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  • microRNA-221在恶性肿瘤中的研究进展

    作者:周宁

    microRNA-221(miRNA-221)为小的非编码调控基因,作为致瘤性miRNA,转录后负向调控靶基因的表达在人类多种恶性肿瘤中表达上调,参与肿瘤的发生发展,是目前被普遍认可的作用机制.miRNA-2 21在恶性肿瘤中的表达及意义也已成为当前肿瘤研究热点之一.目前研究表明miRNA-2 21可促进肿瘤上皮间质转化,增强肿瘤细胞的转移和侵袭能力.miRNA-221在宫颈癌及卵巢癌中的表达具有重要意义,为临床诊断或治疗提供新思路.

  • ROC曲线分析miRNA-221/222作为侵袭性甲状腺乳头状癌诊断标志物的临床价值

    作者:林在楷;周琨;陆霁;董冰;韩肖骅;马保金;孙强

    目的 研究miRNA-221/222在侵袭性甲状腺乳头状癌诊断中的意义及与患者临床病理特征的关系.方法 选取甲状腺乳头状癌(PTC)患者87例,其中,47例患者腺外浸润(I-PTC),40例患者肿瘤局限于包膜内(L-PTC);再选取同期27例结节性甲状腺肿(MNG)患者和18例正常甲状腺患者的甲状腺组织(NT).应用实时荧光定量PCR检测法检测各组患者甲状腺组织中miRNA-221/222的表达量,分析miRNA-221/222的表达与PTC患者的临床病理特征的关系,构建ROC曲线评估miRNA-221/222在乳头状甲状腺癌诊断和判断有无腺外浸润中的应用价值.结果4组患者甲状腺组织中miRNA-221/222表达情况比较,差异有统计学意义(P﹤0.05).有淋巴结转移和(或)腺外浸润的患者miRNA-221/222的表达高于无淋巴结转移和(或)无腺外浸润的患者,差异有统计学意义(P﹤0.05).miRNA-221诊断PTC的曲线下面积(AUC)为0.803,miRNA-222诊断PTC的AUC为0.802;miRNA-221的截断值为0.487时,诊断灵敏度为80.7%,特异度为74.8%;miRNA-222的截断值为0.502时,诊断灵敏度为78.3%,特异度为73.2%.miRNA-221判断甲状腺肿瘤侵袭性的AUC为0.660,miRNA-222判断甲状腺肿瘤侵袭性的AUC为0.653;miRNA-221的截断值为0.846时,诊断灵敏度为63.6%,特异度为52.5%;miRNA-222的截断值为0.851时,诊断灵敏度为63.6%,特异度为73.8%.结论 miRNA-221/222在PTC患者组织中表达上调,与PTC的侵袭程度和淋巴结转移情况有关,支持其作为侵袭性PTC潜在的生物标志物,但利用特异性miRNA判断甲状腺癌的侵袭和转移风险性,仍有待进一步深入研究.

  • miRNA-221表达与甲状腺乳头状癌临床病理分期的关系研究

    作者:刘志英;徐虓;吴英杰

    目的:探讨miRNA-221在甲状腺乳头状癌中的表达及与临床病理特征的关系。方法选取甲状腺乳头状癌(30例)、甲状腺良性病变(25例)及正常甲状腺组织(25例)共80例。采用real-time PCR法检测miR-NA-221在甲状腺乳头状癌组织、良性病变组织及正常甲状腺组织样本中的表达,并分析miRNA-221的表达与甲状腺乳头状癌的临床病理特征的相关性。结果 miRNA-221在甲状腺乳头状癌组织中的表达明显高于甲状腺良性病变组织和正常甲状腺组织(P<0.05);miRNA-221的表达水平与甲状腺乳头状癌组织的病理分级具有明显的相关性(r=0.823,P<0.05)。结论 miRNA-221在甲状腺乳头状癌组织中表达升高,且与甲状腺乳头状癌的组织病理分级相关,miRNA-221在甲状腺乳头状癌的发生发展中有重要作用。

