首页 > 文献资料
-
大鼠肝细胞浆一氧化氮合酶活性的简易测定法
一氧化氮合酶(NOS)主要有结构型一氧化氮合酶(cNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)两类.NOS在体内催化左旋精氨酸生成了一氧化氮(NO).NO的主要稳定代谢产物有NO2-和NO3-;,NO3-;浓度远远大于NO2-浓度[1],目前,NOS活性测定大多采用放射强度测定法[2],尽管此种方法灵敏度高,但测定过程复杂,需要比较昂贵的仪器,限制了方法的普及,目前亦有通过测定NO稳定代谢产物NO2-浓度测定NOS活性的方法[2],虽然该方法简便,但测定NO2-浓度的试剂具有毒性和腐蚀性,且试剂来源不便和不稳定.故本实验室参考有关文献[2-4],通过测定酶反应体系NO稳定代谢产物NO3-浓度的变化,建立了一种简便易行的NOS活性测定法.
-
肝素的标准化
肝素于19世纪30年代作为抗血栓药用于临床[1].因为它的不均一性和化学结构的不确定性,自1942年建立供效价测定用第1次肝素国际标准品[2],至今已更替了4次.为建立第5次国际肝素标准品,1998年,WHO生物标准化中心英国国家检定所(NIBSC)组织了对近50年来肝素样品(其中包括历次国际肝素标准品和主要国家的现行标准品及广泛来源的商业产品)的协作研究[3].参与研究的实验室采用本国药典中肝素的生物测定法,有些实验室还采用了欧洲药典中肝素通则项下推荐的低分子肝素特异活性测定法[4]测定样品的生物效价,用凝胶渗透层析和高分辨核磁共振图谱分析法, 测定样品的组成和分子量及分子量分布.通过实验研究,从中选出2个样品作为第5次肝素国际标准品的候选品;还发现我国提供的肝素国家标准品(批号:509-9010)的特异活性仅相当于70年代初期的第3次国际肝素标准品;与目前市场上肝素原料和近建立的国际及欧洲肝素标准品的高分辨核磁共振(NMR)图谱有一定的差距;多分散性指数PD值(PD=Mn/Mw即分子数平均分子量/重量平均分子量)也高.
-
目的:研究sIL-2R和TNF-α在实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)免疫发病机制中的变化与作用.方法:应用豚鼠诱导EAE动物模型.在MBP+CFA免疫豚鼠的第8、15、22天处死动物,取脾细胞,加入ConA诱生培养,收集上清液,采用ELISA方法测定sIL-2R水平,采用生物活性测定法检测TNF-α水平.结果:EAE组的sIL-2R与TNF-α水平明显高于正常对照组.结论:sIL-2R及TNF-α在EAE免疫发病机制中具有重要作用.
-
人红细胞Na+,K+-ATP酶活性测定法及临床应用
近年来,随着细胞分子等学科的进展,人们已认识到细胞Na+,K+-ATP酶的活性与具有重要生理作用的Na+和K+代谢密切相关,因而该酶引起了人们越来越多的关注[1].为此,笔者建立了简便易行的Na+,K+-ATP酶活性测定法,并测定了健康人和糖尿病患者RBC膜Na+,K+-ATP酶活性,来探讨糖尿病人该酶活性的变化及临床意义.