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精子染色质扩散实验检测精索静脉曲张及不明原因不育患者精子DNA碎片
目的 了解精索静脉曲张(VC)及不明原因不育患者精子DNA碎片的发生比例. 方法 改进的精子染色质扩散(SCD)实验分析精子DNA碎片.检测VC不育患者39例,不明原因不育患者57例.以生育健康成年男性32例为对照组. 结果 VC不育患者SCD小光晕和无光晕精子(精子DNA碎片)比值平均为(36.6±18.9)%,VC不育组明显高于对照组(12.1±5.2)%(P<0.001),而大光晕和中光晕精子比值VC不育组明显低于对照组(P<0.01);不明原因不育患者精子DNA碎片比值平均为(26.8±10.2)%,与对照组[(12.1±5.2)%]比较有显著性差异(P<0.001). 结论 SCD实验表明,VC及不明原因不育患者精子DNA碎片比值增高.
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睾丸热压内裤抗生育效果的初步实验:附11例报告
目的 观察睾丸局部热压对成年男性精子及性激素分泌的影响. 方法 11例已育成年健康男性志愿者, 穿43℃睾丸热压内裤(THSU),每周连续2 d穿2次,每次穿50 min,3个月为1个实验周期.在实验前、实验中和实验后分别取精液和血液,常规方法 分析精子功能参数、低渗肿胀实验(HOST)和精子染色质扩散(SCD)实验;化学发光免疫分析法测定血清睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)含量.THSU实验前的相关指标作为自身正常对照,停止实验后连续观察3个月(11例)和6个月(9例). 结果 THSU实验前精子密度、活动率(a+b+c级)、畸形精子、HOST和SCD精子DNA完整比率分别平均为(85.8±19.7)×106/ml、(46.7±17.9)%、(35.7±7.9)%、(65.1±11.5)%和(86.7±10.3)%, THSU实验2个月后, 上述各项指标明显改变,3个月后分别平均为(8.7±6.6)×106/ml、(18.2±7.2)%、(53.6±5.2)%、(15.6±8.2)%和(26.2±6.7)%,与实验前比较均有显著性差异(P<0.01);停止THSU实验2、3和6个月后,上述各项指标又恢复到实验前水平.血清T、FSH、LH实验前、中、后均无明显改变. 结论 THSU作为男性避孕方法 具有一定前景.
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男性不育患者年龄与精子DNA碎片和精液常规参数的相关性分析
目的:分析男性不育患者年龄与精子DNA碎片率和精液常规参数的相关性.方法:按照年龄将85例男性不育患者分为三组.20～29岁组(n=31),30～ 35岁组(n=28),36 ～ 50组(n=26),采用染色质扩散(SCD)实验检测精子DNA碎片率,按照世界卫生组织标准检测精液常规各参数.采用SPSS 13.0软件包进行统计处理,分析精子DNA碎片率和精子参数在各组的差异及年龄与精子DNA碎片率和精液参数的相关性.结果:年龄与精子活力存在负相关关系(r=-2.31,P＜0.05),但与精子密度,精子形态和精子DNA碎片无相关性.精子密度与精子形态存在正相关关系(r=0.528,P＜0.01),与精子活力存在正相关关系,(r=0.31,P＜0.01).精子DNA碎片率与精液常规各参数无相关性.结论:随着男性年龄的增长,精子的活力可能降低,并影响男性的生育力,精子DFI与精液常规各参数无相关性.故精子DNA碎片检测可作为精液常规分析的补充,进一步反映男性的生育能力.
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精子DNA碎片与年龄、精液常规参数和疾病因素的相关性分析
目的 分析男性患者精子DNA碎片率和年龄、精液常规参数及疾病因素之间的相关性.方法 按照年龄将患者分为20岁～25岁,26岁～30岁,31岁～35岁,36岁～40岁,41岁～45岁及＞45岁组.采用染色质结构分析(SCSA)实验检测精子DNA碎片率,按照世界卫生组织(WHO)标准检测精液各项参数.采用SPSS 19.0软件进行统计分析处理,分析精子DNA碎片率和年龄、精液常规参数及疾病因素之间的相关性.结果 年龄与精子DNA碎片、精子活力、HDS之间存在负相关关系,与精子浓度之间的相关性无统计学意义.精子DNA碎片与精子浓度、精子活力之间存在负相关关系,与HDS之间存在正相关关系.精子HDS与精子浓度、精子活力之间存在负相关关系.DFI值的异常与弱精症、男性不育和尿路感染这3类男性疾病的关系较为密切.结论 随年龄增长,精子活力可能会降低,DNA碎片率增加.因此精子DNA碎片检测可作为一项重要的精子质量评估指标,为全面、客观评估男性生育力提供了有效信息.
