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活血通络汤在激素性股骨头缺血性坏死兔造模过程中对VEGF、 BGP和DLL4的影响
目的:研究活血通络汤在SANFH兔造模过程中对Delta样配体4(DLL4)、骨钙素(BGP)、血管内皮生长因子(VEGF)水平的影响.方法:将192只日本大耳兔随机分为模型组A、模型组B、模型对照组C、空白对照组D,各48只,A、B、C组运用贺西京造模法造模.A组第2周开始喂服中药饲料,B组第3周开始喂服中药饲料,C、D组均喂服等量普通饲料.分别于第2、5、8周末检测血中DLL4、BGP、VEGF的水平,同时做股骨头病理镜检,计算空骨陷窝率.结果:第8周时,C组VEGF浓度比D组明显低(P＜0.01),即VEGF表达明显减弱,A组VEGF浓度比C组高(P＜0.05),即VEGF表达增强,B组VEGF浓度比C组高(P＞0.05),差异无统计学意义;第8周时,A、B组BGP浓度比C组明显高(P＜0.01),表示成骨细胞分泌BGP明显增加.A组、B组、C组、D组的DLL4表达值在2、5、8周呈递增趋势;第8周时,A组、B组DLL4表达值低于C组(P＞0.05),差异无统计学意义,A组的增长幅度比C组大;第8周,C组空骨陷窝率明显高于D组(P＜0.01),即骨坏死明显加重,A组、B组空骨陷窝率明显低于C组(P＜0.01),即骨坏死明显减轻.结论:激素可明显抑制VEGF的表达,活血通络汤可上调DLL4表达水平,促进VEGF的表达,提高BGP的含量,从而促进骨坏死的修复,对干预SANFH有显著疗效.
关键词： 活血通络汤 激素性股骨头缺血性坏死 Delta样配体4 血管内皮因子 骨钙素 -
基于中医传承辅助系统的毕荣修教授治疗激素性股骨头坏死处方规律探析
目的:分析毕荣修教授门诊及病房治疗激素性股骨头缺血性坏死(SANFH)方剂的处方规律.方法:收集并严格筛选毕荣修教授治疗SANFH的方剂,使用中医传承辅助系统(v2.5)软件进行逐一录入并进行数据处理,对筛选出的治疗SANFH的方剂,进行处方规律分析.结果:筛选出符合要求的61首治疗SANFH的处方,确定了处方中药物出现的常用药物和4味核心药物以及6首新处方等.结论:治疗SANFH应以补养肝肾、活血化瘀为主要治法,并根据不同兼证,酌情配伍具有行气止痛、益气养阴、接骨续筋等功效的药物,以达到标本同治的目的.中医传承辅助系统对于分析名中医处方用药规律具有科学性、实用性,能够客观全面地总结分析名中医的临证经验,对于中医药的传承与发展具有重大意义.
关键词： 激素性股骨头缺血性坏死 中医传承辅助系统(V2.5) 处方规律 毕荣修 -
活血通络汤在家兔激素性股骨头缺血性坏死模型中对Notch1、DLL3和HERP1的影响
目的:研究活血通络汤对家兔激素性股骨头缺血性坏死造模过程中Notch1、DLL3和HERP1的影响.方法:将192只日本大耳兔随机分为预防治疗组(A组)、治疗组(B组)、模型对照组(C组)、空白对照组(D组),每组48只,A、B、C组运用贺西京造模法造模.A组第2周开始喂服中药饲料,B组第3周开始喂服中药饲料,C、D组均喂服等量普通饲料.于第2、5、8周末检测血Notch1、DLL3和HERP1 mRNA表达水平,同时做股骨头病理镜检,计算空骨陷窝率.结果:Notch1、DLL3和HERP1表达值各组间比较不同时间段分析及空骨陷窝率分析具有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论:活血通络汤可限制Notch1和HERP1的表达,下调DLL3表达水平,降低空骨陷窝率,促进骨坏死的修复.
