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六味地黄方及配伍对去势雌性大鼠动脉粥样硬化模型的作用
目的 探讨六味地黄方(熟地黄,山药,泽泻等)及其配伍对更年期动脉粥样硬化模型大鼠的影响.方法 用健康雌性大鼠,假手术组切除双侧卵巢下方少量脂肪,其余动物切除双侧卵巢,以高脂饲料喂养并灌胃给予维生素D3复制大鼠更年期动脉粥样硬化模型.30 d后,将总胆固醇＞5～10 mmol/L的大鼠随机分为6组:模型组、苯甲酸雌二醇组、六味地黄方组、熟地/泽泻组、山茱萸/丹皮组、山药/茯苓组,灌胃给药.油红染色检测血管病变程度,放免法检测血中6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)、血栓烷素B2(TXB2)、炎性相关因子C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子α (TNF-α)、白介素6(IL-6)水平,免疫组化和Western blot法检测大鼠主动脉雌激素膜受体GPR30的表达.结果 六味地黄方及其配伍能够不同程度地减轻模型大鼠血管病变,改善血中6-keto-PGF1α和TXB2平衡,降低血中炎性因子表达,升高主动脉雌激素膜受体GPR30表达.结论 六味地黄方具有治疗更年期动脉粥样硬化的作用,各药对相互配伍协同阻止动脉粥样硬化的形成.
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六味地黄方超微细粉的有效成分熊果酸与丹皮酚溶出特性的研究
目的:对六味地黄超微细粉体的化学成分溶出特性进行考察.方法:应用HPLC图谱考察两种粉体提取时化学成分溶出特性的异同;对比考察六味地黄细粉及超微粉中目标成分熊果酸及丹皮酚的含量、溶出特性.结果:两种粉体甲醇提取液HPLC在相同保留时间有相同吸收峰,但峰值有明显差异;超微粉中熊果酸及丹皮酚的含量分别较细粉高出44.55%和7.6%.结论:六味地黄方经超微粉碎后,其化学成分的组成没有明显变化,但溶出速度及溶出量均明显提高.
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六味地黄方的免疫、抗肿瘤药理研究
六味地黄丸(汤)系宋、钱乙在《小儿药证直诀》中首创,由熟地、山萸肉、山药、丹皮、茯苓、泽泻配伍组成,经历年临床实践验证成为滋补肾阴的代表名方.国内对其药理作用的研究不断深入,现将本方免疫与抗肿瘤药理研究的概况、进展予以综述.
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六味地黄方在大鼠及家兔体内的吸收入血成分的研究
目的 对六味地黄方在大鼠及家兔体内的吸收入血成分进行研究.方法 采用HPLC-DAD法对六味地黄方给药前后的化学成分进行了比较研究,建立了给药前后大鼠及家兔药物血清的HPLC色谱分析方法;以对照品对照的方法,分析比较给药前后六味地黄方吸收入血成分.结果 口服六味地黄方从大鼠血清和家兔血清中均发现了多个入血成分,其中马钱素、莫诺苷、丹皮酚成分能够被动物体以原型形式吸收入血,可检测到原型药物成分,还发现了多个为新产生的代谢产物.结论 血中吸收入血成分及代谢产物将成为六味地黄方的体内直接作用物质,将有助于阐明六味地黄方的有效成分及作用机理.
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中药生药材细粉制颗粒压片影响因素的考察
中药片剂制备多采取提取浸膏制颗粒压片,但是,浸膏粘度大,需添加大量赋形剂,同时,一若选择粘合剂不当,也会增加制颗粒的难度[1,2].尝试采用细粉制颗粒压片以解决上述问题.本文选择由熟地黄、山茱萸、山药、茯苓、牡丹皮与泽泻组成的经典六味地黄方作为多味药材方剂的模型药物进行研究.辅料种类针对填充剂、粘合剂、润滑剂、崩解剂以及原填比例等,采用正交设计,以颗粒的粒度、休止角、片剂外观、重量差异、崩解时限及硬度等主要指标进行多指标综合评分,对六味地黄方生药材细粉制颗粒压片成型影响因素进行研究.
