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亚硒酸钠对顺铂致人体淋巴细胞增殖抑制的拮抗作用
目的检测亚硒酸钠是否能够削弱或解除顺铂对植物血球凝激素(PHA)刺激的人体外周血淋巴细胞的增殖抑制.方法用顺铂和亚硒酸钠单独或联合处理PHA刺激的人体外周血淋巴细胞,顺铂(0.05,0.20,0.50 mg/L)在细胞培养24 h时加入,亚硒酸钠(0.05 mg/L)在不同处理中分别在细胞培养开始时加入或与顺铂同时加入;培养72 h后检测转化淋巴细胞的有丝分裂指数.结果 0.05 mg/L亚硒酸钠在培养开始时加入,PHA刺激转化的淋巴细胞有丝分裂指数较对照增长42.8%(P＜0.05),与顺铂同时加入,有丝分裂指数增长13.7%(P＞0.05).0.05与0.20 mg/L顺铂处理细胞,有丝分裂指数未发生显著性改变,当顺铂剂量为0.50 mg/L时,细胞有丝分裂指数较对照降低54.5%(P＜0.001).亚硒酸钠预处理细胞可以解除0.50 mg/L顺铂所致的细胞增殖抑制,使有丝分裂指数恢复正常,但亚硒酸钠与顺铂同时加入时,被顺铂抑制的有丝分裂指数只能部分提高.结论 0.05 mg/L亚硒酸钠单独作用于淋巴细胞可直接促进细胞增殖,与顺铂联合处理细胞时,可降低顺铂毒性,拮抗顺铂的抗增殖作用.亚硒酸钠在细胞培养开始时加入培养体系效果更佳.
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大鼠生后不同发育阶段心肌细胞有丝分裂指数检测
目的 检测大鼠生后不同发育阶段心肌细胞的有丝分裂指数,为研究心肌细胞增殖机制奠定形态学基础.方法 取大鼠生后不同发育阶段心肌组织行冰冻切片,采用免疫荧光双重染色方法,以横纹肌肌动蛋白单克隆抗体标记心肌细胞,以磷酸化组蛋白H3单克隆抗体标记有丝分裂的染色体,同时用Hochest33342显示细胞核,荧光显微镜观察并拍照.结果 心肌细胞胞质呈红色荧光,有丝分裂的染色体呈现不同形状的绿色荧光,胞核为蓝色;大鼠生后零天心肌细胞有丝分裂指数(0.905±0.087%)是生后2w(0.372±0.094%)的2.4倍(P＜0.01),4w至成年几乎为零.结论 大鼠出生2w后心肌细胞逐渐丧失增殖能力,由增生性生长向肥大性生长转化.
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Ce(SO4)2对玉米根尖细胞遗传毒性和细胞毒性的研究
[目的]研究Ce(SO4)2对玉米根尖细胞的遗传毒性和细胞毒性.[方法]用不同梯度浓度的Ce(SO4)2对玉米根尖细胞进行染毒处理,检测玉米根尖细胞的微核率和有丝分裂指数.[结果]当Ce(SO4)2≥10 mr/L时,玉米根尖细胞的微核率显著上升,当Ce(SO4)2达到1 000 mg/L时,玉米根尖细胞的有丝分裂指数显著下降.[结论]提示一定浓度的Ce(SO4)2对玉米根尖细胞具有一定的遗传毒性和细胞毒性.
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秋水仙胺的浓度和处理时间对白血病患者骨髓细胞分裂指数的影响
目的:探讨秋水仙胺的浓度和处理时间对初诊未治和治疗后缓解的白血病患者骨髓细胞有丝分裂指数(MI)的影响.方法:采用浓度为10μg/ml和0.1μg/ml的秋水仙胺对17例各类白血病(初诊未治12例、复发1例、完全缓解(CR)4例)的骨髓细胞分别处理12h和24h,计算其MI,并与常规方法(0.05μg/ml×1h)比较.结果:白血病初诊未治和CR的骨髓标本采用10μg/ml的秋水仙胺处理12h组和用0.1μg/ml处理12h组,其平均MI均比0.05μg/ml×1h组明显增高(P＜0.01),而10μg/ml或0.1μg/ml×24h组则分别导致14/17例和7/17例的MI为零.结论:高浓度(10μg/ml)或常规浓度(0.1μg/ml)的秋水仙胺处理12h是使白血病患者特别是髓细胞白血病患者,无论是初诊未治还是治疗后CR的病例,获得高骨髓细胞MI的有效方法.
