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湖北海棠中根皮苷含量测定
目的:比较湖北海棠不同部位的根皮苷含量,为湖北海棠的利用提供依据.方法:采用高效液相色谱法测定根皮苷含量.结果:湖北海棠嫩枝中根皮苷含量高,为12.94%;高海拔(1 600 m)生长的湖北海棠叶中含根皮苷8.27%,明显高于低海拔(50 m)生长的湖北海棠.结论:湖北海棠可作为富含根皮苷的资源植物加以利用.
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多指标综合评价法优选湖北海棠叶中总黄酮提取工艺
目的:优选湖北海棠中总黄酮的提取工艺.方法:以总黄酮及根皮苷含量为指标,采用单因素试验法筛选提取方法和提取次数；以浸膏得率,总黄酮及根皮苷含量为综合评价指标,对主要影响因素乙醇体积分数、溶剂用量、提取时间进行正交试验优选.结果:佳提取工艺为8倍量70％乙醇回流提取3次,每次1h.结论:优选工艺稳定可行,可作为湖北海棠中总黄酮的提取工艺.
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湖北海棠的化学成分和药理活性研究进展
湖北海棠是一种传统的药食两用植物,在我国分布广泛且应用历史悠久.已有研究发现湖北海棠含有丰富的蛋白质、茶多酚、黄酮类物质和多种微量元素,具有抗氧化、降血糖、抗疲劳、保肝等药理活性,可作为提取根皮苷的原料,也是研制治疗糖尿病药物的潜在植物资源,在药品、饮料和保健食品的开发利用方面具有广阔的前景.通过综合分析湖北海棠的化学成分、药理活性和毒性研究进展,为该药材的进一步研究和开发提供参考.当前需对湖北海棠的提取、分离、纯化和质量控制等进行系统研究,以期开发出安全有效的药品和保健饮品.
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超声辅助离子液体-反相高效液相色谱法同时测定垂丝海棠叶中槲皮苷、根皮苷和3-羟基根皮苷含量
建立以离子液体为萃取剂,结合超声辅助萃取,利用高效液相色谱法测定垂丝海棠叶中根皮苷、3-羟基根皮苷和槲皮苷含量的方法.采用Agilent TC-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)进行分离,以乙腈-1％磷酸水溶液(20:80)为流动相,紫外检测波长为270 nm,流速0.8 mL·min-1,柱温为室温.在优化条件下,根皮苷、3-羟基根皮苷、槲皮苷在0.9～112.5 μg(r=0.999 6),0.093 2～11.65 μg(r=0.999 1),0.097 2 ～12.15 μg(r=0.999 8)线性关系良好,平均回收率分别为99.35％,98.80％,98.19％.该方法绿色环保、快速简便、具有良好的重复性,适用于同时测定垂丝海棠叶中根皮苷、3-羟基根皮苷和槲皮苷的含量.
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RSLC快速测定多穗柯甜茶中5种甜味成分
多穗柯甜茶中含有多种二氢查尔酮类甜味成分,也是其主要活性成分,为了全面评价多穗柯甜茶的质量,该文选择根皮苷、三叶苷、3'-O-乙酰基根皮苷、2'-O-乙酰基根皮苷、根皮素5种甜味成分为指标进行测定.采用超快速液相色谱法(RSLC),Waters Acquity UPLC(R)BEH C18色谱柱(2.1 mmx 100 mm,1.7 μm),乙腈-水(25∶75)等度洗脱,流速0.5 mL·min-1,检测波长285 nm,柱温40℃.结果表明5种甜味成分的线性关系良好(＞0.9991),线性范围(g·L-1)和加样回收率分别为0.0222 ～0.444(98.37％),0.102 8 ～4.112(97.32％),0.003 39 ～0.067 68(96.77％),0.005 1 ～0.204(98.85％)和0.000 538 ～0.010 76( 100.91％).多穗柯甜茶中这5种成分的质量分数范围(mg·g-1)分别为7.83 ～62.37,114.24～272.35,0 ～1.02,0～5.11,0.10 ～1.19,并且它们的含量变化与样品规格、采收时间呈一定的规律性.该实验方法的灵敏度和准确度均较好,采用等度洗脱能够在6 min内完成1份样品的快速测定,适合多穗柯甜茶中5种成分的快速分析.
