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FGF23、MEPE和sFRP4在肿瘤性骨软化症发病机制中的作用
目的 探讨成纤维细胞生长因子-23(FGF-23)、细胞外基质磷酸糖蛋白(MEPE)和分泌型卷曲相关蛋白(sFRP4)在肿瘤性骨软化症(TIO)发病机制中的作用.方法 TIO肿瘤8例(T1-T8),其他间叶肿瘤5例(C1-C5),低血磷骨软化症病人行股骨手术,病理为凝血坏死组织1例(P1),正常人骨骼、肌肉组织各2例(B1、B2、M1和M2).RT-PCR检测组织中FGF23、MEPE、sFRP4 mRNA的表达,Western blot检测TIO肿瘤FGF23蛋白的表达.TIO4例(T1、T3、T4和T7)及P1在手术前后分别取血测定血清磷和FGF23(ELISA)水平.结果 TIO肿瘤有数量不等的FGF23和MEPE的mRNA表达,部分肿瘤表达sFRP4的mRNA.7/8例TIO肿瘤有不同强度FGF23蛋白表达.TIO术前血FGF23升高,术后2～24 h降至正常;血磷3～10 d缓慢升至正常,P1病人术后血FGF23无变化,血磷未上升.FGF23与MEPE mRNA正相关(r=0.884,P<0.05),FGF23 mRNA与蛋白表达之间成正相关关系(r=0.921,P<0.05).结论 FGF23是TIO发病的主要原因,MEPE在TIO肿瘤发病中起到一定作用,sFRP4的作用尚不明确.
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细胞外基质磷酸糖蛋白功能研究进展
细胞外基质磷酸糖蛋白 (matrix extracellular phosphoglycoprotein,MEPE)是在瘤源性骨软化病 (tumor-induced osteomalacia,TIO)中发现的高表达蛋白.本文从结构特点、相关同源蛋白以及生物学功能等方面对MEPE蛋白进行了论述,着重介绍了MEPE功能的相关研究进展,包括对磷酸盐代谢调节、骨骼和牙本质发育形成以及对细胞辐射敏感性的影响等.通过这些阐述展现了MEPE蛋白功能的多重性与复杂性,以及对MEPE蛋白全面认识的必要性.
关键词： 细胞外基质磷酸糖蛋白 磷酸盐代谢调节 骨形成 DNA损伤 -
FGF23、MEPE和sFRP4在肿瘤性骨软化症发病机制中的作用
肿瘤性骨软化症(TIO)是由于肿瘤引起肾脏排磷增加,所造成的获得性低血磷骨软化-症.近来研究显示,肿瘤分泌的体液因子(如调磷因子)可以影响体内磷的平衡,而成纤维细胞牛长因子-23(FGF-23)、细胞外基质磷酸糖蛋白(MEPE)和分泌型卷曲相关蛋白(sFRP)4可能就是调磷因子.它们通过抑制肾小管上皮细胞磷的回吸收,抑制肾脏1,α羟化酶的活性,从而调节血磷,使患者血磷降低,尿磷增多,血1,25(OH)2D3水平降低或正常,从而参与TIO的发生.
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细胞外基质磷酸糖蛋白在牙齿组织中的表达
目的 细胞外基质磷酸糖蛋白(matrix extracellular phosphoglycoprotein,MEPE)是新近在骨和牙齿组织中发现的蛋白.检测MEPE在牙齿组织中的表达以及随着组织分化MEPE表达的变化.方法 通过免疫组化染色对MEPE蛋白在人牙胚中的表达进行初步定位.分别分离培养人的牙髓细胞和成釉器上皮细胞,应用半定量PCR技术探讨MEPE在这两种细胞中的时序表达变化.结果 MEPE在成釉细胞、牙髓和成牙本质细胞中均有表达.MEPE的表达随着牙髓细胞的分化而逐渐下调.随着成釉器上皮细胞培养代次的增加,MEPE表达逐渐下降.结论 MEPE的下调提示MEPE可能在牙齿硬组织的形成过程中起到调控作用.
关键词： 细胞外基质磷酸糖蛋白 牙髓细胞 成釉器上皮细胞 -
低浓度β-甘油磷酸钠培养牙髓干细胞向成牙本质细胞分化及相关因子的表达
背景：以往研究用来诱导成牙本质细胞分化的培养基普遍借鉴成骨细胞的诱导浓度，其他浓度的诱导情况尚无相关研究。目的：观察在低浓度β-甘油磷酸钠条件培养下，牙髓干细胞向成牙本质细胞分化过程中，牙本质基质蛋白1、牙本质涎蛋白和细胞外基质磷酸糖蛋白的表达情况。方法：分离培养人牙髓干细胞，用不同浓度的诱导液诱导牙髓干细胞分别向脂肪细胞，成骨细胞分化，证实其多向分化能力。用5 mmol/Lβ-甘油磷酸钠诱导培养牙髓干细胞向牙本质细胞分化，分别在培养第7，14，21，28天提取各组细胞RNA，反转录PCR检测牙本质基质蛋白1、牙本质涎蛋白和细胞外基质磷酸糖蛋白的表达情况；诱导牙髓干细胞向成牙本质细胞分化形成的矿化结节用Alizarin Red S法检测。结果与结论：人牙髓干细胞经过诱导可证实其成功分化为脂肪细胞和成骨细胞；反转录 PCR 结果显示，5 mmol/Lβ-甘油磷酸钠培养牙髓干细胞在培养7，14，21 d，各组细胞牙本质基质蛋白1、牙本质涎蛋白的mRNA表达增加，伴随细胞外基质磷酸糖蛋白表达下调；培养至28 d，行矿化结节检测发现牙髓干细胞向成牙本质细胞成功矿化，可见红染的矿化结节。结果证实，5 mmol/Lβ-甘油磷酸钠诱导培养的牙髓干细胞可成功分化为成牙本质细胞，并下调细胞外基质磷酸糖蛋白mRNA的表达，同时上调牙本质基质蛋白1及牙本质涎蛋白mRNA的表达。
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稳定转染细胞外基质磷酸糖蛋白细胞株构建及附着力改变研究
目的:检测细胞外基质磷酸糖蛋白对MRC5细胞附着能力的影响.方法:构建含细胞外基质磷酸糖蛋白基因及细胞周期检查点蛋白的质粒,稳定转染MRC5细胞,检测其附着能力的改变.结果:稳定转染细胞外基质磷酸糖蛋白与细胞周期检查点蛋白的MRC5细胞株的附着能力明显高于其他细胞株.结论:细胞外基质磷酸糖蛋白可以促进细胞附着.