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大鼠出生后早期心肌细胞有丝分裂指数检测及细胞周期进程相关基因的表达
目的:通过对大鼠出生后早期不同时间点心肌细胞有丝分裂指数和细胞周期进程相关基因表达水平的定量检测,确定大鼠出生后心肌细胞丧失分裂增殖能力的时间,为心肌细胞增殖研究奠定细胞学及形态学基础.方法:用qRT-PCR法检测出生后第1、4、7、10、14天,共5个不同时间点SD大鼠心肌细胞中细胞周期进程相关基因的mRNA表达水平.肌钙蛋白T(cTnt)和磷酸化组蛋白3(H3p)单克隆抗体对上述5个时间点的心室肌组织进行双重免疫荧光染色,同时用DAPI显示细胞核,荧光显微镜观察并拍照.结果:①大鼠出生后早期不同时间点心肌细胞有丝分裂指数差异有统计学意义(P＜0.05),生后第4天有丝分裂指数达到峰值.②心肌细胞周期进程相关基因Ccnd1、Ccna2、Ccnb1、Cdk1、CDk2和Cdk4的表达在生后第4天出现高峰,之后呈递减趋势;但是Cdk蛋白抑制基因Cdkn1a、Cdkn1b的表达一直呈递增趋势.结论:①大鼠出生后第10天心肌细胞逐渐丧失分裂增殖能力;②细胞周期相关基因的表达和有丝分裂指数在出生后第4天出现峰值可能与心肌细胞的多核化和肥大性生长有关.
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柴胡提取物对人肝癌细胞和小鼠S一180肉瘤的抑制作用
目的:研究柴胡水提物对体外培养的人肝癌SMMC-7721细胞线粒体代谢活性、细胞增殖及小鼠移植性S-180实体瘤的影响.方法:中药柴胡(BCDC)经粉碎、浸提、超速离心、减压浓缩、冷冻干燥得柴胡提取物.人肝癌SMMC-7721细胞经不同浓度柴胡提取物处理不同时间后,检测了各实验组和对照组细胞的有丝分裂指数、细胞增殖及线粒体活性几方面的变化.S-180肉瘤小鼠连续9 d腹腔注射33.3 mg/kg体重BCDC提取物,停药15 d后,杀死小鼠称量瘤重.结果:①经355 mg/L BCDC提取物处理人肝癌SMMC-7721细胞24h,其线粒体活性为对照组的50.26%,处理72h为24.82%.②以355mg/L BCDC提取物处理7d中,人肝癌细胞数分别是血清对照组(FCS)的为57.5%,45.88%,37.06%,28.37%,20.90%,12.89%,14.18%;无血清对照组(NON)的65.09%,62.24%,56.99%,49.08%,40.78%,26.78%,28.41%.③经BCDC提取物处理24h后,即使更换正常培养基,人肝癌细胞数在96h的恢复培养中仍低于处理前的细胞数.④有丝分裂指数实验组为0.30,对照组分别为5.3和5.4(P＜0.001).⑤BCDC提取物对小鼠S-180实体瘤抑制率为87.21%.
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氯化汞对大鼠子宫内膜细胞的增殖作用
目的研究氯化汞对去卵巢大鼠子宫内膜细胞的增殖作用.方法将成年雌性大鼠去卵巢后,给予不同剂量的HgCl2(0.04mg/kg、0.20mg/kg和1.00mg/kg)连续3d,观察子宫内膜细胞有丝分裂指数和嗜银染色颗粒数.结果氯化汞低、中、高3个剂量组有丝分裂指数,均高于阴性对照组,差异有显著性(P＜0.05),且有明显的剂量-效应关系.同时氯化汞高剂量组嗜银染色颗粒数,与阴性对照组相比,差异有显著性(P＜0.05).结论氯化汞能加速细胞的分裂和增殖,因此,推断它在大鼠体内可能具有雌激素样作用.
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玉米种子对铬生态毒害检测的研究
目的:探讨玉米种子对Cr3+和Cr6+的生态毒害检测的毒害浓度和适宜品种.方法:选用3种玉米进行植物发芽毒性试验和根伸长试验,了解不同浓度Cr3+和Cr6+对3个品种玉米种子萌发、根生长及对玉米根尖细胞有丝分裂的影响.结果:Cr3+和Cr6+在5×10-4 mol/L～1×10-2 mol/L浓度范围内对玉米的毒害作用随培养时间延长和浓度增加毒害加重.5×10-4 moL/L、1×10-3 mol/L浓度的铬对玉米的生长有轻微的刺激作用.结论:两种价态的铬比较,Cr6+ 对3种玉米的毒害作用均大于Cr3+.1×10-2 moL/L为玉米耐受铬的高浓度.3种玉米中农大108抗铬毒害能力强.
