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芍药汤调节湿热型溃疡性结肠炎大鼠JAK2/STAT3和SOCS3的分子机制
目的:观察芍药汤通过治疗湿热型溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠模型,对结肠组织JAK2/STAT3和SOCS3的影响,从分子水平上探讨芍药汤治疗湿热型UC的机制.方法:Wistar大鼠雌雄各60只,分为空白组、模型组、芍药汤高、中、低(24,12,6 g·kg-1)剂量组、阳性药组(柳氮磺砒啶组,1 g·kg-1),通过高脂高糖辛辣食物加免疫复合法,2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)结合乙醇复合法复制湿热型UC大鼠模型,芍药汤高、中、低剂量灌服,柳氮磺砒啶组予柳氮磺砒啶研磨成粉灌服,空白组及模型组予等体积生理盐水灌胃,连续21 d.采集结肠组织,运用苏木素-伊红(HE)染色观察病理切片、实时荧光定量PCR法(Real-time PCR)检测基因含量、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测蛋白含量.结果:模型组产生炎症反应,镜下出现黏膜损伤、溃疡,提示造模成功.与空白组比较,模型组JAK2,STAT3蛋白及基因表达明显升高(P＜0.05),SOCS3明显下降(P＜0.05);与模型组比较,各治疗组JAK2,STAT3蛋白及基因表达明显下降,其中芍药汤高剂量组为显著(P＜0.01),SOCS3明显升高,芍药汤高剂量组为显著(P＜0.05).结论:芍药汤能够改善湿热型UC大鼠结肠黏膜组织的病变程度,有效减轻炎症反应,与SOCS3抑制JAK2/STAT3信号通路,产生负反馈调节,降低其活化有关.
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JAK/STAT3信号通路调控肿瘤及其相关生物功能的研究进展
JAK/STAT3信号通路是细胞信号通路中重要的信号传导通路之一,通过影响下游多种效应分子的活化状态,对细胞凋亡和增殖起着关键的作用,并且还诱导胚胎发育、肝脏再生、糖酵解和炎性反应、上皮间质转化和血管再生等一系列生物发生过程,与人类肿瘤的发生发展密切相关.
关键词： JAK/STAT3信号通路 肿瘤 细胞凋亡 -
苦参碱对oxLDL诱导的血管平滑肌细胞炎症反应及增殖凋亡的影响及分子机制研究
目的:探讨苦参碱对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的血管平滑肌细胞炎症反应及增殖凋亡的影响及分子机制.方法:oxLDL处理人主动脉血管平滑肌细胞建立动脉粥样硬化模型.CCK-8实验分析细胞活力和增殖.实时定量PCR(qRT-PCR)检测炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-10和IL-13的mRNA水平.流式细胞术分析细胞凋亡.蛋白印迹检测增殖标记蛋白细胞增殖核抗原-67(Ki-67)和增殖细胞核抗原(PCNA),细胞凋亡标记蛋白 B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2) 和Bcl-2相关蛋白X(Bax),信号转导及转录激活子3(STAT3)和信号转导及转录激活子5(STAT5)的表达.结果:与对照组相比,造模组促炎因子IL-1β和TNF-α的mRNA水平大大提高,抗炎因子IL-10和IL-13的mRNA水平则显著降低(P<0.01).与造模组相比,模型加药组促炎因子IL-1β和TNF-α的mRNA水平显著降低,抗炎因子IL-10和IL-13的mRNA水平明显升高(P<0.05).造模组细胞增殖倍数和细胞凋亡率明显高于对照组,模型加药组细胞增殖倍数和细胞凋亡率明显低于造模组(P<0.05).与对照组相比,造模组Ki-67、PCNA和Bax的表达显著升高,Bcl-2显著降低(P<0.01).与造模组相比,模型加药组Ki-67、PCNA和Bax的表达明显减少,Bcl-2表达明显增多(P<0.05).造模组p-STAT3和p-STAT5相对蛋白表达量显著高于对照组(P<0.01).模型加药组p-STAT3和p-STAT5相对蛋白表达量明显低于造模组(P<0.05).与造模组相比,模型加药组和模型+Ruxolitinib组Ki-67、PCNA和Bax的表达明显减少,Bcl-2表达明显增多(P<0.05);模型加药+Ruxolitinib组Ki-67、PCNA和Bax的表达显著减少,Bcl-2表达显著增多(P<0.01).与造模组相比,模型加药组和模型+Ruxolitinib组及模型加药+Ruxolitinib组IL-1β和TNF-α的mRNA水平都明显降低,IL-10和IL-13的mRNA水平都明显升高(P<0.05).结论:苦参碱可通过抑制JAK/STAT3通路的活化起到抗炎和抑制血管平滑肌细胞增殖和凋亡的作用.