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骨复活汤和介入治疗激素性早期股骨头坏死的临床研究
目的:观察骨复活汤和介入治疗激素性股骨头缺血性坏死国际分期法Ⅰ期的临床疗效.方法:自拟骨复活汤和介入治疗Ⅰ期26例,与仙灵骨葆和介入治疗Ⅰ期24例作对比.结果:治疗组36例髋,总有效率94.4％；对照组35例髋,总有效率77.1％.2组比较有显著性差异(P＜0.05),治疗组分期及对照组分期分别与疗效比较均有极显著性差异(P ＜0.005).结论:骨复活汤和介入治疗优于仙灵骨葆和介入治疗早期激素性股骨头缺血性坏死的疗效,分期与疗效密切相关,早期发现治疗效果较好.
关键词： 激素性股骨头缺血性坏死 骨复活汤 介入治疗 临床研究 -
骨复活汤和髓芯减压术治疗激素性早期股骨头坏死的临床研究
目的:观察骨复活汤和髓芯减压术治疗激素性股骨头缺血性坏死国际分期法工、Ⅱ期的临床疗效.方法:自拟骨复活汤和髓芯减压术治疗工、Ⅱ期41例,与仙灵骨葆和髓芯减压术治疗工、Ⅱ期39例做对比.结果:治疗组59髋,治愈20髋,显效27髋,好转10髋,无效2髋,总有效率96.61%,;对照组56髋,治愈13髋,显效20髋,好转15髋,无效8髋,总有效率85.71%.两组比较有显著性差异(P=0.0206).治疗组分期及对照组分期分别与疗效比较均有极显著性差异(P=0.0001).结论:骨复活汤合髓芯减压术优于仙灵骨葆和髓芯减压术治疗成人早期激素性股骨头缺血性坏死的疗效,分期与疗效密切相关,越早期发现治疗效果越好.因此,早期诊断、早期治疗对本病的疗效至关重要.
关键词： 激素性股骨头缺血性坏死 骨复活汤 髓芯减压术 -
骨复活汤对激素性股骨头坏死细胞凋亡的影响
目的:观察激素性股骨头缺血性坏死(SANFH)骨标本及骨复活汤对SANFH细胞凋亡的影响.方法:采用臀部注射醋酸氢化泼尼松建立兔股骨头骨坏死模型,6周处死取材,采用TUNEL标记法,研究细胞凋亡情况.结果:激素性骨坏死标本上,存在大量凋亡的骨细胞及成骨细胞,模型组与对照组、骨复活汤组及仙灵骨葆组家兔股骨头骨细胞凋亡指数比较均有显著性差异(P<0.05).结论:家兔早期SANFH病程中,骨坏死是通过激素诱导骨细胞及成骨细胞的凋亡和坏死共同作用的结果,骨复活汤在改善家兔SANFH的骨细胞、成骨细胞凋亡及坏死方面有一定作用.
关键词： 骨复活汤 激素性股骨头缺血性坏死 兔 细胞凋亡 原位末端标记检测法 -
活血通络汤对激素性股骨头缺血性坏死模型兔股骨细胞因子表达的影响
目的 探讨活血通络汤治疗激素性股骨头缺血性坏死的可能作用机制.方法 96只日本大耳兔随机分为预防+治疗组、治疗组、模型组、空白组,每组24只.采用臀部肌肉注射醋酸泼尼松龙8 mg/kg方法制备激素性股骨头缺血性坏死模型.从第2周开始,预防+治疗组喂服活血通络汤饲料,其余各组喂服普通饲料,每日1次,连续1周.从第3周开始,预防+治疗组和治疗组均喂服活血通络汤饲料,模型组、空白组均喂服等量普通饲料,每日1次,连续6周.采用免疫组织化学法测定兔股骨组织中碱性磷酸酶(AKP)、骨钙素(BGP)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、转化生长因子β1 (TGF-β1)、骨形态发生蛋白2 (BMP-2)及血小板源性生长因子B(PDGF-B)的表达情况.结果 与空白组比较,模型组股骨组织TGF-β1、bFGF、BGP、BMP-2、PDGF-B含量明显降低,APK含量明显升高(P＜0.05或P＜0.01);与模型组比较,预防+治疗组、治疗组股骨组织TGF-β1、bFGF、BGP、PDGF-B含量明显升高,APK含量明显降低,预防+治疗组BMP-2含量明显升高(P＜0.05或P＜0.01). 结论 活血通络汤可能通过上调骨组织中BGF、TGF-β1、bFGF、PDGF表达,下调APK表达,从而促进骨坏死的修复.
