细胞死亡标记物M65在慢性乙型肝炎患者不同肝脏纤维化分组间的差异比较

目的 细胞死亡标记物M65和M30已证实对非酒精性脂肪性肝病和慢性丙肝患者的肝脏纤维化具有一定诊断意义,而对慢性乙肝患者的研究较少,本研究旨在明确M65和M30在慢性乙型肝炎患者不同肝脏纤维化分组间的差异比较,以探索其潜在的诊断价值.方法 我们收集186例行肝脏穿刺检查的慢性乙型肝炎患者,肝脏炎症程度分为G1至G4级,肝脏纤维化程度分为S1至S4期,并在肝穿前后1周时间内采血,同时选择性别和年龄匹配的18例正常人作为健康对照,通过M65 EpiDeath ELISA和M30 Apoptosense ELISA试剂盒,对所有人群进行血清M65、M30等指标检测.结果 血清M65水平在S2组和cS3组的中位水平分别为246.7 U/L和226.5 U/L,均明显高于S1组(中位水平为199.6 U/L)和cS3组(中位水平为144.5 U/L).结论 血清M65水平随纤维化程度加重而升高,可能对慢性乙型肝炎患者肝纤维化程度具有辅助诊断价值.

甘草酸二铵对溃疡性结肠炎大鼠M30表达的影响

目的:观察甘草酸二铵(diammonium glycyrrhizinate,DG)对2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid,TNBS)诱导的大鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的疗效及其对大鼠结肠组织M30及Fas/FasL蛋白表达的影响,继而从细胞凋亡方面探讨DG治疗大鼠UC可能的作用机制.方法:♀Wistar大鼠30只,随机分为正常对照组、模型组和DG组,每组10只.用TNBS/乙醇灌肠法复制大鼠UC模型,10 d后收集结肠标本,观察大鼠疾病活动指数(disease activity index,DAI)、结肠大体形态损伤评分和组织学改变,用免疫组织化学法观察大鼠结肠黏膜中M30及Fas/FasL蛋白的表达.结果:与正常对照组相比,DG组、模型组DAI评分、结肠大体形态损伤评分和组织学损伤评分均显著增高(7.06±0.80 vs 0.32±0.14;6.03±0.61 vs 0.19±0.16; 5.84±0.53 vs 0.22±0.11,P＜0.01);而与模型组相比,DG治疗组能显著改善UC症状(3.33±0.27 vs 7.06±0.80;3.29±0.36 vs 6.03±0.61; 2.98±0.24 vs 5.84±0.53,P＜0.05).模型组大鼠M30及Fas/FasL蛋白表达水平明显高于正常组(5.76±0.66 vs 0.42±0.18; 26.62±4.20 vs 10.81±2.20; 17.11±3.12vs6.02±1.02,P＜0.01);与模型组相比,DG治疗组M30及Fas/FasL蛋白表达显著降低(2.24±0.48 vs 5.76±0.66; 17.23±3.20 vs 26.62±4.20; 11.02±2.12 vs 17.11±3.12,P＜0.05).结论:DG对TNBS诱导的大鼠UC有较好的疗效,DG通过下调Fas/FasL的表达抑制结肠上皮细胞的凋亡,这可能是其减轻结肠黏膜损伤的机制之一.

Objective.To determine the apoptotic and proliferative activities in various ovarian epithelial tumors.Methods.Formalin fixed,paraffin embedded tissues of 86 ovarian epithelial tumors,including 52 adenocarcinomas,23 borderline tumors and 11 cystadenomas,were retrieved.Apoptotic (AI) and proliferative (PI) index were estimated using the monoclonal antibodies: M30,Ki 67 and Ki S1 in these tumors.Quantitative assessment of AI and PI was estimated by calculating the percentage of positive cells among no less than 1000 tumor cells.Results.Statistically significant difference in AI was found between benign and borderline tumors or carcinomas (P=0.028,0.001,respectively).Significant differences in PI,as assessed by both Ki 67 and topo IIα,were demonstrated between carcinomas and benign or borderline tumors (both P< 0.001).Benign tumors had both low PI and AI; borderline tumors had lower PI but higher AI,while adenocarcinomas had both high proliferative and high apoptotic rates.Among borderline tumors,serous tumors had significantly lower AI and higher PI than mucinous ones.Conclusions.The results suggest that apoptotic and proliferative activities play important roles in the pathogenesis and development of ovarian borderline and malignant tumors.The high apoptotic rate in borderline tumor may explain its relatively indolent behavior while the high proliferative rate in carcinomas tends to explain its aggressive behavior.

