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血浆microRNA-1与肌钙蛋白T在急性心肌梗死早期诊断中的比较
目的 评估血浆microRNA-1(miR-1)在早期诊断急性心肌梗死(AMI,acute myocardial infarction)中的价值,并与肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cTnT)进行比较分析.方法 收集2011年5月至2012年5月间的56名AMI患者和28名无AMI的对照者的血浆标本,通过实时定量逆转录聚合酶链反应(quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测血浆中miR-1的含量,同时通过电化学发光法检测血浆cTnT的变化.对所得数据应用SPSS 16.0软件包进行分析.AMI与对照组病例的临床特征数据的比较采用t检验或Fisher's检验.MicroRNA在AMI和对照病例间表达的差异运用Mann-Whitney检验.AMI病例不同时间点间血浆microRNA表达差异的两两比较采用Wilcoxon检验.受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)用于分析AMI病例与对照组间的差异.结果 AMI患者血浆中miR-1的含量较对照组明显升高(P＜0.01),AMI患者14 d时miR-1的含量已回落到基线水平.血浆miR-1值的变化与研究对象的自身特征无相关性(P＞0.05).同时,通过ROC曲线分析,笔者发现miR-1具有早期诊断AMI的特异性和敏感性,但并不优于hs-cTnT.结论 血浆miR-1在早期诊断AMI方面具有明确的心肌特异性和敏感性,可作为AMI诊断的生物学标志物,但其诊断价值并不优于cTnT.
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microRNA-1对心肌缺氧复氧中细胞凋亡的影响
目的 明确心肌缺氧复氧(H/R)时miR-1的表达变化及其对细胞凋亡的影响.方法 建立乳大鼠心肌细胞H/R模型,TUNEL检测细胞凋亡、Western-Blot检测凋亡蛋白表达和实时荧光定量PCR检测miR-1表达.重组miR-1慢病毒感染乳大鼠心肌细胞,Western-Blot检测各组相关凋亡蛋白的表达.重组miR-1慢病毒感染乳大鼠心肌细胞后H/R处理,通过TUNEL检测心肌细胞凋亡,软件分析和计算心肌细胞凋亡率.结果 心肌细胞H/R后,细胞凋亡率明显增加,同时促凋亡蛋白(Bax和Caspase-3)表达水平增加和抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平下降.在成功构建心肌细胞缺氧复氧细胞模型后,检测到心肌细胞miR-1表达水平下降.与对照组相比,感染LV-mo-miR-1组促凋亡蛋白(Bax和Caspase-3)明显增加和抗凋亡蛋白Bcl-2降低,而感染LV-mo-miR-1 sponge凋亡蛋白的结果相反.相对于感染LV-mo-miR-1组和缺氧复氧组,感染LV-mo-miR-l病毒后缺氧4小时复氧12小时,细胞凋亡率进一步增加.结论 miR-1具有促进细胞凋亡的作用.miR-1表达下降可能是心肌细胞缺氧复氧时维持稳态的一种自我调节机制.
关键词： microRNA-1 心肌缺氧复氧 细胞凋亡 -
急性心肌梗死患者血浆中microRNA-1、尿路上皮癌相关1基因的表达及临床意义
目的 检测急性心肌梗死患者血浆microRNA-1(miR-1)、尿路上皮癌相关1基因(UCA1)的表达水平并探讨其临床意义.方法 选择2015年3月～2016年12月于青岛大学附属心血管病医院心内科收治的急性心肌梗死患者67例纳入病例组,男性39例,女性28例,年龄39～76岁,平均(56.3±8.1)岁.并于同期随机选取50例健康体检者为对照组,男性29例,女性21例,年龄42～75岁,平均(54.6±9.2)岁.留取对照组入组后,急性心肌梗死患者入院后不同时段(入院后2 h、8 h、12 h、24 h、7 d、14 d)的血浆标本,采用实时荧光定量PCR检测miR-1、UCA1的表达.结果 病例组患者血浆miR-1的水平高于对照组,血浆UCA1的水平低于对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05).急性心肌梗死患者入院后,血浆miR-1水平先呈上升趋势,在24 h达到高值,随后呈逐渐下降趋势,并且入院后2 h、14 d的血浆miR-1水平均高于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05);血浆UCA1水平先呈逐渐下降趋势,在24 h降到低值,随后呈逐渐上升趋势,且入院后2 h、14 d时仍低于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05).急性心肌梗死患者血浆miR-1与UCA1水平呈负相关关系(r=-0.497,P<0.05);入院后2 h、8 h、12 h、24 h、7 d、14 d,血浆miR-1与UCA1水平均呈负相关(r=-0.498、-0.492、-0.531、-0.596、-0.422、-0.495,P均<0.05).结论 MicroRNA-1、UCA1在急性心肌梗死患者血浆中异常表达,并且二者呈负相关关系,联合检测可能作为早期辅助诊断急性心肌梗死的重要标志物.
