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白蛋白过负荷对足细胞骨架蛋白α-actinin-4的影响
目的：观察足细胞损伤及药物干预后细胞骨架蛋白mRNA的变化，以进一步研究足细胞病的发病机制。方法：体外培养条件永生化小鼠足细胞，设立分组：对照组、足细胞损伤组（BSA 20mg/ml）、地塞米松组（地塞米松0.1umol/L+白蛋白20mg/ml），分别于12h、24h、48h检测足细胞内α-actinin4 mRNA表达变化。结果：足细胞损伤组足细胞内α-actinin4 mRNA水平随时间变化逐渐降低，地塞米松组先降低后升高。结论：地塞米松可以改善足细胞损伤后骨架蛋白α-actinin-4的mRNA表达的变化。
关键词： 足细胞 α-actinin-4 白蛋白 -
糖肾煎对早期2型糖尿病肾病大鼠足细胞α-actinin-4、ZO-1表达的影响
目的:探讨α-辅肌动蛋白-4(α-actinin-4)、紧密连接蛋白(zo-1)在早期糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏表达与DN的关系,中药糖肾煎对保护肾脏的作用机制.方法:采用单肾切除+高脂饲料+小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射,结合行为干预建立早期(气阴两虚型)2型糖尿病肾病病证结合大鼠模型,按随机数字表法分为假手术组(N组)、模型组(M组)、糖肾煎组(T组)、贝那普利组(B组).干预16周,观察各组大鼠一般状况、空腹血糖(FBG)、负荷后血糖(P2hBG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛索抵抗指数(HOMA-IR)、24 h尿白蛋白(24 h-UAlb)、尿β2微球蛋白(U-β2MG)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr))、足细胞密度及病理改变,应用免疫组化及荧光定量PCR方法观察α-actinin-4、ZO-1及mRNA表达.结果:与N组比较,M组一般状况较差,FBG、P2hBG、FINS、HOMA-IR、24 h-UAlb、U-β2MG水平指标均有明显上升,a-actinin-4、ZO-1的累积光密度值(IOD)下降,PCR表达下降,足细胞密度较少,足突增宽、融合;与M组比较,T、Z组各指标均有改善;与B组比较,T组HOMA-IR、α-actinin-4、ZO-1的IOD有所改善,余指标比较差异无统计学意义.结论:中药糖肾煎能上调足细胞α-actinin-4、ZO-1的表达从而保护足细胞、延缓DN的进展.
关键词： 2型糖尿病肾病 α-actinin-4 ZO-1 糖肾煎 -
α-actinin-4 在糖尿病肾病大鼠的表达及其与足细胞数目的相关性
目的:探讨糖尿痛肾病发展过程中α-actinin-4的表达变化及其与足细胞数目的关系.方法:建立STZ诱导的糖尿病大鼠模型.应用免疫组化及RT-PCR方法观察在糖尿病肾病发展过程中α-actinin-4的蛋白及mRNA表达变化,以及应用WT-1来标记足细胞核,现察足细胞数目的变化.结果:8周时,糖尿病组染色强度较正常组明显增高(P<0.01),12周时变化更为明显(P<0.01).α-actinin-4的mRNA的表达水平在各时间点与组化结果相同.8周时,糖尿病组足细胞数目较正常组明显降低(P
关键词： 糖尿痛肾病 α-actinin-4 足细胞数目 相关性 -
糖尿病肾病大鼠肾组织α-actinin-4表达及通络泄浊方的干预作用
目的:探讨α-actinin-4在糖尿病肾病大鼠肾组织中表达的变化,并观察通络泄浊方对其表达的影响.方法:采用链脲佐菌素(STZ)法制作大鼠模型,随机分为正常对照组、模型组、通络泄浊方组、科素亚组和通络泄浊方+科素亚组.采用Realtime - PCR及Westernblot方法检测肾组织α-actinin-4mRNA和蛋白的表达.结果:与正常对照组相比,模型组mRNA表达和蛋白明显降低(P<0.01),给药组与模型组相比,mRNA和蛋白表达明显增高(P<0.01).结论:α-actinin-4的表达降低参与了糖尿病肾病大鼠蛋白尿的发生;通络泄浊方可以通过上调DN大鼠肾组织α-actinin-4mRNA和蛋白的表达而改善大鼠的肾功能及蛋白尿水平.