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六味地黄方对高脂血症大鼠血浆ET、TXA2、PGI2水平及动脉内皮保护的影响
目的:研究六味地黄方对高脂血症大鼠血浆ET、TXA2、PGI2水平及动脉血管内皮保护的影响.方法:通过高脂饮食建立高脂血症大鼠模型,观察大鼠外周循环内皮细胞(CEC)、主动脉病理学、内皮素(ET)、前列腺素I2(PGI2)、血栓素A2 (TXA2)的变化.结果:六味地黄方能减少高脂血症大鼠外周CEC及主动脉内皮细胞损伤;降低高脂大鼠血清ET、血浆TXA2,升高血浆PGI2水平.结论:六味地黄方对高脂血症大鼠内皮细胞具有保护作用,其作用机制可能与改善内皮细胞分泌功能有关.
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六味地黄方含药血清对H2O2致HUVECs损伤的保护作用
目的 研究六味地黄方(LWDHF)含药血清对过氧化氢(H2O2)损伤的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)的保护作用,并阐明其可能的机制.方法 采用400 μmol·L-1 H2O2复制HUVECs损伤模型,LWDHF含药血清分为3个剂量干预组(体积分数为5%、10%、20%);MTT法测定细胞活力,Hoechst染色荧光显微镜观察细胞凋亡形态,Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞仪检测细胞凋亡情况,RT-PCR法检测Bax、Caspase-3等基因mRNA表达,Western blot法检测Caspase-3、Bax等蛋白表达.结果 LWDHF含药血清能明显促进H2O2损伤后的HUVECs增殖;Hoechst染色和Annexin V-FITC/PI双染法结果均显示LWDHF含药血清抑制血管内皮细胞凋亡;RT-PCR和Western blot结果提示LWDHF抑制H2O2所致的血管内皮细胞凋亡可能是通过降低Caspase-3、Bax mRNA和蛋白的表达,升高Bcl-2 mRNA和蛋白表达实现的.结论 LWDHF含药血清可以抑制H2O2诱导的细胞凋亡,对血管内皮细胞具有一定的保护作用.
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六味地黄方体外对人正常黑素细胞中褪黑素合成限速酶ANNAT、HIOMT活性的影响
目的 观察六味地黄方对体外培养的人正常黑素细胞中ANNAT、HIOMT活性的影响.方法 体外培养人正常黑素细胞,CCK-8法测药物法测定不同浓度的六味地黄方含药血清对黑素细胞增殖的影响,实时荧光PCR定量法测定不同浓度的六味地黄方含药血清对黑素细胞中ANNAT、HIOMT活性的影响.结果 六味地黄方对于黑素细胞的增殖药物剂量的增加先促进了黑素细胞的增殖,在中剂量达到高(P＜0.05),继而高剂量组药物抑制其生长(P＜0.05).AANAT活性在低剂量组及中剂量组表达下调,与低中剂量促进黑素细胞增殖情况一致.分析结果表明,六味地黄方体外对黑素细胞增殖与AANAT活性存在相关性,且差异有统计学意义(P＜0.05).但六味地黄方含药血清对黑素细胞各用药剂量组HIOMT的mRNA含量无明显变化.结论 AANAT的活性在六味地黄方体外对黑素细胞影响的过程中可能起到限制性调节作用.
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六味地黄方实验研究进展
六味地黄丸出自宋*钱乙<小儿药证直诀>.方中用熟地滋肾填精为主,辅以山萸肉养肝肾而涩精,又配茯苓淡渗健脾,泽泻清泻肝火,并制山萸肉之温.本方组方严谨,三补三泻,滋补而不留邪,降泄而不伤正,是通补开合的代表方.本文就近十多年来有关六味地黄丸(汤)及其拆方的实验研究文献作了综述.
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六味地黄方现代药理研究及临床应用新进展
六味地黄丸始出于宋代医家钱乙<小儿药证直诀>,方中六味,"三补"(熟地、山药、山茱萸)、"三泻"(泽泻、茯苓、丹皮).原为治疗小儿因肝肾不足而出现的各种临床证候而设立,后经历代医家发展与创新进而广泛地应用于临床各科.其剂型也由传统丸剂发展成汤、口服液、胶囊剂、颗粒剂、浓缩丸等剂型之六味地黄方系列药物.<中国药典>2000版,所载其滋阴补肾,用于肾阴亏损、头晕耳鸣、腰膝酸软、骨蒸潮热、盗汗、遗精、消渴.随着其多方面药理作用研究成果的取得,临床应用也取得了较好的疗效.
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基于雌激素及其相关受体的六味地黄方异病同治原理的研究构想
“异病同治”是中医一个非常重要的治疗理论,把传统中医理论与现代化研究手段相结合,对于发展传统中医药有着非常重要的意义.通过前期的文献查阅,发现滋补肾阴的经典名方六味地黄方所具有的药理活性与雌激素及其相关受体所介导的生理功能有许多相似性,因此认为“肾精亏损”的病机可能与雌激素及其相关受体功能紊乱有着直接的关系.由此提出“基于雌激素及其相关受体的六味地黄方异病同治机理研究构想”,以期为异病同治的研究提供一定的参考,并进一步阐释“肾精亏损”的科学内涵.