关键词： 激素性股骨头缺血性坏死 活血通络汤 细胞因子 -
中医三联疗法治疗激素性股骨头缺血性坏死的临床疗效观察
目的 探究中医三联疗法对激素性股骨头缺血坏死的临床治疗效果.方法 选取我院2013年2月至2015年5月期间收治的25例激素性股骨头缺血性坏死患者,共30髋.所有患者均采用中医三联治疗方法,比较患者治疗前后VAS以及关节活动度评分.结果 患者治疗前的VAS评分明显高于治疗后,同时关节活动度评分明显少于治疗后,经对比,差异显著,P<0.05,具有统计学意义.结论 采用中医三联疗法治疗激素性股骨头缺血性坏死能够缓解其疼痛,可以有效的改善患者的关节功能,且治疗方法具有安全可靠性,具有临床应用价值.
关键词： 中医三联疗法 激素性股骨头缺血性坏死 临床治疗效果 -
骨复活汤对兔激素性股骨头坏死血浆ET-1、NO的影响
目的:探讨骨复活汤对激素性股骨头坏死模型血浆中内皮素(ET-1)、一氧化氮(NO)含量变化的影响.方法:将32只成年雄性新西兰家兔随机分为对照组、病理模型组、骨复活汤组(15 g/kg)及仙灵骨葆组(0.6 g/kg),采用臀部注射醋酸氢化泼尼松建立股骨头骨细胞坏死模型,每周观察动物,6周处死取材,制作HE病理切片,观察血浆中内皮素、一氧化氮含量变化.结果:模型组家兔与对照组、骨复活汤组及仙灵骨葆组家兔血浆ET-1、NO含量比较,差异有显著性(P＜0.05,P＜0.01).结论:骨复活汤能改善家兔SANFH血管内皮功能.
关键词： 骨复活汤 激素性股骨头缺血性坏死 内皮素 一氧化氮 -
介入配合骨复活汤治疗激素性早期股骨头坏死的疗效观察
目的:观察介入配合骨复活汤治疗激素性股骨头缺血性坏死国际分期法Ⅰ期的临床疗效.方法:介入配合自拟骨复活汤治疗Ⅰ期26例.结果:36例髋中,治愈10髋,显效15髋,好转9髋,无效2髋,总有效率94.4％,分期与疗效比较均有极显著性差异(P ＜0.005).结论:介入配合骨复活汤治疗早期激素性股骨头缺血性坏死的疗效可靠,分期与疗效密切相关,早期发现治疗效果较好.
关键词： 激素性股骨头缺血性坏死 骨复活汤 介入治疗 疗效观察 -
活血通络汤中药对激素性股骨头坏死造模家兔中BMP2和Jagged1表达的影响
目的:探讨中药预防性治疗激素性股骨头坏死(SANFH)的疗效及作用机制.方法:将192只日本大耳兔随机分为模型组A(48)、模型组B(48)、模型对照组c(48)、空白对照组D(48),A组第2周开始喂服中药饲料,B组第3周开始喂服中药饲料,C、D组均喂服等量普通饲料,A、B、C组第3周开始造模,每组分别于第2周末、第5周末、第8周末随机抽取8只取双侧股骨头标本,做病理镜检及计算空骨陷窝率,并采用酶联免疫吸附法(ELISA)对兔血清BMP2的含量进行测定,实时荧光定量PCR(RT-PCR)对兔血清Jagged1蛋白基因表达进行测定.结果:病理镜检及空骨陷窝率显示造模成功,BMP2阳性表达的强度及面积均明显高于造模组,结果有统计学意义(P＜0.05),模型组A、模型组B、模型对照组C的Jagged1均呈上调趋势.结论:①表明活血通络汤中药对股骨头坏死的预防治疗作用确切;②活血通络汤中药可能是通过促进Jagged1的上调并维持股骨头BMP2浓度,共同促进骨修复和血管生成起治疗作用.