关键词： 糖尿病肾病 α-actinin-4 通络泄浊方 -
糖肾平对糖尿病肾病大鼠α-actinin-4表达及足细胞数目影响
目的:探讨糖肾平对糖尿病肾病(Diabetic nephropathy,DN)大鼠发病过程中足细胞表达的影响,及α-actinin-4的表达与足细胞数目和DN大鼠蛋白尿的相关性.方法:采取腹腔注射STZ诱导糖尿病肾病大鼠模型.测定大鼠24 h尿蛋白定量;应用免疫组织化学方法观察DN大鼠肾小球中α-actinin-4和WT-1表达情况.进一步设计体外细胞培养试验,采用Western blotting方法检测糖肾平对足细胞α-actinin-4和WT-1表达的影响.结果:糖肾平组大鼠24 h尿蛋白定量明显降低(P＜0.01).与正常组相比,DN组大鼠肾组织中α-actinin-4蛋白表达水平明显降低(P＜0.01),且α-actinin-4表达与尿蛋白呈负相关关系(r=-0.384,P＜0.05).模型组足细胞数目较正常组明显降低(P＜0.01),且α-actinin-4表达与足细胞数目呈正相关关系(r=0.498,P＜0.01).糖肾平治疗后α-actinin-4的表达水平及足细胞数目均明显升高(P＜0.01),且体外足细胞Western blotting实验结果与免疫组化结果一致.结论:α-actinin-4表达降低,足细胞数目减少.α-actinin-4表达与蛋白尿呈负相关,与足细胞数目呈正相关.糖肾平可能通过调控糖尿病肾病肾组织actinin-4蛋白表达,保护大鼠足细胞,进而降低24 h尿蛋白定量,起到保护糖尿病肾病肾功能及延缓病程进展的作用.
关键词： 糖尿病肾病 α-actinin-4 糖肾平 足细胞数目 蛋白尿 -
肾炎消白颗粒对阿霉素肾病大鼠 Podocin、α－actinin－4蛋白的影响
目的：观察肾炎消白颗粒对阿霉素肾病大鼠足细胞相关分子Podocin、α－actinin－4蛋白的影响，探讨肾炎消白颗粒治疗肾小球肾炎蛋白尿的机制。方法：100只Wistar大鼠随机分正常对照组，模型对照组，肾炎消白颗粒高、低剂量组，洛汀新组5组。一次性尾静脉注入阿霉素6．5 mg／kg，制备阿霉素肾病大鼠模型。分别采用肾炎消白颗粒和洛汀新进行干预，7周末处死大鼠，取大鼠右肾皮质，免疫组织化学法检测Podocin、α－actinin－4蛋白的表达。结果：7周末阿霉素大鼠模型组Podocin蛋白表达明显下调，肾炎消白颗粒、洛汀新组Podocin蛋白的表达明显上调，其中，肾炎消白颗粒高剂量组的作用优于洛汀新组；7周末阿霉素大鼠模型组α－actinin－4蛋白表达明显上调，肾炎消白颗粒、洛汀新组α－actinin－4蛋白的表达明显下调，其中，肾炎消白颗粒高剂量组的作用优于洛汀新组。结论：肾炎消白颗粒治疗肾小球肾炎蛋白尿的机制可能是通过上调足细胞Podocin蛋白的表达，下调足细胞α－acti-nin－4蛋白的表达，保持了裂隙膜结构的完整与功能的正常，稳定了足细胞骨架蛋白结构与功能，维护了正常的肾小球滤过屏障。
关键词： 肾炎消白颗粒 阿霉素肾病 Podocin α-actinin-4 -
CD2AP和α-actinin-4在大鼠阿霉素肾病模型中的表达
目的:观察CD2相关蛋白(CD2AP)和α-actinin-4这两种足细胞相关分子在大鼠阿霉素肾病模型中蛋白表达水平的变化,探讨它们与蛋白尿发生发展的相关性.方法:30只SD大鼠随机分为肾病模型组和正常对照组,建立阿霉素肾病模型,在2、4、6、8周,应用光镜、电镜观察肾组织的病理改变,BCA法检测24 h尿蛋白排泄量,半定量Western Blot的方法检测大鼠肾皮质中CD2AP和α-actinin-4的表达.结果:随着肾病模型组大鼠尿蛋白量逐渐增加,肾组织病理改变逐步加重,肾皮质CD2AP的表达量先明显增加,后逐渐降至对照组水平,2、4、6周分别为对照组的3.0、1.8、1.2倍,而α-actinin-4的表达量无明显变化.结论:阿霉素肾病模型大鼠肾皮质CD2AP和α-actinin-4这两种足细胞相关分子的蛋白表达规律不同,前者与蛋白尿的发生发展有一定程度的相关性,后者则与尿蛋白量的变化无关.
