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血液中细菌灭活方法的研究
目的筛选一种能有效灭活血液中细菌的消毒方法.方法采用定量杀菌试验观察杀菌效果.结果在筛选试验的大作用剂量下,活性炭碘法、8-甲氧补骨脂素(8-MOP)光化学效应法、短波紫外线(UVC)法和亚甲蓝(MB)光敏效应法作用40min,可以使血液中的大肠杆菌分别下降0.800、1.920、2.772和2.552 log,同时血浆游离Hb分别增加679.16、16.06、107.70和1.68 mg/L;PT分别延长6.40、4.60、5.10和0.80s.结论按照既能有效灭活血液中的细菌,又能保持血液的成分和功能没有明显变化的原则,初步筛选的血液中细菌的灭活方法是MB光敏效应法.
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8-甲氧补骨脂素治疗寻常性斑块型银屑病随机双盲平行对照临床研究
目的评价比较进口与国产的8-甲氧补骨脂素片口服结合UVA+UVB照射治疗寻常性斑块型银屑病的临床疗效及安全性.方法用随机双盲、平行对照试验方法,60例患者随机口服进口或国产8-甲氧补骨脂素片,剂量为0.6 mg·kg-1,2 h后照射UVA和UVB,每周3次,疗程8周,观察疗效与安全性.结果通过8周的治疗,进口8-氧补骨脂素组PASI总分下降了96.3%,基愈率为92.9%,有效率为100%;国产8-甲氧补骨素组PASI总分下降98.5%,基愈率和有效率均为100%,两组间基愈率和有效率比较无显著性差异(P＞0.05).进口8-甲氧补骨脂素片药物不良反应发生率为46.4%,国产8-甲氧补骨脂素组为40%.药物不良反应多为轻中度消化道及皮肤瘙痒、色素沉着等.结论进口与国产8-甲氧补骨脂素片在进行银屑病PUVA疗法中都具有良好疗效及安全性.
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染料木黄酮对光老化成纤维细胞增殖作用的影响
目的 探讨染料木黄酮对光老化成纤维细胞增殖作用的影响.方法 经酶消化法分离培养真皮成纤维细胞,并进行细胞传代,免疫细胞化学鉴定细胞.实验分为3组:正常细胞对照组:未经处理的真皮成纤维细胞;8-甲氧补骨脂素(8-methoxypsoralan,8-MOP)/长波紫外线(ultraviolet A,UVA)对照组:用含50 ng/ ml 8-MOP的培养基避光孵育细胞24h,再以9J/cm2 UVA照射;8-MOP/UVA+染料木黄酮(0、1.25、2.5、5、10、20 μg/ml)组:用含50 ng/ ml8-MOP及各浓度染料木黄酮的培养基共同孵育细胞24 h,再以9 J/cm2 UVA照射24h.MTr法检测各组细胞增殖活力,流式细胞术检测各组细胞细胞周期,光镜下观察各组细胞分裂和分裂后表型,实时荧光定量PCR法检测各组细胞中基质金属蛋白酶-1、3水平.结果 皮肤成纤维细胞阳性率达99％以上;8-MOP/UVA+染料木黄酮1.25、2.5 μg/ml组细胞增殖率分别为8-MOP/UVA对照组的112.6％(P＞0.05)和146.6％(P＜0.05),染料木黄酮的光保护作用随浓度的升高而增强,然而随着浓度的继续升高,细胞增值率逐渐降低,当浓度达20 μg/ml时,细胞增殖率仅为8-MOP/UVA对照组的19.4％(P＜0.01),选择染料木黄酮的佳保护浓度为2.5μg/ml;8-MOP/UVA对照组细胞细胞周期阻滞于S期,而8-MOP/UVA+染料木黄酮2.5 μg/ml组细胞细胞周期则由S期进入G2/M期;正常细胞对照组、8-MOP/UVA组及8-MOP/UVA+染料木黄酮2.5μg/ml组分裂细胞表型占总细胞数目的比率分别为(99.7±0.58)％、(7.7±1.15)％、(57.7±3.51)％,各组间差异有统计学意义(P＜0.01);8-MOP/UVA+染料木黄酮2.5 μg/ml组细胞基质金属蛋白酶-1、3水平均明显低于8-MOP/UVA对照组,而高于正常细胞对照组,各组间差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 染料木黄酮可在一定程度上解除8-MOP/UVA所致光老化成纤维细胞的生长抑制作用.
