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桃儿七中黄酮类成分的分离与鉴定
目的 对桃儿七的95％(φ)乙醇提取物的化学成分进行研究.方法 利用反复硅胶、Sephadex LH- 20、开放ODS柱色谱等方法进行分离纯化；根据理化性质及波谱分析对分离得到的化合物进行结构鉴定.结果 分离得到8个黄酮类化合物,分别鉴定为山柰酚(kaempferol,1)、槲皮素(quercetin,2)、杨梅素-3',4'－二甲醚(myricetin-3',4'-dimethyl ether,3)、3-O-甲基－槲皮素(3-O-methyl-quercetin,4)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(kaempferol-3 -O-β-D-glucopyranoside,5)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(quercetin-3 - O-β-D-glucopyranoside,6)、芦丁(rutin,7)、山柰酚－3－O-芸香糖苷(kaempferol-3 - O-rutinoside,8).结论 化合物3、4、8为首次从该属植物中分离得到.
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大孔吸附树脂富集纯化桃儿七中的鬼臼毒素
目的 建立桃儿七中鬼臼毒素的大孔吸附树脂富集纯化工艺.方法 HPLC法测定样品中鬼臼毒素的含有量,比较12种不同厂家、型号的大孔树脂对桃儿七水提取物中鬼臼毒素的吸附与解吸附条件,优选佳的纯化工艺.结果 HPD-100型大孔吸附树脂对桃儿七水提取物中鬼臼毒素具有良好的吸附能力,30％乙醇能大量洗脱除去杂质,60％乙醇能解吸附鬼臼毒素,95％乙醇能再生大孔吸附树脂柱.富集后,鬼臼毒素的含有量达到28.46％,远高于水提取物中的1.58％.结论 采用HPD-100型大孔吸附树脂能从桃儿七水提取物中快速富集提取鬼臼毒素,而且树脂重复利用度高.
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高效液相色谱法测定桃儿七中槲皮素及山柰酚
目的 测定桃儿七中槲皮素及山柰酚的量.方法 采用高效液相色谱法.色谱柱为Kromasil C18柱(4.0 mm×250 mm,5.0 μm);甲醇-0.1％磷酸溶液(50:50)为流动相,体积流量1.0 mL/min;检测波长360 nm.结果 槲皮素、山柰酚分别在0.037 2～0.744μg和0.019 4～0.388μg范围内具有良好线性关系,平均回收率分别为97.8％(RSD为1.1％)和98.6％(RSD为1.4％)结论 该法准确、灵敏,可用于桃儿七中槲皮素及山柰酚的定量测定.
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HPLC分析桃儿七中鬼臼毒素的含量
目的:建立桃儿七鬼臼毒素含量的HPLC测定方法,并比较研究桃儿七不同生长地、不同营养器官中鬼臼毒素的含量.方法:筛选适当提取方法,采用Diamonsil C18色谱柱,0.04%甲酸水-乙腈梯度洗脱,流速0.5 mL/min,检测波长290nm,柱温30℃条件下,记录液相色图谱.结果:鬼臼毒素的线性范同在0.2～1.4 μg,r2=0.999 4,平均回收率为99.32%,RSD小于1.97%,表明该法适用于不同生长地桃儿七中鬼臼毒素含量测定.结果显示宁夏六盘山的桃儿七样品根中鬼臼毒素含量高,云南纳帕海的含量低;而茎中的含量以云南纳帕海的样品为高.结论:该方法准确、快速、简便.
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桃儿七对小鼠乳腺癌肿瘤的作用
目的 探讨藏药桃儿七对小鼠乳腺癌肿瘤模型的防治作用和初步机制.方法 实验以4T1细胞接种配合免疫抑制复制BALB/c小鼠乳腺癌肿瘤为模型,细胞接种后根据小鼠体质量随机分为正常组、模型组,他莫昔芬组(4.1 mg/kg),桃儿七高、中、低剂量组(1.2、0.6、0.3 g/kg)等6组,分别灌胃给药,连续观察25d,检测肿瘤瘤体质量,脏器指数、白细胞(WBC)计数及组织形态学的变化.结果 桃儿七能明显减少乳腺癌的瘤体质量,降低肿瘤、胸腺和脾脏指数,减少WBC计数,组织切片显示促进肿瘤细胞分化.结论 藏药桃儿七对乳腺癌有明显防治作用,机制可能与免疫抑制有关.