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六味地黄方超微饮片含药血清对大鼠前脂肪细胞的影响
目的 探讨六味地黄方超微饮片含药血清对大鼠前脂肪细胞增殖与分化的影响.方法 原代培养大鼠前脂肪细胞,用四甲基偶氮唑盐(MTI)方法检测六味地黄方超微饮片合药血清对前脂肪细胞的增殖情况,以酶组织化学法检测其对前脂肪细胞分化过程中的磷酸甘油脱氢酶(GPDH)的影响,油红O染色方法测定其对细胞内脂肪积聚的影响.结果 10.0%、5.0%、2.5%浓度的六味地黄方超微饮片含药血清对大鼠前脂肪细胞增殖的影响与空白血清比较,差异均有统计学意义(P<0.05).10.0%、5.0%浓度的六味地黄方超微饮片含药血清对大鼠前脂肪细胞分化过程中脂肪积聚的影响,与空白血清比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 六味地黄方超微饮片能促进大鼠,前脂肪细胞的增殖,抑制大鼠前脂肪细胞的分化.
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六味地黄方含药血清对酪氨酸酶活性的影响
目的:观察六味地黄方含药血清对酪氨酸酶活性的影响.方法:制备含药血清,采用多巴色素法测定不同浓度不同时间含药血清对酪氨酸酶活性的影响.结果:低浓度的含药血清(10%、20%)对酪氨酸酶的活性呈现促进作用,且随时间变化而逐步增强(P<0.05),其中以含药血清浓度为20%,测量时间在6min时,测试组对酪氨酸酶的激活率高(P<0.01);而当高浓度(40%、80%)时酪氨酸酶激活率呈现先抑制后促进的双向调节作用(P<0.05);当含药血清浓度为80%,测量时间在3min时,测试组对酪氨酸酶的抑制率高(P<0.01).结论:不同浓度六味地黄方含药血清对酪氨酸酶活性呈现双向调节作用.
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不同剂型六味地黄方含药血清对大鼠前脂肪细胞增殖与分化的影响
目的:比较六味地黄方各剂型(汤、丸、超微饮片)对大鼠前脂肪细胞增殖与分化的影响.方法:原代培养大鼠前脂肪细胞,用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法检测六味地黄方含药血清对大鼠前脂肪细胞的增殖情况,以酶组织化学法检测其对前脂肪细胞分化过程中的磷酸甘油脱氢酶(GPDH)的影响,油红O染色方法测定其对细胞内脂肪积聚的影响.结果:10%以内六味地黄方含药血清对大鼠前脂肪细胞的增殖有促进作用;对分化过程中的GPDH的升高有抑制作用;而对于分化过程中的脂肪积聚则有促进分解的作用.结论:六味地黄汤、丸、超微饮片能促进大鼠前脂肪细胞的增殖,抑制其分化过程中的GPDH的升高和脂肪积聚;上述各作用皆以高剂量组为佳.
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六味地黄方不同剂型中多糖含量的比较研究
目的：研究分析六味地黄方不同剂型中多糖含量。方法自制六味地黄浓缩丸、六味地黄片、六味地黄蜜丸、六味地黄汤剂、六味地黄胶囊做供试品，以分析纯无水葡萄糖做标准对照品，采用苯酚-硫酸法测定其活性多糖含量，对比分析结果。结果当葡萄糖含量在60.10～180.30μg时，与吸光度有较好的线性关系。在此范围内，六味地黄方不同剂型的多糖含量差异较大，其中大蜜丸和片剂含量较高，汤剂较低。结论六味地黄方不同剂型中多糖含量具有一定的差异。
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固相萃取HPLC法研究六味地黄方中马钱素和莫罗苷的血药浓度及配伍变化
目的 建立测定六味地黄方中有效成分马钱素(loganin)和莫罗苷(morroniside)大鼠血清浓度的固相萃取HPLC法;研究大鼠灌胃给予六味地黄方后血清中马钱素和莫罗苷的浓度变化.方法 血清样品经C18固相萃取柱提取后,采用HPLC法测定给药前后大鼠药物血清中马钱素和莫罗苷的浓度,并对该方法进行方法学考察.结果 血清中内源性物质不干扰样品中马钱素和莫罗苷的测定,马钱素和莫罗苷的线性关系良好,相关系数分别为0.9998,0.9998,方法回收率在95%～105%,提取回收率均大于75%,日内精密度和日间精密度均小于12%.结论 该方法具有灵敏、快速的优点,可满足不同配伍六味地黄方有效成分在大鼠体内药代动力学研究的要求.不同配伍对药物血清中有效成分的吸收有一定影响.