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根皮苷大鼠在体肠吸收特性研究
采用大鼠在体单向肠灌流模型,运用HPLC测定灌流液中根皮苷的含量,研究根皮苷在小肠段和结肠的吸收情况,并考察药物浓度和P-糖蛋白(P-gp)抑制剂对根皮苷吸收的影响,得出根皮苷在体大鼠肠吸收的动力学特征.结果表明根皮苷在大鼠全肠段均有吸收,在空肠段和结肠段吸收较完全,在十二指肠段和回肠段难以吸收;其在不同肠段的吸收速率常数(Ka)和表观吸收系数(Papp)从大到小依次为空肠＞结肠＞十二指肠＞回肠;不同质量浓度的根皮苷(5.14,10.28,20.56 mg·L-1),其Ka和Papp没有显著性差异,提示在实验浓度范围内,根皮苷在大鼠全肠段的吸收没有浓度依赖性,吸收机制可能属于被动扩散;含P-gp抑制剂组和不含P-gp抑制剂组比较,根皮苷的Ka和Papp有显著性差异(P＜0.05),表明根皮苷可能是P-gp底物.
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根皮苷对日本血吸虫感染小鼠肝纤维化的抑制作用
探讨根皮苷对日本血吸虫感染所致小鼠肝纤维化的保护作用.随机将未感染和感染日本血吸虫尾蚴昆明小鼠分成4组A～D,每组10只:未感染空白对照组(A)、模型组(B)、复方鳖甲软肝片阳性组(C)、根皮苷治疗(40 mg/ (kg· d))组(D).感染后第42 d,B、C、D组均用吡喹酮驱虫治疗500 mg/(kg·d),2日疗法,之后各组开始灌胃给药持续治疗60 d,A和B组生理盐水灌胃对照.实验结束处死小鼠,留取肝脏组织和血清,测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、透明质酸(HA)含量,计算肝体指数,测定肝组织中羟脯氨酸(HYP)含量.苏木素-伊红和Masson胶原纤维染色观察小鼠肝组织变性、虫卵肉芽肿与胶原沉积等病理改变.结果显示,与A组相比,B、C、D组小鼠肝脏有明显虫卵肉芽肿形成、胶原沉积与肝纤维化,伴有不同程度肝细胞炎性损伤坏死.血清中ALT、AST、HA和肝组织中HYP含量均明显升高(P＜0.05或P＜0.01).与B组相比,根皮苷组ALT、AST、HA和HYP含量和肝体指数均明显降低(P＜0.05或P＜0.01),肝组织坏死与胶原沉积明显减轻,虫卵肉芽肿面积减小.结果表明根皮苷具有抗血吸虫性肝纤维化的作用.
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根皮苷对糖尿病小鼠早期视网膜微血管病变的影响
目的 探讨根皮苷对db/db糖尿病小鼠早期视网膜微血管病变的保护作用. 方法 24只雄性7周龄实验小鼠数字抽签分为3组(每组8只),分别为对照组、糖尿病组、糖尿病干预组(干预组).糖尿病组小鼠给予20 mg· kg-1·d-1生理盐水灌胃,干预组根皮苷20 mg· kg-1·d-1灌胃.实验10周后,所有小鼠麻醉处死,常规分离视网膜,病理取材常规制作视网膜普通石蜡切片,苏丹红染色光镜下观察视网膜形态学改变,并采用蛋白质免疫印迹技术(western blot)分析各组小鼠视网膜组织糖原合成酶激酶3 (GSK3β)蛋白与磷酸化糖原合成酶激酶3(p-GSK3β)蛋白的表达.结果 随着实验进程,对照组小鼠精神状况良好.与对照组比罗,糖尿病组小鼠表现为多饮、多食、多尿与体重的快速增加.干预组小鼠上述表现较对照组有所改善.光镜下观察,与对照组相比,糖尿病组小鼠视网膜毛细血管内皮细胞增生,基底膜明显增厚,而干预组小鼠视网膜病变明显得到改善.视网膜组织p-GSK3β蛋白表达糖尿病组76.2±15.8,较对照组小鼠255.4±10.7减少,差异有统计学意义(t=16.30,P＜0.01);干预组小鼠经根皮苷治疗后,p-GSK3β蛋白表达为188.5±18.4,与糖尿病组比较差异有统计学意义(t=8.05,P＜0.01). 结论 根皮苷可以通过减少p-GSK3β蛋白表达,抑制GSK3β蛋白活性的途径,对db/db糖尿病小鼠视网膜微血管病变有保护作用.
