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金骨片防治激素性股骨头坏死对VEGF和BMP-2表达的影响
目的:探讨金骨片防治激素性股骨头坏死过程中血管内皮生长因子和骨成型蛋白2表达的影响及促进骨折愈合的作用机理.方法:将日本大耳兔分为5组,正常组、模型组、阳性对照组、高剂量组、低剂量组;除正常组外,其余各组给予甲基强的松龙10mg/kg注射,同时对阳性对照组、高剂量组、低剂量组给予相应的药物防治干预,7周后处死动物采用组织病理学观察和免疫组织化学方法检测,分析5组动物股骨头VEGF和BMP-2的表达.结果:免疫组织化学染色显示,正常组VEGF和BMP-2的表达高于其他组,差异有显著性意义(P<0.05);高剂量组和阳性对照组的、VEGF和BMP-2的表达明显强于低剂量组和模型组,差异有显著性意义(P<0.05);低剂量组强于模型组,差异有显著性意义(P<0.05).结论:金骨片防治激素性股骨头坏死过程中促进VEGF和BMP-2表达,这可能是金骨片防治激素性股骨头坏死作用的机制之一.
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慢性肾脏疾病患者各期骨形态蛋白-2水平变化及其影响因素
目的 探讨慢性肾脏疾病(chronic kidney disease,CKD)1-5期患者血清骨形态蛋白-2 (Bone morphogenetic protein 2,BMP-2)水平变化及其可能的影响因素. 方法 收集CKD各期的154例血液样本.测定血清BMP-2水平和常规生化测定肾功能、白蛋白、C-反应蛋白(CRP)及钙磷代谢等.并进行相关及多元回归分析. 结果 CKD1～5期各有26、22、26、20、28例,血液透析32例,对照28例.与正常对照比较,CKD4,CKD5期及血液透析患者血清BMP-2水平明显升高;血清BMP-2水平在CKD患者下列情况下显著升高:血磷大于1.4mmol/L或钙磷沉积大于55 mg2/d12;血清白蛋白低于35g/L；C-反应蛋白大于3000 μ g/L.相关分析结果提示,BMP-2与血磷水平,钙磷乘积,C-反应蛋白,血尿素氮,血肌酐呈显著正相关；与血清白蛋白和肾小球滤过率呈显著负相关.多元回归分析示:血磷及CRP显著影响BMP-2的独立因素. 结论 BMP-2在CKD中晚期和血液透析患者血清中明显升高;残存肾功能、钙磷代谢、炎症和白蛋白可能与CKD患者血清BMP-2水平有关;血磷和炎症是影响BMP-2的主要因素.
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复合骨形态蛋白-2的聚乳酸-乙醇酸共聚物/磷酸三钙人工骨结合带血供组织修复羊大段骨缺损的试验研究
目的 研究复合骨形态蛋白-2的聚乳酸-乙醇酸共聚物/磷酸三钙(PLGA-TCP-BMP-2)人工骨结合尺骨骨膜及长段自体骨移植修复大段骨缺损的效果.方法 手术造成30mm绵羊桡骨骨缺损,A组植入人工骨及带血运的长段尺骨,B组植入人工骨及带血运的尺骨骨膜,C组仅植入人工骨,D组不植入任何材料.四组均以钢板固定桡骨缺损区.术后行X线摄片,24周处死行CT及组织学检查,进行系统评价.结果 X线检查示术后放射学评分A组高于其它各组.组织学结果显示,A组新生骨完全修复骨缺损区；B组新生骨与断端皮质骨融合,新生骨痂较为纤细；C组新生板层骨及骨陷窝排列较为紊乱；D组无骨连接表现.A、B、C组均未见人工骨材料残留.A组组织学评分高,D组低,差异有显著性.结论 PLGA-TCP-BMP-2人工骨结合长段自体骨或带血供尺骨骨膜移植能够很好的修复绵羊桡骨大段骨缺损.
关键词： 带血供 骨形态蛋白-2 聚乳酸-乙醇酸共聚物 磷酸三钙 骨缺损 -
rhIGF-1对成骨细胞增殖、BMP-2及Cbfa1基因表达的影响
目的 通过重组人胰岛素样生长因子(rhIGF-1)对体外成骨细胞增殖、骨形态蛋白-2(BMP-2)及核心结合因子1(Cbfa1)基因表达的影响,探讨rhIGF-1对骨代谢影响的可能机制.方法 不同浓度的rhIGF-1(0、10、50、100 ng/ml)刺激体外培养的大鼠成骨细胞,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,用半定量RT-PCR法检测成骨细胞BMP-2、Cbfa1 基因的表达.结果 rhIGF-1可明显促进成骨细胞增殖(P<0.05),并促进成骨细胞BMP-2、Cbfa1基因的表达(P<0.01),具有浓度依赖性.结论 rhIGF-1可促进成骨细胞的增殖、分化及成熟,可能是通过增强BMP-2、Cbfa1基因的表达来实现的.