关键词： 急性心肌梗死 microRNA-1 尿路上皮癌相关1基因 相关性 标志物 -
心复康丸对压力超负荷大鼠心肌组织microRNA-1影响的实验研究
[目的]观察心复康丸对压力超负荷大鼠所致的心肌肥厚和心室重塑的干预作用，并研究其作用机制是否与影响心肌组织microRNA-1（miR-1）的表达有关。[方法] Wistar雄性大鼠采用腹主动脉缩窄的方法复制心肌肥厚和心室重塑的模型。术后4周，将模型动物随机分为模型组（M组）、依那普利组（E组）、心复康丸低剂量组（L组）、心复康丸高剂量组（H组）。假手术组（S组）不结扎腹主动脉，其他处理相同。分别于术后8、12周，Masson染色观察心肌组织的胶原容积分数。免疫组织化学法检测心肌组织中钙离子ATP酶（SERCA2）、Fibullin-2蛋白表达的变化。实时聚合酶链反应（PCR）法检测心肌组织miR-1表达的改变。[结果]术后8、12周各时间点，与M组比较，E组和H组大鼠心肌纤维化面积显著减少（P﹤0.01）。术后8、12周各时间点，与M组比较，H组心肌组织Fibullin-2显著降低（P﹤0.01）， SERCA2显著升高（P﹤0.01），miR-1表达显著升高（P﹤0.01），L组仅在8周时心肌组织Fibullin-2的表达有明显改变（P﹤0.05）。[结论]心复康丸可能通过促进miR-1表达，调控其靶因子Fibullin-2蛋白，抑制心肌纤维化，进而在抑制心肌肥厚和心室重构的过程中发挥作用。
关键词： 心复康丸 microRNA-1 压力超负荷 心肌肥厚 -
microRNA-1在低切应力诱导血管平滑肌细胞增殖中的作用
[目的]研究microRNA-1 (miR-1)参与切应力条件下ECs (endothelial ceils,ECs)对VSMCs(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖活性调控的力学生物学反应机理,将有利于进一步探索动脉粥样硬化等心血管疾病的发病机制.[方法]应用细胞联合培养平行平板流动腔系统对与VSMCs联合培养的ECs施加15 dyn/cm2的正常切应力(normal shear stress,NSS)和5 dyn/cm2的低切应力(low shear stress,LowSS),加载时间为12 h;Western blotting检测联合培养VSMCs的细胞核增殖抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达变化;实时荧光定量PCR检测联合培养VSMCs的miR-1表达变化;通过TargetScan、miRWalk等网站预测miR-1的目标蛋白;Western blotting检测联合培养VSMCs的miR-1靶蛋白锌指转录因子4(kruppel-like factor4,Klf4)的表达;通过转染技术,上调和抑制VSMCs的miR-1表达,Western blotting技术检测靶蛋白Klf4和PCNA的表达变化,以此验证miR-1对Klf4的负调控作用.[结果]与NSS相比,LowSS促进联合培养VSMCs的PCNA表达并显著抑制miR-1表达;TargetScan、miRWalk等网站预测miR-l的下游靶蛋白为Klf4;与NSS相比,LowSS明显上调联合培养VSMCs的miR-1靶蛋白Klf4的表达;静态条件下上调VSMCs的miR-1表达,靶蛋白Klf4和PCNA表达均显著降低,抑制VSMCs的miR-1表达,靶蛋白Klf4和PCNA表达均明显升高.[结论]LowSS通过联合培养VSMCs的miR-1及靶蛋白Klf4,促进VSMCs的增殖.