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大豆异黄酮对去卵巢大鼠子宫内膜细胞增殖的影响
目的:观察大豆异黄酮(GS)对去卵巢大鼠子宫内膜细胞增殖的影响.方法:30只成年雌性去卵巢大鼠于术后8 d随机分为阴性对照组、GS(低、中、高)剂量组与阳性对照组,按2.0 mL/kg分别腹腔注射蒸馏水、GS及雌二醇(E2),1次/d,连续注射3 d.观察各组大鼠子宫内膜细胞有丝分裂数.结果:阴性对照组、阳性对照组及GS组细胞有丝分裂数差异有统计学意义(F=54.886,P<0.001),且阳性对照组与GS组均高于阴性对照组(P<0.05).随GS剂量的升高,GS组细胞有丝分裂数增加(F=4.692,P=0.026).结论:GS能加速去卵巢大鼠子宫内膜细胞的分裂和增殖,其在大鼠体内可能具有雌激素样作用.
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HgCl2、CdCl2对去卵巢大鼠的雌激素样作用
目的:评价HgCl2、CdCl2的雌激素样作用.方法:将成年雌性SD大鼠48只随机分为8组,去卵巢后,给予低、中、高剂量的HgCl2 (0.04 mg/kg、0.20 mg/kg和1.00 mg/kg)和 CdCl2 (0.08 mg/kg、0.40 mg/kg和2.00 mg/kg),阴性对照给予蒸馏水,阳性对照给予雌二醇,连续3 d ,观察子宫增重作用、子宫内膜细胞有丝分裂指数和嗜银染色颗粒数.结果:HgCl2和CdCl2高剂量组可诱导去卵巢SD大鼠子宫明显增重,与阴性对照组相比,差异有统计学意义(P均<0.05).HgCl2低、中、高剂量组和CdCl2中、高剂量组有丝分裂指数均高于阴性对照组,差异有统计学意义(P均<0.05).HgCl2和CdCl2高剂量组嗜银染色颗粒数高于阴性对照组,差异有统计学意义(P均<0.05).结论:HgCl2、CdCl2在体内可能有雌激素样作用.
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咖啡因与酵母对小鼠骨髓细胞有丝分裂指数的影响
目的:找出能明显促进小鼠骨髓细胞有丝分裂的药物及剂量,探讨咖啡因和酵母对小鼠骨髓细胞有丝分裂指数的影响.方法:选择健康小鼠,分别经腹腔注射不同剂量的咖啡因或酵母液,24小时后颈椎脱臼处死,取股骨并制成骨髓细胞染色体标本,观察并计数小鼠骨髓细胞有丝分裂相的比例.结果:咖啡因的三个剂量组和酵母的低、中剂量组小鼠骨髓细胞中分裂数目均有明显增加,与对照组比较有显著性的差异(P＜0.05),其中咖啡因低剂量组和中剂量组的酵母效果为明显(P＜0.01).结论:咖啡因和一定剂量的酵母都能促进小鼠骨髓的细胞增殖,增加小鼠骨髓细胞的有丝分裂指数,但咖啡因的作用更显著.
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甲胺磷对小鼠骨髓细胞的细胞毒性和遗传毒性检测
目的检测甲胺磷的细胞毒性和遗传毒性.方法以6mg/kg、12mg/kg和24mg/kg三种不同剂量的甲胺磷,分五次、每次间隔24小时经口灌胃给小鼠染毒;然后用细胞遗传学方法,检测骨髓细胞的有丝分裂指数、染色体结构畸变率和畸变细胞率的变化.结果与阴性对照组比较,甲胺磷三个剂量组的有丝分裂指数均显著降低(P<0.001),小剂量组的染色体结构畸变率和畸变细胞率增高不显著(P>0.05),中、大剂量组的染色体结构畸变率和畸变细胞率均显著增高(P<0.01～0.001).结论甲胺磷具有细胞毒性和遗传毒性,表现为抑制细胞增殖,诱发染色体损伤.甲胺磷对细胞增殖的抑制作用比对染色体的损伤作用更加强烈.