关键词： 激素性股骨头缺血性坏死 BMP2 Jagged1 活血通络汤 -
体外震波对激素性股骨头缺血性坏死患者非骨坏死区骨髓间充质干细胞成骨分化的影响
背景:股骨头缺血性坏死涉及股骨近端骨髓祖细胞脂肪化转变.从而导致骨重建修复困难.能否首先通过体外震波疗法体外诱导自体非骨坏死区的骨髓间充质干细胞为成骨细胞前体.然后移植入自体骨坏死区,从而史加利于坏死区的骨重建?目的:观察体外震波对激素性股骨头缺血性坏死患者非骨坏死区骨髓间充质干细胞分化的影响.方法:取激索性股骨头缺血性坏死患者自愿捐赠骨髓,采用密度梯度离心法结合贴壁法体外分离培养骨髓间充质干细胞.将原代骨髓间充质干细胞无血清培养24 h后施以5 kV/500频次体外震波干预10 min.空白对照组未经体外震波干预.结果与结论:体外震波组细胞传代后进入增殖高峰期更早,呈现出成骨分化趋势;空白对照组细胞存在向其他类型细胞多向分化的表现.体外震波组各时间点(除第1天)细胞增殖速度均明显高于空白对照组(P<0.01).体外震波组第24天时碱性磷酸酶平均阳性率约90%.窄白对照组至第36天才上升至约50%.培养20 d茜素红染色示体外震波组矿化结节数为(7.0±1.3)个/视野;空白对照组无明显结节,染色始终为阴性.体外震波组核心结合因子α1 mRNA表达在各时间点(除第3天)均明显强于空白对照组(P<0.01):体外震波组OC mRNA表达在各时间点(除第3、6天)均明显强于空白对照组(P<0.01).结果提示适当强度的体外震波可促进激素性股骨头缺血性坏死患者非骨坏死区骨髓间充质干细胞增殖,并诱导其向成骨细胞方向分化.
关键词： 体外震波 激素性股骨头缺血性坏死 骨髓间充质干细胞 核心结合因子α1 骨钙素 -
碱性成纤维细胞生长因子在激素性股骨头缺血性坏死模型兔体内变化及桃红四物汤的干预
目的:已有研究证实,活血化瘀中药可对抗激素的作用,对激素性股骨头缺血性坏死早期有明显的防治作用.观察桃红四物汤对激素性股骨头缺血性坏死碱性成纤维细胞生长因子表达的影响,进一步阐明活血化瘀法防治激素性股骨头缺血性坏死的机制.方法:实验于2005-04/2006-10在福建中医学院中心实验室完成.①实验材料:健康成年新西兰大白兔60只,雌雄各半,体质量1.8～2.2 kg,清洁级,由福建中医学院实验动物中心购自上海市松江区松联实验动物场.桃红四物汤的组成成分为:桃仁、红花、熟地、当归、白芍、川芎.②实验方法:60只健康成年新西兰大白兔,随机分为正常组6只和实验组54只.实验组采用贺氏造模法建立股骨头缺血坏死模型,6周后处死正常组和实验组各6只,确定造模成功.将造模剩余动物随机分为中药治疗组和激素对照组,每组21只:中药治疗组以桃红四物汤7 mL/kg(浓度为0.75 g/mL)灌胃治疗,1次/d,激素对照组以生理盐水7 mL/kg灌胃治疗,1次/d.③实验评估:于治疗后1,2,4周进行股骨头组织病理学观察,并采用放射免疫法检测血清碱性成纤维细胞生长因子含量变化.结果:纳入新西兰大白兔60只,实验过程中因心脏、脑血管梗死死亡18只,进入结果分析42只.桃红四物汤灌胃治疗1,2,4周后,中药治疗组股骨头局部空骨陷窝数明显减少,与激素对照组比较,差异有显著性意义(P＜0.05),中药治疗组碱性成纤维细胞生长因子表达增强,与激素对照组相比,差异有显著性意义(P＜0.01).结论:桃红四物汤能促进激素性股骨头缺血性坏死模型兔体内碱性成纤维细胞生长因子的表达,明显减少股骨头局部空骨陷窝数,促进坏死股骨头的修复,这可能是活血化瘀法防治激素性股骨头缺血性坏死的机制之一.
