首页 > 文献资料
-
Connexin43在银杏叶片抑制兔动脉粥样硬化斑块形成中的作用
目的 观察银杏叶片对兔动脉粥样硬化过程中血脂代谢及斑块形成的变化,探讨在兔动脉粥样硬化模型中银杏叶片对Connexin43(CX43)表达的影响.方法 雄性实验兔40只,随机分为5组,每组8只,对照组普通饮食,其他4组高脂饮食,同时辛伐他丁组给予辛伐他丁灌胃、银杏叶片高低剂量组给予相应剂量的银杏叶片灌胃共12周,检测血脂、主动脉病理观察动脉硬化变化情况,运用免疫组化及Western blot检测主动脉CX43的表达情况.结果 银杏叶片组兔的血脂较高脂饮食组下降,动脉粥样硬化的程度较高脂组减轻；CX43的表达较高脂组减少.结论 银杏叶片具有轻度的降血脂作用,在一定程度上可以减轻高脂饮食兔动脉粥样硬化程度,这种作用可能是通过下调CX43的表达来实现的.
关键词： 银杏叶片 Connexin43 动脉粥样硬化 实验兔 -
瓣膜病慢性心房颤动心房肌缝隙连接CX43和CX40的重构
目的探讨人类瓣膜病慢性心房颤动(房颤)心房肌中缝隙连接通道蛋白Connexin 43(CX43)和Connexin 40(CX40)的重构及其与房颤的关系.方法 (1)取11例风湿性心脏瓣膜病(风心病)患者的右心耳心肌(房颤8例,窦性心律3例),以Northern blot印迹法比较窦性心律和房颤者CX43和CX40 mRNA表达量的变化;(2)另取20例风心病患者右心耳心肌(窦性心律8例,房颤12例,房颤持续时间从3个月至15年)制成冰冻切片,在激光共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscopy)下分别观察窦性心律和房颤心房肌CX43和CX40蛋白的荧光斑面积、空间分布及形态变化.结果 (1)窦性心律和房颤CX43和CX40 mRNA表达量差异无显著性;(2)CX43和CX40荧光斑面积在窦性心律和房颤时差异也无显著性,但CX40在心肌纵切面上的数目明显多于横切面(P＜0.05),而CX43数目无变化.提示房颤时CX40通道在心肌空间上的分布发生了显著改变,即端-端连接大于侧-侧连接.结论人类风心病慢性房颤时缝隙连接蛋白CX43和CX40的mRNA表达量和蛋白量均未发生显著改变,但CX40蛋白的空间分布发生了显著变化,端-端连接明显增多,侧-侧连接显著减少,提示房颤时CX40通道发生了空间排列上的重构,可能参与了房颤的维持.
关键词： 风湿性心脏瓣膜病 心房颤动 缝隙连接 Connexin43 Connexin40 重构 -
颈椎后纵韧带骨化患者韧带成纤维细胞中Cx43的表达及其在成骨化中的作用
目的:观察Connexin43(Cx43)在颈椎后纵韧带骨化患者韧带成纤维细胞中的表达,探讨其在成骨化过程中的作用.方法:选择2013年1月～12月期间在我科行颈前路手术治疗的15例颈椎后纵韧带骨化症患者(骨化组)与15例不伴后纵韧带骨化的颈椎疾病患者(非骨化组).术中切取两组患者韧带标本并采用组织块培养法进行细胞体外培养,应用免疫细胞化学及免疫荧光技术检测胞浆内波形蛋白进行细胞鉴定.采用RT-PCR方法检测细胞内成骨特异指标骨钙素(OCN)、碱性磷酸酶(ALP)及Ⅰ型胶原(COL Ⅰ)mRNA表达,Western blot技术检测两组细胞Cx43蛋白表达,评估其成骨活性.采用siRNA技术对骨化组第3代细胞之Cx43抑制72h,检测抑制组与非抑制组OCN、ALP及COL Ⅰ的表达变化.结果:经鉴定培养出的细胞为成纤维细胞.韧带骨化组细胞OCN、ALP与COL Ⅰ的mRNA表达量分别为1.36±0.21、0.53±0.18、1.64±0.37,明显高于非骨化组(0.78±0.21、0.29±0.13、1.01±0.26);骨化组Cx43蛋白表达量(1.00±0.30)亦明显高于非骨化组(0.48±0.18).对骨化组细胞Cx43抑制72h后,其蛋白表达下调69％(P＜0.01);非抑制组OCN、ALP及COL Ⅰ的mRNA表达量为1.54±0.33、1.32±0.36、1.86±0.44,抑制组分别为0.91±0.32、0.47±0.21、0.88±0.29,两组比较差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:颈椎后纵韧带骨化症患者韧带成纤维细胞中存在较高水平的Cx43,并在其成骨化过程中发挥着积极作用.