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部分型圆头精子症患者精子形态、DNA碎片指数和精液常规参数分析
目的:对部分圆头精子症患者的精子形态、DNA碎片指数和精液常规参数进行分析,研究DNA碎片指数与其他指标之间的相关性.方法:将2016年1月～2017年1月在解放军第113医院泌尿外科生殖中心进行不育症检查的155例患者纳入研究.按照是否患有部分型圆头精子症将患者分为观察组和对照组,观察组83例患者,对照组72例患者.检测形态正常精子率、精子总数、精子前向活动率(progressive motility,PR)、非前向活动率(non-progressive motility,NP)、不活动率(Immotile,Im)、精子DNA碎片指数(DNA fragment index,DFI)和核精蛋白色霉素3(Chromomycin A3,CMA3)染色阳性率(％).结果:两组患者相比,观察组患者形态正常精子率、PR和NP均低于对照组患者,其差异均具有统计学意义(均P＜0.05);观察组患者Im、DFI和CMA3阳性率均高于对照组患者,其差异均具有统计学意义(均P＜0.05).观察组患者DFI与Im及CMA3之间均存在正相关关系(均P＜0.05);与形态正常精子率、PR、NP均呈负相关(均P＜0.05).结论:DFI是反应部分型圆头精子症患者精子功能的重要标志物,与精子染色质异常密切相关.
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精液处理前后精子DNA碎片的变化及对IVF-ET结局的影响
目的 探讨经密度梯度离心结合上游法处理前后精子DNA碎片率的变化以及对体外授精-胚胎移植(In Vitro Fertilization-Embryo Transfer,IVF-ET)结局的影响.方法 收集107例行IVF助孕患者的精液,按照WHO标准对处理前精液行精液常规分析,采用精子染色质扩散试验(SpermChromatin Dispersion,SCD)检测处理前和处理后精液的精子DNA碎片率,并收集IVF实验室及临床结局.根据处理前精子DNA碎片率将患者分为两组:精子DNA碎片率≤20％的患者为A组,精子DNA碎片率＜20％的患者为B组.结果 处理后精子DNA碎片率显著低于处理前精子DNA碎片率[(3.49±3.38)％ vs (18.69±10.89)％,P＜0.001)];处理前和处理后精子DNA碎片率均与精子总活动率、前向运动率及受精率有显著负相关关系(Spearman相关系数:-0.508、-0.629、-0.283、-0.299、-0.399、-0.329,P＜0.05)与男方年龄、精液量、精子密度、正常形态率及卵裂率无显著相关关系;B组处理后精子DNA碎片率高于A组,差别有统计学意义(P＜0.05);B组的精子总活动率、前向运动率和受精率均低于A组,差别有统计学意义(P＜0.05);两组男方年龄、女方年龄、不孕年限、获卵数、精液量、精子密度、正常形态率、卵裂率、种植率和妊娠率之间的差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 密度梯度离心加上游法处理精液后可以显著降低精子DNA碎片率,精子DNA碎片率与精子活力密切相关,碎片率升高会降低受精率,但对种植率、妊娠率等临床结局没有显著影响.
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精子染色质扩散实验检测男性不育患者精子DNA碎片
目的:通过精子染色质扩散(SCD)实验检测精子DNA碎片,探讨男性不育患者精子DNA完整性.方法:改进的SCD实验分析精子DNA碎片,DNA完整的精子产生扩散的大光晕或中光晕,而DNA损伤的精子不产生或产生很小的光晕.少弱精子症患者56例,畸形精子症不育患者31例,对照组32例.结果:对照组、少弱精症组和畸形精子症组大、中光晕精子比率分别平均为(88.0±5.9)%、(73.4±9.6)%和(58.5±11.2)%,精子DNA碎片比率分别平均为(12.0±5.2)%、(26.6±9.7)%和(41.5±12.3)%,少弱精症组和畸形精子症组与对照组比较有统计学意义(DNA完整的精子比率显著低于对照组,P<0.001,精子DNA碎片比率显著高于对照组,P<0.001).结论:SCD实验是检测精子DNA完整性有效的方法.少弱畸精子症不育患者精子DNA碎片比率增高.
