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  • 珍珠梅提取物对DEN所致大鼠肝癌前病变抑制作用的研究

    作者:张学武;张学斌

    目的:研究珍珠梅提取物对二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,SEN)致大鼠肝脏癌前病变的抑制作用.方法:给动物ig给药,用DEN制备大鼠肝脏癌前病变模型;用免疫组织化学S-P法检测大鼠肝脏谷胱甘肽S-转移酶(GST-P)的表达水平,用比色分析法检测血清、肝匀浆、线粒体SOD、GSH-Px的活性及MDA含量的变化.结果:珍珠梅提取物能显著降低DEN致癌前病变大鼠肝脏GST-P的表达,升高血清、肝匀浆、肝线粒体SOD、GSH-Px的活性,降低MDA的含量.结论:珍珠梅提取物对DEN致大鼠肝脏癌变有抑制作用.

  • 珍珠梅水提物对大鼠肝损伤的保护作用

    作者:张学武;朴龙;刘超;孙权;金海玲;尹宗柱

    目的:研究珍珠梅水提物的保肝作用.方法:给动物灌胃给药,用CCl4,D-半乳糖造大鼠急性肝损伤模型,用比色分析法测定大鼠血清天冬氨酸转氨酶(aspartate transaminase,ALT)、丙氨酸转氨酶(alaninetransaminase,AST)的活性;测定大鼠血清超氧化歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione perioxidase,GS H-Px)的活性及丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量.结果:珍珠梅水提物显著降低因CCl4,D-半乳糖所致急性肝损伤大鼠血清ALT,AST的升高;对急性肝损伤大鼠血清SOD,GSH-PX的活性有明显的升高作用及降低MDA的含量.结论:珍珠梅水提物对CCl4,D-半乳糖所致大鼠急性肝损伤有保护作用.

  • 珍珠梅黄酮纳米粒抑制人肝癌HepG-2细胞STAT3诱导细胞凋亡

    作者:肖斌;张璇;张美兰;张学武

    本文研究了珍珠梅黄酮纳米粒(5,2',4'-trihydroxy-6,7,5'-trimethoxyflavone nanoparticle,TTF1-NP)通过STAT3诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的分子机制.MTT法、免疫细胞化学染色和流式细胞术结合Annexin V-FITC/PI检测发现,TTF 1-NP可明显抑制人肝癌HepG-2细胞增殖,诱导细胞凋亡,且抑制作用呈浓度、时间依赖效应.免疫印迹结果显示,TTF1-NP下调survivin、p-STAT3和STAT3表达,上调cleaved caspase 3表达.采用siRNA沉默STAT3、脂质体转染STAT3载体表达质粒过表达STAT3技术,证明TTF1-NP可调控STAT3蛋白的表达,诱导细胞凋亡.结果表明:TTF 1-NP通过抑制STAT3的表达,诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡.

  • 珍珠梅黄酮纳米粒诱导裸鼠肝癌移植瘤细胞凋亡的内质网应激作用机制

    作者:刘荣荣;张璇;肖斌;张学武

    本文探讨中药珍珠梅黄酮纳米粒(5,2',4'-trihydroxy-6,7,5'-trimethoxy flavone nanoparticle,TTF1-NP)对裸鼠肝癌移植瘤细胞的凋亡作用及其内质网应激作用机制.建立人肝癌HepG-2细胞裸鼠移植瘤模型,分组(模型组、TTF 1-NP低、中、高剂量组和阿霉素组)给药,处死裸鼠计算其抑瘤率;采用HE染色观察肿瘤细胞的形态学变化;利用TUNEL法检测肿瘤细胞的凋亡;采用免疫组织化学法检测GRP78、p-JNK和caspase 12的表达;利用Western blotting检测GRP78、p-JNK、caspase 12和CHOP的表达.结果显示,TTF 1-NP给药组(5、10和20 μmol·kg-1)和阿霉素组对肿瘤细胞均有抑制作用,其抑瘤率分别为51.2%、54.2%、61.8%和65.9%.与模型组相比,TTF1-NP给药组观察到肿瘤细胞凋亡形态学改变;检测到肿瘤细胞凋亡;免疫组织化学结果显示GRP78、p-JNK和caspase 12的表达均有上升,与Western blotting结果相一致.结果表明:TTF 1-NP可以诱导裸鼠肝癌移植瘤细胞凋亡,内质网应激途径是其主要作用机制之一.