关键词： 重组人胰岛素样生长因子1 成骨细胞 增殖 骨形态蛋白-2 核心结合因子1 -
间歇性高糖环境通过激活过氧化物酶增殖物激活受体γ下调成骨细胞Wnt信号通路
目的 研究Wnt信号转导通路在间歇性高糖环境所致成骨细胞损伤中的作用机制.方法 (1)将对数生长期的第3代成骨细胞随机分为3组:5.5mmol·L-1正常糖浓度组,25 mmol·L-1持续性高糖组,25～5 mmol·L-11QD间歇性高糖组.半定量RT-PCR法检测细胞中过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)和骨形成蛋白(BMP-2)的mRNA表达情况;以免疫印迹法检测细胞中PPARγ和BMP-2蛋白表达情况.(2)正常糖浓度成骨细胞作为空白对照组、间歇性高糖成骨细胞作为模型组.在此基础上,分别给予阴性药物——Wnt蛋白阻滞剂Dickkopf 1(DKK-1)蛋白、阳性药物——Wnt蛋白激动剂氯化锂(LiCl),分为DKK-1对照组、DKK-1模型组、LiCl对照组、LiCl模型组,干预3周后,评价PPARγ、BMP-2及Wnt相关蛋白β-catenin及CyclinD1蛋白表达情况.结果 (1)干预3周后,间歇性高糖组与高糖组、正常糖浓度组的BMP-2mRNA灰度值分别是0.49±0.03,0.83±0.04,0.96±0.02;这3组的PPARγmRNA灰度值分别是0.94±0.02,0.86±0.05,0.77±0.04,组间比较差异均有统计学意义(均P ＜0.05),存在时间依赖性.(2)模型组与空白对照组比较,PPARγ表达升高,而β-catenin、CyclinD1及BMP-2蛋白表达降低;DKK-1模型组与DKK-1对照组相比,PPARγ表达升高,而β-catenin、CyclinD1及BMP-2蛋白表达明显降低;氯化锂组与DKK-1组相比,PPARγ表达降低、而β-catenin、CyclinD1及BMP-2蛋白表达都明显升高,上述指标组间两两比较,差异均有统计学差异(均P＜0.05).结论 间歇性高糖环境所致成骨细胞损伤可能与PPARγ激活后Wnt信号转导通路被抑制有关.
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转化生长因子β对成骨细胞增殖、BMP-2及Cbfal基因表达的影响
目的:通过转化生长因子β(TGF-β)对体外成骨细胞增殖、骨形态蛋白-2(BMP-2)及核心结合因子1(Cbfal)基因表达的影响,探讨TGF-β对骨代谢影响的可能机制.方法:不同浓度的TGF(0、0.01、100 ng/ml)刺激体外培养的大鼠成骨细胞,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力.用半定量RT-PCR法检测成骨细胞BMP-2、Cbfal基因的表达.结果:TGF-β可明显促进成骨细胞增殖(P＜0.05),并促进成骨细胞BMP-2、Cbfal基因的表达(P＜0.01),具有浓度依赖性.结论:TGF-β可促进成骨细胞的增殖、分化及成熟,可能是通过增强BMP-2、Cbfal基因的表达来实现的.
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盐酸二甲双胍对成骨细胞增殖、BMP-2及Cbfa-1基因表达的影响
目的 初步研究二甲双胍(MF)在体外对小鼠颅盖骨成骨细胞增殖、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)及核心结合因子(Cbfa-1)mRNA表达的影响,探讨二甲双胍对骨代谢的可能作用机制.方法 (1)分离培养原代颅盖骨成骨细胞并对其进行鉴定.(2)以乳鼠成骨细胞为体外实验模型,不同浓度(0、50、100、200、400 μmol/L)的MF干预体外培养的成骨细胞24 h后,MTT法检测成骨细胞的增殖能力,实时荧光定量PCR法检测成骨细胞BMP-2及Cbfa-1基因表达.结果二甲双胍干预成骨细胞24 h后,可促进成骨细胞的增殖,在浓度400 μmol/L的OD值大为0.298±0.047(P < 0.05);可促进 BMP-2及Cbfa-1 mRNA的表达,呈剂量效应关系.结论二甲双胍可促进成骨细胞的增殖和分化,可能通过调节BMP-2及Cbfa-1的表达,从而促进骨的形成.
