首页 > 文献资料
-
血管紧张素转换酶2改善肝细胞炎症分子机制
目的 探讨血管紧张素转换酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)2通过抑制P38促分裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)/激活蛋白(activator protein,AP)-1通路改善脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的肝细胞炎症反应的分子机制.方法 培养永生化大鼠BRL肝细胞,随机分为5组:对照组、LPS(10μg/mL)组、LPS+重组(recombinant,r) ACE2 (LPS处理前30 min予5、10、20 ng/mL rACE2)组、LPS+ACE2抑制剂MLN-4760(LPS处理前30 min予10-7,10-6,105 mmol/L MLN-4760)组、LPS+rACE2(LPS处理前30 min予20ng/mL rACE2)+P38MAPK抑制剂SB203580(LPS处理前30 min予10-5 mmol/L SB203580)组.于LPS处理后6、12、24 h应用Western blot方法检测ACE2、P38MAPK、磷酸化(p)-P38MAPK、AP-1蛋白表达.实时定量PCR方法检测P38MAPK、AP-1、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达.结果 与对照组相比,LPS处理后ACE2、P38MAPK、AP-1蛋白表达呈时间依赖性激活,均于12 h达峰值(均P＜0.05).与LPS组相比,rACE2组AP-1、P38MAPK、p-P38MAPK、肿瘤坏死因子α表达明显下降(均P＜0.05),20 ng/mL浓度的rACE2对AP-1(0.12±0.002 vs.0.04±0.005,P＜0.01)、P38MAPK(0.17±0.02 vs.0.02±0.002,P＜0.01)、p-P38MAPK(0.29±0.01 vs.0.02±0.01,P＜0.01)的抑制作用强.MLN-4760组上述因子表达明显升高(均P＜0.05),并呈剂量依赖性.SB203580去除了rACE2对AP-1、TNF-α表达的抑制作用.结论 rACE2通过下调P38MAPK/AP-1信号通路改善LPS诱导的肝细胞炎症.
关键词： 血管紧张素转换酶2 P38促分裂原活化蛋白激酶 脂多糖 肝细胞炎症 分子机制 -
辛伐他汀抑制P38MAPK信号通路减少大鼠肾小球系膜细胞MCP-1及ICAM-1表达的研究
目的 探讨P38促分裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)信号通路在糖尿病肾病(DN)中的作用及辛伐他汀(SI)在防治DN中的作用机制. 方法 分别以高糖、糖基化终产物(AGE)或过氧化氢体外孵育大鼠肾小球系膜细胞(MC),检测P38MAPK和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)及细胞问黏附因子1(ICAM-1)在MC的表达.比较有无P38MAPK特异性抑制剂SB203580(SB)或辛伐他汀(SI)预处理时以上3种因素对P38MAPK和MCP-1及ICAM-1在MC表达的影响. 结果 高糖、AGE或H2O2均可独立激活P38MAPK.并增加MCP-1及ICAM-1在MC的表达;SB显著抑制MCP-1及ICAM-1的表达;SI抑制P38MAPK的活化并减少MCP-1及ICAM-1的表达. 结论 P38MAPK是MCP-1及ICAM-1的上游信号分子,表明P38MAPK可能是DN发生的始动信号之一.SI可能通过抑制P38MAPK磷酸化而抑制MCP-1及ICAM-1的表达,有防治DN的作用.
关键词： P38促分裂原活化蛋白激酶 单核细胞趋化蛋白 细胞间黏附因子 辛伐他汀 -
普伐他汀对高糖培养肾小球系膜细胞P38促分裂原活化蛋白激酶信号通路的影响
目的 探讨普伐他汀对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞(MC)p38促分裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号传导通路的影响.方法 大鼠MC分别培养在正常糖5.5 mmol·L-1(正常对照组), 高糖25 mmol·L-1(高糖组),葡萄糖25 mmol·L-1+p38MAPK特异性抑制剂SB203580(SB) 10 μmol·L-1,及葡萄糖25 mmol·L-1+普伐他汀(PV) 100 μmol·L-1.ELISA法检测培养上清液Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)、纤连蛋白(FN)含量;Phospho-ELISA法检测胞浆及胞核内p38MAPK和磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)蛋白的表达;以及RT-PCR 法检测p38MAPK mRNA的表达.结果 与正常对照组比较,高糖组MC合成基质蛋白Col-Ⅳ, FN增多;胞浆及胞核内p-p38MAPK的表达增加.SB或PV干预能部分或完全逆转这一变化.与高糖组比较,SB干预后,上清液中Col-Ⅳ含量下降[48 h:(21.19±3.21) vs (16.75±1.93)μg·L-1, n=6, P<0.05]、FN减少[48 h:(13.47±1.27) vs (12.01±0.85)μg·L-1, n=6, P<0.05];胞浆及胞核内p-p38MAPK表达显著下调.PV干预后,上清液中Col-Ⅳ含量下降[48 h:(21.19±3.21) vs (14.97±3.04)μg·L-1, n=6, P<0.05]、FN减少[48 h:(13.57±1.27) vs (11.99±0.98)μg·L-1, n=6, P<0.05];胞核内p-p38MAPK表达显著下调,但对胞浆内p-p38MAPK的表达则无显著影响.各组总p38MAPK蛋白水平及p38MAPK mRNA表达则没有明显改变.结论 PV能够显著下调高糖培养的 MC胞核内p38MAPK信号传导通路的活化,进而减少胞外基质合成,达到对糖尿病肾病的治疗作用.