  • HPLC法测定珍珠梅中槲皮素的含量

    作者:张乐华;董陆陆;尹春华;刘秉义;杨平传;董明;于敬海

    珍珠梅Sorbaria sorbifolia(L.)A.Brown又名山高粱,为蔷薇科灌木,生于村边、山谷、溪旁[1].民间用其活血祛瘀、消肿止痛,治骨折、跌打损伤[2].

  • 长白山珍珠梅化学成分的研究

    作者:张学武;尤昕;孙权;关丽萍

    目的:研究长白山珍珠梅茎、叶、花的化学成分.方法:用色谱法分离纯化,根据理化性质和光谱数据解析结构.结果:从珍珠梅中分离出3种化合物,5,2′,4′-三羟基-6,7,5′-三甲氧基黄酮(Ⅰ)、丁二酸(Ⅱ),对羟基苯甲酸(Ⅲ).结论:化合物Ⅰ、Ⅱ是首次从珍珠梅中分离获得.

  • 珍珠梅提取物对大鼠肝脏化学致癌前病变抑制作用的实验研究

    作者:张学武;金香子;陈丽艳;金艳华;金英淑

    目的:研究珍珠梅提取物对二乙基亚硝胺(DEN)致癌初期的抑制作用.方法:动物腹腔注射给药,用DEN 制备大鼠肝脏化学致癌初期模型,分为模型组、治疗组、正常对照组.模型组和治疗组注射 DEN,对照组注射等体积生理盐水.用免疫组织化学SP法检测3组大鼠肝脏c-myc、p53和bcl-2的表达水平,用比色分析法检测血清、肝匀浆、线粒体超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及丙二醛(MDA)含量的变化.结果:珍珠梅提取物能显著降低治疗组大鼠肝脏bcl-2、突变型p53的表达,与对照组比较差别有统计学意义(P<0.05或P<0.01),而对c-myc的表达无明显影响;治疗组SOD、GSH-Px的活性高于模型组,而MDA含量低于模型组(P<0.05或P<0.01).结论:珍珠梅提取物对DEN致大鼠肝脏癌变初期有抑制作用,其作用机制可能与下调bcl-2和突变型p53蛋白的表达及清除自由基有关.

  • 珍珠梅花及茎中多糖含量测定及成分分析

    作者:云学英;罗素琴;吴宁远;张翠荣;蒋洪

    目的:建立珍珠梅样品中多糖的提取、含量测定及成分分析法.方法:经苯酚-硫酸显色,用分光光度法测定多糖含量;用PC法检识多糖成分.结果:珍珠梅多糖的浓度与吸光度在1.26~7.56μgmg-1范围内呈良好的线性关系,回归方程为:A=4.4244C-0.1649,r=0.9919.花中多糖含量为5.31%;茎中多糖含量为2.86%.结论:含量测定方法操作简便,灵敏度高,稳定,重现性好.初步判断珍珠梅花中多糖含葡萄糖和戊醛糖;茎中多糖含葡萄糖、鼠李糖、戊醛糖.

  • ITF1-NP通过活化内质网应激CHOP通路抑制大鼠原发性肝癌生长作用

    作者:马子涵;张坤;臧韵;张学武

    [目的]探讨TTF1-NP对大鼠原发性肝癌生长的抑制作用及其机制.[方法]采用二乙基亚硝胺(DEN)间断给药法建立大鼠肝癌模型,行HE染色观察TTF1-NP干预后大鼠肝脏的形态学变化;利用Western Blot技术检测TTF1-NP干预后大鼠内质网应激(ERS) CHOP通路主要调控蛋白的表达情况.[结果] TTF1-NP对大鼠原发性肝癌的生长有抑制作用,随着TTF1-NP质量浓度的升高,GRP78,eIF2α,IRE1表达逐渐增加,而CHOP仅在高剂量组表达增加.[结论]TTF1-NP可通过活化ERS的CHOP通路抑制DEN诱发的大鼠原发性肝癌的生长.

  • 珍珠梅对四氯化碳致肝损伤大鼠自由基的影响

    作者:张学武;金海玲;赵红;陈丽艳;孙权

    珍珠梅(Sorbaria sorbifolia)属蔷薇科植物,又称"山高粱"、"八木条",广泛分布于云南、贵州、四川、湖北、甘肃、宁夏及东北,有活血化瘀、消肿止痛作用,用于骨折及跌打损伤的治疗[1],80年代初期研究发现珍珠梅水提物有抗缺氧作用[2],我们曾研究过珍珠梅乙酸乙酯提取物对亚硝酸钠和四氯化碳所致急性肝损伤具有保护作用[3].本次实验研究珍珠梅对四氯化碳致肝损伤大鼠自由基的影响.