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瘦素对成骨细胞增殖、BMP-2及Cbfa1基因表达的影响
目的：通过瘦素(leptin)对体外成骨细胞增殖、骨形态蛋白-2（BMP-2）及核心结核因子（cbfa1）基因表达的影响研究，探讨leptin对骨代谢影响的可能机制。方法体外培养大鼠成骨细胞并对其进行鉴定。结果体外培养的细胞经鉴定为成骨细胞；对照组与实验组，实验组组间比较，均有统计学差异（P<0.05）；随着leptin浓度增高，使成骨细胞表面BMP-2和cbfa1基因表达升高，光密度比值明显增加，且都呈剂量依赖性变化。对照组与实验组，实验组组间比较，均有显著性统计学差异（P<0.01）。结论 leptin促进成骨细胞增殖；leptin可增加BMP-2和cbfa1基因的表达；leptin可能通过增加BMP-2和cbfa1基因的表达，促进成骨细胞的增殖、分化及成熟。
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局部应用辛伐他汀对家兔下颌骨骨折愈合的影响
目的 研究局部应用辛伐他汀对家兔下颌骨骨折愈合的影响,为辛伐他汀在口腔颌面部骨折愈合的临床应用提供相应的理论依据.方法 选择24只成年雄性新西兰家兔,所有家兔均在左侧下颌骨体处做线性骨折模型后行钛板钛钉内固定,将实验家兔随机分成实验组和对照组.实验组家兔下颌骨骨折区局部覆盖含有辛伐他汀的明胶海绵缓释膜,对照组骨折区局部覆盖不含辛伐他汀的明胶海绵缓释膜.分别于术后第2、4、8周处死实验动物,通过HE染色和免疫组化法分析辛伐他汀对家兔下颌骨骨折愈合的影响.结果 实验组骨痂形成与改建速率快于对照组;术后2、4周实验组骨形态发生蛋白-2阳性表达率明显高于对照组(P＜0.05),在第8周时两组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 局部应用辛伐他汀能促进新骨的形成,加速骨折的愈合.
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续骨活血汤对家兔骨折愈合影响实验研究
目的:观察续骨活血汤对家兔骨折愈合中血清骨钙素(BGP)、骨形态蛋白-2(BMP-2)表达和血液流变学的影响.方法:将108只家兔建立骨折模型,随机分为模型组、伤科接骨片组和续骨活血汤组,每组36只,各组均于造模术后第2天开始给药,2次/d,模型组予蒸馏水灌胃,伤科接骨片组予伤科接骨片200 mg/kg以混匀灌胃,续骨活血汤组予续骨活血汤浓缩口服液对人等效剂量的2倍灌胃.术后2周时随机抽取各组6只家兔,用自动血黏度测试仪检测血液流变学指标.于术后1、2、3、4、6周时随机抽取各组6只家兔,采用放射免疫法测定血清中骨钙素含量,再取材,进行免疫组织化学染色,观察骨折愈合不同时间点外骨膜、内骨膜和骨髓腔骨BMP-2的表达情况.结果:血液流变学及BGP、BMP-2的表达,续骨活血汤组、伤科接骨片组大部优于模型组,P＜0.01或P＜0.05;续骨活血汤组与伤科接骨片组比较,血液流变学大部时间点优于伤科接骨片,P＜0.01或P＜0.05;BGP和BMP-2的表达,部分时间点高于伤科接骨片组,P＜0.01或P＜0.05.结论:续骨活血汤对家兔骨折愈合有较好促进作用.
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地塞米松对小鼠颅颌面部发育的影响
目的:探讨妊娠期注射地塞米松对胎鼠颅颌面部发育的影响.方法:将孕鼠随机分为实验组和对照组,妊娠11.5d实验组给予50 mg/kg地塞米松腹腔注射,对照组给予相同剂量的生理盐水.于妊娠14.5、15.5、16.5d取胚胎,记录腭裂数、活胎数及死胎数,切取胎头在体视学显微镜下作头颅颌面组织侧貌分析,采用H-E染色和免疫组织化学显色观察腭部形态变化及骨形态蛋白(BMP)-2和甲状腺转录因子(TTF)-2在鼻中隔软骨中的表达情况.结果:实验组出现明显颅颌面部畸形,下颌体缩短,上颌突角、下颌突角后缩;免疫组织化学检测显示BMP-2和TTF-2在腭裂胎数鼻中隔软骨中持续表达;妊娠14.5～16.5 d实验组鼻中隔软骨细胞中BMP-2表达水平依次增强,且同时间实验组表达低于对照组;对照组鼻中隔软骨TTF-2表达呈现波动性,妊娠15.5d表达高,而实验组在妊娠16.5d仍持续增高,数值高于对照组.结论:地塞米松抑制颅颌面部骨骼发育;BMP-2和TTF-2在鼻中隔软骨持续表达提示其与分化转归相关.