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8-甲氧补骨脂素脂质体凝胶成型工艺研究
8-甲氧补骨脂素(8-methoxypsoralen,8-MOP)是临床治疗白癜风和银屑病的药物,其外用治疗白癜风的机理可能与影响角质酪氨酸酶活性,激活酪氨酸酶促进黑素合成作用及促进黑素细胞的增殖、移行有关,也可能通过刺激角质形成细胞释放某些炎性介质,后者又可作为黑素细胞生长刺激因子增强黑素细胞的功能[1].目前8-MOP有口服和外用酊剂2种剂型上市,国内也有关于8-MOP脂质体凝胶的研究报道[2,3].
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同位素标记法研究8-甲氧补骨脂素脂质体凝胶的皮肤靶向性
采用3H同位素标记8-甲氧补骨脂素脂质体凝胶、脂质体、凝胶和酊剂,给予SD大鼠后,以液体闪烁仪测定皮肤及血液中3H标记的8-甲氧补骨脂素含量.考察剂型、脂质组成、粒径和电荷等因素对脂质体凝胶皮肤靶向性的影响.结果显示,以二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)为膜材或加入带负电荷胆固醇硫酸酯的脂质体凝胶可增加皮肤靶向性.研究表明,脂质组成、粒径和电荷对脂质体凝胶的皮肤靶向性均有较大影响.
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卤米松和8-甲氧补骨脂素联合外用治疗白癜风99例疗效观察
有关白癜风治疗的报告很多,我们从2002年1月-2003年4月外用卤米松加8-甲氧补骨脂素(8-MOP)治疗白癜风,取得较为满意的疗效,现将观察结果报告如下.
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卤米松乳膏联合补骨脂素治疗寻常型白癜风
我们应用0.05%卤米松乳膏(商品名:澳能,香港澳美制药有限公司)外用,联合内服和外用8-甲氧补骨脂素(商品名分别为甲氧沙林片和甲氧沙林溶液),治疗寻常型白癜风23例,获得满意效果.现将临床资料总结如下.
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8-甲氧补骨脂素对对乙酰氨基酚致小鼠急性肝损伤的保护作用
目的 研究8-甲氧补骨脂素(8-methoxypsoralen,8-MOP)对对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)致小鼠急性肝损伤的保护作用.方法 采用对乙酰氨基酚所致小鼠急性肝损伤模型.24 h后,检测小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH)；留取肝脏组织,常规石蜡包埋切片,HE染色,光镜观察肝脏组织病理变化；制备肝匀浆,测定肝中还原型谷胱甘肽(GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)和丙二醛(MDA)的含量.结果 与正常对照组比较,模型组小鼠血清中ALT、AST和LDH活性明显升高,肝脏组织出现明显的肝细胞变性坏死;与模型组相比,8-甲氧补骨脂素可以明显降低小鼠血清中ALT、AST和LDH的活性,降低肝组织中MDA的含量,升高GSH/GSSG比值,肝组织病理损伤也明显减轻.结论 8-甲氧补骨脂素对对乙酰氨基酚致小鼠急性肝损伤具有明显的保护作用.
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8-甲氧补骨脂素药理作用研究进展
8-甲氧补骨脂素(8-methoxypsoralen,8-MOP)主要存在于多种常见中草药如蛇床子、北沙参、白芷、枳实、羌活、芫荽等根茎或果实中,由于8-MOP结构简单、易与DNA发生相互作用,有较多的生物活性,目前已成为天然药物研究的热点.本文结合本实验室研究工作对近年8-MOP在抗微生物和抑制炎症反应、调节免疫功能、抗肿瘤作用、其他药理和毒副作用研究进展做一综述.
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外用8-甲氧补骨脂素诱导的黄褐斑动物模型研究
目的 采用综合造模法创建小鼠皮肤黄褐斑动物模型. 方法30只KM雌性小鼠随机分为空白组、造模1组、造模2组.除空白组外,造模1组和造模2组根据文献均每日用波长320 nm的中波紫外线(UVB)照射小鼠背部皮肤1次,照射时间30 s,并每日定时肌肉注射1％黄体酮注射液2 mL/kg体重,两腿交替注射;同时每日将小鼠置于特制的束缚桶内束缚30 min;造模2组同时局部外涂8-甲氧补骨脂素(8-MOP),每日1次.造模4周后,HE染色和免疫组化染色观察皮肤黑色素细胞病理形态学. 结果①HE染色结果:造模1组和造模2组小鼠皮肤黑色素细胞的上皮层增生数、真皮血管数和真皮炎性细胞数高于空白组(P＜0.01);造模2组小鼠皮肤黑色素细胞的上皮层增生数、真皮血管数和真皮炎性细胞数高于造模1组(P＜0.01).②免疫组化染色结果:造模1组和造模2组小鼠皮肤黑色素细胞的HIS、平均光密度和积分光密度高于空白组(P＜0.01);造模2组小鼠皮肤黑色素细胞的HIS、平均光密度和积分光密度高于造模1组(P＜0.01). 结论采用小鼠皮肤局部黄体酮注射+慢性束缚+局部紫外线照射+外涂8-甲氧补骨脂素的综合实验方法建立的黄褐斑小鼠模型,更加接近人类黄褐斑病变特征.
