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温化蠲痹方对类风湿关节炎患者外周血TNF-α及IL-1β的影响
目的 观察中药温化蠲痹方治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的临床疗效及其减少西药用量及稳定病情作用,初步探讨中药温化蠲痹方治疗RA的机制.方法 100例RA患者随机分为两组:中药温化蠲痹方加西药治疗组(治疗组)50例,对照组50例,其中对照组口服甲氨喋呤(MTX,每周1次,每次7.5 mg),柳氮磺吡啶片(每天3次,每次0.5g),美洛昔康片(莫比可,每天2次,每次7.5 mg).治疗组在口服上述西药的同时,加用温化蠲痹方(每天1剂,分两次口服)治疗,疗程3个月.观察两组临床疗效,治疗前后症状、体征及实验室指标包括外周血肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)及抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP抗体)变化、西药用量和治疗后3个月病情复发情况.结果 治疗组总有效率(88.0%)优于对照组(76.0%,P<0.05);在改善症状体征积分[关节疼痛度(0.61±0.59)分、肿胀度(1.49±1.20)分、压痛度(0.90±0.69)分、活动度(0.68±0.62)分、握力(68.56±6.50)mm Hg、晨僵时间(23.26±9.26)min],与本组治疗前及对照组治疗后比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);治疗组美洛昔康[(108.85±16.13)mg]及MTX[(82.11±11.35)mg]用量、病情复发率显著少于对照组[(189.63±18.44)mg,(94.75±10.23)mg,P<0.05,P<0.01].两组TNF-α、IL-1β、抗CCP抗体、类风湿因子(RF)、血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)、血小板(PLT)、免疫球蛋白(Ig)等指标,与本组治疗前比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),治疗组治疗后上述指标改善优于对照组(P<0.05,P<0.01).结论 中药温化蠲痹方加西药治疗RA的疗效优于单独西药治疗,具有减少西药用量,减少病情复发率,稳定病情作用.温化蠲痹方具有抗炎等免疫调节作用,可能是通过抑制TNF-α、IL-1β等细胞因子而达到治疗RA的作用.
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温化蠲痹方对胶原诱导性关节炎大鼠外周血单核细胞DNA甲基化转移酶表达的影响
目的 观察温化蠲痹方对胶原诱导性关节炎(collagen-inducing arthritis,CIA)大鼠外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs) DNA甲基化转移酶(DNA methyltrsansferases,DNMTs)表达的影响,探讨温化蠲痹方治疗CIA的作用机制.方法 将90只Wistar大鼠随机分为造模组(80只)及正常对照组(10只,简称正常组).造模组在大鼠尾根部注射牛Ⅱ型胶原乳剂制备CIA模型.将造模成功的50只大鼠随机分为模型组、甲氨喋呤组(MTX)、温化蠲痹方低、中、高剂量组(简称中药低、中、高剂量组),每组10只.模型组给予生理盐水灌胃;中药低、中、高剂量组分别给予温化蠲痹方22.9、45.8、68.7 g/(kg·d)灌胃,均每日1次;MTx组按0.78 mg/kg剂量灌胃MTX混悬液,每周1次,连续30日.采用容积法(排水体积)评价足趾肿胀度.给药干预后提取各组大鼠PBMCs,采用实时定量PCR法检测PBMCs DNMTs(DNMT1、DNMT3a及DNMT3b)mRNA表达水平.结果 与正常组比较,模型组大鼠足趾明显肿胀(P＜0.01);与模型组比较,中药低、中、高剂量组及MTX组大鼠足趾肿胀明显减轻(P＜0.01).与本组治疗前比较,中药各剂量组及MTX组大鼠足趾肿胀减轻(P＜0.01).与正常组比较,模型组大鼠PBMCs DNMT1、DNMT3a及DNMT3b表达明显降低(P＜0.01);与模型组比较,中药各剂量组及MTX组DNMT1、DNMT3a及DNMT3b表达水平明显升高(均P＜0.01);中药各剂量组DNMT1、DNMT3a及DNMT3b表达水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 CIA大鼠PBMCs DNMTs表达降低.温化蠲痹方上调CIA大鼠PBMCs DNMTs表达无明显剂量依赖性.通过上调DNMTs表达,调节CIA大鼠甲基化状态可能是其治疗CIA作用机制之一.