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BMP-2控释涂层对加力状态下牙周膜干细胞成骨分化的影响
目的 测试在加力状态下,层层自组装BMP-2控释涂层的缓释效果,并检测其对牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSC)的成骨诱导作用.方法 通过层层自组装技术在Flexcell加力六孔板上负载[(PAH/BMP-2)/PSS][COL/ALG] 20涂层,利用ELISA检测加力状态下缓释涂层21 d内释放的BMP-2浓度;将4～6代PDLSCs种于预置BMP-2控释涂层的BioFlex专用六孔培养板,置于FX-4000T加力系统中,加载动态张应力(10％形变牵张力,20Hz),各组作用时间均为1h/次,3次/d,间隔4h加力,分别培养3、5、7d.对照组为非预置涂层添加BMP-2培养液(100 ng/ml)的BioFlex板同条件下加力培养;使用用Real-Time PCR和Westem印迹法分析PDLSCs在不同张应力作用前后,其表型标志Runx2,ALP和OCN在mRNA和蛋白水平的表达变化情况.结果 实验结果显示,与对照组相比,实验组加力3、5、7d后,Runx2、ALP和OCN标志物mRNA与蛋白表达差异有统计学意义(P＜0.05).结论 [(PAH/BMP-2) PSS]/[COL/ALG]20涂层对hPDLSCs在加力状态下成骨向分化能力具有显著增强作用.
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复合骨形态蛋白-2的聚乳酸-乙醇酸共聚物/磷酸三钙人工骨结合带血供骨膜修复羊大段骨缺损
目的 研究复合骨形态蛋白-2的聚乳酸-乙醇酸共聚物/磷酸三钙(PLGA-TCP-BMP-2)人工骨结合自体带血供尺骨骨膜移植修复大段骨缺损的效果. 方法 手术造成30 mm绵羊桡骨骨缺损,A组植入PLGA-TCP-BMP-2人工骨及带血运的尺骨骨膜,B组仅植入PLGA-TCP-BMP-2人工骨,C组不植入任何材料.3组均以钢板固定骨缺损区.术后24周拍摄X线片并处死动物,进行组织学观察评价. 结果 X线检查示A组桡骨缺损处完全成骨修复,皮质骨与髓腔的轮廓清晰；B组亦完全修复,但新生骨密度及髓腔轮廓清晰度均不如A组；C组无有效骨痂形成.组织学检查示A、B组骨痂外层形成为板层骨,C组缺损区可见大量纤维组织填充. 结论 PLGA-TCP-BMP-2人工骨结合自体带血供尺骨骨膜移植能够很好的修复绵羊桡骨30 mm的骨缺损.
关键词： 骨形态蛋白-2 聚乳酸-乙醇酸共聚物 磷酸三钙 骨膜 骨缺损 -
重楼皂苷对新生大鼠成骨细胞增殖、分化及Smurf1、Cthrc1、BMP-2表达的影响
目的:探究重楼皂苷对新生大鼠成骨细胞增殖、分化及Smurf1、Cthrc1、BMP-2表达的影响.方法:获取新生大鼠颅骨成骨细胞,经原代培养后传代培养,应用倒置显微镜观察并通过茜素红染色鉴定.将第三代成骨细胞接种至含不同浓度重楼皂苷(0μg/ml、3μg/ml、10μg/ml、30μg/ml)的培养基中培养.应用MTT实验检测重楼皂苷对成骨细胞增殖能力的影响.应用碱性磷酸酶(ALP)活性检测和钙结节染色评估重楼皂苷对成骨细胞分化能力的影响.应用荧光实时定量PCT (qRT-PCR)评估重楼皂苷对成骨细胞分化过程中Smurf1、Cthrc1、BMP-2基因表达的影响.结果:与空白对照组相比,重楼皂苷浓度3μg/ml、10μg/m1、30μg/ml组的细胞增殖能力、ALP活性、钙化结节数量均显著增加.重楼皂苷各浓度组的BMP-2、Cthrc1 mRNA和蛋白表达水平均显著增加,而Smuff1mRNA和蛋白表达水平均显著降低.结论:重楼皂苷能够通过抑制Smurf1表达、增强Cthm1表达参与调控BMP-2相关信号通路,从而促进新生大鼠颅骨成骨细胞增殖分化过程.