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龙胆及其混淆品桃儿七的鉴别
比较龙胆及其混淆品桃儿七的植物形态、性状及显微.方法对植物形态、性状、显微、薄层层析等进行鉴别.结果龙胆与桃儿七来源不同科属,其性状、性味、功效都存在很大差异,桃儿七有毒,不能两者相混淆.结论应按两个品种分别使用.
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藏药桃儿七鬼臼成分提取分离及抗癌作用研究进展
藏药桃儿七具有抗肿瘤、祛痰止咳、抗炎、抗病毒等作用,有望为多种新药的研发提供物质基础.本文就近年桃儿七主要活性物质鬼臼成分提取分离工艺、抗癌等药理作用及机制研究情况进行总结,旨在通过增加鬼臼毒素的提取率的前提下为珍稀濒危藏药桃儿七的开源节流提供方法参考,为桃儿七的综合开发奠定基础,同时为鬼臼类新药的研发提供理论支撑.
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桃儿七抗乳腺癌作用机制探讨
藏药在我国传统医药中占有重要地位.宗玉英等[1] 研究发现,藏药桃儿七果实90%乙醇提取物对肿瘤细胞抑制率为75%,但目前对其抗肿瘤作用机制仍不很清楚.近年来,我们对桃儿七根90%乙醇提取物抑制乳腺癌细胞增殖及诱导其凋亡的作用进行研究,以探讨其抗肿瘤作用的机制.
关键词： 桃儿七 乳腺癌 人乳腺癌细胞系MCF-7 凋亡 -
龙胆伪品-桃儿七的鉴别
我市曾发现四例因服伪品龙胆而急性中毒的病人,均是因牙痛而服单味中药"龙胆",一次剂量40～50 g,水煎服.服药2 h左右患者出现呕吐、腹泻、四肢无力、继而四肢麻木等严重中毒症状,病程数月,给患者造成严重后遗症.
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鬼臼类中药中毒的服药原因与临床救治
目的:探讨口服鬼臼类中药中毒的原因与临床救治措施.方法:选取本院2010年1月-2014年1月接收的56例口服鬼臼类中药中毒患者,调查记录其服药原因并予临床救治,观察临床救治结果.结果:患者服药主要原因为治疗身体疾患;中毒后临床治愈率为94.64％.结论:鬼臼类中药含一定毒性,服用方式不当可导致中毒,应在医生指导下服用,如出现中毒后立即入院救治.
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藏药桃儿七干预高转移小鼠乳腺癌的作用研究
目的 建立小鼠乳腺癌高转移模型,研究桃儿七对小鼠乳腺癌生长的干预作用以及乳腺癌肺转移的抑制作用.方法 将乳腺癌高转移模型小鼠随机分为6组:模型组(纯水)、阳性组(他莫昔芬4.1 mg·kg-1)、低剂量组(0.3 g·kg-1)、中剂量组(0.6 g· kg-1)、高剂量组(1.2 g· kg-1)、空白组(纯水).观察并测量高转移乳腺癌小鼠的肿瘤体积,25d后断颈处死小鼠,对小鼠乳腺癌肺部转移病灶结节进行结节计数.结果 高、中、低剂量桃儿七水煎液能够减慢乳腺癌小鼠肿瘤生长速率,抑制肿瘤生长,乳腺癌抑制率分别达到了77.99％、66.53％、40.16％;高、中剂量的桃儿七还能够明显抑制小鼠乳腺癌的肺转移(P＜0.05),高、中、低剂量组、阳性组以及模型组肺结节计数(个)分别为:0.08±0.32、0.75±1.6、0.90±1.29、1.4 ±2.12、3.08±3.55.结论 藏药桃儿七可减缓原位乳腺癌的生长,对乳腺癌有强烈的抑制作用,高剂量使用还可以抑制乳腺癌的肺转移.