关键词： 低切应力 血管平滑肌细胞 microRNA-1 锌指转录因子4 增殖 -
microRNA－1与microRNA－126在支气管哮喘急性发作期患儿外周血中的表达及诊断价值
目的：：探讨microRNA－1与microRNA－126在支气管哮喘急性发作期患儿外周血中的表达及其与患儿发病的相关性。方法：临床纳入2013年1月至2015年1月我院收治的支气管哮喘急性发作期患儿48例,设为哮喘组,同时纳入同时期内52例健康体检儿童作为对照组。分别采集两组外周血,并进行microRNA－1与microRNA－126水平检测,同时检测IL－4、INF－γ水平。结果：哮喘组患儿IL－4、INF－γ水平分别为(109.65±74.31)ng/L、(70.47±11.96)ng/L,对照组患儿IL－4、INF－γ水平分别为(78.47±75.78)ng/L、(77.05±17.21)ng/L,差异有显著性(P<0.05)；哮喘组患儿microRNA－1与microR-NA－126水平分别为(2.15±0.97)、(7.34±1.26),对照组患儿microRNA－1与microRNA－126水平分别为(5.81±1.29)、(3.66±0.91),差异有显著性(P<0.05)；microRNA－126、microRNA－1在支气管哮喘急性发作期患儿外周血中的灵敏度与在对照组的特异度分别为85.42％、79.17％、78.85％、73.08％；ROC曲线下面积分别为0.917、0.865。结论：支气管哮喘急性发作期患儿外周血中 microRNA－126水平升高, mi-croRNA－1水平降低,两者可以作为临床诊断儿童支气管哮喘急性发作的客观指标。
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microRNA-1转基因小鼠心肌组织中胶原表达水平的研究
目的 研究microRNA-1(miR-1)转基因小鼠心肌组织中各型胶原的表达水平.方法 取4月龄的心脏特异性miR-1过表达的转基因小鼠(TG)和野生型小鼠(WT)各20只,应用小鼠心动超声检测小鼠心功能,应用real time-PCR技术检测心肌组织中COL1A1等十一种胶原的mRNA表达水平.结果 4月龄时TG小鼠心肌组织中miR-1的表达水平显著增加,心脏超声结果显示TG组的小鼠心脏射血分数(ejection fraction,EF)和左室短轴缩短分数(left ventricular shortening fraction,FS)均显著降低,左室收缩末内径(left ventricular end systolic diameter,LVIDs)和左室收缩末期容积(left ventricular end systolicvolume,LV Vols)显著增加,收缩末期左室后壁厚度(left ventricular posterior wall thickness at end systole,LVPWs)显著减少.在所检测的十一种胶原中COL1A1和COL6A3 mRNA表达水平显著增加.结论 miR-1过表达转基因小鼠心肌组织中胶原水平显著增加.
关键词： microRNA-1 胶原 心功能 -
急性心肌梗死后血浆中升高的microRNA-1与QT离散度的相关性研究
目的 研究急性心肌梗死后血浆中升高的microRNA-1(miR-1)与QT离散度(QTd)的相关性及临床意义.方法 选取急性心肌梗死(AMI)患者53例[无室性心律失常(VA)者40例、有VA者13例],健康对照人群49例,对血浆中miR-1的表达含量进行绝对定量,并测定心电图QT间期计算出QTd及校正的QTcd,再进行相关性分析.结果 AMI患者血浆中miR-1的实际表达量和QTd及QTcd值均高于正常对照人群,而且有VA者的QTd及QTcd值均大于无VA者,QTd的延长与VA的发生密切相关,血浆中的miR-1表达水平与QTd呈正相关性.结论 AMI患者血浆中miR-1与QTd具有良好的正相关性,二者联合对AMI患者预警恶性心律失常的发生、近期预后评估具有重要的临床参考价值.