关键词： 颈椎后纵韧带骨化 Connexin43 骨钙素 碱性磷酸酶 Ⅰ型胶原 -
晚期糖基化终产物引起内皮细胞connexin43表达上调
目的 研究晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)对体外培养的人脐静脉内皮细胞缝隙连接蛋白( gap junction protein) connexin43基因表达的影响.方法 D-葡萄糖孵育牛血清白蛋白制备糖基化牛血清白蛋白作为晚期糖基化终产物.体外常规培养的人脐静脉内皮细胞分为4组,分别为对照组,100、200和400mg/L AGEs干预组,干预24h后通过RT -PCR方法检测各组connexin43基因mRNA的表达有无差别;通过免疫荧光方法检测对照组和200mg/L AGEs干预组之间connexin43蛋白的表达水平有无差别.结果 不同浓度(100、200、400mg/L)的AGEs干预24h均能引起人脐静脉内皮细胞connexin43基因mRNA的表达上调(P＜0.01);200mg/L的AGEs干预24h引起人脐静脉内皮细胞connexin43基因的蛋白表达上调(P＜0.01).结论 AGEs体外短期干预可引起人脐静脉内皮细胞connexin43基因的mRNA和蛋白表达水平上调.
关键词： Connexin43 晚期糖基化终产物 人脐静脉内皮细胞 基因表达 -
Connexin43磷酸化调节与细胞间隙连接通讯功能
细胞间隙连接通讯(gap junction intercellular communication,GJIC)对于细胞增殖、分化、内环境稳定及机体新陈代谢、生长发育等生理过程起重要作用.细胞间隙连接是由细胞间隙连接蛋白(connexin,Cx)六聚体形成的跨膜通道结构,细胞间隙连接蛋白是构成细胞间隙连接的蛋白大家族,在人类组织中已经有超过20种细胞间隙连接蛋白被鉴定,connexin43( Cx43)则是该蛋白家族中组织分布广、研究多的一个重要成员,主要表达在心肌、肺、平滑肌、晶状体、成纤维细胞、星形细胞等多种组织.
关键词： Connexin43 细胞间隙连接 磷酸化 去磷酸化 -
Cx43、心脏发育与先天性心脏病
Cx43是哺乳动物心脏中主要的连接蛋白.近年的研究表明它在心脏发育中具有重要作用;Cx43基因可能是先天性心脏病的重要候选基因.本文综述了Cx43的结构、表达及其与心脏发育关系的研究进展.
关键词： Connexin43 连接蛋白类 心脏发育 心脏缺损 先天性 -
间隙连接蛋白connexin43在膀胱移行细胞癌组织中的表达及其与bcl-2、bax表达的相关性
目的:研究细胞间隙连接蛋白connexin43基因(Cx43)在膀胱移行细胞癌(transitional cell carcinoma of the bladder,BTCC)组织中的表达,及其与凋亡相关基因bcl-2、bax表达的相关性.方法:分别采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学法检测60例BTCC中Cx43 mRNA和bcl-2、bax蛋白的表达,并与癌旁组织、正常膀胱组织各15例进行对照.结果:60例BTCC组织中Cx43 mRNA的表达率为43.33%,显著低于癌旁组织和正常膀胱组织的表达率73.33%及100%(x2=17.58,P＜0.01).Cx43的表达与肿瘤的病理分级和淋巴转移均呈显著负相关(x2=9.33和9.74,P均＜0.01),而与患者性别、年龄、临床分期、肿瘤直径和肿瘤生长方式等均无相关性(P均＞0.05).相关性检验表明Cx43与bcl-2蛋白表达呈显著负相关(r=-0.63,P＜0.01),而与bax蛋白表达则呈正相关(r=0.52,P＜0.01).结论:Cx43在BTCC组织中的表达下调提示其与膀胱癌的发生发展和侵袭转移密切相关,可作为判断其预后的重要参考指标.Cx43基因可能与凋亡相关基因bcl-2、bax在膀胱移行细胞癌的发生发展中分别起拮抗和协同作用.
