临床妊娠率,进一步研究新鲜周期血清LH值对胚胎发育潜能的影响.结果 GnRHa降调节后,各组之间年龄、正常受精率、D3优质胚胎率、囊胚形成率、可利用胚胎率、移植胚胎数目没有统计学差异(P值分别为0.122、0.129、0.235、0.605、0.417、0.496),但各组间临床妊娠率差异有统计学意义(P=0.016).GnRHa降调节后不同血清LH值对胚胎的发育潜能无影响.结论 GnRHa降调节后,在月经第3天不同血清LH值对实验室数据及胚胎的发育潜能没有显著性影响,但对临床妊娠率影响显著,并初步认为当2 IU/L≤LH<4 IU/L时,可能会达到较为理想的新鲜周期妊娠结局.
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妊娠期糖尿病孕妇新生儿脐血脂联素水平及其与胎儿生长发育的相关性研究
目的 了解妊娠期糖尿病(GDM)孕妇新生儿脐血脂联素(APN)水平的变化,探讨脐血APN的来源及其与胎儿宫内生长发育的关系.方法 采用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定30例GDM孕妇和30例正常糖耐量(NGT)孕妇空腹血清及其新生儿脐血APN浓度,同时测定18例出生3 d的新生儿血清APN水平.结果 (1)GDM组孕妇血清APN水平明显低于NGT组[分别为(1.946±1.477)ng/ml和(3.049±1.788)rig/m1],差异有统计学意义(P＜0.05),但她们的新生儿脐血APN水平相比差异无统计学意义[分别为(4.318±1.993)ng/ml和(5.120±1.878)ng/ml](P＞0.05).(2)两组新生儿脐血APN水平均明显高于其母血APN水平,差异有统计学意义(P＜0.01).(3)新生儿出生时的脐血APN水平与其生后3 d的血清APN水平相比差异无统计学意义(P＞0.05).(4)相关分析结果显示,两组新生儿脐血APN与其出生体重、出生体重指数(BMI)及孕龄均呈显著正相关(r分别为0.581、0.567、0.439和0.449、0.488、0.547,t分别为3.775、3.664、2.586和2.660、2.956、3.456,P＜0.01或P＜0.05),而与其母血APN及母体BMI无明显相关性(r分别为0.107、0.226和0.244、0.016,t分别为-0.570、1.228和1.330、0.563,P＞0.05).结论 (1)GDM孕妇血APN水平明显降低,但其新生儿脐血APN水平无明显变化.(2)脐血中高浓度的APN并非来自母体或胎盘,而是由胎儿自身组织分泌.(3)脐血APN可能参与调控宫内胎儿的生长发育.
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不同的胚胎密度、培养液体积及微孔培养对小鼠早期胚胎发育的影响
目的：通过比较不同胚胎密度和培养液体积及微孔（WOW）培养系统对小鼠早期胚胎发育的影响，以期优化早期胚胎发育的培养条件和环境，提高胚胎的发育率和质量。方法（1）在液状石蜡覆盖的20μl的发育液小滴中培养5、10、20和40枚2-细胞胚胎，观察并统计8-细胞率、囊胚率和孵化囊胚率。（2）15枚2-细胞胚胎放入在5、10、20、50、100μl的发育液小滴和500μl WOW系统（每个WOW中放一枚胚胎）中，观察并统计8-细胞率、囊胚率和孵化囊胚率。（3）对各组得到的囊胚进行差异染色并计数。结果在不同胚胎密度的比较中，20μl的培养液小滴中培养10枚2-细胞胚胎得到了较高的8-细胞胚胎率、囊胚率和孵化囊胚率，而且得到囊胚的 ICM、TE和ICM＋TE的平均细胞数显著高于5枚和40枚胚胎组。在不同培养液体积和WOW培养系统中，5μl培养液组在各阶段胚胎发育率和得到囊胚的ICM、TE和ICM＋TE的平均细胞数方面显著低于其他各组。500μl WOW培养系统组在各阶段胚胎发育率方面与得到较高发育率的20μl和50μl培养组均没有统计学差异，同时500μl WOW培养系统和20μl培养液组在孵化囊胚率和得到囊胚的ICM、TE和ICM＋TE平均细胞数方面显著高于100μl培养液组。结论20μl的培养液小滴培养10枚胚胎可以得到较高的胚胎发育率，且得到的胚胎质量较好。较少的培养液体积不利于胚胎发育，较适宜的培养液小滴体积为20～50μl。同时，WOW培养系统在本实验条件下取得了较好的胚胎发育效果。