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支气管哮喘急性发作期患儿外周血microRNA-126和microRNA-1表达的意义
目的 探讨microRNA-126和microRNA-1在支气管哮喘急性发作期患儿外周血中的表达及其与儿童支气管哮喘发病的关系.方法 选取2012年10月至2013年12月在广东医学院附属厚街医院门诊及住院部就诊的48例支气管哮喘急性发作期患儿作为研究对象(哮喘组),同期选取52例体检健康的儿童作为对照(健康对照组),留取外周血标本,通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测血浆microRNA-126、microRNA-1的表达水平,酶联免疫吸附双抗夹心法(ELISA)检测白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)水平,受试者工作特征(ROC)曲线评价microRNA-126、microRNA-1对儿童支气管哮喘诊断的预测价值.结果 哮喘组microRNA-126表达相对含量[7.36 (0.96 ～41.21)]显著高于健康对照组[3.68 (0.75～38.91)](Z=3.135,P =0.038);哮喘组microRNA-1表达相对含量[2.17 (0.18～26.97)]显著低于健康对照组[5.83 (0.82 ～39.62)] (Z=2.156,P=0.045).哮喘组IL-4水平高于健康对照组[(109.98 ±74.58) ng/L比(78.50±75.82) ng/L,t=2.122,P=0.036],而IFN-γ水平低于健康对照组[(70.49±12.03) ng/L比(77.03±17.16) ng/L,t=2.270,P=0.025].MicroRNA-126、microRNA-1在急性发作期哮喘患儿血浆中的灵敏度和在健康对照组的特异度分别为85.42％(41/48例)、79.17％(38/48例)和78.85％(41/52例)、73.08％(38/52例),其中ROC曲线下面积分别为0.919(95％ CI0.866 ～0.973),0.867(95％ CI0.796 ～0.939).结论 MicroRNA-126在支气管哮喘急性发作期患儿血浆中表达升高,microRNA-1表达降低,提示二者可作为儿童支气管哮喘诊断的检测指标之一.
关键词： MicroRNA-126 microRNA-1 支气管哮喘 儿童 -
降钙素基因相关肽通过调节microRNA-1和microRNA-133a的表达抑制异丙肾上腺素诱导的心肌细胞凋亡
目的:探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对心肌细胞凋亡的抑制作用及其潜在的机制.方法:异丙肾上腺素(10-5 mol/L)孵育48 h以诱导体外培养的大鼠心肌细胞凋亡,不同浓度的CGRP(10ˉ8或10-7mol/L)在异丙肾上腺素孵育前1h给药.药物处理结束后,检测心肌细胞凋亡率和细胞内活性氧的水平以及microRNA-1和microRNA-133a表达的变化.结果:异丙肾上腺素能显著增加心肌细胞的凋亡和细胞内活性氧的产生,同时伴随着microRNA-1表达的上调和microRNA-133a表达的下调,预先给予CGRP可显著抑制异丙肾上腺素的上述效应,但CGRP的有益效应可被CGRP受体拮抗剂所取消.结论:CGRP可抑制异丙肾上腺素诱导的心肌细胞凋亡,其机制可能与抑制活性氧的产生进而调节microRNA-1和microRNA-133a的表达有关.