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根皮苷对2型糖尿病db/db模型小鼠主动脉的保护作用
目的 观察根皮苷对2型糖尿病小鼠主动脉的保护作用,探讨其可能的作用机制.方法 以db/m小鼠8只作为正常对照组(对照组),16只糖尿病db/db小鼠随机分为2组:糖尿病组和糖尿病干预组.干预组给根皮苷(20mg/kg)盐水灌胃10周.对照组和糖尿病组小鼠每天用相同体积的生理盐水灌胃10周.所有小鼠每周称体质量.10周末空腹处死全部小鼠,留取血清和主动脉.检测血清空腹血糖、三酰甘油、总胆固醇、糖基化终产物和丙二醛浓度.主动脉做病理学检查.结果 10周末,糖尿病组体质量(57.53±3.40)g、空腹血糖(31.21±2.16)mmol/L、三酰甘油(0.39±0.12)mmol/L、总胆固醇(3.15±0.30) mmol/L、糖基化终产物(0.28±0.04) AU/mg和丙二醛(15.18±1.60)mol/L水平高于对照组(P＜0.01).干预组体质量(54.24±1.28)g、血清空腹血糖(29.17±1.41)mmol/L、三酰甘油(0.26±0.06) mmol/L、总胆固醇(2.71±0.26) mmol/L、糖基化终产物(0.24±0.03) AU/mg和丙二醛(13.46±1.28) nmol/L水平较糖尿病组降低(P＜0.05或P＜0.01).干预组主动脉病变较糖尿病组减轻. 结论 根皮苷对糖尿病小鼠的大血管具有保护作用,该作用与其降糖调脂、降低糖基化终产物水平和抗氧化有关.
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锁阳药材的HPLC指纹图谱与抗衰老作用的相关性
目的 研究锁阳药材HPLC指纹图谱与抗衰老作用的相关性.方法 用HPLC-DAD技术建立锁阳药材的指纹图谱;按照体重将小鼠随机分为13组,每组10只:正常组、模型组、对照组(维生素E 25 mg·kg-1)、野生锁阳4个提取物组(S1,S2,S4,S6:相当于生药0.5 g· kg-1)、栽培锁阳6个提取物组(S3,S5,S7,S8,S9,S10:相当于生药0.5 g·kg-1).除了正常组小鼠以外,其他小鼠用D-半乳糖120 mg·kg-1致衰老模型.13周后处死小鼠,用试剂盒法检测小鼠脑组织的丙二醛(MDA)含量;用灰色关联分析法建立其谱-效关系.结果 建立了锁阳药材HPLC指纹图谱,标定共有峰14个.正常组、模型组、对照组、S1～S10锁阳组的MDA含量(nmol·mg-1)分别为2.78±0.21,5.05 ±0.42,3.42±0.52,3.52 ±0.36,3.67±0.62,4.17 ±0.71,3.61±0.55,4.01±0.65,3.73 ±0.47,3.88 ±0.56,4.22±0.69,4.24±0.66,4.12±0.66,模型组与正常组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);S1 ～ S10锁阳组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05).各特征峰所代表的化学成分对其抗衰老贡献大小的顺序依次为10号＞1号＞12号＞7号＞4号＞14号＞13号,其中7号峰为根皮苷,4号峰为儿茶素.结论 所构建的锁阳药材指纹图谱方法简单,重复性好;锁阳药材抗衰老作用与其所含的多种成分有关.
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苹果多酚及其活性单体对糖尿病小鼠肾中与糖代谢相关基因表达的影响
目的 探讨苹果多酚及其活性单体对糖尿病小鼠肾中与糖代谢相关基因的调节作用.方法 分别以50、100、200 mg/(kg?bw)剂量的苹果多酚和它的活性单体连续10周灌胃糖尿病模型小鼠,末次给药后取肾组织测定糖代谢相关的基因指标.结果 与空白组比较,模型组肾组织中PPARγ、InsR、GLUT-4 mRNA表达水平显著下降,而PI3K和Akt mRNA表达水平显著上升.与模型组比较,各处理组肾组织中PPARγ、InsR、GLUT-4 mRNA表达水平均显著上升,而PI3K和Akt mRNA表达水平均下降,统计学差异显著,这些效果药物处理剂量的增加成正比.相比其他处理组,根皮苷的效果好.结论 苹果多酚及其活性单体对糖尿病的改善作用与它们对小鼠肾中的糖代谢相关的基因的调节作用有关.