肝癌组织M30蛋白表达及其与凋亡的关系

目的 探讨原发性肝癌早期凋亡相关蛋白M30的表达及其与凋亡的关系.方法 采用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法分别检测了80例原发性肝癌及相应的癌旁组织、10例正常肝组织M30蛋白的表达情况,采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)技术,检测肝癌凋亡指数.结果 80例原发性肝癌、相应的癌旁组织、10例正常肝组织M30平均指数分别为9.10±7.05、3.31±3.02、0.10±0.32,肝癌组织M30指数和TNM分期、组织分化程度、生长方式、生存期及复发时间密切相关(P<0.05). M30指数与凋亡指数呈显著正相关(P<0.01).结论 M30有可能成为对肝癌预后进行推测的分子标志之一.

血清M30及M65水平用于HBV相关慢加急性肝衰竭患者预后的临床价值

目的 探讨血清M30及M65水平用于乙型肝炎病毒(HBV)相关慢加急性肝衰竭(ACLF)患者短期预后的临床价值.方法 纳入2013年2月至2016年10月住院的HBV相关ACLF患者101例(ACLF组),同时纳入慢性乙型肝炎(CHB)患者59例(CHB组)及健康对照57名(健康对照组).记录患者一般情况及常规实验室指标,检测血清M30及M65水平.分析M30及M65水平与临床指标的相关性,ROC曲线及生存曲线分析评估指标的短期预后价值.结果M30水平由高至低依次为ACLF组(1495.00±792.81)U/L、CHB组(943.78±538.87)U/L及健康对照组(705.00±278.56)U/L;血清M65水平由高至低依次为ACLF组(2519.93±1298.06)U/L、CHB组(1790.23±870.20)U/L及健康对照组(622.01±270.37)U/L.ACLF组中,M30水平与MELD评分(R=0.406,P<0.001呈正相关,M65与MELD评分(R=0.526,P<0.001)也呈正相关.M30单独预测90 d病死的AUC为0.794(95％CI:0.708～0.880),M65的AUC为0.785(95％CI:0.697～0.874).M30联合MELD评分预测90 d病死的AUC为0.854(0.782～0.926),M65联合MELD评分的AUC为0.832(0.753～0.911),M30、M65及MELD评分三者联合的AUC为0.871(0.801～0.940).结论 血清M30 及M65 用于HBV 相关ACLF 患者短期的预后价值较高,M30 及M65 联合MELD 评分可以提高预后效能.

血清生化指标对非酒精性脂肪性肝病的肝损伤评估价值

目的 分析非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者血清生化指标对肝损伤的评估价值.方法 选择我院收治的NAFLD患者34例,健康对照者20名.收集两组血清样本,检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、r谷氨酞转肽酶(GGT)、三酰甘油(TG)、金属基质蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)、透明质酸(HA)、M30及M65的水平,比较与肝损伤程度的相关性,并进一步分析对NAFLD肝损伤的临床意义.结果 与对照组相比,NAFLD组ALT、AST、TG、TIMP-1、HA、M30、M65表达明显增高(P＜0.05);HA与NAFLD患者肝纤维化程度之间呈正相关(P＜0.05),M30与NAFLD患者小叶内炎症、脂肪变性及肝纤维化程度之间呈正相关(P＜0.05).结论 HA结合M30或可作为NAFLD患者临床评估肝纤维化程度的肝损伤生化指标.

细胞死亡标记物M65和M30对慢性乙型肝炎患者肝脏炎症程度的诊断价值

目的 明确M65和M30对慢性乙型肝炎患者肝脏炎症程度的诊断价值.方法 共纳入186例未经治疗的慢性乙型肝炎患者,病理学肝脏炎症程度分为G1至G4级,肝脏纤维化程度分为S1至S4期,并在肝穿前后1周时间内采血;选择性别和年龄匹配的18例正常人作为健康对照,进行血清M65、M30检测.结果 血清M65和M30水平与转氨酶有一定相关性,随着肝脏炎症程度的加重而升高,G2和cG3组的M65中位水平分别为208.3和238.8 U/L,M30中位水平为251.8和282.9 U/L,二者水平均显著高于正常人(M65:144.5 U/L;M30:208.8 U/L)和G1组(M65:199.6 U/I,M30:241.9 U/L).多因素分析表明血清M65水平是严重肝脏炎症的独立预测指标.在S1患者中,血清M65和M30水平均随着肝脏炎症程度的加重而升高,炎症损伤较重的G2S1组的血清M65和M30中位水平为206.0U/L、280.7 U/L,均高于G1S1组(M65:190.5 U/L,M30:241.9 U/L).结论 慢性乙型肝炎患者血清M65水平与肝组织炎症程度相关,具有一定的辅助诊断价值,其临床应用价值优于M30.