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温化蠲痹方对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜基因表达谱的影响
目的 研究中药温化蠲痹方对胶原诱导性关节炎( collagen-induced arthritis,CIA)大鼠滑膜基因表达谱的影响,探讨其治疗CIA的作用机制.方法 选用健康雄性Wistar大鼠40只,采用大鼠尾根部注射牛Ⅱ型胶原乳剂的方法建立CIA模型.选取造模成功的16只大鼠随机分为模型组和中药组,每组8只.中药组给予温化蠲痹方22.9 g/(kg·d)灌胃,模型组以生理盐水灌胃,均每天1次,连续30天.给药结束后,提取两组大鼠滑膜总RNA,运用Illumina基因表达谱芯片分析每个样本基因变化.结果 与模型组比较,温化蠲痹方干预后大鼠滑膜差异表达基因有222条,其中上调基因76条,如防御素3b( RatNP-3b)等；下调基因146条,如血管生成素样蛋白2( Angptl 2)、黏蛋白1(Muc1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)等.差异表达基因主要涉及细胞凋亡、血管生成素、防御素基因、细胞因子、信号转导、癌基因等.结论 中药温化蠲痹方可能通过对多基因表达进行调控,从而发挥多靶点治疗CIA的作用.
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温化蠲痹方对CIA大鼠滑膜Ang-2和ANGPTL2表达的影响
目的 以胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠为研究对象,测定大鼠滑膜血管生成素2(angiopoietin-2,Ang-2)、血管生成素样蛋白2(angiopoietin-like proteins 2,ANGPTL2)表达水平,探讨温化蠲痹方治疗CIA的作用机制.方法 选用Wistar大鼠,随机分为造模组(50只)、正常组(10只),造模组于大鼠尾根部注射牛Ⅱ型胶原(typeⅡcollegan of bovine,BCⅡ)乳剂,建立CIA模型.选取30只造模成功大鼠随机分为温化蠲痹方组、甲氨蝶呤组、模型组.给药30 d后,运用实时real time PCR检测大鼠膝关节滑膜Ang-2mRNA、ANGPTL2mRNA的表达.结果 温化蠲痹方组和甲氨蝶呤组大鼠滑膜Ang-2 mRNA、ANGPTL2 mRNA表达水平均低于模型组(P＜0.05),与甲氨蝶呤组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 温化蠲痹方可有效抑制CIA大鼠滑膜Ang-2mRNA、ANGPTL2mRNA表达,达到抑制血管翳形成而治疗CIA的作用.
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温化蠲痹方对胶原诱导性关节炎大鼠外周血单个核细胞微小RNA-146a表达的影响
目的:研究中药温化蠲痹方对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠外周血单个核细胞(PBMC)微小RNA-146a(miRNA-146a)表达的影响,探讨温化蠲痹方治疗CIA的作用机制.方法:选用健康雌性Wistar大鼠,随机分为造模组、正常对照组(10只,简称正常组),造模组采用牛Ⅱ型胶原乳剂于大鼠尾根部注射,建立CIA模型.再选取造模成功大鼠50只随机分为模型组(10只)、MTX组(10只)、温化蠲痹方低剂量组(n=10,简称中药1组)、温化蠲痹方中剂量组(n=10,简称中药2组)、温化蠲痹方高剂量组(n=10,简称中药3组).中药1、2、3组分别给予温化蠲痹方22.9 g/kg·d、45.8 g/kg·d、68.7 g/kg·d灌胃,模型组灌胃生理盐水,均每天1次,MTX组按0.78 mg/kg剂量灌胃MTX混悬液,每周1次,连续30 d.采用容积法(排水体积)评价足趾肿胀度.给药结束后,提取各组大鼠外周单个核细胞,采用实时定量PCR法检测miRNA-146a表达水平.结果:与正常组比较,模型组大鼠足趾肿胀明显,差异有统计学意义(P＜0.01);与模型组比较,中药1、2、3组和MTX组大鼠足趾肿胀明显减轻,差异有统计学意义(P＜0.01);与MTX组比较,中药1、2、3组大鼠足趾肿胀差异无统计学意义(P＞0.05);与治疗前比较,中药1、2、3组和MTX组大鼠足趾肿胀减轻,差异有统计学意义(P＜0.01).与正常组比较,模型组大鼠PBMC miRNA-146a表达明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01);与模型组比较,中药1、2、3组和MTX组大鼠PBMC miRNA-146a表达均明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05);与MTX比较,中药1、2、3组大鼠PBMC miRNA-146a表达差异无统计学意义(P＞0.05);中药1、2、3组比较,大鼠PBMC miRNA-146a表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论:CIA大鼠PBMC miRNA-146a表达升高.中药温化蠲痹方下调CIA大鼠PBMC miRNA-146a表达无剂量依赖性,其可能通过下调miRNA-146a表达,而调节免疫细胞分化、信号转导等达到治疗CIA的作用.