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低温沙藏对桃儿七种子破眠及其内源激素变化的影响
目的 研究解除桃儿七种子休眠的方法及其内源激素水平变化的规律.方法 以低温沙藏处理的桃儿七种子为材料,利用高效液相色谱法(HPLC)测定低温层积过程中植物内源激素吲哚乙酸(IAA)、赤霉素(GA)以及脱落酸(ABA)含量的变化与种子萌发率的关系.结果 低温沙藏处理3个月可有效打破桃儿七种子休眠,随着层积时间的增加,GA、IAA含量显著升高,ABA含量显著下降,GA/ABA和GA/ABA +IAA比值增大.结论 内源激素IAA、ABA和GA在桃儿七种子休眠与萌发过程中起着重要的调节作用.
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桃儿七质量标准研究
目的 对不同产地或批次桃儿七药材进行分析研究,建立桃儿七药材质量标准.方法 鉴别桃儿七的植物形态、药材性状、显微特征;采用TLC法进行定性鉴别;采用HPLC法测定鬼臼毒素、4'-去甲鬼臼毒素和山柰酚的含量.结果 对桃儿七的植物形态、药材性状、显微特征进行了描述;建立了桃儿七的TLC鉴别方法,斑点清晰,分离度好,具有较好的专属性;根据10批次桃儿七含量测定结果,鬼臼毒素、4'-去甲鬼臼毒素、山柰酚分别在11.39～91.14、1.29～10.36、1.44～11.52μg与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率均大于97％,RSD均小于2％(n=6).结论 所建立的方法操作简便、重现性好、专属性强,可用于桃儿七药材的质量评价.
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桃儿七化学成分研究
目的:对药材桃儿七的化学成分进行研究.方法:利用大孔吸附树脂柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、0DS柱色谱、硅胶柱色谱进行分离纯化,通过理化常数和波谱分析技术进行结构鉴定.结果:从桃儿七中分离得到9个化合物,分别鉴定为:异苦去氧鬼臼毒素(Ⅰ)、3β-羟基-7α-甲氧基-24β-乙基-胆甾-5-烯(Ⅱ)、5α,8α-过氧-(22E,24R)-麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(Ⅲ)、7β-羟基-谷甾醇(Ⅳ)、β-谷甾醇(Ⅴ)、胡萝卜苷(Ⅵ)、α-棕榈酸甘油酯(Ⅶ)、α-D-葡萄糖(Ⅷ)、5-羟甲基糠醛(Ⅸ).结论:化合物Ⅰ～Ⅳ、Ⅶ～Ⅸ为首次从该属植物中分离得到.
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三种鬼臼毒素类化合物的鉴定
目的:三种鬼臼毒素类化合物鬼臼毒素、苦鬼臼毒素和异鬼臼苦酮在液相色谱上很容易混淆,甚至误认,为此进行了一系列的实验,使这三种化合物在不同的色谱条件下可以彼此分离,用于鬼臼类植物桃儿七化学成分判定.方法:高效液相色谱法.结论:鬼臼毒素、苦鬼臼毒素和异鬼臼苦酮在液相色谱上可以互相分离,实验用鬼臼类植物桃儿七中含有该三种化学成分.
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响应面法优化桃儿七中鬼臼毒素的热回流提取工艺
目的:利用响应面分析法优化桃儿七中鬼臼毒素的热回流提取工艺.方法:在单因素试验的基础上,选取乙醇浓度、液料比、提取温度3个因素为自变量,以鬼臼毒素提取率作为响应值,采用3因素3水平的响应面分析法,依据回归分析确定优提取工艺条件.结果:桃儿七中鬼臼毒素的佳提取工艺条件为:乙醇浓度53％,液料比16∶1,提取温度42℃,在此条件下鬼臼毒素提取率理论值为8.60％,实际测得值为8.47％,两者较接近.结论:在单因素试验的基础上采用响应面法对鬼臼毒素提取条件优化合理可行,验证试验表明所得模型方程能较好地预测实验结果.