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8-甲氧补骨脂素凝胶的制备与质量控制
目的研制8-甲氧补骨脂素凝胶,确定该药的质量控制方法.方法以卡波姆-940作为凝胶基质,以8-甲氧补骨脂素为主药制备凝胶.采用高效液相色谱法测定主药的含量,并对制剂的稳定性进行考察.结果制备的凝胶均匀、细腻、分散性好,建立的分析方法不受辅料的干扰,相对回收率平均为99.18%,RSD为0.87%(n＝5).结论该制剂制备工艺简单,所得凝胶稳定性好.
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不同组方祛白脂对小鼠B16黑素瘤细胞代谢的影响
目的:探寻祛白脂组方中影响小鼠B16黑素瘤细胞代谢的因素.方法:以小鼠B16细胞增殖活性、黑素生成量、酪氨酸酶活性为指标,以8-甲氧补骨脂素(8-MOP)浓度和辅药为考察因素,选用3×2析因设计研究不同组方祛白脂对小鼠B16黑素瘤细胞代谢的影响,用SPSSl3.0软件辅助数据分析.结果:8-MOP 10 μmol·L-1处理组小鼠B16黑素瘤细胞增殖能力明显高于其他组(P<0.01),8-MOP 50 μmol·L-1处理组小鼠B16黑素瘤细胞黑素含量、酪氨酸酶活性明显高于其他组(P<0.01);加入辅药小鼠B16黑素瘤细胞增殖能力、黑素含量、酪氨酸酶活性显著高于不加辅药组(P<0.01);8-MOP浓度和辅药处理的交互作用对小鼠B16黑素瘤细胞增殖能力、黑素含量、酪氨酸酶活性有显著影响(P<0.01).结论:祛白脂中8-MOP浓度和辅药是影响小鼠B16黑素瘤细胞代谢的主要因素.
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高效液相色谱法同时测定复方8-甲氧补骨脂素洗剂中主药含量
目的:建立复方8-甲氧补骨脂素洗剂中复方8-甲氧补骨脂素和醋酸肤轻松含量测定的高效液相色谱法.方法:采用Waters Symmetry C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(70:30),检测波长为240nm,流速为1.0ml·min-1.结果:8-甲氧补骨脂素浓度在20.232～101.16mg·L-1范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为100.70%(RSD为0.82%).醋酸肤轻松浓度在5.232～26.16 mg·L-1范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9998),平均回收率为100.8%(RSD为1.11%).结论:本法简便、快捷,结果准确,适用于该制剂的质量分析检验.
关键词： 高效液相色谱法 8-甲氧补骨脂素洗剂 8-甲氧补骨脂素 醋酸肤轻松 -
8-甲氧补骨脂素脂质体凝胶对实验性白癜风的药效学
目的:以8-甲氧补骨脂素(MOP)酊剂和凝胶剂为对照,考察8-甲氧补骨脂素脂质体(LMOP)凝胶对实验性白癜风的作用.方法:用化学脱色法制备白癜风动物模型,分别用等浓度(0.15%)MOP酊剂、凝胶剂、脂质体凝胶进行治疗,并给予日光照射15 min,考察其对皮肤黑素形成和胆碱酯酶的影响.结果:LMOP凝胶相对其他剂型对实验性白癜风有良好的治疗作用,对皮肤黑色素的影响和对胆碱酯酶的影响与模型组比较, 差异有极显著性(P<0.01), 与MOP凝胶组和酊剂组比较,差异有显著性(P<0.05).结论:LMOP凝胶较其他MOP制剂对白癜风有更好的治疗作用,为临床应用提供了理论依据.
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8-甲氧补骨脂素脂质体凝胶的研制
目的:制备8-甲氧补骨脂素脂质体(LMOP)凝胶,并评价其质量.方法:以均匀设计法优化工艺制得LMOP凝胶,用透射电镜观察其形态,用凝胶柱层析法结合HPLC测定其包封率及该制剂的稳定性.结果:所制脂质体形态圆整,分布较均匀,平均粒径为550 nm,粒径范围为150～1000 nm,平均包封率为90.13%,于40℃贮存3个月,脂质体形态及包封率无显著改变.结论:该脂质体凝胶制备工艺可行,稳定性较好,具有开发价值.