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根皮苷对饲喂高脂高胆固醇饲料仓鼠肝脏中胆固醇代谢调控基因表达的影响
目的 研究根皮苷对仓鼠血清胆固醇水平及肝脏中胆固醇代谢相关调控基因表达的影响.方法 试验以饲喂高脂高胆固醇饲料仓鼠为动物模型,随机分为对照组和实验组(0.3％、0.6％和0.9％根皮苷),测定血清总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)水平.用实时定量荧光PCR (Real-time PCR)和Western blot 方法检测肝脏中胆固醇代谢相关调控基因mRNA及蛋白表达水平.结果 与对照组相比根皮苷(0.9％)能显著降低血清中TC (P＜0.05)和TG (P＜0.01)水平;饲喂根皮苷(0.6％,0.9％)能显著升高血清HDL-C水平(P＜0.01).RT-PCR分析显示,肝脏中LDL-R、LXR、CYP7A1基因表达上调, HMG-CoA-R基因表达下调.Western blot结果显示,与对照组相比给予0.6％、0.9％根皮苷后胆固醇合成限速酶HMG-CoA-R蛋白表达水平显著降低(P＜0.05),0.9％根皮苷组CYP7A1表达水平显著升高(P＜0.05).结论 根皮苷调控机体胆固醇代谢的机制可能是通过调控肝脏中胆固醇代谢相关基因的表达来实现的.
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根皮苷对雄性果蝇抗衰老活性的研究
目的：探究根皮苷（phloridzin）对雄性果蝇的抗衰老作用机制。方法实验以Oregon K野生型黑腹雄性果蝇为模型，将2d龄雄性果蝇随机分为4组（每组200只），即对照组和不同剂量根皮苷组（0.5、1.0和2.0 mg/ml）。定时记录果蝇死亡数目来统计果蝇的平均寿命和高寿命，绘制果蝇寿命曲线图；测定超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、过氧化氢酶（catalase，CAT）和丙二醛（malondialdehyde，MDA）；Real Time-PCR法测定相关基因mRNA表达水平。结果根皮苷各剂量组果蝇的平均寿命及高寿命较对照组均显著延长（P<0.05）；给予2.0mg/ml 根皮苷可以显著提高 Cu-Zn-SOD和CAT 酶活力（P<0.01），显著降低MDA含量(P<0.01)，并显著上调Cu，Zn-SOD、Mn-SOD、CAT mRNA表达水平（P<0.01），显著下调MTH (methuselah) mRNA表达水平（P<0.05）。结论根皮苷可以有效延缓果蝇衰老，并可能通过调控抗氧化基因的表达水平来实现。[营养学报，2015，37（4）：372－375,383]
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红槭树枝条酚类成分及其抗氧化和抑制α-葡萄糖苷酶活性研究
目的 研究红槭树枝条甲醇提取物中的酚类化学成分及其抗氧化和抑制α-葡萄糖苷酶活性.方法 采用甲醇浸泡提取红槭树枝条,系统溶剂萃取其甲醇提取物,并用硅胶、Sephadex LH-20、ODS和制备HPLC等各种柱色谱技术对其醋酸乙酯部位进行分离纯化,根据化合物的理化性质和谱学数据鉴定化合物结构,并对单体化合物进行DPPH自由基清除和抑制α-葡萄糖苷酶活性测试.结果 从红槭树枝条醋酸乙酯部位中分离得到了10个酚类化合物,分别鉴定为儿茶素(1)、表儿茶素(2)、表儿茶素-3-O-没食子酸酯(3)、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(4)、槲皮素-3-O-(3"-没食子酰基)-吡喃鼠李糖苷(5)、槲皮素-3-O-(2"-没食子酰基)-吡喃鼠李糖苷(6)、根皮苷(7)、条茶槭甲素(8)、条茶槭乙素(9)和条茶槭丙素(10).结论 化合物3、5～7为首次从红槭树枝条中分离得到,其中化合物7是首次从槭树科植物中分离得到的一个查耳酮类成分.所有化合物均具有很强的抗氧化活性,化合物3和8具有很强的抑制α-葡萄糖苷酶活性.