血清M30、M65水平对乙型肝炎肝衰竭患者生存状况的影响

目的 探究乙型肝炎相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者血清M30、M65水平及其对患者生存状况的影响.方法 选取2014年6月-2016年3月于哨点医院接受治疗的HBV-ACLF患者136例,同时选取慢性肝炎患者25例,健康体检者25例,采集研究对象血清,测定M30、M65含量及其他生化指标.观察三组对象入组时的生物化学指标、不同预后的HBV-ACLF患者生物化学指标及M30/M65比值与终末期肝病模型评分(MELD)情况.结果 HBV-ACLF组M30含量为(3.02±0.30)lgU/L,高于健康组(2.18±0.14)lgU/L,低于慢性肝炎组(3.15±0.31)lgU/L(P＜0.05);M65含量为(3.43±0.32)lgU/L,高于慢性肝炎组(3.37±0.32)lgU/L、健康组(2.03±0.15)lgU/L(P＜0.05);M30/M65值为0.38±0.12,低于慢性肝炎组0.57±0.10,明显低于健康组1.42±0.37(P＜0.05).预后死亡组:MELD得分、M65含量,均明显高于生存组(P＜0.05);M30/M65比值为0.38±0.14,低于生存组0.57±0.18(P＜0.05).不同预后组患者M30含量差异无统计学意义(P＞0.05).在0.4613诊断阈值内M30/M65方法ROC曲线下面积高于MELD评分,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 血清M30、M65水平能够反映肝细胞病变情况,M30/M65能够较为准确地评估HBV-ACLF患者的生存状况.

Bcl-2、Bax及M30在Bowen病中的表达

为了研究细胞凋亡与Bowen病发病的关系,我们采用免疫组化方法检测了28例Bowen病皮损中Bcl-2、Bax及M30的表达.结果发现M30及Bax染色阳性分别见于4例和8例表皮角质形成细胞,Bcl-2在10例表皮角质形成细胞和12例真皮淋巴细胞呈阳性表达;Bcl-2表达阳性率高于Bax,但无统计学差异(χ2=2.1053,P>0.05);M30与Bax表达显著正相关(r=0.6455,P<0.01);M30与Bcl-2表达微弱负相关(r=-0.2932,P>0.05).提示Bowen病发病可能与表皮角质形成细胞凋亡降低有关.

慢性乙型肝炎患者血清M65和M30水平与肝纤维化分期的关系

目的：检测慢性乙型肝炎病毒感染后血清中M65和M30水平与肝脏继发性纤维化病变的关系。方法选择150例慢性乙型肝炎患者和100例健康对照者，检测慢性乙型肝炎患者和健康人群血清M65及M30水平，并对慢性乙型肝炎患者肝脏活检组织进行METAVIR纤维化分级以及TUNEL检测。结果慢性乙型肝炎患者血清M30水平（277±44.5）U／L和M65水平（520±56.7）U／L均显著高于健康对照组M30（95±22.8）U／L ，M65（202±45.7）U／L （均 P＜0.01）；在慢性乙型肝炎患者中M30及M65水平和肝纤维化有关，它们在血液中的浓度随着患者肝纤维化程度的加深而升高，肝纤维化F2级M30（442±67.9）U／L ，M65（707±55.1）U／L；F3级M30（585±51.2）U／L ，M65（774±63.2）U／L；F4级M30（611±42.1）U／L ，M65（788±59.4）U／L显著高于F0级M30（223±23.1）U／L ，M65（433±34.7）U／L和F1级M30（242±41.3）U／L ，M65（448±39.4）U／L （均 P＜0.05）；慢性乙肝患者肝细胞凋亡指数随着肝纤维化程度的提高而增加，分别为F0级16.3±3.1，F1级16.9±2.8，F2级21.3±3.6，F3级25.9±3.2，F4级28.0±3.7。结论血清M30及M65水平能提示慢性乙型肝炎患者肝纤维化的程度。

ROC曲线评价M30和M65在非酒精性脂肪肝诊断中的价值

目的探讨非酒精性脂肪肝（NAFLD）患者血清M30和M65抗原浓度变化及其临床价值。方法将103例NAFLD患者分成非酒精性单纯性脂肪肝63例和非酒精性脂肪肝炎（NASH)40例两组，同时设健康对照组26例，用ELISA法测定各组M30和M65抗原含量，描绘ROC曲线并进行曲线下面积（AUC）分析。结果 NAFLD组血清M30抗原含量（164.0±87.5）U/L和血清M65抗原含量（546.0±167.4）U/L均显著高于对照组[（98.4±20.5）U/L和（289.0±98.4 U/L）]，均有统计学差异（均P＜0.01）。NASH组M30抗原含量（189.4±82.5）U/L和M65抗原含量（624.0±183.4）U/L均显著高于非酒精性单纯性脂肪肝组[（132.0±74.4）U/L和（562.0±156.4）U/L，P＜0.01或0.05]。M30抗原诊断NASH的AUC为0.743，M65抗原诊断NASH的AUC为0.669，两项联合诊断NASH的AUC为0.878。以M30抗原161.9 U/L，M65抗原514.8U/L为临界值点，敏感度94.5%、特异度85.5%、准确度88.9%。结论 M30抗原和M65抗原对NASH的诊断均具有较好的诊断价值，两者联合更利于NASH的诊断。

