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  • 小叶莲化学指纹图谱研究

    作者:王蔼华;刘广学;徐风;尚明英;蔡少青

    目的:研究小叶莲的化学成分指纹图谱,评价小叶莲商品药材质量,并比较桃儿七不同药用部分之间的主要成分差异,为临床安全、合理应用提供依据.方法:采用小叶莲HPLC指纹图谱方法,测定了12份小叶莲的指纹图谱,确定了20个色谱峰作为共有峰,并指认了其中12个色谱峰;运用该方法比较了桃儿七根及根茎与小叶莲指纹图谱的差异,通过相似度评价和聚类分析对图谱数据进行分析.结果:本研究首次报道了小叶莲中4个黄酮类成分;首次指认了小叶莲指纹图谱中11个色谱峰,包括9个黄酮和2个木脂素类成分;桃儿七不同药用部分化学成分存在较明显的差异,小叶莲主要含异戊烯基黄酮类成分,桃儿七根和根茎主要含鬼臼毒素和简单取代的黄酮及其苷类成分.结论:该指纹图谱方法可以作为评价比较小叶莲、桃儿七根及根茎中黄酮类和木脂素类成分的相对含量及其质量的依据.同时,为小叶莲、桃儿七根及根茎不同药用部分的药效学差异研究提供参考.

  • 珍稀濒危药用植物桃儿七的资源调查

    作者:赵纪峰;刘翔;王昌华;张植伟;秦松云;钟国跃

    对西藏、青海、甘肃、四川、云南等省区的桃儿七资源进行调查.结果表明,桃儿七主要分布于我国中部从陕西太白山区由北向南沿横断山脉两侧的中高山及青藏高原地带,适生生境以海拔1 500~4 500 m的沟谷湿润林下到高原面上较为干旱的矮小灌丛植被为主,单纯的高山草甸分布密度相对较小;光照、水分、土壤、温度、海拔等从不同的角度对桃儿七的分布和生长、资源蕴藏量都有着明显的影响.采取文献调查、走访调查、样方调查及市场调查等方法.作为藏药"小叶莲"(果实)和鬼臼毒素提取原料的地下部分的市场需求增长迅速,采挖地下部分的"鬼臼"是导致近年桃儿七资源急剧减少的主要原因.建议一方面应加强对"鬼臼"的合理限量采挖管理,同时应开展桃儿七资源利用价值的评价,并加快发展桃儿七的栽培生产.

  • 四川康定折多山濒危药用植物桃儿七群落主要种间联结性研究

    作者:刘翔;赵纪峰;王昌华;张植玮;秦松云;钟国跃

    在2×2列联表基础上,采用方差分析,x2检验,OI,DI,JI指数、方差/均值比的t检验和Morisita指数的F检验对四川康定折多山桃儿七所在植物群落中的20个优势种的种间关联和空间分布格局进行定量分析.结果表明,该区域桃儿七所在群落中20个优势种的总体关联性呈不显著的正关联,反映出群落处于稳定成熟阶段,各种间独立性较强,20个优势种组成的190个种对中,有2个极显著正联结,12个显著正联结,无极显著负联结,6个显著负联结,桃儿七在群落中无显著相关,在群落中独立性较强,桃儿七群落的分布格局服从随机分布.

  • 青海上北山林场野生桃儿七根部内生真菌群落组成及多样性研究

    作者:宁祎;李艳玲;周国英;杨路存;徐文华

    该研究通过应用第二代测序技术(NGS),即高通量测序方法测序青海野生桃儿七根内真菌宏基因组ITS 1区,并依据RDP中设置的分类阈值对处理后的序列进行物种分类,鉴定内生真菌的群落组成.研究结果显示,测序结果经过质量控制共获得有效条带22 565条,依据97%的序列相似性做聚类相似性分析,获得全部样品的可分类操作单元(OTUs)共517个,RDP分类依据0.8的分类阈值鉴定出的全部真菌可归类为13纲、35目、44科、55属.3个样品LD1,LD2,LD3中共同的优势属真菌为Tetracladium属(所占比例分别为35.49%,68.55%,12.96%),样品的香浓多样性指数和辛普森多样性指数分别在1.75 ~2.92,0.11 ~0.32.研究结果表明,青海上北山林场野生桃儿七根内内生真菌具有较高的多样性和较复杂的群落组成,蕴含着丰富的内生真菌资源,且高通量测序技术对于研究植物内生真菌群落组成及多样性具有显著的优势.