关键词： 红槭树 酚类 表儿茶素-3-O-没食子酸酯 根皮苷 抗氧化 抑制α-葡萄糖苷酶活性 -
苹果属植物叶片的代谢组学分析及5种成分的含量测定研究
目的 对不同来源的苹果属植物叶片进行化学成分分析比较,为苹果属植物叶片的综合利用及资源开发奠定基础.方法 采用UPLC-DAD技术测定5种主要成分(根皮苷、三叶苷、根皮素、芦丁和槲皮苷)的含量,采用UPLC-Q-TOF-MS代谢组学技术对苹果属不同种(品种)、不同产地来源的20种共40份叶片进行了化学成分检测,并结合统计软件对各组间化学成分进行了比较分析.结果 5种成分在苹果属不同来源植物叶片中含量差异较大,其中根皮苷普遍含有,质量分数相对较高,在1.01％～17.15％,根皮素、芦丁和槲皮苷也较广泛存在,而三叶苷则仅在真正苹果组的山荆子系和花楸苹果组中存在,苹果系和栽培品种中未检测到.代谢组学分析结果表明真正苹果组中苹果系和山荆子系化学成分差异显著,共发现26个差异标志物;不同产地来源的植物叶片化学成分有所不同;野生种与栽培种植物叶片化学成分相似.结论 苹果属植物叶片普遍含有根皮苷等多酚类成分,是潜在的药物和保健产品资源;该属植物叶片的化学成分种类和含量在不同组、系及产地间具有一定的差异,为合理利用该属植物奠定基础;另外,苹果属植物叶片资源丰富且可再生,值得进一步深入研究和开发.
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木姜叶柯中根皮苷的提取工艺优选
目的:以木姜叶柯为原料,优选其根皮苷的提取工艺.方法:分别提取木姜叶柯中的根皮苷,比较提取物得率.结果:热水提取法所获得的根皮苷纯度及含量高.以1:20料液比,提取2h,提取3次为热水提取法佳工艺.结论:热水提取法是木姜叶柯中根皮苷的优提取方法.
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根皮苷药理研究进展
综述近年来根皮苷在降低血糖、抗氧化、抗动脉粥样硬化、改善胰岛素抵抗以及抗肿瘤等方面的药理作用及其机制的研究进展.
关键词： 根皮苷 药理作用 机制 钠-葡萄糖协同转运蛋白 自由基 -
根皮苷对LO2正常人肝细胞体外细胞毒性的实验研究
目的 探究根皮苷对正常人肝细胞LO2的体外细胞毒性.方法 实验分为正常组和根皮苷组.将从甜茶中提取根皮苷配以不同浓度根皮苷的培养液,浓度分别为4.0、8.0、16.0、32.0、64.0、128、256、512、800、1 000 μmol/L.分别在24、48和72 h,使用MTT比色法测定并计算出细胞活力率.结果 给药24、48和72 h后,根皮苷在4.0～1 000 μmol/L浓度的范围内对正常人肝细胞LO2无毒性作用,细胞的存活率在90％以上.结论 在4.0 ～1 000 μmol/L浓度范围内,根皮苷对正常人肝细胞的正常增殖无明显抑制,未显示有肝细胞毒性作用.
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一测多评法测定湖北海棠叶中5种黄酮的含量
目的 建立一测多评法同时测定湖北海棠叶中5种黄酮的含有量.方法 湖北海棠叶甲醇提取液的分析采用BDS Hydedsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-0.1％磷酸水溶液,梯度洗脱;检测波长250 nm;体积流量0.6 mL/min;柱温25℃.以根皮苷为内标,建立金丝桃苷、3-OH根皮苷、槲皮素、根皮素的相对校正因子,再测定其含有量.结果 5种黄酮在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 7),平均加样回收率98.12％～102.2％,RSD 0.22％ ～2.24％,一测多评法所得结果与外标法接近.结论 该方法稳定可靠,可用于湖北海棠叶的质量控制.
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根皮苷可增强索拉非尼抑制肝癌细胞能量代谢及活力
目的:探讨根皮苷联合索拉非尼对肝癌细胞能量代谢与凋亡的影响.方法:将根皮苷5 μmol/L和(或)索拉非尼5 μ上mol/L作用于HepG2细胞48 h后,检测肝癌细胞活力、肝癌细胞葡萄糖摄取与细胞内ATP含量、caspase-3活力与凋亡细胞计数.结果:索拉非尼组肝癌细胞活力降低,与对照组差异有统计学意义(P＜0.05);索拉非尼与根皮苷联合组肝癌细胞活力进一步降低,与其他各组(对照组、索拉非尼组及根皮苷组)差异均有统计学意义(P＜0.05).根皮苷组葡萄糖摄取及ATP生成减少,与对照组差异有统计学意义(P＜0.05);索拉非尼与根皮苷联合组葡萄糖摄取及ATP生成进一步减少,与其他组差异均有统计学意义(P＜0.05).索拉非尼组与根皮苷组caspase-3活力与细胞凋亡较对照组增强(P＜0.05);索拉非尼与根皮苷联合组caspase-3活力与细胞凋亡进一步增强,与其他组差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:根皮苷可以通过抑制肿瘤细胞ATP生成和促进肿瘤细胞凋亡来提高索拉非尼疗效.