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快杀灵对小鼠骨髓细胞的细胞毒性和遗传毒性检测
目的检测快杀灵是否具有细胞毒性和诱变性.方法按受试药物LD50的1/4×、1/2×、1×和2×四种不同剂量,分5次(间隔24小时)经口灌胃给小鼠染毒,然后用细胞遗传学方法,检测骨髓细胞的有丝分裂指数、染色体结构畸变率和畸变细胞率的变化.结果与阴性对照组比较,18.2mg/kg的剂量就使骨髓细胞的有丝分裂指数显著降低(P＜0.001).18.2mg/kg和36.4mg/kg剂量组的染色体结构畸变率和畸变细胞率有增高,但无显著性差异(P＞0.05),72.8mg/kg和145.6 mg/kg剂量组的染色体结构畸变率和畸变细胞率均有显著增高(P＜0.01).结论快杀灵既可抑制细胞增殖,又可诱发染色体损伤.快杀灵对细胞增殖的抑制作用比对染色体的损伤作用更加强烈.
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明矾对玉米(Zea mays L.)根尖细胞的遗传毒性效应
目的 研究明矾对玉米(Zea mays L.)根尖细胞微核及异常有丝分裂的诱导,阐明明矾对玉米根尖细胞的遗传毒性效应.方法 以玉米根尖为实验材料,用不同浓度的明矾为诱变剂,处理24h,测定玉米根尖细胞的有丝分裂指数、微核率和染色体畸变率.结果 不同浓度明矾均能诱发较高微核率和染色体畸变率(P<0.05),在同样的条件下,0.1～1.0 g/L明矾处理下玉米根尖细胞微核率和染色体畸变率显著升高并达到高值,而1.0～2.0g/L明矾处理下玉米根尖细胞微核率和染色体畸变率下降并趋于平缓.同时在低浓度明矾作用下,玉米根尖细胞分裂有显著的加速现象.当明矾浓度到达一定程度后,表现为玉米根尖细胞分裂减少.结论 明矾诱发玉米根尖细胞高微核率和有丝分裂异常,明矾对玉米根尖细胞具有明显的细胞遗传学毒性效应.
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甘草酸苷对银屑病大鼠的作用
目的：观察甘草酸苷对银屑病大鼠的作用，探讨其可能的作用机制。方法：健康雌性 SD 大鼠，体质量180~210 g，腹腔注射苯甲酸雌二醇，形成雌激素期阴道上皮银屑病模型。将40只模型大鼠随机分成4组（n=10）：对照组、甘草酸苷1 mg 组、甘草酸苷2 mg 组和甘草酸苷4 mg 组。上述4组分别于大鼠腹腔注入生理盐水、甘草酸苷1、2和4 mg。用光学显微镜观察大鼠阴道上皮基底细胞有丝分裂情况，计数300个基底细胞中的有丝分裂数，计算有丝分裂指数。用酶联免疫吸附试验法测定大鼠血清细胞因子 IL-4和 IL-10的含量。结果：甘草酸苷1 mg 组、甘草酸苷2 mg 组和甘草酸苷4 mg 组的有丝分裂指数均明显低于对照组（P＜0.05），IL-4和 IL-10的含量均明显高于对照组（P＜0.05）。结论：甘草酸苷具有抑制银屑病大鼠阴道上皮细胞有丝分裂的作用，其作用可能与血清细胞因子 IL-4和 IL-10的含量增高有关。
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退银汤治疗银屑病动物模型的实验研究
目的 研究退银汤对银屑病动物模型的治疗作用.方法 将60只小鼠或豚鼠随机均分为空白组、模型组、阳性对照组(消银颗粒)和退银汤低、中、高剂量组,各给药组ig给药,qd,连续14 d,空白组和模型组给予等量生理盐水.采用雌激素期小鼠阴道上皮和小鼠尾部鳞片表皮病理模型,观察退银汤对雌激素期小鼠阴道上皮细胞的有丝分裂指数及小鼠尾部表皮鳞片中颗粒层鳞片数的影响;采用豚鼠耳廓皮肤银屑样皮损模型,观察皮损组织病理变化及耳廓的表皮厚度;采用ELISA试剂盒检测豚鼠耳廓皮肤匀浆液中肿瘤坏死因子(TNF-α)及细胞间黏附因子(ICAM-1)的含量.结果 退银汤能明显抑制雌激素期小鼠阴道上皮细胞的有丝分裂,对小鼠尾部鳞片表皮颗粒层的形成有显著促进作用,使豚鼠银屑病样模型的耳廓皮肤厚度显著减少,豚鼠耳廓皮肤匀浆液中TNF-α及ICAM-1的含量显著降低,并均呈良好的量效正相关.结论 退银汤对银屑病动物模型有良好的治疗作用.