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精索静脉曲张患者精子DNA碎片率、精浆丙二醛含量及精子活力的变化
目的:探讨精索静脉曲张对精子DNA碎片率(DFI)、精浆丙二醛(MDA)含量及精子活力的影响.方法:精索静脉曲张的不育患者按精索静脉曲张临床分度分为Ⅰ度、Ⅱ度和Ⅲ度组,采用染色质扩散实验(SCD)对85例精索静脉曲张所致男性不育患者和22例健康生育男性进行精子DFI检测;采用硫代巴比妥酸法(TBA)测定精浆MDA的含量;采用计算机辅助精液分析仪按照WHO标准测定精子活力.结果:和正常生育男性相比,Ⅰ度、Ⅱ度和Ⅲ度组的精子DFI均升高(P＜0.05),但各组间差别无统计学意义(P＞0.05);和正常生育男性相比,Ⅰ度、Ⅱ度和Ⅲ度组的精浆MDA含量均升高(P＜0.05),各组间差别有统计学意义(P＜0.05);和正常生育男性相比,Ⅰ度、Ⅱ度和Ⅲ度组的前向精子活动百分率均下降(P＜0.05),各组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论:精索静脉曲张可导致精子DFI和精浆MDA含量升高,而前向活动精子百分率下降;随着精索静脉曲张临床分度的增加,精浆MDA含量明显升高、前向活动精子百分率明显下降,而精子DFI升高不明显.
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精子DNA碎片对IVF-ET结局的影响
目的:探讨精子DNA碎片化率(DFI)对体外受精结局的影响.方法:采用改良精子染色质扩散实验(SCD)对139例接受体外受精(IVF)的男方进行精子DFI检测,并根据精子DFI值将上述IVF患者分为:A组(DFI＜17.6％)、B组(17.6％≤DFI≤30％)、C组(DFI＞30％),根据单因素方差分析统计方法分析各组IVF受精率、卵裂率、优质胚胎率和妊娠结局的差异.结果:与A组比较,B组和C组正常形态精子率、精子前向活动力[(a+b)％]、卵裂率、优质胚胎率均降低(P＞ 0.05 vs B组,P＜ 0.05 vs C组)；与B组比较,C组正常形态精子率、精子前向活动力[(a+b)％]、卵裂率、优质胚胎率均降低(P＜0.05)；与A组比较,B组和C组受精率均降低(P＜ 0.05 vs B组,P＜ 0.05 vs C组)；与B组比较,C组受精率降低(P＜0.05)；A、B、C3组间生化妊娠率、临床妊娠率差异无统计学意义(P＞ 0.05).结论:精子DNA碎片率升高不仅会导致精子前向活动力下降,还可导致IVF受精率、卵裂率、优质胚胎率下降,但对临床妊娠结局无明显影响.
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精索静脉高位结扎术对精子DNA碎片的影响
目的:探讨精索静脉高位结扎术对精子DNA碎片影响及手术效果的评价.方法:精索静脉曲张(Varicocele,VC)患者34例,均行精索静脉高位结扎术.术前和术后3个月按WHO推荐方法进行精子运动指标(10项)、精子巴氏染色形态分析和精子DNA碎片分析检测.结果:VC患者术后正常精子形态比例明显高于术前,有显著性差异(P＜0.01),术后精子DNA碎片比率、精子畸形指数(Sperm deformity index,SDI)和多种异常指数(Multiple anomalies index,MAI)均明显低于术前,有显著性差异(P＜0.01)；术后精子浓度、b级精子率均较术前升高,有显著性差异(P＜0.05)；术后a级精子比率、(a+b)级精子比率均比术前明显升高,有显著性差异(P＜0.01).vC Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级组术后精子DNA碎片比率均较术前明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01)；亚临床型VC组术后精子DNA碎片比率与术前无显著差异(P＞0.05).VC术后大晕环精子比率较术前明显增多,有显著性差异(P＜0.01)；术后中晕环、小晕环、无晕环精子比率均较术前降低,有显著性差异(P＜0.01).结论:行精索静脉高位结扎术能有效改善VC患者的精子质量.
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SCSA和SCD检测精子DNA完整性结果比较及与精子质量参数的相关性分析
目的:近年来精子DNA碎片预测男性生育受到广泛关注,其检测方法较多,但方法学的比较研究很少,本文旨在比较精子DNA完整性常用检测方法之间的差异,并分析DNA碎片与精子质量的相关性. 方法:选择108例精液样本,采用精子染色质结构分析试验(SCSA)和精子染色体扩散实验(SCD)对样本分别进行精子DNA碎片检测分析,对两种方法的结果进行比较,并与精液常规、精子形态以及患者年龄进行相关性分析. 结果:两种方法检测的精子DNA碎片化指数(DFI)存在显著的一致性(P＜0.01),DFI与精子活动率、前向运动精子百分率以及正常形态精子百分率呈显著负相关(P＜0.01),与畸形精子指数呈显著正相关(PSCSA＜0.01,PSCD＜0.05),SCSA得出的DFI与年龄呈显著正相关(P＜0.01),而SCD法的DFI并未发现类似的现象. 结论:两种方法检测的结果对精子质量均有较好的预测价值,精子DFI作为一个检测指标,对男性生育力预测有一定的临床价值.但不同方法之间的检测结果差异较大,检测方法的标准化有待进一步研究.