关键词： 桃红四物汤 激素性股骨头缺血性坏死 bFGF 修复 -
骨形态发生蛋白2联合突变型低氧诱导因子1α修复激素性股骨头缺血性坏死
背景:骨形态发生蛋白2是目前发现的唯一的一种可单独诱导骨形成的生长因子,但是研究发现骨形态发生蛋白2单一基因的促血管生成作用较弱,无法在新生骨组织处产生足量的毛细血管,所以在诱导骨形成过程中还需要与其他诱导因子协同作用.低氧诱导因子1α在促进新生血管的形成方面有重要作用.目的:观察腺病毒介导的人骨形态发生蛋白2联合突变型低氧诱导因子1α(Ad-BMP-2-IRES-HIF-1αmu)转染骨髓间充质干细胞对激素性股骨头缺血性坏死的修复作用.方法:①转染Ad-BMP-2-IRES-HIF-1αmu到骨髓间充质干细胞,检测碱性磷酸酶活性、钙结节茜素红染色检测其成骨能力;②建立激素性股骨头缺血性坏死兔模型,随机分为3组:实验组股骨坏死部位移植转染Ad-BMP-2-IRES-HIF-1αmu的骨髓间充质干细胞;对照组移植未转染的骨髓间充质干细胞;空白组移植细胞培养液.移植8周后,Westen blot法检测骨形态发生蛋白2和低氧诱导因子1α蛋白表达;苏木精-伊红染色组织学观察股骨头缺血性坏死修复情况;墨汁灌注透明切片血管形态学观察股骨头缺损区域血管生成情况.结果与结论:①转染Ad-BMP-2-IRES-HIF-1αmu的骨髓间充质干细胞的碱性磷酸酶活性和钙结节数量均高于未转染的细胞,说明转染Ad-BMP-2-IRES-HIF-1αmu能促进骨髓间充质干细胞的成骨分化;②实验组骨形态发生蛋白2和低氧诱导因子1α蛋白表达高于对照组与空白组(P<0.05);移植8周后,实验组缺损区周边观察到明显的成骨反应,与对照组及空白组相比,实验组空骨陷窝率低(P<0.05),骨小梁面积百分比高(P<0.05);墨汁灌注实验显示:实验组出现血管化现象,并出现骨陷窝结构,血管间有清晰的连通脉络相互间构成网络,股骨头下血管分布及血管网的形成基本正常,实验组墨汁灌注血管面积为114.22±3.78,高于对照组(63.78±2.61)和空白组(21.39±3.52),差异有显著性意义(P<0.05);③提示:骨形态发生蛋白2联合突变型低氧诱导因子1α可以促进激素性股骨头缺血性坏死的修复.