关键词： 阿霉素肾病 CD2相关蛋白 α-actinin-4 蛋白尿 -
α-actinin-4与多柔比星肾病大鼠氧化应激状态的关系
目的 探讨足细胞骨架结构蛋白α-actinin-4与多柔比星肾病大鼠机体氧化应激状态的关系,并从分子水平推测贝那普利降低尿蛋白的作用机制.方法 实验组Wistar大鼠经尾静脉一次性注射多柔比星5 mg/kg建立动物模型,术后药物干预组予贝那普利6 mg/(kg*d)灌胃,对照组则行等量9 g/L盐水灌胃,观察2组大鼠尿蛋白、氧化应激指标丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)变化.链酶抗生物素蛋白-生物素过氧化酶复合物(SABC)免疫组织化学染色,观察α-actinin-4在其肾小球中的分布及表达改变.结果 实验组多柔比星注射后7 d即有T-AOC活性递减,α-actinin-4蛋白阳性表达递增,且α-actinin-4由均匀点线样分布,逐渐向不连续粗颗粒状、连续较粗线样、斑片样的分布模式转变;在14～28 d,实验组24 h尿蛋白量、MDA渐增,SOD递减,与对照组比较均有显著性差异(Pa<0.05).与实验组比较,28～35 d贝那普利干预组24 h尿蛋白量及MDA显著降低,SOD、T-AOC活性明显增强;免疫组织化学染色示α-actinin-4表达减弱,并呈线样分布,且紊乱程度减轻(Pa<0.05).相关性分析示α-actinin-4与24 h尿蛋白量、MDA均呈正相关(r=0.948 ,0.825 Pa=0),与SOD、T-AOC均呈负相关(r=-0.956,-0.873 Pa=0). 结论 多柔比星肾病大鼠α-actinin-4分布及表达的改变与蛋白尿的发生及机体氧化应激状态存在相关性.贝那普利降尿蛋白的作用可能与改善机体氧化应激,影响α-actinin-4分布或表达有关.
关键词： α-actinin-4 蛋白尿 氧化应激 贝那普利 大鼠 -
氯沙坦对晚期糖基化终产物诱导足细胞α-actinin-4表达的干预作用
目的观察晚期糖基化终产物（AGEs）对足细胞α-actinin-4的影响及氯沙坦的干预作用。方法不同浓度的AGEs（0,20,40,80μg/mL）干预足细胞24 h后，采用免疫印迹法检测足细胞α-actinin-4的表达。通过激光共聚焦显微镜观察足细胞肌动蛋白F-actin和α-actinin-4的分布，并在氯沙坦预处理足细胞后，观察α-actinin-4和F-actin的改变。结果与对照组相比，AGEs（80μg/mL）可明显降低足细胞α-actinin-4的表达[（62±13）%vs.100%，P<0.05]，使α-actinin-4由膜周分布转为核周分布，并使肌动蛋白F-actin发生重构，而氯沙坦预处理可减轻AGEs介导的α-actinin-4的下调[（80±14）%vs.（62±13）%，P<0.05]和α-actinin-4和F-actin的重构，P<0.05。结论 AGEs可下调α-actinin-4表达，介导骨架蛋白的重构，而氯沙坦可减轻AGEs介导的这些改变。
关键词： 晚期糖基化终产物 足细胞 α-actinin-4 -
α-actinin-4在糖尿病大鼠的表达及贝那普利对其的干预作用
目的 探讨糖尿病肾病发展过程中α-actinin-4的表达变化及贝那普利对其的干预作用.方法 建立STZ诱导的糖尿病大鼠模型,贝那普利对其干预,应用免疫组化及RT-PCR方法观察在糖尿病肾病发展过程中α-actinin-4的蛋白及mRNA表达变化.结果 8周时,糖尿病组染色强度较正常组明显增高(P<0.01),12周时变化更为明显(P<0.01).α-actinin-4的mRNA的表达水平在各时间点与组化结果相同.贝那普利干预组8周时α-actinin-4表达较糖尿病组明显降低(P<0.05),而在12周时其表达仍较糖尿病组低,但无统计学意义.结论 α-actinin-4在糖尿病肾病发展过程中表达增高,贝那普利能下调其表达.
