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冬凌草甲素抑制BGC823细胞的生长及MMP-2 MMP-9的表达
目的 探讨冬凌草甲素(oridonin,Ori)在体内、外对胃癌BGC823细胞生长的影响,及对BGC823移植瘤MMP-2、MMP-9表达的影响.方法 MTT法检测Ori对BGC823细胞生长的抑制作用,流式细胞术检测其对BGC823细胞周期的影响,体内抑瘤实验观察其对BGC823移植瘤生长的影响,免疫组织化学染色法观察Ori对移植瘤组织中MMP-2、MMP-9表达的影响.结果 Ori在体外显著抑制细胞的增殖,引起细胞G2/M期阻滞;体内实验表明,Ori显著抑制肿瘤组织的生长,抑制率达70.7%;免疫组化染色结果显示,Ori显著抑制移植瘤MMP-2及MMP-9的表达.结论 Ori在体内、外显著抑制胃癌BGC823细胞的生长,减少移植瘤MMP-2、MMP-9的表达,提示Ori可能具有抑制肿瘤侵袭转移及血管生成的作用.
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B细胞易位基因1在BGC823胃癌细胞株中的表达及其对细胞周期、凋亡及迁移的影响
目的 检测B细胞易位基因(B-cell translocation gene 1,BTG1)在BGC823胃癌细胞中的过表达对其周期、凋亡及迁移的影响.方法 采用脂质体法将pcDNA3.1-BTG1重组质粒转染细胞,经过筛选得到稳定表达细胞株后,分为含BTG1质粒组、空载体组和空白对照组,采用Western-blot检测BTG1蛋白在BGC823细胞株中的表达,采用流式细胞术及划痕实验观察BTG1对BGC823细胞周期、凋亡及迁移的影响.结果 与空载体组、空白对照组相比,BTG1组蛋白表达增高(P＜0.05);流式细胞术显示,BTG1组G2/M期细胞数明显高于其他组(21.38％、18.47％ vs 8.57％、8.74％,P＜0.05),同时早期凋亡和总凋亡率显著增高(3.41％、3.05％ vs 1.32％、0.87％和6.12％、8.30％ vs 3.17％、2.34％,P＜0.05).结论 BTG1高表达,诱导G2/M阻滞,抑制细胞增殖,提高凋亡率.
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毛蕊异黄酮增强顺铂对胃癌细胞增殖的抑制作用
目的 观察毛蕊异黄酮对顺铂抑制胃癌细胞增殖的增强作用.方法 将BGC823细胞分为4组,分别用生理盐水、顺铂、毛蕊异黄酮和2种药物联合处理,检测不同时间点、不同处理因素下的细胞增殖情况.进一步检测影响细胞增殖的相关蛋白,确定毛蕊异黄酮联合顺铂抑制胃癌细胞增殖的方式.结果 对细胞作用24 h后,20μg/mL顺铂,10μg/mL毛蕊异黄酮,以及2种药物联合处理组对BGC823细胞的增殖抑制率分别为56.44%±2.08%,9.52%±2.77%和74.44%±0.82%.药物联合使用后对细胞的抑制率明显高于单个药物处理组,各组数据间差异有统计学意义(P<0.05).并且无论是在蛋白水平还是RNA水平上,毛蕊异黄酮均可以显著增强顺铂对Cyclin D1,CDK4和CDK6蛋白的抑制作用.结论 毛蕊异黄酮可以显著提高顺铂对BGC823细胞增殖的抑制率,2种药物联合使用可以降低顺铂单独使用所导致的毒副作用.