关键词： 温化蠲痹方 大鼠 胶原诱导性关节炎 外周血单个核细胞 微小RNA-146a -
温化蠲痹方对胶原诱导性大鼠滑膜血管内皮生长因子表达的影响
目的:研究中药温化蠲痹方对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠滑膜血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探讨温化蠲痹方治疗CIA的作用机制.方法:选用健康雄性Wistar大鼠,随机分为造模组、正常对照组(10只,简称正常组),造模组采用牛Ⅱ型胶原乳剂于大鼠尾根部注射,建立CIA模型.再选取造模成功大鼠30只随机分为模型组(10只)、MTX组(10只)、温化蠲痹方组(10只,简称中药组).中药组给予温化蠲痹方22.9g/(kg·d)灌胃,模型组灌胃生理盐水,均每天1次,MTX组按0.78mg/kg剂量灌胃MTX混悬液,每周1次,连续30天.给药结束后,运用免疫组化法检测大鼠滑膜VEGF水平.结果:与模型组比较,治疗后中药组和MTX组大鼠关节炎指数(AI)评分明显降低(P＜0.01);与治疗前比较,中药组和MTX组大鼠AI评分均明显降低(P＜0.01).与正常组比较,模型组大鼠滑膜VEGF表达水平明显升高(P＜0.01);与模型组比较,中药组和MTX组大鼠滑膜VEGF表达水平明显降低(P＜0.01),中药组和MTX组之间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:中药温化蠲痹方可能通过下调CIA大鼠滑膜VEGF水平,抑制血管翳形成而治疗CIA.
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基于多药耐药基因P-糖蛋白表达研究温化蠲痹方治疗类风湿关节炎的增效机制
目的:观察温化蠲痹方治疗类风湿关节炎(RA)的临床疗效,研究其对RA患者耐药基因P-糖蛋白(P-gP)表达影响,探讨温化蠲痹方治疗RA的增效机制.方法:60例RA患者随机分为两组,中药温化蠲痹方加西药治疗组(治疗组)30例,对照组30例,其中对照组口服甲氨蝶呤片(MTX,每周1次,每次7.5 mg),来氟米特片(每天1次,每次10 mg),美洛昔康片(莫比可,每天2次,每次7.5 mg).治疗组在口服上述西药的同时,加用温化蠲痹汤(每天1剂,分2次口服)治疗,观察12周.观察两组临床疗效,治疗前后症状、体征、实验室指标,包括中医症候疗效分析、健康状况评估(HAQ评分)、疾病活动指数(DAS28)、患者疼痛评估(VAS评分)、晨僵时间、血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP抗体)、血小板计数、P-gP表达、安全性指标等,运用实时定量PCR检测外周血P-gP表达.结果:治疗组总有效率(86.6％)优于对照组(76.6％),差异有统计学意义(P＜0.05).在改善DAS28、HAQ评分、VAS评分、关节肿胀数、关节压痛数、晨僵时间,与本组治疗前和对照组治疗后比较,差异均有统计学意义(P ＜0.05,P＜0.01);两组患者P-gP、ESR、CRP、RF、抗CCP抗体、血小板计数等指标,与本组治疗前比较,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01),治疗组治疗后上述指标改善优于对照组(P＜0.05,P＜0.01);两组出现肝酶升高、白细胞下降、胃肠道反应、感染及血压升高等,治疗组低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:中药温化蠲痹方加西药治疗RA疗效优于单独西药治疗,温化蠲痹方可降低RA患者多药耐药基因P-gP表达,改善患者对DMARDs多药耐药,可能是其治疗RA提高临床疗效机制之一,该方治疗RA患者安全、有效.