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精子碱性单细胞凝胶电泳法优化条件的建立及效果分析
目的:探讨精子碱性单细胞凝胶电泳法(SCGE)的主要影响因素,并优化条件,以利于标准化. 方法:采用不同浓度H2O2处理精子,碱性SCGE检测精子DNA碎片(SDF),探讨凝胶层数、DNA解旋及电泳时的pH、DNA解旋及电泳时间、计数精子数对结果的影响,分析优化后方法的重复性,并用于检测40例精液标本. 结果:3层琼脂糖凝胶可降低本底,DNA解旋及电泳缓冲液佳pH值为10,佳DNA解旋及电泳时间分别为40 min和30 min,计数50个精子即可保证结果的可靠性.优化后的碱性SCGE,用尾部DNA含量百分比表示,其批内、批间变异系数(CV)分别为3.12％、7.13％,用DNA损伤得分表示,其批内、批间CV分别为2.38％和6.09％.与健康生育男性相比,少弱畸形精子症不育男性精液SDF显著升高(P＜0.05). 结论:优化后的精子碱性SCGE,重复性好,易于标准化,可用于不育男性SDF检测,适合在临床推广应用.
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Ⅲ型前列腺炎对精子DNA碎片及核蛋白组型影响研究
目的:探讨Ⅲ型前列腺炎(CP/CPPS)对精子DNA碎片及核蛋白组型的影响. 方法；将CP/CPPS患者65例和健康男性30例均按《世界卫生组织人类精液检查与处理实验室手册》第5版推荐方法予精液常规、精子巴氏染色形态学分析、精子DNA碎片分析和精子核蛋白组型检测. 结果:CP/CPPS患者精子浓度(94.75±92.07)×106/ml、正常形态精子百分率(5.61±3.40)％、前向运动精子百分率(47.68±17.62)％均较对照组[分别为(134.05±99.80)×106/ml、(7.26±2.28)％、(59.18±16.06)％]显著下降(P＜0.05),精子DNA碎片百分率(43.58±17.07)％、精子核蛋白组型转换异常百分率(32.14±8.79)％均较对照组[分别为(22.92±11.51)％、(23.26±5.97)％]显著升高(P＜0.01). 结论:CP/CPPS使精子质量明显降低并在一定程度上影响男性生育力.
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单侧睾丸扭转对精子DNA碎片及核蛋白组型影响的研究
目的 探讨单侧睾丸扭转以及不同术式对患者精子质量的影响.方法 将58例单侧睾丸扭转患者(其中行睾丸扭转复位术32例,睾丸切除术26例),按WHO《人类精液及精子-宫颈黏液相互作用实验室检验手册(第5版)》规定检测精子运动指标(10项)、精子DNA碎片和精子核蛋白组型.结果 睾丸扭转复位组术后3、12、26周的精子密度、前向运动精子比例逐渐升高,差异有统计学意义(P＜0.05);精子DNA碎片百分率、精子核蛋白组型百分率逐渐降低,差异均有统计学意义(均P＜0.05).睾丸扭转复位组术后3周精子DNA碎片百分率明显高于睾丸切除组,差异有统计学意义(P＜0.05);术后26周精子密度明显低于睾丸切除组,差异也有统计学意义(P＜0.05).结论 睾丸扭转使患者精子质量明显降低,单侧睾丸扭转切除术后精子质量的恢复比睾丸扭转复位快.