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反相高效液相色谱法测定白癜风治疗药脂质体凝胶中8-甲氧补骨脂素的含量
目的:建立一种反相高效液相色谱法测定8-甲氧补骨脂素脂质体凝胶中主药含量的方法.方法:采用C18柱,甲醇-水(70∶30)为流动相,检测波长为249 nm,氢化可的松为内标.结果:8-甲氧补骨脂素在0.8～8 mg*L-1(r=0.9999,n=6)浓度范围内呈线性关系,其平均回收率为98.26%～99.46%;RSD为0.50%～1.58%.结论:该方法简便、灵敏、快速、准确.
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8-甲氧补骨脂素脂质体对小鼠黑素瘤细胞黑素生成影响的研究
目的探讨8-甲氧补骨脂素脂质体(LMOP)对B16F小鼠黑素瘤细胞增殖、黑素含量、酪氨酸酶活性的影响.方法采用体外培养的小鼠B16F黑素瘤细胞株,以等浓度的8-甲氧补骨脂素(MOP)为对照,用MTT法测定细胞增殖情况;NaOH裂解法测定黑素合成;多巴氧化法测定酪氨酸酶活性.结果与等浓度MOP相比,LMOP低浓度(10～50μmol/L)时显著提高酪氨酸酶活性和黑素含量(P＜0.05),高浓度(100～200μmol/L)时对细胞的抑制作用更显著(P＜0.05).结论用脂质体作为MOP的载体可以显著提高MOP对靶细胞的作用,为LMOP制剂治疗白癜风的临床应用提供了实验依据.
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小白鼠皮肤光老化模型的建立
目的应用8-甲氧补骨脂素(8-MOP)/长波紫外线(UVA 320～400 nm)照射小白鼠,快速、简便、可靠地建立皮肤光老化动物模型.方法应用HE染色及弹力纤维染色(Weigert法),对接受8-MOP/UVA照射24 h的小白鼠进行皮肤表皮、真皮组织结构、胶原纤维、弹性纤维进行对比观察.结果小白鼠经8-MOP/UVA照射24h,皮肤增厚,表皮组织增生、伴有角化过度及角化不全.真皮层炎性细胞浸润,弹性纤维增粗、增多,排列紊乱或聚集成团,胶原退行性变明显,甚至可见无定形物质,血管不规则扩张,血管壁增厚,有炎性细胞浸润.结论通过8-MOP/UVA可以快速、简便、可靠地建立小白鼠的皮肤光老化模型,为临床进行皮肤光老化的研究提供了方便.
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8-甲氧补骨脂素脂质体凝胶对白癜风模型豚鼠的治疗作用研究
目的:比较 8-甲氧补骨脂素( 8-MOP)脂质体凝胶与其等浓度的其它剂型对白癜风模型豚鼠的疗效.方法:将豚鼠分为正常组、模型组、 8-MOP酊剂组、 8-MOP凝胶组和 8-MOP脂质体凝胶组.除正常组外,其余各组均用化学脱色法造模,并给以相应药物治疗,之后比较各组疗效,同时考察各组表皮毛囊黑色素生成、血清胆碱酯酶及皮肤丙二醛( MDA)含量等指标的变化.结果:与其它各组比较, 8-MOP脂质体凝胶组总有效率更高,该组的毛囊黑色素生成、血清胆碱酯酶及 MDA含量等指标,与模型组比较具有极显著性差异( P<0.001),与凝胶组及酊剂组比较具有显著性差异( P<0.05).结论: 8-MOP脂质体凝胶较其酊剂和凝胶对白癜风模型豚鼠具有更好的治疗作用.
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8-甲氧补骨脂素脂质体凝胶的皮肤渗透性研究
目的:研究 8-甲氧补骨脂素脂质体凝胶的皮肤渗透性.方法:以凝胶与敏白灵酊为对照,将 8-甲氧补骨脂素脂质体凝胶应用于离体及在体大鼠皮肤,用反相高效液相色谱法测定接收介质、皮肤、血液及其它组织中 8-甲氧补骨脂素的含量.结果:离体条件下,脂质体凝胶具有小的透皮速率和大的皮内滞留量;在体条件下,包封于脂质体中的药物在皮肤中滞留量分别是凝胶和酊剂的( 4. 37± 0. 91)倍和( 3. 36± 0. 58)倍.结论: 8-甲氧补骨脂素脂质体凝胶具有显著的局部皮肤靶向性.