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温化蠲痹方治疗膝骨性关节炎临床研究
目的:观察温化蠲痹方治疗膝骨性关节炎的临床疗效.方法:将90例患者随机分为2组各45例,对照组采用美络昔康片和盐酸氨基葡萄糖胶囊口服,治疗组在对照组治疗的基础上加用温化蠲痹方治疗,均治疗3月.结果:总有效率治疗组为93.33％,对照组为84.44％,2组比较,差异有显著性意义(P＜0.05).2组治疗前后疼痛、关节僵硬、生理功能、指数总积分等骨关节指数积分比较,差异均有显著性意义(P＜0.05);治疗后治疗组上述各项评分较对照组改善更显著,差异均有显著性意义(P＜0.05).结论:温化蠲痹方治疗膝骨性关节炎疗效好,疗效肯定.
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针刺联合温化蠲痹方治疗膝骨性关节炎临床观察
目的:观察针刺联合温化蠲痹方治疗膝骨性关节炎患者的临床疗效.方法:将膝骨性关节炎患者70例分成2组,观察组患者进行针刺联合温化蠲痹方治疗,对照组患者仅进行针刺疗法.观察并记录患者关节疼痛、晨僵、肿胀等评分,将总疗效及临床症状总积分作为主要指标,评价临床效果.结果:总有效率观察组94.3％,对照组77.1％.2组临床疗效比较,差异有显著性意义(P＜0.05).治疗后,2组疼痛、晨僵、肿胀、临床证候总积分分别比较,差异均有显著性意义(P＜0.05).结论:针刺联合温化蠲痹方及仅用针刺疗法治疗膝骨性关节炎均有效,但前者疗效更优,治疗后症状较后者轻,适合推广使用.
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温化蠲痹方对胶原诱导性关节炎大鼠VEGF表达的影响
目的:研究中药温化蠲痹方对胶原诱导性关节炎血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探讨温化蠲痹方治疗胶原诱导性关节炎(CIA)的作用机制.方法:健康雄性大鼠随机分为造模组(60只)、正常对照组(简称正常组,10只),造模组采用牛Ⅱ型胶原(BCⅡ)乳剂于大鼠尾根部及颈背部多点注射,建立CIA模型.造模成功后,选取30只造模成功大鼠随机分为模型组(10只)、甲氨喋呤(MTX)组(10只)、温化蠲痹方组(简称中药组,10只).给药30天后,运用免疫组化法检测大鼠滑膜VEGF水平,观察各组大鼠足趾肿胀度.结果:与正常组比较,模型组、中药组和MTX组大鼠足趾肿胀明显,差异均有非常显著性意义(P＜0.01);与模型组比较,中药组和MTX组大鼠足趾肿胀明显减轻,差异均有显著性意义(P＜0.01);中药组与MTX组比较,差异无显著性意义(P＞0.05);与治疗前比较,中药组和MTX组大鼠足趾肿胀明显减轻,差异有非常显著性意义(P＜0.01).与正常组比较,模型组大鼠滑膜VEGF表达水平明显升高(P＜0.01);与模型组比较,中药组和MTX组大鼠滑膜VEGF表达水平明显降低(P＜0.01),中药组与MTX组比较,差异无显著性意义(P＞0.05).结论:降低CIA大鼠滑膜VEGF水平可能是中药温化蠲痹方治疗CIA的作用机制之一.
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试论温经清化法治疗类风湿关节炎
类风湿关节炎(RA)属中医学顽痹范畴.病本禀赋不足,邪凑正虚致痹.临床多表现为寒热错杂证,痰瘀痹阻.治疗法当温清并用,痰瘀同治.拟温化蠲痹方,温经清化法为基本治法.
关键词： 类风湿关节炎(RA) 寒热错杂 痰瘀痹阻 温经清化法 温化蠲痹方 -
温经清化法治疗类风湿关节炎的临床及实验系列研究*
研究了类风湿关节炎的基本病因病机，为本虚标实，寒热错杂，痰瘀痹阻。论述了中药湿化蠲痹方治疗胶原诱导性关节炎的作用机制和研究现状。