  • 地形因子对桃儿七鬼臼毒素含量的影响与生态适宜度研究

    作者:伍奥林;李敏;张寿文;赵纪峰;刘翔;王昌华;王晓云;钟国跃

    该研究从四川、青海、甘肃、西藏、云南和陕西六省桃儿七分布较多的区域进行实地采样116份桃儿七样品,并测定鬼臼毒素含量,再利用测得的鬼臼毒素数据和桃儿七地形因子(海拔、坡度、坡向)对桃儿七进行中药区划研究.采用偏相关分析和大信息熵模型2种方法对鬼臼毒素含量和桃儿七生境适宜度进行综合分析,选择出适宜桃儿七生长的地形因子.研究结果如下:桃儿七鬼臼毒素含量与海拔相关性大(偏相关系数为-0.120),与坡度、坡向联系不大(偏相关系数-0.094,-0.039).桃儿七在海拔为2 800~3 600 m,坡向为北、东北、西北,坡度在12° ~65°的地区时,桃儿七生境适宜度较高,较适合桃儿七的野生引种和人工栽培.研究表明,桃儿七地形因子对桃儿七适生区域有一定影响,与鬼臼毒素含量影响不.该文分析结果对桃儿七区划布局和生产发展提供了重要科学依据,但由于该文只是从桃儿七的地形因子对桃儿七的生境适宜度进行分析,而影响桃儿七生境适宜度和鬼臼毒素含量的生态因子较多,因此在对桃儿七资源进行实际开发与保护时,应结合其他气候、土壤因子等综合考虑.

  • 桃儿七不同部位2种木脂素含量的动态研究

    作者:李艳玲;宁祎;徐文华;周国英

    采用超声提取和HPLC测定栽培植株与野生植株桃儿七不同部位中4'-去甲基鬼臼毒素和鬼臼毒素的含量,结果表明,栽培植株各部位4'-去甲基鬼臼毒素含量依次为叶柄>根,叶中未检测到此物质,野生植株不同部位4'-去甲基鬼臼毒素含量依次为须根>茎>根状茎>叶,果实中未检测到此物质;栽培植株和野生植株不同部位鬼臼毒素含量均为根>茎>叶(>果实);桃儿七栽培植株各部位2种木脂素含量随季节变化呈W型,以7月份采收时含量高.

  • 濒危药用植物桃儿七野生居群遗传多样性与遗传结构的SCoT分析

    作者:陈大霞;赵纪峰;刘翔;王昌华;张植伟;秦松云;钟国跃

    目的:揭示珍稀濒危药用植物桃儿七的遗传多样性水平及居群遗传结构特点.方法:采用新型分子标记SCoT对来源于我国的6个桃儿七野生居群共45个个体进行遗传多态性检测.运用POPGENE软件计算相关遗传参数,UPGMA方法聚类,结合MEGA5软件生成树状图.结果:筛选出的27条引物,共检测到350个位点,其中284个为多态位点,平均每条引物扩增所得多态条带为10.52条.物种水平上,桃儿七6个野生居群的遗传多样性较为丰富,PPB 79.27%,Ne 1.332 7,H 0.210 9,Hspp0.328 6.在居群水平上,遗传多样性水平较低:PPB 10.48%(4.00%~23.71%),Ne 1.0487(1.020 7~1.1037),H 0.029 7(0.012 9 ~0.063 1),Hpop0.046 2(0.019 9 ~0.098 6).Nei's基因多样性指数计算的居群间遗传分化系数Gst=0.841 1与Shannon's居群分化系数(Hsp-Hpop)/H.p=0.849 4基本一致,均说明大部分遗传变异存在于居群间.基因流Nm=0.094 4,表明桃儿七居群间基因交流处于低等水平.Nei's遗传一致度(I)范围为0.570 8~0.978 7.聚类分析将供试居群分为2类,相同地理来源或相似生境的材料具有聚为一类的倾向.结论:供试野生桃儿七具有较丰富的遗传多样性,为有效保护和改良种质资源奠定了一定的基础.