  • 萃取-紫外分光光度法测定珍珠梅总黄酮的含量

    作者:杨平传;张海英;董明;张乐华;于敬海

    珍珠梅(Sorbaria sorbifolia),又名山高粱,为蔷薇科灌木,生于村边、山谷、溪旁[1].

  • 珍珠梅提取物对化学致癌前病变大鼠抗氧化活力的影响

    作者:张学武;孙权;金明;朴春梅;李莲花

    目的研究珍珠梅乙酸乙酯提取物对二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)致癌前病变大鼠抗氧化活力的影响.方法给动物灌胃给药,用DEN制备大鼠化学致癌初期模型.用比色分析法测定大鼠血清、肝匀浆超氧化歧化酶(superoxidedismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)及丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glu-tathione,GSH)的含量.结果珍珠梅乙酸乙酯提取物能显著升高DEN致癌初期大鼠血清、肝匀浆SOD、GSH-PX的活性,升高GSH及降低MDA的含量.结论珍珠梅乙酸乙酯提取物对DEN致癌前病变大鼠的抗氧化活力有升高作用.

  • 河南产珍珠梅花蕾和花的挥发性成分研究

    作者:姬志强;王金梅;孙磊

    目的:研究河南产珍珠梅花蕾和花的挥发性成分.方法:采用顶空固相微萃取和气质联用技术(HS-SPME-GC-MS),首次分析了河南产珍珠梅花蕾和花的挥发性成分.结果:从花蕾中鉴定了44种组分,从花中鉴定了36种组分.其中有32种组分二者是相同的.结论:珍珠梅花在开放的过程中,其内部化学物质的代谢基本稳定.

  • 珍珠梅醋酸乙酯提取物对荷瘤小鼠免疫功能影响

    作者:迟艳;马冬杰;张学武;林冬岩

    目的 观察珍珠梅醋酸乙酯提取物对荷瘤小鼠免疫功能影响.方法 45只H22荷瘤小鼠随机分为珍珠梅醋酸乙酯提取物大、中、小剂量组、对照组和环磷酰胺组,共5组.观察珍珠梅醋酸乙酯提取物对荷瘤小鼠体质量的影响,计算抑瘤率,测定胸腺、脾脏指数及吞噬百分率及吞噬指数;MTT比色法测定脾淋巴细胞增殖能力及NK细胞活性.结果 珍珠梅醋酸乙酯提取物组小鼠体重无明显变化,对肿瘤的抑制率分别为49.0%、45.0%、36.2%.胸腺、脾脏指数,吞噬功能,脾淋巴细胞增殖能力及NK细胞活性明显增强,与对照组比较有显著性差异(P<0.05或P<0.01).结论 珍珠梅醋酸乙酯提取物可以抑制肿瘤的生长,提高荷瘤小鼠免疫功能可能是作用机制之一.

  • 5,2',4'-三羟基-6,7,5'-三甲氧基黄酮通过线粒体途径诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡

    作者:金香子;张学武

    目的 探讨5,2’,4’-三羟基-6,7,5’-三甲氧基黄酮(5,2',4’- trihydroxy -6,7,5 '-trimethoxyflavone,TTF1)诱导人肝癌HepG -2细胞凋亡的诱导作用及机制.方法 TTF1作用HepG -2细胞后,采用流式细胞术测定细胞周期及凋亡率,采用Western blot检测bcl-2、bax、cyt -c、caspase-3和caspase-9蛋白表达.结果 TTF1能够抑制人肝癌HepG -2细胞增殖、诱导凋亡.Western blot结果显示,TTF1明显降低bcl -2 mRNA及蛋白表达,增加bax、胞质cyt -c、caspase-3和caspase-9 mRNA及蛋白表达.结论 TTF1可以通过线粒体途径诱导人肝癌HepG -2细胞发生凋亡.

  • 珍珠梅黄酮纳米粒通过抑制Akt/mTOR信号通路诱导肝癌细胞凋亡的研究

    作者:冯海一;张璇;孟繁平;张学武

    目的 探讨珍珠梅黄酮纳米粒对人肝癌SMMC-7721细胞体外生长的抑制作用及其作用机制.方法 不同浓度的珍珠梅黄酮纳米粒(40,80,120μmol·L-1)处理SMMC-7721细胞后,采用MTT法检测珍珠梅黄酮纳米粒对SMMC-7721细胞增殖的抑制作用;Hoechst染色法观察SMMC-7721细胞凋亡的形态学变化;利用Annexin/PI双标记法检测细胞凋亡率;Western blot检测SMMC-7721细胞中Akt,mTOR,p-Akt,p-mTOR及active-caspase3蛋白表达.结果 珍珠梅黄酮纳米粒能显著抑制SMMC-7721细胞增殖,诱导细胞凋亡,具有剂量依赖性;显著降低p-Akt和p-mTOR蛋白表达.结论 珍珠梅黄酮纳米粒具有抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖及诱导凋亡的作用,其作用机制可能与抑制Akt/mTOR信号通路有关.