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黄药子体外抗胃癌活性成分的筛选及分析
目的 通过MTT体外实验观察黄药子4种不同提取物及从石油醚提取物中分离得到的黄独乙素和β-扶桑甾醇作用于MGC803、BGC823和SGC7901 3种人胃癌细胞株,探讨黄药子不同提取物及两个单体对3种胃癌细胞株的增殖情况的影响,从而筛选出黄药子有效抗胃癌活性成分.方法 采用MTT法检测0.5、1、2、4、6、8、10、12 mg/mL的不同质量浓度的黄药子石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、水层萃取物、醇提物和终质量浓度为1×10-4、5×10-4、1×10-3、5×10-3、1×10-2、5×10-2、1 ×10-1、5×10-1 mg/mL的黄独乙素和β-扶桑甾醇分别作用于MGC803、BGC823和SGC 7901细胞株24 h后对细胞增殖的影响.结果 石油醚萃取物、醇提物、黄独乙素和β-扶桑甾醇均有不同程度的抑制肿瘤细胞生长的作用,而乙酸乙酯萃取物和水萃取物低剂量有不同程度的促进肿瘤细胞生长的作用;大剂量表现为抑制肿瘤细胞生长的作用.结论 从石油醚提取物中分离得到的黄独乙素和β-扶桑甾醇对胃癌细胞均有抑制作用.
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佛波酯不同浓度和不同时间对人胃癌BGC823细胞的MMP-9表达
目的 观察佛波酯(12-myristate 13-acetate,PMA)不同浓度和不同时间对人体胃癌BGC823细胞MMP-9表达的影响,探讨PMA能诱导MMP-9表达增加的佳浓度和诱导时间.方法 采用mRNA(Real Time RT-PCR)蛋白(West-blot)明胶酶活性分析(Zymography)观察不同浓度的PMA作用于人胃癌BGC823细胞不同时间后的MMP-9表达.结果 PMA浓度1 5mg/L、3 0mg/L、6 0mg/L、12 0mg/L、24 0mg/L 24h时对人胃癌BGC823细胞作用后MMP-9表达率分别为(19 1±1 27)%、(25 3±5 7)%、(52 6±4 8)%、(67 9±3 6)%、(91 3±2 3)%;48h时分别为(21 1±1 9)%、(29 2±3 6)%、(56 6±4 3)%、(76 1±5 1)%、(93 3±2 9)%;72h时分别为(23 4±3 7)%、(37 8±4 2)%、(60 3±14 5)%、(83 6±18 1)%、(95 6±1 3)%.结论 PMA对MMP-9表达的影响浓度剂量和时间依赖性,佳浓度24 0mg/L,佳时间24h.
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紫红参提取物抗肿瘤作用研究
[目的]以中国红参,高丽参为对照探讨紫红参提取物的抗肿瘤活性.[方法]体外实验:HepG 2、A549、BGC823细胞培养,用药后MTT法检测细胞活力；体内试验:制备S180荷瘤小鼠,灌胃给药,称取瘤重计算抑瘤率.[结果]体外实验:紫红参须提取物对肿瘤细胞抑制作用较强,在0.9、1.8g·L1对HepG 2抑制率分别为69.73％、91.10％,对BGC823抑制率分别为73.58％、93.12％,在1.8g·L-1对A549抑制率为88.06％;体内实验:红参、紫红参根、紫红参须、高丽参提取物对S180肉瘤生长具有明显抑制作用,紫红参须提取物抑瘤活性好,抑瘤率达到44.3％.[结论]紫红参须提取物抑瘤作用较好,具有较大开发应用价值.
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MTT法测定蜂房提取物对胃癌细胞BGC823增殖的影响
目的 探讨蜂房不同提取部位抗肿瘤的活性.方法 采用MTT法测定蜂房石油醚提取液、95%乙醇提取液、剩余水提液、水浸液、水煎液对胃癌细胞BGC823增殖的影响.结果 胃癌细胞BGC823对不同的蜂房提取物敏感性存在差异,乙醇提取液对胃癌细胞BGC823增殖抑制作用强,在1.67 mg/mL浓度下抑制率可达68.5%;其它部位提取物对胃癌细胞BGC823的抑制作用较弱,抑制率均未超过30%.结论 95%的乙醇提取物为蜂房抗肿瘤主要活性部位.