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EGCG对人结肠癌细胞株HCT116、SW116增殖、凋亡及JAK/STAT3信号通路的影响
目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCC)对人结肠癌细胞株HCT116、SW116增殖、凋亡及JAK/信号转导子与转录激活子3(STAT3)信号通路的影响.方法 体外培养结肠癌细胞株,采用不同浓度的EGCG对其进行干预.分别采用MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,ELISA法检测磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白表达,RT-PCR法检测Bcl-2、Cyclin D1、C-myc mRNA的表达.结果 EGCG抑制结肠癌细胞株增殖,促进其凋亡,降低p-STAT3蛋白的表达水平,作用呈浓度依赖性；EGCG可以抑制结肠癌细胞株中Bcl-2、Cyclin D1、C-myc mRNA表达水平.结论 EGCG抑制结肠癌细胞株增殖、促进其凋亡的机制可能与抑制JAK/STAT3信号通路有关.
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二甲双胍对宫颈癌Hela细胞Twist及E-cadherin表达的影响及机制
目的 观察二甲双胍处理后宫颈癌Hela细胞JAK/STAT3信号通路调节靶基因Twist及上皮-间质转化(EMT)标志物E-cadherin的表达变化,并探讨其机制.方法 宫颈癌Hela细胞培养后分别经IL-6(IL-6组)、二甲双胍(二甲双胍组)及IL-6+二甲双胍(IL-6+二甲双胍组)处理48 h,未处理细胞作对照组,观察各组细胞形态学变化,检测细胞坏死情况,Western blotting法检测p-STAT3、Twist及E-cadherin蛋白表达,RT-PCR法检测Twist、E-cadherin mRNA表达.结果 IL-6组Hela细胞向间质细胞表型转变,而IL-6+二甲双胍组Hela细胞未向间质细胞表型转变且细胞坏死.IL-6组、IL-6+二甲双胍组p-STAT3、Twist、E-cadherin蛋白表达及Twist、E-cadherin mRNA表达与对照组比较差异有统计学意义(P均<0.05),而二甲双胍组以上指标与对照组比较差异无统计学意义(P均>0.05).结论 二甲双胍可通过阻断JAK/STAT3信号通路降低宫颈癌Hela细胞Twist及E-cadherin的表达.
关键词： 宫颈肿瘤 二甲双胍 白细胞介素6 JAK/STAT3信号通路 上皮-间质转化 -
CPEB4对脑胶质瘤细胞增殖、迁移的影响
目的:探讨胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4(CPEB4)对脑胶质瘤细胞增殖、迁移的影响.方法:采用实时荧光定量PCR法检测40例脑胶质瘤组织及对应的癌旁正常组织中CPEB4 mRNA的表达水平.分别将CPEB4 siRNA及无义siRNA转染至脑胶质瘤细胞U87中,Western blot法检测细胞中CPEB4、MMP-9、MMP-2、STAT3、p-STAT3、JAK2和p-JAK2蛋白的表达水平,MTT法检测细胞存活率,细胞划痕实验检测细胞迁移距离,以未处理细胞作对照.使用50μmol/L特异性JAK2抑制剂AG490作用于转染CPEB4 siRNA的U87细胞48 h后,检测细胞存活率及迁移距离,以未处理细胞和AG490处理的U87细胞作对照.结果:脑胶质瘤组织中CPEB4 mRNA表达水平高于癌旁正常组织(P<0.05).与对照组及无义siRNA组相比,CPEB4 siRNA组细胞CPEB4蛋白表达水平下降(P<0.05),细胞存活率、迁移距离降低(P<0.05),MMP-9、MMP-2、STAT3、p-STAT3、JAK2和p-JAK2蛋白表达水平下降(P<0.05).与对照组相比,AG490组与AG490+CPEB4 siRNA组细胞存活率和迁移距离均降低(P<0.05);与AG490组相比,AG490+CPEB4 siRNA组细胞存活率与迁移距离降低(P<0.05).结论:CPEB4在脑胶质瘤组织中高表达,可能通过上调JAK/STAT3信号通路促进脑胶质瘤细胞的增殖与迁移.