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5-HTs/褪黑素能系统在六味地黄方体外调节黑素代谢中的作用
目的：观察六味地黄方对体外培养的人正常黑素细胞及与角质形成细胞共培养模型中细胞增殖，及5-HTs、MT含量及合成限速酶ANNAT、HIOMT活性的影响。方法体外培养人正常黑素细胞和角质形成细胞，角质细胞与黑素细胞共同培养体系的构建，CCK-8检测不同浓度的六味地黄方含药血清对黑素细胞及和角质细胞共同培养体系细胞增殖的影响，高效液相色谱法检测5-HT含量和MT含量，RT-QPCR分析AANAT、HIOMT的活性的影响。结果对于人正常黑素细胞与角质形成细胞共培养模型低浓度的含药血清对细胞增殖无影响，中高浓度的六味地黄方含药血清可以抑制共培养模型中细胞的增殖，特别是含药血清浓度为40%时对细胞增殖有显著抑制作用（P<0.05）；5-HT、MT含量均随含药血清浓度增加含量递减（P<0.05），浓度为40%则明显减少（P<0.01）；六味地黄方低中浓度含药血清对共培养模型中AANAT表达下调，呈浓度剂量依赖性的降低，有统计学意义（P<0.05）；但六味地黄方含药血清对黑素细胞各用药剂量组HIOMT的mRNA含量无明显变化。结论5-HTs/MTs能系统可能是六味地黄方发挥调节黑素代谢的中介物质基础，主要通过5-HTs、MT及合成限速酶ANNAT来进行调控。
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六味地黄方对体外培养的人正常黑素细胞增殖及黑素合成的影响
目的 观察六味地黄方对体外培养的人正常黑素细胞增殖及黑素合成的影响.方法 体外培养人正常黑素细胞,MTT法测定不同浓度的六味地黄方含药血清对黑素细胞增殖的影响,NaOH法测定不同浓度的六味地黄方含药血清对黑素合成的影响.结果 中低浓度(5%～15%)的六味地黄方对黑素细胞增殖无影响(P0.05),高浓度(20%～30%)的六味地黄方可以抑制黑素细胞增殖,特别是浓度为30%时对黑素细胞生长有显著抑制作用(P<0.01).而浓度为10%～15%时可以促进黑素细胞黑素生成的增加(P<0.05),其中15%的浓度作用显著(P(0.01);浓度为20%时对黑素细胞黑素合成无影响(P0.05),高浓度(25%～30%)的含药血清对黑素细胞黑素生成的影响呈显著抑制作用(P<0.01).结论 六味地黄方对体外培养的人正常黑素细胞增殖及黑素合成因浓度不同而量.效关系不同,这可能是六味地黄方既可以用于治疗黄褐斑.义可以治疗白癜风的机制之一.
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六味地黄方对高脂血症大鼠血管内皮细胞的保护作用
目的:研究六味地黄方对高脂血症大鼠血管内皮细胞的保护作用.方法:高脂饮食建立高脂血症大鼠模型,观察大鼠血脂、血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)及外周血循环内皮细胞(CEC)的变化.结果:高脂模型组血清TC、TG、LDL-C、MDA、CEC均明显升高,HDL-C、SOD、NO、NOS显著下降;六味地黄方可降低模型大鼠血清TC、TG、LDL-C、MDA、CEC,升高HDL-C、SOD、NO、NOS.结论:六味地黄方具有调节脂质代谢、抗脂质过氧化反应、升高NO水平,保护血管内皮细胞的作用.
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六味地黄方药物血清对血管内皮细胞胞内Ca2+的影响
目的:探讨六味地黄方药物血清保护血管内皮细胞的分子机制.方法:取人脐静脉内皮细胞(HUVEC),用脂多糖(LPS)造成凋亡细胞模型,通过激光共聚焦显微镜观察六味地黄方药物血清对胞内Ca2+的影响.结果:六味地黄方药物血清可明显缓解其所致的钙超载.结论:六味地黄方药物血清有抗HUVEC凋亡作用,其防治血栓性疾病的机理可能与其缓解细胞钙超载有关.
