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健脾解毒方通过PTEN/PI3K/AKT信号通路抑制幽门螺杆菌诱导胃癌血管新生的研究

刘宁宁;周利红;孙筱婷;李春浦;李琦

摘要: 目的:探讨健脾解毒方对幽门螺杆菌(H.pylori)感染胃癌细胞诱导血管新生的调控作用及可能的机制.方法:采用H.pylori标准株NCTC1 1637与人胃癌MKN45细胞共培养的方法感染MKN45细胞,分为MKN45组,H.pylori+M KN45组,健脾解毒方低、中、高剂量组(0.5、1.0、2.5mg/mL),取上清液与细胞培养液按1:1比例混合作为条件培养液,观察条件培养基对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)管腔形成的影响;采用ELISA法检测健脾解毒方对H.pylori感染诱导的人胃癌MKN45细胞VEGF表达的影响;采用PI3K特异性抑制剂LY294002(20μmol/L)抑制PI3K/AKT活性后,再进行H.pylori感染,检测人胃癌MKN45细胞VEGF蛋白表达的变化.Western blot检测H.pylori感染对人胃癌MKN45细胞PTEN/PI3K/AKT信号通路活性的影响及健脾解毒方对该信号通路的调控作用.结果:H.pylori感染组可明显促进HUVEC细胞管腔形成,健脾解毒方中、高剂量组可抑制HUVEC细胞管腔形成(P<0.01).H.pylori感染MKN45细胞可明显上调上清液中VEGF蛋白的表达(p<0.01),健脾解毒方药物各剂量组均可下调H.pylori诱导的人胃癌MKN45细胞VEGF蛋白的表达.采用PI3K特异性抑制剂LY294002抑制PI3K/AKT活性,H.pylori诱导的VEGF蛋白的表达明显下调(P<0.01).H.pylori感染对人胃癌MKN45细胞PTEN和AKT无影响,但可增加p-PTEN和p-AKT的表达,健脾解毒方各剂量组均可降低二者的表达,并呈一定的剂量依赖效应(P<0.01).结论:健脾解毒方可抑制H.pylori诱导的HUVEC血管新生及H.pylori诱导的人胃癌细胞VEGF表达,调控PTEN/PI3K/AKT信号通路是其机制之一,这可能是其防治胃癌的重要作用靶点.

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