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精子获能时间及精卵共孵育时间对小鼠体外受精和胚胎发育的影响
目的本文通过两种方法探讨了精子的代谢产物对小鼠的体外受精和胚胎发育的影响，以期为人类辅助生殖技术优化操作程序提供一定的理论基础。方法（1）精子体外获能时间的不同决定了精子代谢产物的不同，将精子获能时间分为4组，分别为0.5、1、2和4 h，接着进行体外受精，精卵共孵育的受精时间均为5 h，获能液和受精液均为G-IVF＋5％人血清白蛋白（HSA）。（2）受精时间的不同决定了精子的代谢产物对体外受精和胚胎发育的影响不同，将受精时间分为5组，分别为0.5、2、5、8和12 h，而精子的获能时间均为1 h。不同组合受精后的胚胎经洗涤后放入卵裂液G1中培养48 h。然后转入囊胚培养液G2中继续培养至囊胚期。结果第一种方法中精子的获能时间为1 h时，卵母细胞的受精率显著高于其他组（P＜0.01）；获能时间为4 h，受精率显著下降（ P＜0.01）。胚胎在8细胞率、囊胚率、孵化囊胚率方面比较没有明显差异（P＞0.05）。第二种方法中受精时间为0.5 h时，卵母细胞的受精率显著低于其他组，差异有统计学意义（ P＜0.01），其他各组之间的受精率差异不明显；而对于胚胎发育率，12 h组的胚胎在8细胞率和囊胚率方面显著低于其他组（P＜0.01），在孵化囊胚率方面差异显著（P＜0.05）。其他各组之间比较没有明显差异。结论应选择合适的精子体外获能和受精时间，以达到减少氧化性损伤对精子受精能力的影响和提高胚胎发育潜能的目的。
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胆囊异常的产前超声诊断
胎儿系统超声检查中胆囊未列为常规观察的内容,但胎儿胆囊发育异常的可能性仍然存在,虽然较为少见,但有些非常严重.文献报道胎儿胆囊异常的发生率约为0.15%[1],包括胆囊缺如或发育不良、胆囊结石、双胆囊、胆囊位置异常、胆囊形态异常等.但在胎儿产前超声检查中,一些比较常见的胎儿胆囊异常(胎儿胆囊不显示、胆囊增大等)其临床意义超声医师及产科医师并不十分清楚.正确、全面地认识胎儿胆囊的胚胎发育、胆囊异常的产前超声诊断及其预后问题,有利于指导临床优生优育咨询.笔者对胎儿胆囊的胚胎发育、产前超声扫查方法及胎儿胆囊异常的产前诊断现状和临床意义综述如下.
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胎儿畸形的产前超声检查
出生缺陷也称先天异常,泛指胚胎发育紊乱引起的形态、结构、功能、代谢、精神、行为等方面的异常.出生缺陷或先天异常可于出生时显现,或出生后一段时间表现出来,如智力低下.胎儿畸形专指胎儿期胎儿各器官结构存在的形态结构异常[1,2].
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人体鱼序列征的产前超声诊断
人体鱼序列征(sirenomelia sequence)又称美人鱼综合征(mermaid syndrome)、先天性并腿畸形,是一种罕见的致死性先天畸形,国外文献报道,在活产儿中的发病率为1/100万～16/100万,男女发病比例为3∶1[1],有报道认为该畸形在单卵双胎之一中多见[2].Rocheus 和Palfyn分别在1542年和1553年首次报道了这种形似希腊神话中美人鱼Siren的畸形,并将此畸形命名为Sirenomelia[3].因人体鱼序列征胎儿常合并双肾缺如或双肾多囊性发育不良、外生殖器缺如、肛门闭锁等严重的内脏畸形,为致死性畸形;产前多在中孕期诊断该畸形,但此时期因双肾缺如或双肾多囊性发育不良而无羊水,使超声对胎儿肢体的观察欠满意,诊断该畸形较困难.为使超声医师及产科医师对本病有较全面的认识,本文对人体鱼序列征的病因、发病机制、胚胎发育、产前超声扫查方法、产前超声图像特征、佳检查时机及预后等相关研究概况简述如下.