  • 珍珠梅黄酮纳米粒通过活化内质网应激的Caspase通路抑制大鼠原发性肝癌的生长

    作者:管宇;刘炳彤;臧韵;柳明洙

    目的 探讨珍珠梅黄酮纳米粒(TTF1-NP)对大鼠的原发性肝癌生长的抑制作用及机制.方法 通过二乙基亚硝胺(DEN)间断给药法建立原发性大鼠肝癌模型;HE染色比较TTF1-NP作用后大鼠肝脏的形态学变化,利用Western Blot检测大鼠肝脏内质网应激的Caspase通路相关蛋白的变化.结果 HE染色结果显示,TTF1-NP能减轻大鼠原发性肝癌肝脏的病理学变化,增加p-IRE1、TRAF2、Caspase-12和Caspase-3蛋白的表达,且有一定的浓度依赖性.结论 TTF1-NP可以通过活化内质网应激的Caspase通路抑制DEN诱发大鼠原发性肝癌的生长.

  • 珍珠梅黄酮纳米粒诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的实验研究

    作者:刘延祥;肖斌;张学武

    目的 探讨珍珠梅黄酮纳米粒对人肝癌HepG-2细胞凋亡的影响.方法 采用MTT法观察不同时间(24,48,72h)、不同浓度(50,100,200 μmol/L)的珍珠梅黄酮纳米粒对人肝癌细胞(HepG-2,Hep3B,PLC/PRF/5)及人正常肝细胞(Chang Liver)的增殖抑制作用;利用光学、荧光和透射电子显微镜观察HepG-2细胞凋亡,并应用流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 MTT法检测细胞增殖抑制结果显示:不同浓度的珍珠梅黄酮纳米粒对人肝癌细胞(HepG-2,Hep3B,PLC/PRF/5)及人正常肝细胞(Chang Liver)均有不同程度的抑制作用,对人肝癌HepG-2细胞抑制明显;形态学检测结果显示:珠梅黄酮纳米粒干预HepG-2细胞48 h后,细胞出现明显的凋亡;流式细胞术检测阴性对照组、5-Fu阳性对照组及不同浓度珍珠梅黄酮纳米粒干预组(50,100 μmol/L)凋亡率分别为为4.9%,89.6%,50.0%,86.2%.结论 珠梅黄酮纳米粒可以抑制人肝癌HepG-2生长并诱导其凋亡.

  • 珍珠梅提取物对S180小鼠血管内皮生长因子及血管生成素蛋白-1表达的影响

    作者:陈丽艳;柳明洙;张琚;张学武

    目的 研究珍珠梅水提物对S180荷瘤小鼠体内血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素蛋白-1(Ang-1)蛋白表达的影响.方法 取60只小鼠复制S180荷瘤模型,随机分成5组:珍珠梅水提取物大、中、小剂量组,对照组,环磷酰胺组.观察珍珠梅水提取物对S180荷瘤小鼠的抑制率;应用免疫杂交方法检测肿瘤组织中VEGF、Ang-1蛋白的表达.结果 珍珠梅水提取物对S180荷瘤小鼠有明显的抑制作用(P<0.05),免疫杂交结果显示,珍珠梅水提取物可以明显降低VEGF蛋白在肿瘤组织中的表达(P<0.05);Ang-1的表达在各组中无显著性差异.结论 珍珠梅水提物可以抑制S180荷瘤小鼠的肿瘤生长,下调VEGF蛋白在肿瘤组织中的表达,抑制肿瘤血管生成.

  • 长白山珍珠梅化学成分的研究(Ⅱ)

    作者:全红梅;张学武

    目的研究长白山珍珠梅茎、叶、花的化学成分.方法用硅胶柱色谱法分离纯化,薄层色谱和波谱法进行结构鉴定.结果从珍珠梅中分离3种化合物,经理化及波谱数据分析确定为:芦丁(Ⅰ),槲皮素(Ⅱ), 5,7-二羟基-8-甲氧基黄酮(Ⅲ).结论化合物Ⅰ、Ⅱ是首次从珍珠梅中分离获得.

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