  • 濒危药用植物桃儿七中鬼臼毒素和总木脂素含量测定

    作者:黄坤;蒋伟;赵纪峰;王昌华;刘翔;张植伟;秦松云;钟国跃

    目的:测定不同产地桃儿七中鬼臼毒素和总木脂素类成分含量,对其资源利用价值进行评价.方法:采用高效液相色谱法和紫外分光光度法分别测定不同产地共126个桃儿七样品中鬼臼毒素和总木脂素含量,采用参比波长法测定桃儿七中总木脂素类成分的含量.结果:桃儿七中鬼臼毒素和总木质素的含量均以产自甘肃省永登县自然保护区样地的样品含量高,产自西藏自治区江达同普乡样地的样品含量低,前者分别为7.40%,20.66%,后者分别为0.40%,5.46%,两者分别相差近19倍和4倍.桃儿七中鬼臼毒素与总木脂素的含量呈显著正相关,且两者的含量表现出海拔较低、纬度较高地区样地的含量较高的特点.结论:2种含量测定方法均简便、快速、准确、重复性好;以鬼臼毒素含量和总木脂素含量为指标评价桃儿七资源利用价值较为客观;本研究的结果,对于桃儿七野生资源采集和栽培生产基地建设的产地选择具有重要的指导意义.

  • 原子吸收光谱法测定桃儿七中微量金属元素含量

    作者:温普红;赵卫星;王艳

    目的:应用原子吸收光谱法测定桃儿七中微量金属元素.方法:采用原子发射光谱法进行定性分析,原子吸收光谱法进行定量分析.结果:桃儿七中微量元素的含量为:钙449.1 mg/kg;镁48.5 mg/kg;锌55.3 mg/kg;铜195.1 mg/kg;锰16.8 mg/kg;铁188.6 mg/kg,RSD≤0.8%,加样回收率为97.9%~102.1%.结论:该方法准确度较高,简便易行,处理一次样品可连续测定多种元素.

  • 桃儿七化学成分和细胞毒性研究

    作者:陈有根;张丽芳;刘育辰;王碧松;金鑫;傅欣彤;周建平;郭洪祝

    目的 研究桃儿七Podophyllun hexandrum药材的化学成分及其细胞毒性.方法 采用硅胶柱色谱-高效液相色谱分离纯化,通过理化常数测定和光谱分析鉴定其化学结构;用L929、HepG2、NCI-H460 3种癌细胞测定各化合物的IC<,50>结果 从桃儿七中分离鉴定了7个四氢柰类木脂素化合物:鬼臼毒素(1)、苦鬼臼毒素(2)、鬼臼毒酮(3)、苦鬼臼毒酮(4)、异苦鬼臼毒酮(5)、去氧鬼臼毒素(6)、去氧苦鬼臼毒素(7);7个化合物对L929的IC<,50>为0.003 5~14.145 3 μg/mL,对HepG2的IC<,50>为0.003 7~1.497 5μg/mL,,对NCI-H460的IC<,50>为0.005 3~1.699 8 μg/mL.结论 化合物7是首次从该植物中分离得到,化合物6的细胞毒性强.