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人胃癌BGC823细胞RNA转染脐血树突状细胞分泌的exosomes对T细胞增殖及杀瘤活性的影响
目的:探讨肿瘤细胞RNA转染脐血树突状细胞(DCs)分泌的exosomes对细胞毒T细胞(CTL)特异性抗肿瘤作用的影响.方法:分离脐血单个核细胞,经干细胞因子(SCF)、粒细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白介素-4(IL-4)诱导和BGC823 RNA转染形成成熟DCs,收集DCs培养上清,采用超速离心法分离exosomes,并用透射电镜、SDS-PAGE和Western blot进行鉴定;利用MTT比色分析法观察exosomes诱导T细胞增殖和CTL的杀瘤活性.结果:经诱导和BGC823 RNA转染后DCs分泌的exosomes表达MHC-Ⅱ、CD54、CD86,对T细胞的刺激指数(SI)为(2.53±0.09),CTL杀瘤活性(64.92±0.37)%,较转染前的(1.26±0.07)和(35.28±0.16)%均增高(P＜0.01).结论:从脐血中诱导的DCs经肿瘤细胞RNA转染后分泌的exosomes,能在体外活化T细胞,有望成为新型非细胞结构的DCs亚单位疫苗.
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灵芝孢子油对人胃腺癌细胞BGC823的抑制作用
目的 观察灵芝孢子油(GSSO)对BGC823细胞增殖、凋亡、迁移的影响,探讨其对胃腺癌细胞的影响.方法 GSSO干预BGC823后,CCK-8检测细胞增殖的变化,流式检测细胞凋亡的变化,Transwell实验检测细胞迁移的变化.结果 与对照组(溶剂DMSO)相比,GSSO剂量依赖性地抑制BGC823细胞的增殖(P＜0.05)；体积分数＞0.005%时,即可促进细胞凋亡(P＜0.001).与对照组相比较,灵芝孢子油体积分数达到0.005%,即可显著性抑制BGC823细胞迁移(P＜0.001).结论 孢子油能显著抑制BGC823细胞增殖和迁移,促进BGC823细胞凋亡.
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人胃腺癌BGC823细胞Midkine高表达前后基因表达谱芯片分析
目的:用基因芯片技术分析、筛选Midkine高表达前后胃腺癌相关基因谱的差异表达.方法:建立Midkine高表达BGC823胃腺癌细胞系,提取细胞总RNA,逆转录Cy3、Cy5 标记cDNA 探针,应用晶芯表达谱芯片,分析差异表达的基因.结果:发现Midkine高表达前后BGC823胃腺癌细胞有显著性表达差异的基因共有550个,其中上调基因407个,下调基因143个.对550条差异表达基因进行初步功能分类分析,结果表明这些基因与Midkine促进胃腺癌发病机制存在相关性.结论: Midkine高表达前后BGC823胃腺癌细胞部分功能基因存在显著的表达差异,多数差异表达的基因参与细胞黏附、细胞骨架形成、细胞周期以及细胞代谢等过程.
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贝母素乙增加胃癌细胞对阿霉素化疗敏感性的研究
目的 探讨贝母素乙对人胃癌BGC823细胞的化疗增敏作用及其相关机制.方法 采用MTT、结晶紫染色法观察贝母素乙与阿霉素联用对BGC823细胞的生长抑制作用.Western blotting法检测贝母素乙与阿霉素联用作用于BGC823细胞后增殖相关蛋白的表达.结果 贝母素乙与阿霉素联合应用可使BGC823细胞的抑制率增加(P<0.05),阿霉素的细胞毒性增加,化疗药物的IC50值降低(P<0.01),明显影响BGC823细胞的增殖.Western blotting结果 显示,CyclinD1、P-AKT的表达均下调.结论 贝母素乙可增加BGC823细胞对阿霉素的敏感性,降低P-AKT、CyclinD1的表达.