随机、开放法评价卡维地洛对扩张型心肌病心衰患者血浆M30抗原水平影响的临床研究

目的测定扩张型心肌病(DCM)心衰患者血浆中细胞凋亡产物M30抗原水平以及卡维地洛对其的影响.方法39例DCM心衰患者,随机分为常规治疗组和卡维地洛治疗组,予以药物干预8周,检测治疗前后血浆M30水平变化,正常对照组25例,同时检测血浆M30水平.结果DCM心衰组血浆M30抗原水平与正常对照组相比明显升高(P＜0.01).重度心衰心功能Ⅳ级患者血浆M30抗原水平较心功能Ⅱ级患者明显升高(P＜0.01).心衰患者中卡维地洛组治疗后血浆M30水平明显低于治疗前(P＜0.05),而常规治疗组治疗前后无显著性差异(P＞0.05).结论细胞凋亡在DCM心衰的慢性病理进程中可能起着重要作用.卡维地洛具有抗细胞凋亡的作用,可能是其治疗心衰的有益机制之一.

经皮冠状动脉介入治疗对不稳定型心绞痛患者血浆M30浓度的影响

目的 探讨经皮冠状动脉介入(percutaneous coronary intervention,PCI)治疗对不稳定型心绞痛(unstable angina,UA)患者血浆M30浓度的影响.方法 从2011年12月至2013年1月在广东省心血管病研究所心内二区住院并行PCI治疗的400例冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)患者血浆中,采用完全简单随机方法(随机数表法)抽取73例患者,其中稳定型心绞痛(stable angina,SA)9例、UA38例、心肌梗死(myocardial infarction,MI)26例.采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定冠心病患者在PCI治疗前、治疗后第一天的血浆M30浓度.结果 冠心病患者PCI治疗后血浆M30浓度比治疗前高,但差异无统计学意义(P＞0.05).亚组分型中,因UA组例数太少,不对其进行统计分析.MI组患者的术前血浆M30抗原浓度比UA组高,但差异无统计学意义(P＞0.05).UA组PCI治疗前、后血浆M30浓度比较,差异有统计学意义[129(109～497)U/L vs.149 (83 ～542) U/L,P=0.037]；PCI治疗后血浆M30抗原浓度明显高于PCI治疗前.MI组PCI治疗前、后血浆M30浓度比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 UA患者血浆M30抗原浓度在PCI治疗后升高,说明PCI治疗会增加UA患者的心肌细胞凋亡.M30可作为细胞凋亡的监测指标并有助于观察UA患者PCI治疗后出现的心肌微损伤.

慢性充血性心力衰竭患者血浆M30抗原水平检测--附121例报告

目的:了解慢性充血性心力衰竭(心衰)患者的细胞凋亡状况,并寻找能反映细胞凋亡的简单可靠的检测方法.方法:采用酶联免疫吸附法,用单克隆抗M30抗体定量测定55名正常人与121例心衰患者血浆细胞凋亡产物M30抗原的水平,并分别比较正常人(正常对照组)和不同程度心衰病人、不同病因的心衰病人、采用不同口服药物(30例予常规治疗,49例予美托洛尔25～50 mg/d,40例予卡维地洛12.5～25 mg/d,2例予比索洛尔5～7.5 mg/d)治疗的心衰患者血浆M30抗原水平.结果:血浆M30抗原水平:心衰组高于正常对照组[91(57～202)U/L比58(25～122)U/L](P＜0.01),心功能Ⅲ、Ⅳ级的心衰患者[92(67～192)U/L、99(73～202)U/L]均较Ⅱ级者[84(57～186)U/L]高(P＜0.01),扩张型心肌病(扩心病)心衰患者高于冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心痛)心衰患者[109(68～202)U/L比80(57～186)U/L](P＜0.01);不同药物治疗组中,常规治疗组高于卡维地洛组[95(70～202)U/L比83(57～180)U/L](P＜0.01),而与美托洛尔组[97(68～192)U/L]比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:心衰患者血浆M30抗原表达水平明显升高,证实心衰时存在细胞凋亡现象,且凋亡水平与心衰的严重程度密切相关.而用酶联免疫吸附法单克隆抗M30抗体检测血浆M30抗原水平可作为临床评估细胞凋亡状况的简易方法.扩心病心衰患者血浆M30抗原水平明显高于冠心病心衰患者,提示细胞凋亡在前者的慢性病理进程中可能起更重要的作用.卡维地洛对血浆M30抗原有明显的抑制作用,可能是其治疗心衰有益的作用机制之一.