  • 桃儿七中酚类成分研究

    作者:孙彦君;周巍;陈虹;李占林;华会明

    目的 研究桃儿七Sinopodophyllum emodi的酚类成分.方法 通过多种色谱方法进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定.结果 从桃儿七中分离得到10个化合物,分别鉴定为对羟基苯甲醛(1)、原儿茶酸(2)、4-羟基-3-甲氧基苯乙酮(3)、香草酸(4)、香草酸-4-O-β-D-葡萄糖苷(5)、ilexpubside A(6)、对羟基苯乙醇(7)、苯乙醇-4-O-β-D-木糖基-(1→6)-β-D-葡萄糖苷(8)、2-(4 '-羟苯基)-硝基乙烷(9)、2-(4'-羟苯基)-硝基乙烷-4'-O-β-D-木糖基-(1→6)-β-D-葡萄糖苷(10).结论 化合物1~6、9、10为首次从该属植物中分离得到.

  • 云南桃儿七遗传多样性的DALP分析

    作者:吴刚;虞泓;崔光芬

    目的 进行药用植物桃儿七Sinopodophyllum hexandrum的遗传多样性研究,为桃儿七资源的保护和开发利用提供分子遗传理论基础.方法 对6个桃儿七居群进行DALP分析,利用PopGene 1.31软件分析遗传多样性相关数据,UPGMA方法 聚类,结合Treeview软件生成树状图.结果 筛选5对引物组合,扩增共产生150条DNA片段,其中104条谱带具有遗传多态性,占69.33%,平均每组引物扩增所得多态条带为20.8,6个居群平均多态百分率为14.22%.6居群总的观察等位基因数Na为1.693 3,平均1.142 2;总的有效等位基因数Ne为1.417 1,平均1.083 8;基因多样性指数H为0.244 3, 平均0.048 8;总的Shannon多样性指数I为0.364 3,平均0.073 0;居群总的基因多样性Ht为0.244 3,居群内基因多样性Hs为0.048 7.基因分化系数Gst为0.800 5,即遗传变异有80.05%发生在居群间,19.95%发生在居群内,居群每代迁移数Nm为0.124 6.结论 桃儿七居群间存在较大的遗传分化,基因流受到阻碍,这与桃儿七的繁育系统和生存环境紧密相关.

  • 桃儿七组织培养体系的建立及鬼臼毒素的检测

    作者:栗孟飞;李唯

    目的 建立桃儿七组织培养体系及其鬼臼毒素的提取检测方法.方法 以桃儿七成熟分离胚为材料,研究了不同浓度激素、活性炭(AC)对无菌苗诱导的影响;以桃儿七无菌苗切除后约2.0 cm的根茎为材料,考察不同浓度激素对根继代及生长发育的影响,并定期对继代根、叶(叶柄)及培养基进行鬼臼毒素的提取及HPLC法检测.结果 分离胚在MS+2.0%蔗糖+0.4%琼脂+1.0 mg/mLGA,+1.0 g/L AC的培养基培养20 d后,无菌苗诱导率为92.0%,无菌苗生长发育良好;切除后约2 cm的根茎接种在MS+ 2.0%蔗糖+0.4%琼脂+1.0 g/LAC|+1.0 mg/mLIBA继代40 d后,根长11.59 cm,植株生长发育良好;对继代根、叶(叶柄)及培养基进行鬼臼毒素的提取及HPLC法检测显示,鬼臼毒素量大小依次为根>培养基>叶(叶柄),50 d后分别为33.17,12.97,4.55μg/mL.结论 本研究建立了桃儿七组织培养体系,证明了利用桃儿七根培养生产鬼臼毒素的可行性.

  • 基于ITS2序列的5种鬼臼类中药材DNA条形码鉴定研究

    作者:鹿江南;成航;樊佳佳;韩宗贤;高翰;王永红;刘霞

    目的 通过分析5种鬼臼类中药材八角莲、南方山荷叶、桃儿七、小八角莲和六角莲的ITS2(internal transcribed spacer2)条形码序列,探讨鬼臼类药材鉴定新方法.方法 共收集26份样品,以ITS2作为条形码序列,对各鬼臼类中药材提取基因组DNA,PCR扩增ITS2序列并进行双向测序.所得序列经CodonCode Aligner拼接并剪切后,采用MEGA5.1软件进行序列对比分析,计算遗传距离,分析比较种内、种间序列差异,并构建系统邻接树.结果 5种药材种间存在明显差异,各个种的种内大遗传距离均小于种间小遗传距离;构建的系统树各个种不同样本均分别聚在一起,表现出单系性.结论 ITS2序列作为DNA条形码可较好地用于鬼臼类中药材DNA条形码的鉴定研究.