  • 反义miRNA-221/222上调p27kip1抑制胶质瘤细胞生长的体外研究

    作者:张春智;康春生;杨卫东;王广秀;张安玲;浦佩玉

    目的 探讨敲低miRNA-221/222表达上调p27kip1抑制U251人脑胶质瘤细胞株生长的效果及机制.方法 脂质体共转染反义miRNA-221/222下调U251人脑胶质瘤细胞株miRNA-221、miRNA-222的表达.使用Northern blot方法 鉴定转染后U251细胞miRNA-221、miRNA-222表达水平下调;MTT法评价反义miRNA-221/222抑制U251细胞生长效果;流式细胞术检测转染后U251细胞周期分布;Western blot分析p27kip1蛋白的表达变化.结果 Northern blot显示反义miRNA-221/222共转染组使miRNA-221、miRNA-222的表达水平明显下降.反义miRNA-221转染组仅使miRNA-221的表达水平明显下降,反义miRNA-222转染组仅使miRNA-222的表达水平明显下降.转染无意序列组及对照组的miRNA-221、miRNA-222表达水平没有改变.MTT结果 显示反义miRNA-221/222共转染组肿瘤细胞生长速度小于对照组、转染无意序列组、转染反义miRNA-221组、转染反义miRNA-222组.流式细胞术检测可见反义miRNA-221/222共转染组细胞周期存在G0/G1期阻滞且明显高于其他各组.Western blot显示反义miRNA-221/222共转染组的p27kip1蛋白表达明显上调.结论 反义miRNA-221/222通过上调p27kip1蛋白表达来抑制胶质瘤细胞U251的生长.

  • miRNA-221和miRNA-222与甲状腺癌侵袭转移的相关性研究

    作者:赵鹏新;张凯丽;马维远;胡志刚

    目的 探讨miRNA-221和miRNA-222与甲状腺癌侵袭转移的相关性.方法 选择2013年10月至2016年10月接受甲状腺次全手术切除治疗的病理确诊的甲状腺癌患者168例作为研究对象,于确诊后收集患者外周静脉血与新鲜标本提取miRNA,进行RT-PCR检测血浆及组织miRNA-221及miRNA-222表达水平.结果 癌组织miRNA-221及miRNA-222与血浆miRNA-221及miRNA-222表达呈正相关(r=0.226,P<0.05);血浆miRNA-221及miRNA-222表达水平在不同年龄、淋巴结转移与否、腺体外浸润与否、肿瘤大小及TNM分期均有差异,且有统计学意义(P<0.05).结论 miRNA-221及miRNA-222在甲状腺癌组织及血浆中高表达,与甲状腺癌侵袭转移的明显相关,可能可以作为生物标志物.

  • miRNA-221在行完全切除术非小细胞肺癌中的表达及患者生存分析

    作者:王峰;李梅;朱建伟;茅国新

    目的:探讨miRNA-221在非小细胞肺癌组织中的表达及其与预后的相关性.方法:回顾性收集分析南通大学附属医院2010年1月至2012年12月期间行完全切除术治疗的153例非小细胞肺癌患者的临床资料,同时应用RT-PCR检测患者组织标本miRNA-221的表达量,分析其与患者临床资料及总生存期(OS)的关系.结果:年龄、临床分期与miRNA-221表达存在相关性,P<0.05.单因素COX回归分析显示,临床分期(OR=1.96,95% CI:1.14~2.67)、腺癌(OR =2.54,95% CI:1.77 ~5.12)、肿瘤大小(OR =1.33,95%CI:1.01~2.14)和miRNA-221(OR=3.07,95% CI:1.76 ~6.31)表达均是影响OS的危险因素;多因素COX回归分析显示,临床分期(OR =3.32,95% CI:1.67 ~7.05)和miRNA-221表达(OR=2.55,95%CI:1.41 ~4.85)是影响OS的独立危险因素.结论:miRNA-221高表达提示非小细胞肺癌患者OS较短,有望作为肺癌预后预测的分子标志物.