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血管内皮生长因子联合突变型低氧诱导因子1α的促血管生成作用
背景:研究表明,血管内皮生长因子的转录翻译过程在许多缺血、缺氧的条件下都会增加,有效改善机体血管形成与侧支微循环.突变低氧诱导因子1α的表达也需要严格的缺氧条件,很大程度上限制了其实际应用.目的:观察腺病毒介导的血管内皮生长因子联合突变型低氧诱导因子1α(Ad-VEGF-IRES-HIF-1αmu)转染内皮祖细胞在激素性股骨头缺血性坏死修复中促血管生成的作用.方法:①转染Ad-VEGF-IRES-HIF-1αmu到内皮祖细胞,观察细胞活性、形态及细胞病变效应;②将转染Ad-VEGF-IRES-HIF-1αmu成功的内皮祖细胞植入激素性股骨头缺血性坏死动物模型的股骨坏死部位(实验组:转染Ad-VEGF-IRES-HIF-1αmu,对照组:内皮祖细胞细胞悬液,空白组:细胞培养液);③移植10周后,检测血管内皮生长因子、低氧诱导因子1α蛋白表达及CD34表达和微血管密度计数;④墨汁灌注透明切片血管形态学观察.结果与结论:①实验组血管内皮生长因子和低氧诱导因子1α蛋白表达高于对照组与空白组(P<0.05);②实验组的CD34表达阳性的微血管数量较多,且相互之间有连接.③实验组动物股骨头血管墨汁染色显示有新的血管生成,部分血管管径良好,有再通现象,血管间有清晰的连通脉络,有效的血管脉络均匀分布在缺损区域;实验组新生血管面积显著高于对照组和空白组(P<0.05);④结果提示,血管内皮生长因子联合突变型低氧诱导因子1α在激素性股骨头缺血性坏死修复中可以增强血管生成作用.
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同种异体骨骨笼结合自体骨移植治疗股骨头坏死患者的护理
股骨头坏死发生的原因很多.主要为创伤性和非创伤性,特别是非创伤性股骨头缺血性坏死好发于中青年,主要因为血管栓塞,骨内压增高,微循环破坏而导致骨坏死,其中以激素性股骨头缺血性坏死较具代表性,各个年龄段均可发病,发病率为15%～40%,如不经治疗将不可避免地出现股骨头塌陷、骨性关节炎而需行人工关节置换术.
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兔激素性股骨头缺血性坏死模型BMSCs超微结构观察
目的 观察兔激素性股骨头缺血性坏死(SANFH)模型中骨髓间充质干细胞(BMSCs)的超微结构变化,探讨SANFH的发生机制.方法 采用马血清加醋酸泼尼松龙制备兔SANFH模型,采用Percoll细胞分离液分离其股骨近端BMSCs,透射电镜观察其超微结构.结果 骨髓内出现大量脂肪滴,其中BMSCs 出现胞核染色质浓缩;胞质中出现大量脂滴及线粒体肿胀.结论 激素导致SANFH的可能机制为通过对血液系统的干扰,影响股骨头内各种细胞的有氧呼吸;又通过干扰BMSCs 的脂类代谢影响骨的修复,终导致股骨头坏死塌陷.
关键词： 激素性股骨头缺血性坏死 骨髓间充质干细胞 超微结构 -
活血通络汤基于Notch信号通路对家兔激素性股骨头缺血性坏死治疗作用机制研究
目的 研究活血通络汤治疗家兔激素性股骨头缺血性坏死的作用机制.方法 将40只日本大耳兔随机分为空白组、模型组、治疗给药组、预防加治疗给药组,每组10只,采用贺西京法制做家兔激素性股骨头坏死模型.预防给药组第2周开始喂服中药饲料,治疗给药组第3周开始喂服中药饲料,模型组和空白组均喂服等量普通饲料.第8周末各实验组耳缘静脉取血,RT-PCR检测白细胞Notch1,Notch2,Notch3,Notch4、DLL1,DLL3,DLL4,Jagged1,Jagged2,Hes1,Hes5,HERP1,HERP2基因表达.同时对股骨头进行病理镜检,计算空骨陷窝率.结果 第8周时,活血通络汤预防给药组和治疗给药组家兔股骨空骨陷窝率显著低于模型组(P＜0.05);相比模型组,预防给药组家兔白细胞Notch1和Notch3 mRNA表达有显著升高(P＜0.05),而Notch2和Notch4 mRNA表达有显著下调(P＜0.05);相比模型组,预防给药组和治疗给药组家兔白细胞Hes1和Hes5 mRNA表达有显著下调(P＜0.05),Jagged1 mRNA表达有显著升高(P＜0.05);预防给药组和治疗给药组家兔白细胞DLL1和DLL4mRNA表达有显著升高(P＜0.05).结论 活血通络汤通过早期作用于Notch1或其它成员导致其表达发生变化,从而激活Notch如Notch1-DLL1信号传导通路,而增加Notch1胞内NICD的表达,促进下游靶基因的转录表达,促进血管生成,从而参与对骨细胞增殖的调控,进而促进新骨生成.