关键词： 脑胶质瘤 CPEB4 增殖 迁移 JAK/STAT3信号通路 -
水蛭素通过JAK/STAT3信号通路缓解人肾小管上皮细胞纤维化的相关机制研究
目的:探讨水蛭素抑制人肾小管上皮细胞纤维化的作用机制.方法:将HK-2细胞分为正常对照组、模型组、AG490(3 mg/L)阳性对照组及水蛭素低(1 mg/mL)、中(3 mg/mL)、高(10 mg/mL)浓度组,除正常对照组外其他各组培养基均含5 ng/mL TGF-β1.各组细胞培养24、48、72 h时采用MTF测定细胞增殖情况;各组细胞培养72 h时采用双抗体夹心ELISA法检测细胞分泌Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)和纤连蛋白(Fib)含量;各组细胞培养72 h时采用实时荧光定量PCR法以及Western blot法检测细胞α-SMA、Col Ⅰ、Fib、JAK、STAT3 mRNA和蛋白的表达.结果:水蛭素高、中浓度组细胞在培养24、48、72 h时光密度较模型组显著降低,在培养72 h时细胞培养液中Col Ⅰ、Fib含量较模型组显著降低,细胞中α-SMA、Col Ⅰ、Fib、JAK、STAT3 mRNA和蛋白表达较模型组显著降低(P＜0.05或P＜0.01).水蛭素上述作用均具有浓度依赖性.结论:水蛭素可逆转TGF-ββ1刺激HK-2细胞的增殖和纤维化,其作用机制可能与抑制JAK/STAT3信号通路有关.
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华蟾素对胃癌肿瘤细胞SGC-7901增殖、凋亡以及JAK/STAT3信号通路的影响
目的 探讨华蟾素(Cino)对转录激活因子3(STAT3)的调控作用,以及对人胃癌肿瘤细胞SGC-7901的增殖、凋亡的影响.方法 采用MTT法检测不同浓度华蟾素(0.1、1.0、10 mg/L)及5-FU (20 mg/L)分别作用于人胃癌肿瘤SGC-7901细胞12、24、48 h后对肿瘤细胞增殖活力的影响;半定量RT-PCR检测Cyclin D1、PCNA、Bcl-2的mRNA表达水平;蛋白悬液芯片(Bio-plex)法检测STAT3磷酸化(p-STAT3)蛋白表达水平.结果 华蟾素可显著抑制SGC-7901的增殖,且呈时间和剂量依赖性.华蟾素能抑制SGC-7901细胞Cyclin D1、PCNA、Bcl-2的mRNA表达水平(均P＜0.05).华蟾素抑制p-STAT3蛋白表达水平,且呈现剂量依赖性(P＜0.05).结论 华蟾素具有抑制胃癌肿瘤细胞增殖和诱导凋亡的作用,其可能机制与其抑制STAT3活化,从而抑制其下游靶基因表达有关.
关键词： 华蟾素 肿瘤细胞 细胞增殖 凋亡 JAK/STAT3信号通路 -
JAK/STAT3抑制剂对创伤性休克致兔肾损伤影响
目的：探讨JAK/STAT3抑制剂AG490对创伤性休克致兔肾损伤的影响。方法将30只健康新西兰兔分为对照组、模型组与AG490治疗组,每组10只。模型组与AG490治疗组兔建立创伤性休克致肾损伤动物模型。通过实时荧光定量聚合酶链反应( Real-time PCR)和蛋白质印迹法( Western-blot)检测肾组织中STAT3、Kim-1、TGF-β1的表达情况。结果与对照组比较,模型组肾组织肌酐与尿素氮水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0．05)；与模型组比较,AG490治疗组肌酐与尿素氮水平显著降低,差异有统计学意义(P<0．05)；与对照组比较,模型组脏组织中STAT3、TGF-β1的mRNA与蛋白表达水平显著升高,差异有统计学意义(P<0．05)；与模型组比较,AG490治疗组STAT3、TGF-β1的mRNA与蛋白表达水平显著降低,差异有统计学意义(P<0．05)。结论 JAK/STAT3抑制剂可能通过TGF-β1来阻断JAK/STAT3信号通路的激活,进而抑制创伤性休克肾损伤发展。
关键词： 创伤性休克 肾损伤 JAK/STAT3信号通路 TGF-β1 AG490