  • 血清miRNA-124 miRNA-221在缺血性脑卒中的临床应用

    作者:周晓冬;郝瑞;肖小平

    目的:探讨血清miRNA-124、miRNA-221在缺血性脑卒中患者中的临床应用价值。方法收集缺血性脑卒中患者85例的临床资料,将脑卒中患者分为完全卒中组和进展卒中组,选取同期本院健康体检者38例为对照组。采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测血清miRNA-124、miRNA-221的表达。结果脑卒中患者血清miRNA-124、miRNA-221表达与对照组比较分别上调和下调,差异有统计学意义(P<0.01);miRNA-124在进展卒中组的表达水平低于完全卒中组(t=21.37,P<0.01),miRNA-221的表达水平则高于完全卒中组(t=22.26,P<0.01)。完全卒中组和进展卒中组miRNA-124、miRNA-221表达均呈负相关(r=-0.687,-0.692,P<0.01)。两组患者中miRNA-124,miRNA-221的表达水平分别和甘油三酯、总胆固醇、收缩压及空腹血糖具有相关性[(r=0.387,0.316,0.369,0.337, P<0.01);(r=0.-328,-0.368,-0.329,-0.382,P<0.01)]。结论检测血清miRNA-124、miRNA-221表达可预测缺血性脑卒中疾病的发生及判断其危险程度,估计病情的发展状况。

  • 应用实时荧光定量PCR检测结直肠癌与癌旁组织中miRNA-221的差异表达状况

    作者:曾俊杰;孙凯;吴承堂;雷尚通;王伟

    目的 分析结直肠癌与毗邻癌旁组织中miRNA-221差异表达状况.方法 常规抽提30例结直肠癌及对照癌旁组织中总RNA,应用实时荧光定量PCR方法检测标本中miRNA-221的表达状况.结果 与癌旁组织相比,结直肠癌组织中miRNA-221表达明显上调(P<0.01).结论 实时荧光定量PCR是一种较精确的miRNA定量检测方法;miRNA-221可能通过转录后基因沉默机制促进结直肠癌的发生发展.

  • 不同肝癌细胞株中miRNA-221和miRNA-222的差异表达及意义

    作者:高峰;庞新亚;权胜伟

    目的 研究miRNA-221、miRNA-222在不同人肝癌细胞株中的表达情况,同时分析其在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达情况,探讨二者与HCC复发转移的关系.方法 从体外培养的人肝癌细胞株HepG2、Huh7、MHCC-97H和46例手术切除的HCC组织及毗邻癌旁组织中提取总的RNA,用微小RNA的引物反转录后,用miRNA-221、miRNA-222特异性引物作荧光定量聚合酶链反应,分析miRNA-221、miRNA-222在肝癌细胞株中的表达水平.结果 肝癌细胞株MHCC-97H中miRNA-221、miRNA-222的表达较肝癌细胞株HepG2、Huh7显著升高;HCC组织中miRNA-221、miRNA-222的平均表达水平较癌旁组织分别上调(1.72±1.17)、(1.76±1.14)倍,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 miRNA-221、miRNA-222显著高表达可能在HCC发生、发展中发挥重要作用,尤其与HCC细胞的复发转移有关.

  • MicroRNA-221在恶性肿瘤中的研究进展

    作者:邓小斌;孙圣荣

    miRNA-221在甲状腺癌、肝癌、胶质细胞瘤、恶性黑色素瘤、乳腺癌等多种恶性肿瘤中高表达,其通过抑制相关靶基因的表达促进肿瘤的发生、发展.miRNA-221的研究为恶性肿瘤诊断标志物的筛选和基因治疗靶点的寻找提供了新的方向.