关键词： 活血通络汤 激素性股骨头缺血性坏死 Notch信号通路 -
早期激素性股骨头坏死的细胞凋亡研究
目的:观察细胞凋亡在SANFH骨标本上的存在情况.方法:采用TUNEL标记法,研究SANFH股骨头局部细胞凋亡情况.结果:激素性骨坏死标本上,存在大量凋亡的骨细胞及成骨细胞,模型组与对照组家兔股骨头骨细胞凋亡指数比较,有显著性差异(P＜0.01),模型组与对照组家兔股骨头空骨陷窝率比较,有显著性差异(P＜0.01).结论:家兔SANFH病程中,骨坏死是通过激素诱导骨细胞及成骨细胞的凋亡和坏死共同作用的结果方式进行的.
关键词： 激素性股骨头缺血性坏死 兔 细胞凋亡 原位未端标记检测法 实验研究 -
ROS/PARP-1/AIF信号通路在糖皮质激素诱导的MC3T3-E1细胞凋亡过程中的作用研究
目的 通过用地塞米松诱导小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)的凋亡,建立激素性股骨头坏死的细胞模型,探讨抗氧化剂(N-乙酰-L-半胱氨酸,NAC)和钙蛋白酶的抑制剂(PD151746)对MC3T3-E1细胞抑制凋亡的作用和可能机制的研究.方法 CCK-8检测NAC和PD151746不同药物浓度对MC3T3-E1细胞增殖的影响,选择合适的药物浓度.细胞分组:正常组(10％ FBS),激素组(地塞米松1×10.6 mol/L),NAC组(NAC1 mmol/L+地塞米松1×10-6 mol/L)和PD151746组(简称PD组,PD 10 μmol/L+地塞米松1×10-6 mol/L),流式细胞仪检测细胞凋亡率和ROS含量,激光扫描共聚焦显微镜检测各组ROS荧光强度和钙离子荧光强度,Westernblot测定细胞蛋白AIF、PARP-1和Cyt-c的表达水平.结果 CCK-8结果显示,NAC和PD151746的实验浓度分别取1 mmol/L和10 μmol/L.流式细胞仪检测凋亡率结果显示,激素组、NAC组和PD组的凋亡率与正常组比较,差异有统计学意义(P＜0.05),激素组与NAC组、PD组比较差异有统计学意义(P＜0.05).流式细胞仪和激光扫描共聚焦显微镜检测各组ROS含量,结果显示激素组荧光强度高,与NAC组和PD组比较明显增高(P＜0.05),其他三组与正常组比较差异也具有统计学意义(P＜0.05).激光扫描共聚焦显微镜检测钙离子荧光强度,与NAC组和PD组比较明显增高(P＜0.05),其他三组与正常组比较差异也具有统计学意义(P＜0.05).Western blot检测各组AIF、PARP-1和Cyt-c的表达水平,激素组、NAC组和PD组的凋亡率与正常组比较,差异有统计学意义(P＜0.05),激素组与NAC组、PD组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 NAC能抑制地塞米松诱导的ROS产生,PD151746能有效抑制钙蛋白酶的活性,抑制PAPR-1/AIF的释放,抑制成骨细胞凋亡,ROS/PARP-1/AIF通路参与了地塞米松诱导MC3T3-E1细胞的凋亡过程.
关键词： 激素性股骨头缺血性坏死 凋亡 信号通路 N-乙酰-L-半胱氨酸 PD151746