关键词： 普伐他汀 糖尿病性肾病 肾小球系膜细胞 P38促分裂原活化蛋白激酶 -
绞股蓝总皂苷对光老化人皮肤细胞p38MAPK和MMP-1的影响
目的:研究绞股蓝总皂苷对光老化人皮肤p38促分裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)和基质金属蛋白酶-1(MMP-1)的影响.方法:制备空白大鼠血清和绞股蓝含药血清,将人角质形成细胞(HaCaT)分为4组:空白对照组(A)、UVB模型组(B)、空白血清组(C)和含药血清组(D);将成纤维细胞(HSF)分为6组:空白对照组(Ⅰ)、UVA模型组(Ⅱ)、HaCaT培养上清液A组(Ⅲ)、HaCaT培养上清液B组(Ⅳ)、HaCaT培养上清液C组(Ⅴ)、HaCaT培养上清液D组(Ⅵ).对HaCaT细胞B、C、D组和HSF细胞Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组分别用UVB和UVA照射,制备光老化细胞模型.将4组HaCaT细胞培养上清液分别加入HSF细胞的Ⅲ～Ⅵ组.采用RT-PCR和Western blotting方法检测Ⅰ～Ⅵ组细胞p38MAPK和MMP-1mRNA和蛋白的表达水平.结果:与Ⅰ组比较,Ⅱ组细胞p38MAPK和MMP-1 mRNA和蛋白的表达水平显著上调(P＜0 01);与Ⅱ组比较,Ⅳ组p38MAPK和MMP-1mRNA和蛋白表达均上调(P＜0.01),而Ⅲ组变化不显著;与Ⅳ组比较,Ⅵ组p38MAPK和MMP-1 mRNA和蛋白表达均显著下调(P＜0.01),而Ⅴ组变化不显著.结论:光老化HaCaT细胞分泌细胞因子促进光老化HSF细胞p38MAPK和MMP-1 mRNA和蛋白的表达.绞股蓝总皂苷对光老化HaCaT细胞培养上清液作用的光老化HSF细胞中MAPK信号转导通路中相关基因和蛋白的表达具有抑制作用.
关键词： 绞股蓝总皂苷 光老化 皮肤细胞 P38促分裂原活化蛋白激酶 基质金属蛋白酶-1 -
绞股蓝总皂苷对光老化HaCaT细胞中p38MAPK蛋白和c-Jun mRNA表达的抑制作用
目的:观察绞股蓝总皂苷含药血清对光老化HaCaT细胞p38促分裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)蛋白和Jun基因(c-Jun) mRNA表达的影响,探讨绞股蓝总皂苷含药血清抗皮肤光老化的作用机制.方法:采用中波紫外线(UVB)照射建立光老化HaCaT细胞模型,加低、中、高剂量绞股蓝总皂苷含药血清于光老化HaCaT细胞模型培养液中培养,并设空白对照组、空白血清组和UVB模型组.采用Western blotting和RTPCR方法检测各组细胞p38MAPK蛋白和c-Jun mRNA的表达水平.结果:与空白对照组比较,UVB模型组细胞p38MAPK蛋白和c-Jun mRNA表达显著上调,差异有统计学意义(P＜0.01)；与UVB模型组比较,低、中和高剂量含药血清组细胞p38MAPK蛋白和c-Jun mRNA表达显著下调,差异有统计学意义(P＜0.01)；与空白血清组比较,低、中和高剂量含药血清组细胞p38MAPK蛋白和c-Jun mRNA表达下降(P＜0.01).结论:绞股蓝总皂苷含药血清可能通过抑制p38MAPK蛋白和c-Jun mRNA表达抑制皮肤光老化.