  • 特异性miR-221抑制剂对结直肠癌细胞增殖及凋亡的影响

    作者:王伟;孙凯;吴承堂;雷尚通;曾俊杰;伍颖君;李国新

    目的 探讨miR-221在结直肠癌细胞中的表达状况及特异性miR-221抑制剂对癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 应用实时荧光定量PCR(real-time Q-PCR)检测四种人结肠癌细胞系HT-29、Lovo、SW-480、Cac02中miRNA-221表达状况,并以人脐静脉内皮细胞HUVEC作为正常对照;设计并合成miR-221、antl-miR-221(微小RNA抑制剂)寡核苷酸,以脂质体转染Cac02细胞系,以Real-timeQ-PCR再次检测转染后细胞中miR-221表达状况,并通过噻唑蓝(MTT)比色法及流式细胞仪观察细胞的增殖和凋亡状态.结果 与正常细胞相比,4种人结肠癌细胞系中miR-221表达均显著增高,差异具有统计学意义(P<0.01);癌细胞转染antt-miR-221后,G0/G1期细胞比例明显增加,而S期细胞比例显著下降,并可见细胞凋亡的发生(P<0.01).结论 miR-221特异性抑制剂可通过抑制细胞增殖同时诱导凋亡而抑制结直肠癌细胞生长,提示miR-221作为结直肠癌生物治疗有效靶点有进一步研究价值.

  • miRNA-221对肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响

    作者:韩双喜;王丽;王介营;李传光;张锋刚

    目的 通过构建慢病毒介导的miRNA-221-siRNA,探讨其下调miRNA-221对肝癌HepG2细胞系生物学行为的影响.方法 针对目标序列合成特异性siRNA干扰片段并克隆入慢病毒载体pGCSIL-GFP,将重组miRNA-221-RNAi-LV感染肝癌HepG2细胞系中,设为实验干扰组(miRNA-221-siRNA,SI组)、阴性对照组(negative control,NC组)和正常组(normal,N组);分别采用聚合酶链反应方法检测miRNA-221目的基因的表达情况;用噻唑蓝比色法检测增殖情况、transwell小盒迁移实验检测迁移情况、Hochest33258凋亡实验检测调亡情况.结果 (1) miRNA-221-RNAi-LV可显著降低miRNA-221的表达;(2) MTT实验96 h,SI组吸光度显著低于NC组和N组(P=0.003 2);(3)迁移能力明显减弱(P=0.000 4);(4)SI组细胞凋亡明显增加,促凋亡基因Caspase 3基因表达明显上调(P--0.000 2).结论 miRNA-221-siRNA通过抑制miRNA-221的表达抑制肝癌HepG2细胞增殖,促进肝癌HepG2细胞凋亡,降低其迁移能力.

  • 非小细胞肺癌组织miRNA-221表达及其与预后的关系研究

    作者:吕俊杰;徐磊;许有涛;邱满堂;杨欣;王洁;尹荣;许林

    背景与目的 microRNAs是肿瘤的重要调控因子,其中miRNA-221的表达与多种肿瘤相关,本研究旨在探讨miRNA-221在非小细胞肺癌组织中的表达及其与预后的关系。方法分析江苏省肿瘤医院2005年11月-2007年1月期间行手术治疗的117例非小细胞肺癌患者的临床资料。采用实时定量逆转录聚合酶链反应检测上述病例肺癌标本中miRNA-221的水平;应用χ2检验分析miRNA-221表达水平与各临床病理参数的关系;采用Kaplan-Meier方法分析miRNA-221表达与非小细胞肺癌生存期(overall survival, OS)之间的关系;采用Cox风险比例模型分析各个协变量的联合效应。以P<0.05认为差异有统计学意义。结果 miRNA-221的表达量与患者年龄相关,与患者性别(χ2=0.070, P=0.791)、病理类型(χ2=0.414, P=0.520)、p-TNM分期(χ2=0.068, P=0.794)及吸烟史(χ2=0.206, P=0.650)无明显关系;生存分析显示miRNA-221高表达组患者生存期显著低于低表达组(P<0.001)。Cox风险比例模型分析显示miRNA-221表达可作为非小细胞肺癌患者预后不良的标志。结论 miRNA-221的高表达提示非小细胞肺癌患者预后较差,是潜在的肺癌预后预测分子标志物。