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microRNA-1抑制心肌特异性Dicer基因缺失小鼠心脏病理性重构
目的 探讨microRNA-1(miR-1)对他莫昔芬(tamoxifen,TMX)诱导的心肌特异性Dicer 基因缺失小鼠心脏结构重构及心功能的影响.方法 采用Myh6-Cre/Loxp重组系统,通过Dicerloxp/1oxp小鼠和Myh6-creERT小鼠杂交,获得Myh6-creERT/Dicerloxp/loxp小鼠.将18只8周龄雄性Myh6-creERT/Dicerloxp/loxp小鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、miR-1治疗组.采用腹腔注射20 mg/mL TMX溶液(0.1 mL),连续注射5d,建立心肌特异性Dicer基因缺失心力衰竭小鼠模型,对照组腹腔注射玉米油;模型建立后,miR-1治疗组通过尾静脉注射miR-1类似物(miR-1 mimic) 10 nmol/只,对照组给予同等剂量生理盐水,模型组给予miRNA阴性对照试剂,2次/周.1周后,经胸二维超声心动图检测各组小鼠舒张末期左室内径(LVIDd)、收缩末期左室内径(LVIDs)、舒张末期左室容积(EDV)、收缩末期左室容积(ESV)、射血分数(EF)及左室短轴缩短率(FS),然后收集心肌标本,通过HE染色、Masson三色染色及天狼猩红染色观察小鼠心肌结构重构程度;利用原位缺口末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end labeling,TUNEL)免疫荧光染色检测心肌组织细胞凋亡情况;通过细胞增殖指标Ki67免疫组化染色评估细胞增殖水平.结果 建模后1周,模型组小鼠心功能明显下降,LVIDs及ESV均高于对照组(P＜0.05),EF及FS则显著低于对照组(P＜0.05),miR-1治疗后上述指标均较模型组明显改善(P＜0.05).组织病理学检测结果显示,与对照组相比,模型组小鼠心肌细胞排列紊乱,细胞肥大,炎症细胞浸润明显,心肌纤维化显著,而治疗组小鼠心肌细胞形态正常,无明显肥大和炎性浸润,未见明显的间质纤维化;TUNEL免疫荧光染色及Ki67免疫组化染色结果显示,miR-1治疗组小鼠较模型组心肌组织凋亡比例增加(P＜0.05),且存在较明显的细胞增殖(P＜0.05).结论 miR-1可抑制TMX诱导的心肌特异性Dicer基因缺失心力衰竭模型中心肌细胞的固有改变和间质的改变,抑制心脏结构重构,维持心功能.
关键词： Dicer 心力衰竭 microRNA-1 心脏重构 -
MicroRNA-1对肝癌细胞BAG4表达的影响
目的 观察microRNA-1 (miR-1)对肝癌细胞系Hep3B死亡结构域沉默子(BAG4)的表达及细胞凋亡的影响.方法 Western blot检测肝癌组织中BAG4蛋白表达情况;将过表达miR-1的质粒转染肝癌细胞Hep3B,分别用RT-qPCR及Western blot检测BAG4 mRNA和蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞凋亡;生物信息学软件分析miR-1和BAG4 3' UTR作用关系.结果 BAG4蛋白在肝癌组织中的表达明显高于癌旁组织;Hep3B转染miR-1过表达质粒后,相较于阴性对照(NC)组,BAG4mRNA和蛋白水平的表达均有所降低;早期凋亡率明显增高.生物信息学分析提示BAG4是miR-1潜在靶基因.结论 miR-1可以诱导肝癌细胞Hep3B凋亡,其作用可能和抑制BAG4表达有关.
关键词： 肝癌 microRNA-1 死亡结构域沉默子 凋亡 -
MicroRNA-1与心律失常的关系研究进展
MicroRNA是一类单链非编码小分子RNA,其作用是抑制靶信使的转录和翻译,其中microRNA-1是其家族中的一员,主要在心脏中表达.在心肌细胞的多种病理状态下,microRNA-1可以通过转录调节各种离子通道和心肌电活动来参与心律失常的发生.现就microRNA-1与多种心律失常的关系进行综述.
关键词： 心律失常 microRNA-1 离子通道 心肌电活动 -
支气管哮喘急性发作期患儿外周血microRNA-126和microRNA-1表达的意义
目的：探讨分析支气管哮喘患儿急性发作期其外周血microRNA-126和microRNA-1的表达水平，并研究其与支气管哮喘发生发展的关系。方法选取支气管哮喘急性发作期患儿51例为研究组，同期经我院体检健康的儿童43例为对照组。取外周静脉血， microRNA-126、microRNA-1的表达水平采用实时荧光定量PCR（RT-PCR）法检测，同时白细胞介素12（IL-12）和白细胞介素25（IL-25）水平采用酶联免疫吸附双抗夹心法（ELISA）检测。分析比较2组受试对象各检测指标之间的差异。结果研究组microRNA-1表达水平及IL-12水平显著低于对照组（P<0.05），但研究组microRNA-126表达水平及IL-25水平显著高于对照组（P<0.05）。结论microRNA-126、microRNA-1可通过差异性表达调节细胞因子水平，并进一步调控辅助性T淋巴细胞，参与了支气管哮喘的发生发展过程。
关键词： 支气管哮喘 MicroRNA-126 microRNA-1 细胞因子