-
匹格列酮对肾小球系膜细胞的保护机制
目的：研究匹格列酮对各种应激条件下肾小球系膜细胞的保护作用，进一步探讨匹格列酮保护糖尿病肾病的作用机制。方法分别以高葡萄糖、糖基化终产物和过氧化氢孵育大鼠肾小球系膜细胞（mesangial cells， MCs ）；以p38促分裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）信号通路特异性抑制剂 SB203580和匹格列酮（pioglitazone， PO ）分别预处理RMCs，再给予上述3种刺激因素孵育RMCs，观察RMCs 中磷酸化p38MAPK、核因子（NF-κB）和转化生长因子（TGF-β）蛋白表达。结果与各刺激组相比，匹格列酮预处理的肾小球系膜细胞p38MAPK、NF-κB和TGF-β蛋白表达水平降低。结论匹格列酮对肾小球系膜细胞具有一定的保护作用，保护机制可能与其抑制p38MAPK信号通路激活及减少 NF-κB 、TGF-β的表达相关。
关键词： P38促分裂原活化蛋白激酶 NF-κB TGF-β 匹格列酮 肾小球系膜细胞 -
抗β2GPⅠ抗体/β2GPⅠ与PLT活化
近年来,血栓性疾病发病率不断上升,严重威胁人类健康和生命,血小板(PLT)活化是血栓形成的始动因素,在血栓形成中起到关键作用.研究发现抗β2糖蛋白Ⅰ(β2GP Ⅰ)抗体出现在多种血栓性疾病中,常见于抗磷脂综合征,能使体内PLT活化并和纤维蛋白结合,引起PLT聚集,与血栓形成关系非常密切.抗β2GP Ⅰ抗体如何诱导血栓形成还不明确,其中PLT的活化聚集是整体上的病理机制,研究抗原抗体复合物对PLT活化的过程,对血栓形成机制和血栓性疾病预防和治疗具有重要意义.
-
p38促分裂原活化蛋白激酶在神经病理性疼痛中的作用
促分裂原活化蛋白激酶(MAPKs)家族是细胞内重要的信号传导系统，并在神经可塑性以及炎症反应方面发挥重要作用。MAPKs家族包括3个家庭成员：细胞外信号调节激酶、c-Jun氨基末端激酶和p38MAPK。p38 MAPK信号通路是MAPKs家族信号通路的枢纽，诱导多种与神经性病理疼痛相关的细胞内反应。p38 MAPK可以作为神经元和胶质细胞中研究疼痛的靶标，为疼痛性疾病的治疗提供一个潜在治疗方案。
关键词： P38促分裂原活化蛋白激酶 疼痛 敏感性 小胶质细胞 -
实验性肺血栓栓塞症大鼠肺炎症反应的变化及阿托伐他汀的干预作用
目的 探讨实验性肺血栓栓塞症大鼠肺炎症反应的变化及阿托伐他汀的干预作用.方法 42只大鼠随机分为假手术组(Sham组)、肺栓塞模型组(PTE组)、阿托伐他汀干预组(Statin组).采用自体血栓回输法建立肺栓塞大鼠动物模型,取动脉血行血气分析,取肺组织行常规病理检查,免疫组化测定P38促分裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)及TNF-α在肺组织中的表达.结果 PTE组明显缺氧,且肺组织炎症损伤较Statin组明显.PTE组肺组织P38MAPK、TNF-α表达较Sham组表达增强,Statin组与PTE组相比表达减弱,差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论 急性肺动脉栓塞可引起P38MAPK信号通路参与的炎症反应的激活,阿托伐他汀可以从某种程度上抑制P38MAPK、TNF-α的表达,从而减轻炎症反应.
关键词： 肺血栓栓塞症 P38促分裂原活化蛋白激酶 肿瘤坏死因子-α 阿托伐他汀 大鼠 -
头针对急性脑缺血再灌注大鼠P38促分裂原活化蛋白激酶表达的影响
目的 观察头针(电针)对急性脑缺血大鼠P38促分裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)表达的影响.方法 采用大脑中动脉线栓法制备脑缺血再灌注模型,头针组予电针治疗,各组分别于6h、24h、48h、72h进行大鼠神经功能缺损评分(NSS),Western bloting检测脑组织样本P38MAPK蛋白表达,Real-time PCR检测P38MAPK mRNA.结果 脑缺血60min再灌流24h、48h、72h,头针组NSS显著低于模型组(P<0.05或P<0.01).脑缺血60min再灌流6h、24h、48h和72h,P38MAPK在梗死侧脑组织中均有表达,且在24 h达到高峰,但头针组的表达明显低于模型组(P<0.05).结论 头针抗脑缺血的作用机制可能是通过抑制P38MAPK的表达,减轻脑缺血再灌注损伤,实现脑组织的保护作用.
关键词： 头针 脑缺血再灌注 P38促分裂原活化蛋白激酶