  • miRNA-221对卵巢癌细胞生物学行为的影响分析

    作者:朱小丹;姚馨怡;赵蕴芝;陈超;陈燕;许文娟

    目的:探讨微小RNA-221(microRNA-221,miRNA-221)对卵巢癌细胞生物学行为的影响.方法:对人卵巢癌细胞系OVCAR3瞬时转染miR-221 mimics为实验组,转染miR-negative control mimics为阴性对照组,不进行任何转染为空白对照组,转染48 h后进行四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法实验、流式细胞实验、Transwell迁移实验,观察卵巢癌细胞OVCAR3生长状况.结果:实时定量PCR(real-time PCR)检测显示实验组miR-221的表达水平较阴性对照组与空白对照组均有增高(P<0.05).MTT检测显示,上调OVCAR3细胞内miR-221水平后,细胞增殖抑制率为(29.81 ± 2.24)%,而阴性对照组与空白对照组分别为(2.49 ± 0.28)%和(1.98 ± 0.24)%,实验组与阴性对照组和空白对照组相比,细胞增殖抑制率增高,差异均有统计学意义(P<0.05).流式细胞术检测显示实验组OVCAR3细胞凋亡率为(30.33 ± 2.39)%,而阴性对照组与空白对照组分别为(8.13 ± 0.71)%和(6.89 ± 0.58)%,实验组与阴性对照组和空白对照组相比,细胞凋亡率增高,差异均有统计学意义(P<0.05).Transwell迁移实验显示,转染miR-221 mimics后实验组、阴性对照组、空白对照组三组的细胞迁移能力差异无统计学意义(P>0.05).结论:瞬时转染miR-221 mimics的上皮性卵巢癌(EOC)细胞系,细胞增殖受到抑制而对细胞的迁移没有影响,表明miR-221可能参与了EOC细胞增殖和凋亡过程.

  • miRNA-221和miRNA-222在肝细胞肝癌中的表达及临床意义

    作者:庞新亚;高峰;权胜伟

    目的:研究miRNA-221、miRNA-222在人肝癌细胞株及肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达,探讨二者与患者临床病理特征间的关系.方法:从体外培养的人肝癌细胞株HepG2、Huh7、MHCC-97和46例手术切除的HCC组织及毗邻癌旁组织中提取总的RNA,用微小RNA的引物反转录后,用miRNA-221、miRNA-222特异性引物做荧光定量聚合酶链反应,并分析miRNA-221、miRNA-222表达水平与各临床病理参数间的关系.结果:肝癌细胞株MHCC-97中miRNA-221、miRNA-222的表达较肝癌细胞株HepG2、Huh7显著升高;HCC组织中miRNA-221、miRNA-222的平均表达水平较癌旁组织分别上调1.72±1.17,1.76±1.14倍,差异均有统计学意义(P<0.05).miRNA-221、miRNA-222表达水平与HCC肿瘤TNM分期和包膜浸润有关,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:miRNA-221、miRNA-222显著高表达可能在HCC发生、发展中发挥重要作用,尤其与肝癌细胞的侵袭、转移有关.

  • 探究miR-221在甲状腺乳头状癌中的表达及其与患者临床资料和预后的关系

    作者:李锋;宋文娜;张秋月;许海明;王章站

    目的 对甲状腺乳头状癌中miRNA-221的表达和患者临床资料与预后关系作出分析和总结.方法 选取在我院接受甲状腺良性病变和甲状腺乳头状癌治疗的40例患者为研究对象,其入院接受治疗的时间段为2016年3月至2017年3月,其中接受甲状腺良性病变治疗的患者有20例,接受甲状腺乳头状癌治疗的患者有20例.并且通过逆转录PCR检测法对正常甲状腺组织的样品和甲状腺乳头状癌组织中miRNA-221的表达进行检测.结果 在甲状腺恶性肿瘤患者的肿瘤组织之中miRNA-221表达值显著高于甲状腺良性病变组织和正常对照组;miRNA-221的表达程度随着甲状腺乳头状癌的分化程度的增加而增高P<0.05.结论 在甲状腺乳头状癌的发生与发展过程中,miRNA-221的表达与之具有重要的作用,在对患者进行诊断和治疗时对miRNA-221的表达情况进行检测具有一定的意义.

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