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不育症患者精子DNA完整性与精液相关参数的研究
目的：探讨不育症患者精子DNA完整性与精液相关参数的相关性。方法：收集100例男性不育患者的精液标本，采用精子染色体扩散实验检测精子DNA的完整性，采用混合抗球蛋白凝集实验检测抗精子抗体( AsAb)，通过计算机辅助精液分析系统对不育患者的精液进行常规分析。结果：年龄与精子DNA碎片率、AsAb和精液各参数均无相关关系(P>0.05)。精子DNA碎片率与精子密度及精子活力均呈负相关关系(P<0.01)，与AsAb无相关关系(P>0.05)。 AsAb仅与精子摆动性和前向性呈弱相关关系(P<0.05)。结论：精子DNA完整性和AsAb作为精液分析的补充指标，具有重要的临床应用价值。
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抗氧化剂对早期不明原因复发流产史男性精子DNA碎片率的影响
目的:探讨抗氧化剂在治疗早期不明原因复发性流产史男性精子DNA碎片中的作用.方法:42例精子DNA碎片率≥15%的患者进行3个月抗氧化剂治疗(治疗组),复查精液常规和精子DNA碎片率;23例精子DNA碎片率＜15%的不进行抗氧化剂治疗(对照组),1年后比较2组妊娠及流产情况.结果:治疗组治疗后精子密度和精子前向运动率均较治疗前明显增高(P<0.01),精子DNA碎片率亦显著降低(P<0.01),精子正常形态率无变化(P>0.05);治疗组妊娠成功率为66.7%,高于对照组的25.0%(P<0.05).结论:抗氧化剂治疗可降低早期不明原因复发性流产史男性精子DNA碎片率,是减少早期不明原因复发性流产的有效途径之一.
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左卡尼汀口服液联合补肾强精颗粒对弱精子症(肾精亏虚)患者精子DNA完整性的影响
目的 探讨左卡尼汀口服液联合补肾强精颗粒对弱精子症(肾精亏虚)患者精子DNA完整性的临床疗效.方法 选取我院男性不育科门诊收治的124例弱精子症(肾精亏虚)伴有精子DNA碎片率偏高患者.随机分成3组,A组(左卡尼汀组40例);B组(补肾强精颗粒组41例);C组(左卡尼汀+补肾强精颗粒43例)分别给药,3个月后复查精液常规及精子DNA碎片率DFI(％),比较3个月后三组精子前向运动率(PR)、总活动率及精子DFI.结果 三组治疗总有效率,C组为95.3％明显优于A组的80％和B组的75.6％;DFI、PR及精子总活率比较,C组显著优于A组和B组,差异有统计学意义(P<0.05),A组与B组治疗后比较,无明显差异(P>0.05).结论 左卡尼汀口服液联合补肾强精颗粒组治疗弱精子(肾精亏虚)DFI、PR及精子总活率上疗效明显优于单药组,临床安全性高,具有一定的临床价值.
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精子DNA碎片在复发流产及不明原因不孕中的研究进展
精子DNA碎片是精子发生过程紊乱后的一种病理产物,其水平异常增高对正常受精、卵裂及其胚胎发育过程造成不利影响,包括复发流产、不明原因不孕、子代高患病风险等不良妊娠结局.但也有研究认为,精子DNA碎片与不良妊娠结局并无明显相关性.目前关于精子DNA碎片的研究结论存有争议,且其发生机制尚未清楚,但其对男性生育潜能的预测显示出了重要价值.
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精索静脉曲张对精子DNA碎片和体外受精结局的影响
目的 探讨精索静脉曲张(VC)对精子DNA碎片、活力、形态和体外受精(IVF)结局的影响.方法 采用染色质扩散实验(SCD)对103例VC所致男性不育患者和37例正常生育男性进行精子DNA碎片率(DFI)检测;采用计算机辅助精液分析仪,按照WHO标准进行精液常规分析;采用苏木素—伊红染色、Kruger评分标准进行精子形态学分析.男性不育患者中有75例进入试管婴儿周期,统计其IVF受精率、卵裂率和妊娠结局,并与本中心同期数值比较.结果 与正常生育男性相比,VC所致男性不育患者的精子DFI升高(P＜0.05);而精液量、精子密度、前向精子活动百分率和正常精子形态百分率下降(P＜0.05);VC所致男性不育患者IVF受精率和卵裂率与我中心同期IVF受精率、卵裂率相比下降(P＜0.05),但两组优质胚胎率和生化妊娠率无统计学差异(P＞0.05).结论 VC可导致精子DFI增加和精液常规参数下降,还可导致IVF受精率和卵裂率下降.
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精子DNA碎片及其在不育症诊治中的应用
精子DNA碎片 (SDF) 是近年来国内外生殖医学领域研究的热点, 随着大量实验研究和临床研究的开展, SDF对于男性生殖能力具有重大影响已成为学术界的共识.但是, SDF产生机制不明确, 治疗手段也较为有限, 同时关于SDF的众多问题仍然存在较大争议, 本文从SDF的产生机制、临床意义、检测方法和治疗手段4个方面对SDF的发展及应用现状予以综述, 以利于对SDF进一步的深入研究.