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野生濒危中藏药桃儿七人工育苗技术
目的:建立一种桃儿七人工育苗方法,解决传统育苗方法耗时长、育苗率低的问题,提高幼苗移栽成活率.方法:采用保护地育苗,通过温度控制和植物生长调节剂处理,研究其对桃儿七种子发芽、真叶发生、幼苗生长的影响.结果:与传统大田育苗方法相比,本技术显著提高了桃儿七种子萌发率,缩短了幼苗真叶的发生时间,增加了真叶和不定根数目,使幼苗提前1个生长周期移栽.结论:建立了桃儿七人工育苗方法,与传统育苗方法相比,可以缩短育苗时间10个月左右.
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桃儿七中主要生物活性成分的萃取技术研究
采用超临界CO2流体萃取技术及常规溶剂萃取方法对桃儿七的主要化学成分进行萃取和分离,并用高效液相色谱法测定其成分,得出用超临界CO2萃取桃儿七根茎中木脂素类的鬼臼和脱氧鬼臼及黄酮醇类的山奈酚和槲皮素的较适工艺条件.对试验结果分析讨论后认为:超临界CO2萃取桃儿七中木脂素类优于常规溶剂提取方法,并对超临界CO2流体萃取桃儿七工业化应用前景和可行性进行了分析探讨.
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桃儿七中木脂素类化学成分及其活性研究进展
系统地综述濒危药用植物桃儿七中存在的天然木脂素类化学成分、人工合成鬼臼毒素衍生物及其生物活性、作用机理.目前研究主要集中在桃儿七中已知的木脂素类化合物的生物活性探讨、以鬼臼毒素为前体物质合成和发现低毒高效的抗肿瘤活性衍生物方面,并将是今后的主要研究方向.同时,由于目前作为前体物质的鬼臼毒素仍依赖于从桃儿七中提取,而桃儿七的资源已出现紧缺,寻找鬼臼毒素含量高的桃儿七野生资源,并开展人工种植基地建设也是不容忽视的工作.
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桃儿七可促进慢性粒细胞白血病K562细胞的凋亡
目的 探讨藏药桃儿七对慢性粒细胞白血病K562细胞凋亡的影响及相关机制.方法 用不同浓度的桃儿七对K562细胞株进行不同时间梯度的处理,应用CCK8试验筛选桃儿七的佳作用浓度及时间;流式细胞术检测细胞凋亡;瑞氏染色观察细胞形态学改变,DAPI染色观察细胞核形态变化;Western blotting分别检测凋亡相关蛋白PARP、caspase-3、Cleaved-caspase3的活化情况以及BCR/ABL、p-BCR/ABL、STAT5、p-STAT5蛋白表达变化.结果 分别以1、2、3μg/mL浓度的桃儿七处理细胞12、24、36、48、72、96 h,K562细胞增殖呈浓度时间依赖性抑制,并筛选出2μg/mL,48 h为佳处理方式.流式细胞术检测结果显示凋亡细胞数量呈时间依赖性增加,并在48 h凋亡为显著;凋亡相关蛋白PARP、caspase-3以及Cleaved-caspase-3均呈时间依赖性活化.以2 μg/mL桃儿七处理细胞48 h后,K562细胞形态发生不规则改变,出现核碎裂、溶解等凋亡特征;BCR/ABL、p-BCR/ABL、STAT5、p-STAT5表达显著降低.结论 藏药桃儿七能够促进慢性粒细胞白血病K562细胞凋亡,其机制可能通过抑制BCR/ABL-STAT5信号通路并激活线粒体凋亡途径来实现.
