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流式细胞术测定丹参毛状根核DNA方法的建立
目的:建立丹参毛状根核DNA流式细胞术检测方法.方法:分别对内标物的选择、根组织核DNA分离方法以及测定方法的稳定性进行研究.结果:1)选择大豆核DNA作为内标物;2)丹参毛状根分离方法的特点是分离时间适量延长,且核DNA需要乙醇固定.3)重复性稳定.结论:该方法适用于毛状根核DNA的测定.
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食管鳞癌组织中线粒体和细胞核DNA的提取和鉴定
目的:研究在同一组织中同时提取线粒体DNA(mtDNA)和核DNA(nDNA)的方法的有效性.方法:同一组织中既含有mtDNA又含有nDNA,利用试剂盒同时提取出mtDNA和nDNA,用琼脂糖凝胶电泳,聚合酶链反应(PCR)的方法,对所提取的mtDNA和nDNA进检测.结果:用同一组织从线粒体中得到mtDNA,从细胞核中得到nDNA.与用传统方法分别提取mtDNA和nDNA效果一样,并且两者相关性强,相比较更有说服力.结论:同一组织中能同时提取mtDNA和nDNA,既节省组织又节省时间和费用,为DNA的研究提供了较好的实验方法.
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从微量血中快速制备线粒体DNA片段
目的建立从微量血中快速制备线粒体DNA(mt DNA)片段.方法取50 μl抗凝血和常规酶解法提取的血DNA,同时扩增核DNA(nDNA)上的基因片段和mtDNA上的基因片段,华美公司生产的RedyPCR(tm)微量全血DNA纯化系统进行比较,PCR相对定量分析比较这3种方法提取的mtDNA片段的纯度.结果 RedyPCR(tm)微量全血DNA纯化系统得到的mtDNA和常规酶解法提取的mtDNA有nDNA污染,而作者建立的方法获得的mtDNA纯度较高.结论同时与该法简便快捷地排除了nDNA的污染,适合于对mtDNA进行PCR分析和研究.
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指甲游离缘核DNA提取及检验1例
指甲的游离缘是指指甲前缘延伸到离开甲床的部分。指甲的游离缘采集无创，操作简单，是做秘密DNA亲子鉴定的主要检材之一。但由于其细胞高度角化，胞核退化严重，核DNA含量少，通常仅用于线粒体DNA检验。本例在处理1例亲子鉴定案例时，以剪下的指甲游离缘作为检验对象，先后用Chelex-100法和改良的blood DNA kit法提取核DNA后进行STR分型，终获得了满意的STR分型结果，成功完成了鉴定。
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姜黄素对线粒体DNA和核DNA 8-羟基脱氧鸟苷形成的影响
[目的]探讨姜黄素对人结肠癌HT-29细胞线粒体DNA(mtDNA)和核DNA(nDNA)的氧化损伤作用.[方法]人结肠癌HT-29细胞暴露于不同浓度姜黄素(0、5、10、20μg/ml)2 h后,细胞免疫组化分析nDNA和mtDNA的8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平;2',7'-二氢二氯荧光比色法测定细胞内活性氧(ROS)水平;硫代巴比妥酸法测定细胞内脂质过氧化产物.[结果]随着姜黄素剂量的增高,mtDNA和nDNA的8-OHdG染色密度均增大,20μg/ml姜黄素组,胞浆的染色密度增长了15倍,核染色密度增长了6倍,表明胞浆中mtDNA的8-OHdG水平的增长明显高于nDNA,差异有统计学意义(P＜0.05);5μg/ml以上剂量姜黄素能引起细胞的ROS水平升高和脂质过氧化产物增加(P＜0.05或P＜0.01).[结论]姜黄素能引起HT-29细胞的ROS增加,并造成脂质和DNA的氧化性损伤,并且mtDNA的损伤明显大干nDNA的损伤.
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线粒体脑肌病5例临床诊治分析
线粒体脑肌病是一组由线粒体DNA（mtDNA）或核DNA（nDNA）缺陷导致线粒体结构和功能障碍，以脑和肌肉受累为主的疾病。本文回顾性分析，经临床确诊的5例线粒体脑肌病患者的临床症状、体征及实验室检查资料，现报告如下。
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影响精子DNA损伤因素研究进展
精子DNA损伤是引起不育的原因之一,同时可以增加遗传缺陷风险,因此对精子DNA损伤的研究已成为生殖医学的热点之一.精子DNA检测在评价男性不育患者时越来越受到重视.精子中的DNA包括核DNA和线粒体DNA,它们均易受损伤,损伤机制可能有氧化应激、精子染色质组装缺陷、异常凋亡.精子DNA损伤与很多因素有关,如化学治疗和放射治疗、高龄和生活方式、睾丸温度升高、吸烟与生殖道炎症、环境毒素、精素静脉曲张、激素等,它是多因素共同作用的结果.
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精子DNA完整性及对辅助生殖技术治疗结局的影响
精子遗传物质(包括核DNA和线粒体DNA)易受各种因素影响发生损伤,其损伤机制可能涉及染色质组装异常、氧化应激、凋亡等.精子DNA完整性是成功受精和胚胎发育的基本保证,通过检测精子DNA损伤,评估精子质量,选择优质精子用于临床,可提高辅助生殖技术(ART)成功率,减少技术失败引起的经济、社会和情感问题.本综述主要探讨男性因素不育患者精子DNA完整性及其损伤的可能机制,以及对ART治疗结局的影响.
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大鼠死后不同时间坐骨神经雪旺氏细胞核DNA的变化
目的 探讨大鼠死后不同时间坐骨神经雪旺氏细胞核DNA的变化及其与死亡时间的关系.方法 应用Feulgen染色法及计算机图像分析技术,观测大鼠死后即刻至9d坐骨神经雪旺氏细胞核DNA染色变化及其图像分析参数,所得数据进行统计学分析.结果 雪旺氏细胞核在死后6-18h细胞核呈紫红色、长椭圆形,轮廓清晰,其长轴方向与坐骨神经走向一致,死后24h着色变淡、着色面积变小,终完全消失;在6h-9d内目标面积和积分光密度随死亡时间的延长而逐渐减小,且其均值均与死亡时间明显相关,并得出对应的回归方程.结论 大鼠死后9d内,其坐骨神经雪旺氏细胞核DNA变化与死亡时间有一定的相关性.
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血性胸腹水细胞核DNA定量分析技术
血性胸腹水加等量的50%酒精,可消除红细胞,涂片经Feulgen染色细胞核呈紫红色,背景清晰.将该涂片进行细胞核DNA含量分析,其结果给出细胞平均积分光密度与淋巴细胞平均积分光密度之比(DI值),以及各种倍体细胞的百分比.提高了对血性胸腹水涂片细胞形态学表现的认识水平.