关键词： 膀胱肿瘤 癌 移行细胞 Connexin43 预后 -
高血压大鼠海绵体平滑肌细胞间连接的变化
目的:比较自发性高血压大鼠(SHR)和正常血压大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞间连接改变及与阴茎勃起功能的关系.方法:注射阿朴吗啡(APO)观察14周龄SHR(SHR组,n=5)、Wistar-Kyoto大鼠(WKY组,n=5)阴茎勃起情况,用透射电镜观察其阴茎海绵体平滑肌细胞间连接超微结构,RT-PCR测定海绵体平滑肌细胞Connexin 43的mRNA表达,免疫组化观察Connexin 43蛋白表达.结果:SHR组大鼠阴茎勃起次数明显低于WKY组(P＜0.05),电镜发现SHR组大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞间大量胶原纤维增生,Connexin 43蛋白及其mRNA表达较WKY组显著降低(P＜0.05).结论:高血压影响阴茎勃起功能,阴茎海绵体平滑肌细胞间连接的病理改变可能是高血压性勃起功能障碍的发病机制之一.
关键词： 勃起功能障碍 高血压 Connexin43 阴茎海绵体平滑肌细胞 大鼠 -
Connexin43基因表达下调导致斑马鱼胚胎后部体节发育异常
目的:验证斑马鱼胚胎体节的发育是否受到间隙连接蛋白connexin43(cx43)基因表达调控.方法:利用吗啉修饰的反义寡核苷酸(morpholino antisense oligos)下调cx43基因的表达;单克隆抗体CH1进行全胚胎的免疫荧光来标记体节;全胚胎的TUNEL实验检测细胞凋亡.结果:研究发现cx43基因表达下调的斑马鱼胚胎呈现为尾部向侧下弯曲,并且后部体节排列紊乱.进一步的研究证实cx43下调诱导了后部体节细胞的异常凋亡.结论:cx43与斑马鱼后部体节的正常发育有关.
关键词： Connexin43 体节 发育 吗啉修饰的反义寡核苷酸 斑马鱼 -
高糖对人腹膜间皮细胞间隙连接蛋白的影响
目的 研究高糖对人腹膜间皮细胞间隙连接蛋白(connexin43)表达的影响.方法 分离培养人腹膜间皮细胞,细胞分为3组:正常糖组(含5.5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(含140 mmol/L葡萄糖)和渗透压对照组(含5.5 mmol/L葡萄糖加24.5 mmol/L甘露醇),培养24、48 h后,应用Northern blot、Western blot方法检测connexin43 mRNA和蛋白质表达,比较3组之间的差异.结果 正常糖组腹膜间皮细胞表达丰富的connexin43,高糖环境下培养的腹膜间皮细胞connexin43 mRNA和蛋白质表达均较正常糖组显著下降(P<0.05).渗透压对照组与正常糖组之间无明显差异(P>0.05).结论 高糖可抑制腹膜间皮细胞connexin43 mRNA和蛋白质表达,可能为腹膜透析(PD)中腹膜间皮层完整性损伤的机制之一.
关键词： 腹膜间皮细胞 Connexin43 腹膜透析 -
原发性肝细胞癌组织中Connexin43和CD147的表达及意义
目的 探讨原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中Connexin43(Cx43)和CD147蛋白的表达及意义.方法 采用免疫组化PV6000法检测74例HCC和20例正常肝组织中Cx43和CD147的表达.结果 Cx43和CD147在HCC组织中阳性率分别为27.03%、63.51%,在正常肝组织中阳性率分别为95.00%、30.00%,Cx43在正常肝组织中的阳性率明显高于HCC组织中的阳性率,差异有显著性(P<0.01);CD147在HCC组织中阳性率明显高于正常肝组织的阳性率,差异有显著性(P<0.01).Cx43和CD147阳性表达与肝细胞癌的肿瘤大小、分化程度、TNM分期及肝内血管癌栓具有相关性(P<0.05),与患者的年龄、性别、有无伴肝硬化、门静脉癌栓及术前血清甲胎蛋白水平无相关性(P>0.05).肝癌组织中Cx43表达下调,CD147表达上调,两者呈负相关(P<0.01).结论 联合检测HCC组织中Cx43和CD147的表达情况,可预测HCC的浸润和转移,对指导临床治疗和判断预后有重要意义.