关键词： 细胞外基质磷酸糖蛋白 稳定转染 -
细胞外基质磷酸糖蛋白对细胞增殖能力的影响
目的:探讨细胞外基质磷酸糖蛋白对细胞增殖能力的影响.方法:构建含细胞外基质磷酸糖蛋白基因的质粒,稳定转染293T细胞,通过激光共聚焦显微镜与RT-PCR检测转染细胞株hMEPE蛋白表达结果.通过MTT实验检测细胞增殖与迁移能力.通过RT-PCR检测p53基因的表达水平的差异,进一步探讨肿瘤细胞增殖的分子机制.结果:与转染空载体细胞相比,稳定转染hmepe细胞株增殖能力有明显提高,RT-PCR结果显示p53基因在转染目的基因细胞中较转染空载体细胞其表达增高.结论:细胞外基质磷酸糖蛋白可以提高细胞增殖能力.
关键词： 细胞外基质磷酸糖蛋白 增殖 -
细胞外基质磷酸糖蛋白对体外细胞生物学行为的影响
目的:探讨细胞外基质磷酸糖蛋白对体外细胞生物学行为的增殖影响及基因表达.方法:构建含细胞外基质磷酸糖蛋白基因的质粒后稳定转染细胞株,利用RT-PCR检测转染后细胞株hMEPE蛋白表达结果.基于蛋白表达结果基础上通过RT-PCR检测p53基因的表达水平,MTT实验检测细胞增殖水平.结果:RT-PCR结果显示与转染空载体细胞相比p53基因在转染目的基因细胞表达增高.MTT结果有统计学意义(P<0.05),显示转染后的hmepe细胞株较转染空载体细胞相比增殖能力明显提高.结论:细胞外基质磷酸糖蛋可以通过p53信号通路提高细胞增殖能力.
关键词： 细胞外基质磷酸糖蛋白 增殖 -
小整联蛋白结合配体N-连结糖蛋白家族成员在牙发育中的作用
小整联蛋白结合配体N-连结糖蛋白家族是一组主要在牙和骨组织中表达的蛋白质，其基因具有通用的外显子内含子结构，影响细胞的增殖和分化。目前已知其包括骨桥蛋白、骨涎蛋白、牙本质基质蛋白-1、牙本质涎磷蛋白、细胞外基质磷酸糖蛋白和釉蛋白等6个成员，本文就其在牙发育过程中的作用作一综述。
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细胞外基质磷酸糖蛋白及其重要的结构片段
细胞外基质磷酸糖蛋白(MEPE)是一种细胞外基质的非胶原性磷酸化糖蛋白,主要表达于骨组织、牙组织和肾近球小管中,在骨形成矿化以及调节磷吸收方面发挥重要作用.酸性丝氨酸-天冬氨酸-富集细胞外基质磷酸糖蛋白相关性基序与细胞外基质磷酸糖蛋白活性片段/AC-100多肽是MEPE的重要结构域,其生物学功能是近来研究的热点.
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小分子整联蛋白结合配体N-连接糖蛋白家族成员在牙髓干细胞分化过程中的作用
体外诱导牙髓干细胞向成牙本质细胞分化并观察其过程,是目前研究牙髓干细胞分化机制和寻找其分化标志的主要方法.在成牙本质细胞分化和矿化过程中,小分子整联蛋白结合配体N-糖蛋白(SBLING)家族成员发挥着重要作用.下面就SBLING家族成员牙本质涎磷蛋白、牙本质基质蛋白-1和细胞外基质磷酸糖蛋白在牙髓干细胞分化过程中的作用作一综述.
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细胞外基质磷酸糖蛋白在大鼠牙周组织缺损愈合过程中的表达
目的:观察细胞外基质磷酸糖蛋白(matrix extracellular phosphoglycoprotein,MEPE)在大鼠牙周组织缺损愈合过程中的表达,初步探讨MEPE在牙周组织再生中可能发生的作用.方法:24只成年健康雄性Wistar大鼠随机分2组:术后14d组和术后28 d组各12只,行左侧下颌骨开窗术,制备牙周组织缺损模型,HE染色观察牙周组织缺损愈合情况,免疫组织化学染色法观察MEPE在牙周组织缺损愈合过程中各组织的表达.结果:术后14d,术区有部分新生牙槽骨形成,部分牙周纤维附着于根面牙本质上;术后28 d,术区完全被新生牙槽骨覆盖,在新生牙槽骨和牙本质之间可见牙周膜和部分牙骨质生成,牙周膜大部分附着于根面上;牙周组织缺损愈合过程中,MEPE在健康对照侧仅呈弱阳性表达,而在缺损区牙槽骨和牙周膜相关细胞中均呈阳性表达.结论:在牙周组织缺损愈合过程中,细胞外基质磷酸糖蛋白参与牙槽骨以及牙周膜的再生.
关键词： 细胞外基质磷酸糖蛋白 牙周组织 牙周缺损