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新生牛牙周膜细胞的生物学特性研究
目的:观察新生牛牙周膜细胞的生物学特性,为牙周组织工程研究寻找合适的种子细胞.方法:采用组织块法体外培养新生牛牙周膜细胞,观察其形态特点,取第3代培养细胞测定细胞24 h贴壁率、生长曲线和分裂指数.结果:新生牛的牙周膜细胞呈梭形或星形,贴壁率高,生长曲线呈"S"形,分裂相多.原代培养成功率100%.结论:新生牛牙周膜细胞体外原代培养成功率高,细胞生长迅速,分裂较快,可考虑用于牙周组织工程的实验研究.
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氧化苦参碱对银屑病有丝分裂指数及炎症细胞计数的影响
目的 探究氧化苦参碱对重度斑块状银屑病患者有丝分裂指数及炎症细胞计数的影响.方法 静脉滴注氧化苦参碱治疗重度斑块状银屑病8周,治疗前后观察全身皮损变化,并取患处皮损利用HE染色对比观察治疗前后皮肤组织病理学改变,计数皮损中有丝分裂细胞数及炎性细胞数,并与正常皮肤进行对比.结果 氧化苦参碱治疗8周后,PASI评分较治疗前显著下降(P＜0.05),达PASI75的患者比例为40.54％,皮肤组织病理明显恢复,炎症细胞计数(P＜0.05)、有丝分裂指数(P＜0.05)均较治疗前明显降低,但仍高于正常组(P＜0.05).结论 氧化苦参碱治疗重度斑块状银屑病,能显著改善患者的皮损,抑制银屑病患者表皮细胞的有丝分裂及角质形成细胞异常增殖,减轻炎性反应和改善微循环,使银屑病表皮过度增殖的病理状态趋于恢复正常.
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门静脉动脉化对大鼠肝脏再生的影响
目的探讨门静脉动脉化重建肝血流后对肝脏再生的影响.方法建立门静脉动脉化重建肝脏血流加半肝切除(43%)的大鼠实验模型,分别在术后3 d和10 d取出肝脏烘干称重、光镜下计数进入有丝分裂期的肝细胞和分离肝细胞进行流式细胞仪分析,以观察肝脏再生的情况.结果实验组术后3 d和10 d测定的肝脏干重分别为(67.56±3.70)%、(78.76±5.68)%,与对照组(71.66±3.24)%、(82.38±4.86)%相比无显著性差异(P>0.05);进入有丝分裂期的肝细胞计数(708.4±68.21、239.6±24.50)与对照组(724.8±69.99、216.2±23.81)相比无显著性差异(P>0.05);流式细胞仪测得的进入G2和M期的肝细胞的DNA含量[(25.72±4.78)%、(15.60±2.52)%]与对照组[(28.78±3.37)%、(13.34±2.88)%]相比无显著性差异(P>0.05).结论行门静脉动脉化重建肝血流不影响肝脏的再生.
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沙苑子提取物对丝裂霉素C致小鼠骨髓细胞遗传损伤的保护作用
目的:探讨沙苑子提取物(Flastem milkvetch seed extract,FMSE)对丝裂霉素C(mitomycin C,MMC)诱导的小鼠骨髓细胞遗传损伤的保护作用.方法:将100只昆明小鼠随机分成5组,每组20只.试验分为正常对照组(生理盐水),模型组(MMC,2.0mg/kg),FMSE低(20 mg/kg)、中(40 mg/kg)、高(80 mg/kg)剂量组.灌胃给药,连续10 d,每天1次.末次灌胃前12h,除正常对照组腹腔注射等体积生理盐水外,其余各组均腹腔注射MMC (2.0 mg/kg).用药结束后,脱颈椎处死小鼠,制备小鼠骨髓细胞悬液,应用彗星电泳、嗜多染红细胞微核形成、骨髓淋巴细胞染色体畸变和有丝分裂指数试验,检测FMSE对MMC所诱导的小鼠骨髓细胞遗传损伤的保护作用.结果:与正常对照组比较,模型组中MMC单独作用时可造成小鼠骨髓淋巴细胞拖尾率及平均尾长、微核率和染色体畸变率显著增加(P均＜0.01),有丝分裂指数显著降低(P＜0.01).而FMSE低、中、高剂量组与MMC联合作用时,与模型组比较,小鼠骨髓淋巴细胞拖尾率及平均尾长、微核率和染色体畸变率显著降低(P均＜0.01),有丝分裂指数显著提高(P＜0.01).结论:FMSE对MMC诱导的小鼠骨髓细胞遗传损伤有明显的保护作用.