关键词： 肝肿瘤 Connexin43 CD147 免疫组织化学 -
二甲双胍对高糖培养 H9 c2细胞 Connexin43表达的影响
目的研究二甲双胍（metformin， Met）对高糖培养下的H9c2细胞缝隙连接蛋白43（connexin43，Cx43）表达的影响及其机制。方法高糖培养的大鼠H9 c2心肌细胞分别加入3和5μmol· L－1的两种不同浓度的二甲双胍继续培养24 h。 MTT实验检测H9c2细胞活力；LDH释放实验检测细胞毒力；细胞免疫荧光实验检测Cx43的表达和分布；荧光法检测细胞内活性氧（ ROS ）水平；Western blot 检测 Cx43、p-AMPK、AMPK和GAPDH的表达。结果 Met能增加H9c2细胞活力，降低细胞内ROS水平，对LDH释放差异无显著性；Met使AMPK磷酸化水平明显升高，增加心肌Cx43表达，改善Cx43的分布。结论 Met可能通过激活AMPK途径，增加心肌细胞Cx43的表达和减少细胞内ROS的产生，进而发挥心血管的保护效应。
关键词： 二甲双胍 高血糖 Connexin43 氧化应激 AMP依赖的蛋白激酶 H9 C2 -
Connexin43在心血管疾病作用的研究进展
Connexin43即缝隙连接蛋白43(Cx43),具有保持机体心脏正常电生理活动的重要作用,Cx43可在人体心肌细胞闰盘处形成缝隙连接(gap junctions,GJs),这种连接是正常细胞、组织所具有特征性的标志之一.临床上,诸如高血压、心力衰竭以及心肌梗死等心血管疾病,均可使Cx43的分布或含量发生改变,致使心肌细胞间的信号传递出现障碍,是形成心律失常形成的解剖学基础.本文将对Connexin43与心血管疾病的关系研究进行综述.
关键词： Connexin43 心血管疾病 -
Cx43在神经管畸形发生中神经上皮的表达及意义
目的 观察缝隙连接蛋白43(Connexin43,Cx43)在神经管畸形(neural tube defects,NTDs)发生中神经上皮的表达,以探讨Cx43与NTDs发生的关系.方法 用过量RA建立小鼠胚胎NTDs模型.用SABC免疫组化方法和图像处理系统,分析比较实验组和对照组神经管发育情况以及Cx43蛋白表达的位置和强度.结果 对照组神经管发育良好并适时闭合,实验组神经管发育不良而且不能闭合,脑泡不能发育;Cx43蛋白表达于神经上皮细胞的细胞膜和细胞质内,而且实验组明显高于对照组(P＜0.05);Cx43蛋白的表达表现出时间的差异性.结论 Cx43蛋白定位于神经管上皮细胞的胞膜和胞质内,且有时间差异性.Cx43蛋白的过高表达可能与RA致NTDs密切相关.
关键词： Connexin43 神经管畸形 维甲酸 免疫组织化学 -
间隙连接蛋白-43的表达调控及其功能
细胞间间隙连接通讯(GJIC)是相邻细胞之间的信息和能量物质交换的重要基础.作为GJIC重要成员之一的connexin43(Cx43)基因在转录和翻译水平受到机体的严密调控.相应地,除了调节GJIC外,Cx43也通过影响细胞增殖、分化和凋亡过程参与多种疾病尤其是肿瘤的发生和发展过程.
关键词： Connexin43 间隙连接 功能 调节 抑癌基因 -
大鼠脊髓损伤后逼尿肌兴奋性改变及Connexin43表达的研究
目的 探讨大鼠不同平面脊髓损伤(SCI)造成神经源性膀胱后尿动力学,逼尿肌兴奋性改变和Connexin43(Cx43)的表达情况.方法 成年健康SD雌性大鼠52只,将其随机分为对照组、骶上脊髓损伤(DH)组、骶下脊髓损伤(DA)组.采用脊横断法制备大鼠神经源性膀胱模型.4周后行尿流动力学检查,膀胱离体逼尿肌肌条兴奋性检测,免疫组化法和Western blotting检测Cx43表达情况.结果 DH组逼尿肌漏尿点压较对照组、DA组明显升高,DA组逼尿肌漏尿点压较对照组显著降低;DH组膀胱逼尿肌肌条自发性收缩的频率较对照组、DH组明显增高,DA组膀胱逼尿肌肌条自发性收缩的频率较对照组明显降低.DH组Cx43表达较对照组、DA组明显升高,DA组Cx43表达较对照组明显降低.结论 尿流动力学检查为神经源性膀胱的早期诊断及选择个体化治疗方案提供了一种有效的检查手段.DH组为逼尿肌反射亢进,DA组为逼尿肌反射无力,逼尿肌反射亢进与逼尿肌收缩频率与幅度增高有关,膀胱逼尿肌Cx43表达增高可能是逼尿肌反射亢进机制之一.