关键词： α-actinin-4 蛋白尿 -
Nephrin,α-actinin-4在糖尿病大鼠肾组织中的表达及其与足细胞数目的相关性研究
目的:探讨糖尿病肾病发展过程中Nephrin及α-actinin-4的表达变化及其与足细胞数目的相关关系.方法:应用SD大鼠,建立1型糖尿病大鼠模型,分为糖尿病组及正常对照组,应用免疫组化及RT-PCR方法观察在糖尿病肾病发展过程中Nephrin,α-actinin-4蛋白及mRNA表达变化,以及应用WT-1来标记足细胞核,观察足细胞数目的变化.结果:8周时,糖尿病组Nephrin染色强度较正常组明显降低(P＜0.05),12周时变化更为明显(P＜0.01),糖尿病组α-actinin-4染色强度在两个时间点较正常组均明显增高(P＜0.01),足细胞数目在两个时间点较正常组均明显减少.Nephrin表达与足细胞数目呈正相关(r=0.93,P=0.002 4),α-actinin-4表达与足细胞数目表达呈负相关(r=-0.923,P=0.008 6),而足细胞数目与尿蛋白呈负相关(r=-0.950 8,P=0.003 6).结论:Nephrin,α-actinin-4的表达在糖尿病肾病发展过程中发生改变,此种改变与足细胞数目减少、尿蛋白的发生密切相关.
关键词： nephrin α-actinin-4 足细胞数目 相关性 -
α-actinin-4及其生物学意义
α-actinin-4在机体组织中广泛表达,具有多种生物学特性,是维持肾小球足细胞功能正常的重要因素之一.本组综述了近年有关α-actinin-4的研究进展及其生物学意义.
关键词： α-actinin-4 细胞骨架 细胞运动 肿瘤 肾疾病 -
TRPC6、α-actinin-4在阿霉素肾病大鼠肾组织的表达差异及意义
目的 分析TRPC6、α-actinin-4在大鼠正常肾组织和阿霉素肾病大鼠不同病理类型肾组织的表达差异,并以此讨论两个分子在蛋白尿产生中相互的关系以及可能发生的作用.方法 采用阿霉素大鼠肾病模型,分析TRPC6、α-actinin-4在不同病理类型大鼠肾组织中的表达.结果?(1)TRPC6在微小病变和局灶节段性肾小球硬化肾小球内的的表达水平较对照组显著增多(P<0.05),且在局灶节段性肾小球硬化组中增多较微小病变组更加显著(P<0.05).(2)α-actinin-4在微小病变组表达增加(P<0.05),而在局灶节段性肾小球硬化组表达与对照组无明显差异.(3)随着TRPC6的表达的增加α-actinin-4的表达下调(P<0.01).结论?(1)TRPC6的表达在不同病理类型间存在差异,其表达的增强促进肾小球硬化.(2)α-actinin-4在不同病理类型间存在差异,其表达的变化间接反映足细胞的损伤,提示了病变的活动情况.(3)随着TRPC6表达的增加造成足细胞损伤、脱落、肾小球硬化,导致α-actinin-4的表达下调.
关键词： TRPC6 α-actinin-4 大鼠 表达 -
α-Actinin-4在足细胞脱落机制中的作用
蛋白尿是慢性肾病进展的独立危险因素，病理条件下，足细胞可能发生凋亡、脱落等病理改变而形成蛋白尿，因此，研究足细胞的脱落机制尤为重要。α-辅肌动蛋白（α-Actinin-4）是在人类肾脏足细胞中特异表达的细胞骨架辅肌动蛋白，可以通过与F-肌动蛋白（F-actin）、SD复合物、整合素（integrin）α3β1等蛋白作用介导足细胞的形态学、细胞骨架动力学、足细胞与GBM的粘附和细胞内外信号传递等重要生物学过程。本文对α-actinin-4在足细胞脱落机制中的作用进行综述，为探讨蛋白尿的产生原因和慢性肾病的发病机制提供参考。
关键词： 足细胞 α-actinin-4 蛋白尿 慢性肾病
