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应用均匀设计法优化喜树果乙醇渗漉工艺条件
目的:优化喜树果乙醇渗漉提取工艺条件.方法:应用均匀设计法考察乙醇浓度(X1)、渗漉速度(X2)、漉液收集量(X3)对喜树碱提取得率的影响.结果:喜树碱得率与乙醇浓度及漉液收集量成正比,与渗漉速度无关.佳工艺条件为:以80%乙醇作溶剂,渗漉速度为6ml·min-1·kg-1,收集漉液量为8倍药材量.结论:优化的佳提取工艺条件是科学的,喜树碱得率较高.
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聚酰胺分离纯化喜树果中10-羟基喜树碱和喜果苷的研究
目的:研究聚酰胺分离纯化10-羟基喜树碱和喜果苷的工艺条件与参数.方法:采用HPLC进行定量分析,考察了聚酰胺对10-羟基喜树碱和喜果苷静态和动态吸附性能,确定佳的工艺条件.结果:优化的工艺条件为:药液中10-羟基喜树碱和喜果苷的质量浓度分别为0.189,0.334 g·L-1,上样液pH 6,上样流速1.0 mL·min-1,上样量3 BV,洗脱剂60%乙醇溶液,洗脱流速1.0 mL·min-1,洗脱剂用量5 BV.经聚酰胺分离纯化后10-羟基喜树碱和喜果苷的质量分数分别为17.52%,32.87%,收率分别为66.05%,75.86%.结论:聚酰胺对10-羟基喜树碱和喜果苷吸附能力强,解吸容易,分离效率果较好,此工艺为大规模产业化提供了依据.
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荧光分析法测定喜树果药材中的喜树碱
研究了喜树果药材、喜树碱和10-羟基喜树碱的三维荧光图谱和薄层荧光色谱,建立了测定喜树果药材中喜树碱含量的荧光分析方法.在三维荧光图谱中,喜树碱呈现3个荧光峰,激发波长λex分别为215、255和365 nm,发射波长λm均为430 nm; 10-羟基喜树碱呈现4个荧光峰,λex分别为220、265、325和375 nm,λem均为555 nm.喜树碱的荧光比10-羟基喜树碱的荧光强.三维荧光图谱对照和薄层荧光色谱分析表明,喜树果药材中的荧光成分主要是喜树碱,10-羟基喜树碱和其他共存组分对喜树碱的荧光基本无干扰.在pH 3.0～6.7条件下,喜树果提取液有稳定的强荧光.以甲醇为溶剂制备喜树果药材提取液,用水适当稀释后于365/430 nm (λex/λem)波长下测定喜树碱的含量.在0.00235 ～ 0.235 μg·mL-1内,荧光强度与喜树碱浓度之间呈线性关系,回归方程为IF=9+ 30 844 c,相关系数r=0.999(n=9).将本法用于喜树果样品中喜树碱含量的测定,结果为0.127％,加标回收率为102％.用薄层荧光扫描法验证了本法的可靠性.结果表明,本法可用于喜树果药材的质量检验.
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喜树果脂肪酸化学成分分析
喜树Camptotheca acuminate Decne.隶喜树属Camptotheca Decne.珙桐科,为我国特有树种,出产于我国的浙江、江苏、江西、湖北、湖南、广东等地.
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HPLC法测定不同产地喜树果中喜树碱
目的 建立喜树果药材中喜树碱定量测定的HPLC方法,并对不同产地喜树果药材中喜树碱的量进行比较分析.方法 用HPLC法测定喜树果药材中喜树碱的量,色谱条件:色谱柱为Dikma Diamonsil C18柱(250 mm × 4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(55:45),体积流量:0.8 mL/min,检测波长:254 nm.结果 喜树碱在0.112～0.672μg与峰面积有良好的线性关系,平均回收率为102.19%,RSD=2.90%(n=6),40批不同产地喜树果药材中喜树碱的量为0.0315%～0.2424%.结论 建立的喜树果定量测定方法准确可靠,不同产地喜树果药材中喜树碱的量有较大差异.
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树脂法分离纯化喜树果中喜果苷的研究
自从1966年Wall等首次从喜树中分离出喜树碱并发现其具有显著抗癌活性后[1],至今已有20多种化学成分从中分离出来,包括喜树碱(camptothecine,CPT)、10-羟基喜树碱、11-羟基喜树碱、10-甲氧基喜树碱、喜树次碱、白桦脂酸、喜果苷(vincoside-lactam VCS-LT)等[2,3].人工合成也取得了可喜的进展[4].研究发现喜树果中喜果苷明显高于喜树碱及其他类似物[5].目前由喜树果中分离提取喜果苷采用溶剂萃取和氧化铝柱色谱法,过程复杂,收率很低,且尚处于实验室阶段.大孔树脂具有理化性质稳定、吸附选择性独特,吸附效率高、易再生等优点.本实验采用树脂吸附分离法从喜树果中分离纯化喜果苷.
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喜树果浸膏搽剂治疗白癜风81例临床观察
我科近年来选用自行研制的喜树果浸膏搽剂治疗81例白癜风患者,取得满意疗效,现报道如下.
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喜树果超微粉显微特征及含量分析
目的:观察喜树果超微粉的显微特征并测定喜树碱溶出量.方法:气流粉碎制备喜树果超微粉和残渣,显微镜下观察其细胞学特征.在370/430 nm(λex/λem)波长下测定喜树果残渣和超微粉乙醇提取液中CPT含量.结果:镜下残渣细胞结构清晰可见,而超微粉无完整细胞存在,且粒径小于50μm.一定浓度的10-羟基喜树碱能猝灭喜树碱的荧光.喜树果超微粉的乙醇提取液中喜树碱含量有显著性差异(t=4.809,P＜0.05).结论:超微粉中活性成分溶出率高,荧光法测定喜树果药材中喜树碱含量.