关键词： 脊髓损伤 尿动力学 逼尿肌肌条 Connexin43 -
Connexin43介导的缝隙连接与心血管疾病研究进展
半通道蛋白Connexin(Cx)是一种跨膜蛋白,通常以六聚体形式在细胞膜的特定区域形成缝隙连接通道,允许小分子物质通过.心血管系统内有多种Cx蛋白表达,其中Cx43表达为广泛,由Cx43组成的缝隙连接介导心肌细胞间电化学信号传递和物质交换,在维持正常心脏功能中起着重要的作用.近年来文献报道,Cx43结构、数量或其分布的变异与多种心血管疾病有关,如先天性心脏病、肥厚型心脏病、心律失常、高血压以及心力衰竭等.因此,该文对Cx43与心血管疾病关系作一综述.
关键词： 缝隙连接 Connexin43 心血管疾病 -
connexin43基因体外转染大鼠L6骨骼肌成肌细胞的研究
目的 将含有connexin 43基因的质粒在脂质体的介导下转染进入大鼠L6骨骼肌成肌细胞,使用G418根据有限稀释法筛选单克隆细胞株L6 myoblast-Cx43.方法 通过免疫细胞化学技术、Western blot技术,对整合有connexin43基因的阳性细胞克隆进行检测.结果 两个阳性克隆组Cx43蛋白表达均明显高于对照组.结论 获得的两个持续高表达connexin43蛋白的细胞株可用于进行移植细胞之间及移植细胞与宿主细胞之间能否形成良好的电偶联的研究.
关键词： Connexin43 骨骼肌成肌细胞 基因表达 转染 细胞克隆 -
急性白血病化疗前后与正常人骨髓基质细胞间通讯的改变
目的 观察急性白血病化疗前后与正常人骨髓基质细胞间隙连接蛋白43 (connexin43, Cx43)表达的变化及通讯功能的改变.方法 体外培养初发急性白血病化疗前及化疗后完全缓解的与正常人的骨髓基质细胞,采用免疫细胞化学方法观察三者之间Cx43表达的变化;采用细胞划痕染料传输技术比较三者之间间隙连接细胞间通讯(gap junction intercellular communication, GJIC)功能的差异.结果 正常人、急性白血病化疗前及化疗后完全缓解的骨髓基质细胞上Cx43表达的阳性率分别为(88.0±3.5)%、(12.0±2.4) %和(52.0±3.1) %;基质细胞上Cx43蛋白的光密度值分别为(175.08±8.34)、(45.42±3.71)及(94.33±7.20);染料传输的细胞数分别为(9.20±0.35)、(1.84±0.33)和(4.07±0.53).结论 急性白血病骨髓基质细胞间通讯功能较正常人及化疗后完全缓解急性白血病骨髓基质细胞明显减弱.
关键词： 急性白血病 骨髓基质细胞 Connexin43 GJIC 化疗 -
两性霉素B对急性白血病骨髓基质细胞上Cx43表达及GJIC功能的影响
目的 探讨两性霉素B作用下急性白血病骨髓基质细胞上连接蛋白43(Cx43)表达及对细胞间隙连接通讯(GJIC)功能的影响.方法 体外Dexter法培养13份急性白血病骨髓基质细胞(2 ml/份),传代后加入两性霉素B(5×10~(-6) moL/L)(1 ml/份);采用流武细胞术及激光共聚焦显微镜检测加药前后Cx43蛋白表达的变化,采用荧光漂白恢复技术(FRAP)比较加药前后GJIC功能的差异.结果 加药后急性白血病骨髓基质细胞上Cx43的表达的阳性率为(35.9±4.06)%,与加药前(38.75±3.95)%相比无明显变化但出现定位异常;加药前基质细胞的荧光强度在淬灭后缓慢恢复,而加药后基质细胞的荧光在淬灭后400 s仍未恢复,GJIC功能被阻断.结论 两性霉素B可影响Cx43在急性白血病骨髓基质细胞上的定位并阻断其GJIC功能.
关键词： Connexin43 GJIC 急性白血病 骨髓基质细胞 两性霉素B