  • 鬼臼毒素的提取及其溶剂加合物的表征

    作者:王晓玲;杨伯伦;刘谦光;张尊听

    鬼臼毒素,俗名鬼臼素、足叶草素、鬼臼脂素,是小檗科植物桃儿七Sinopodophyllum emodi Ying、窝儿七Diphylleia sinensis Li中的主要药用成分,具有抗肿瘤活性,以鬼臼毒素为原料进行修饰改性,还可以合成数十种新的抗肿瘤新药[1~2],所以,大量而有效的提取鬼臼毒素,对新的抗肿瘤药物的开发有重要意义.

  • 桃儿七的生药鉴定

    作者:彭强;赵桦;张国柱;任云倩

    对桃儿七Sinopodophyllum emodi Wall.进行生药性状、显微及理化特征鉴定研究,并与其混淆品铁筷子作比较,为鉴别提供依据.

  • 桃儿七的研究进展

    作者:刘海军;徐艳;苏国庆;李春燕;王莉;刘玉军

    主要综述了国内外对桃儿七的研究进展.介绍了桃儿七的地理分布、系统发育、化学成分、生物学特性、资源现状及解决办法,特别介绍了利用植物组织培养、细胞培养、生物反应器、毛状根培养等生物技术方法来生产鬼臼毒素的研究新进展.

  • 正交设计优化桃儿七中鬼臼毒素的提取工艺

    作者:崔文燕;赵艳敏;林纪伟;宋晓凯;刘岱琳;魏晓瑶;石浩源;齐书艺

    [目的]利用正交实验优化桃儿七中鬼臼毒素的回流提取工艺.[方法]通过高效液相色谱法,Cosmosil C18柱(2.5 mm,4.6 mm×250 mm),流动相甲醇水溶液梯度洗脱,292 nm下进行检测,建立鬼臼毒素的含量测定方法,以桃儿七中鬼臼毒素的含量及得率为评价指标.在单因素实验的基础上采用正交设计方法L9(34)考察提取温度、提取时间和料液比对鬼臼毒素提取效果的影响.[结果]桃儿七中鬼臼毒素的佳提取工艺条件为:提取溶剂80%乙醇、提取2次、提取温度85℃、提取时间2.0 h、料液比1∶10.通过验证试验,鬼臼毒素的总提取率可达86.62%,含量可达9.57%.[结论]经过优化后鬼臼毒素的提取工艺具有提取率高、工艺稳定、低成本等特点,该工艺条件可为其工业生产提供参考依据.

  • 藏药澳毛赛原植物的生药鉴定

    作者:周则;卓玛;张浩

    目的:对藏药澳毛赛原植物桃儿七的果实和根进行生药学鉴定,为其鉴别及应用提供科学依据.方法:对原植物进行形态描述,根及根茎和果实进行性状鉴定、横切片和粉末显微观察,描述所见结果.结果:藏药澳毛赛在原植物形态、显微特征上有明显的鉴别特征.结论:通过原植物、性状、显微特征能够很好地鉴别藏药澳毛赛.

  • 桃儿七化学成分和药理作用研究进展

    作者:刘艳杰;王健;刘丽歌

    桃儿七为小檗科桃儿七属植物鬼臼的干燥根及根茎,有较高的药用价值,内含多种化学成分,具有抗肿瘤、抗病毒等多种功效。本文主要对桃儿七的化学成分及药理作用进行综述,以期为更好地使用桃儿七提供参考。

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