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液相色谱质谱联用法分析喜树果中苷类化学成分
目的:建立喜树果液相色谱质谱联用分析方法并分析其苷类化学成分.方法:大孔吸附树脂分离,HPLC-ESI-(MS)n分析,离子碎片结构解析.结果:识别到7种苷类化合物,即3,4-dehydro-stric-tosidinic acid、strictosidinic acid、短小蛇根草苷、金丝桃苷、20-O-β-Glucopyranosyl-18-hydroxycamptothecin、喜果苷、三叶豆苷.结论:建立的分析喜树果成分的HPLC-ESI- (MS)n方法实用可靠.
关键词： 喜树果 HPLC-MS/MS 化学成分 -
喜树果粗提液抗单纯疱疹病毒实验研究
目的:用药物喜树果提取液作用于单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2),了解药物抗病毒作用.方法:用不同浓度的药物与病毒混合后在温箱中作用4h,或药物与病毒混合后4℃过夜,吸附于单层BGM细胞1.5h,培养7d,在显微镜下观察结果.结果:实验组BGM细胞未出现病变,对照组细胞出现明显病变.结论:喜树果有较强抗HSV-2作用.
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TLCS法对广西产喜树果中喜树碱含量动态积累的研究
目的:建立喜树果药材中喜树碱含量的TLCS测定方法,并对喜树果药材中喜树碱含量的动态积累进行分析,确定喜树果的佳采收期.方法:采用硅胶H-CMC-Na薄层板,展开剂为氯仿-丙酮(7∶ 3),单波长线性扫描,λs=360 nm.结果:喜树碱在0.0542～0.3252 μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系,平均回收率为97.13%,RSD=1.76%;6个产地不同时间采集喜树果药材喜树碱含量的动态积累情况相似,均为8～9月份喜树碱含量较高.结论:该方法简便、准确、可靠,可作为喜树果中喜树碱含量的测定方法;广西产喜树果佳采收期应为每年的8～9月份.
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HPLC对广西不同采收期喜树果中喜树碱成分动态积累的研究
目的:考察广西不同采收期喜树果中喜树碱成分的动态积累情况,确定喜树果药材佳采收期.方法:采用高效液相色谱法(HPLC)测定广西部分地区同一植株不同采收期喜树果中喜树碱含量.色谱条件:色谱柱:Dikma Diamonsil(钻石)C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:甲醇-水(55∶45),流速:0.8 mL/min,柱温:室温,检测波长:254 nm.结果:测得喜树碱在0.112～0.672 μg范围内有良好线性关系,平均回收率为102.16％,RSD=2.91％(n=6).不同采收期喜树果中喜树碱含量在0.065％～0.21％之间.结论:广西不同采收期喜树果中喜树碱成分的动态积累有一定差异,广西产喜树果佳采收期应为每年的8,9月份.
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不同干燥方法对喜树果中喜树碱含量的影响
目的 探讨不同干燥方法对喜树果中喜树碱含量的影响.方法 对采集到的喜树果鲜药材分别采用阴干、曝晒、40℃、60℃、80℃和100℃烘干的方法进行干燥,并采用HPLC法测定喜树果不同干燥品中喜树碱的含量.结果 不同干燥方法对喜树果药材中喜树碱含量有一定影响,其中阴干品含量高,40℃烘12 h及60℃烘4～8 h含量变化不大,曝晒(37℃)24h及40℃烘18～24h、80℃烘2～6 h、100℃烘1～3 h含量均有减少.结论 不同干燥方法对喜树果药材中喜树碱含量有不同的影响,喜树果药材宜采用阴干或一定时间低温烘干的方法干燥.
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薄层扫描法测定不同产地喜树果中的喜树碱
目的 采用薄层扫描法测定喜树果中的喜树碱,评价不同产地喜树果药材的质量.方法 采用羧甲基纤维素钠作为黏合剂;展开剂为氯仿-丙酮(7∶3);单波长线性扫描法测定,λ<,s>=360 nm.结果 喜树碱0.0542～0.3252 μg与峰面积线的性关系良好,回归方程为:Y=97.19X-55.07(r=0.9928),平均回收率为97.13%,RSD=1.76%(n=6).结论 所建方法 准确可靠,不同产地喜树果药材中喜树碱含量有一定差异.
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喜树果浸膏搽剂治疗白癜风临床研究
目的探讨喜树碱外用制剂对白癜风的临床疗效.方法应用我院自行研制的喜树果浸膏搽剂(喜树果浸膏二甲基亚砜溶液),治疗白癜风患者81例,男31例,女50例.年龄1.3～65岁.病程为1周到30年.分布于头部、颈部、躯干、四肢的单发及多发形皮损.局部涂搽,一日二次.结果用药后快一周出现色素沉着,14天白斑消退,平均3～4周恢复色素.治愈62例,好转17例,无效2例,总有效率97.4%.对其中54例治愈者随访一年局部无复发,随访率87.9%.结论喜树果浸膏搽剂治疗白癜风疗效好,显效快,安全可靠,方便,我们认为喜树碱浸膏制剂有促进色素细胞增殖,移行及促进色素生成的作用,但其确切机理有待进一步研究.
