首页 > 文献资料
-
大鼠死后肋软骨细胞核DNA含量随死亡时间的变化
目的 研究大鼠死后肋软骨细胞核DNA含量与晚期死亡时间的相关性.方法 应用改良的Feulgen法结合计算机图像分析技术对死后大鼠35d内肋软骨细胞核DNA含变化进行观测分析.结果 死后1-28d,细胞核染色逐渐变淡,至35d时已观察不到,死后肋软骨细胞核DNA含量与死亡时间呈直线相关.结论 大鼠肋软骨细胞核DNA含随死亡时间延长呈线性规律下降.
-
骨关节炎软骨细胞对白细胞介素18的炎症应答
目的 探讨IL-18对骨关节炎软骨细胞的作用.方法 取骨关节炎患者的膝关节软骨,进行原代细胞培养.不同浓度的IL-18(0,50,150,300 ng/mL)刺激软骨细胞,RT-PCR检测TNFα和COX-2 mRNA的表达,ELISA检测TNFα、PGE2的水平.应用IL-1受体阻断剂(IL-1Ra)+IL-18干预软骨细胞,检测软骨细胞COX-2的表达量和培养液中PGE2的水平.提取软骨细胞RNA,测定IL-18受体的表达.结果 对于COX-2和TNFα,300 ng/mL组和150 ng/mL组mRNA的表达量显著高于对照组(P＜0.01,P＜0.05).50、300 ng/mL组的PGE2水平显著高于对照组(P＜0.05).150、300 ng/mL组的TNFα蛋白的浓度显著高于对照组(P＜0.05),IL-1Ra组的PGE2浓度高于对照组(P＜0.01),但是低于IL-18组(P＜0.01).软骨细胞能够检测到IL-18受体的表达.结论 IL-18诱导软骨细胞产生炎症应答,这种作用和IL-1β有关但不完全依赖IL-1β.
-
独活寄生汤对脂多糖诱导的大鼠软骨细胞炎症模型IL-1β、TNF-α表达的影响
目的 观察独活寄生汤水提物对体外培养的炎症模型大鼠软骨细胞IL-1β和TNF-α的影响.方法 采用4周龄SD大鼠分离培养体外软骨细胞,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色法对第二代软骨细胞进行鉴定.脂多糖诱导软骨细胞,建立软骨细胞的炎症模型,确定佳干预浓度和时间;模型复制成功后,随机分为空白对照组(脂多糖浓度为0 ng/ml)、模型组(脂多糖浓度为10 ng/ml)和独活寄生汤组,分别干预软骨细胞,elisa法检测各组细胞上清液中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达变化.结果 造模实验中,各组干预8 h后,脂多糖浓度为10 ng/ml、100 ng/ml、1000 ng/ml、2000 ng/ml时,细胞上清液中IL-1β和TNF-α表达高于空白对照组.脂多糖浓度为10 ng/ml时,IL-1β和TNF-α表达高于100 ng/ml、1000 ng/ml、2000 ng/ml,差异具有统计学意义(P<0.01);10 ng/ml脂多糖分别干预软骨细胞4 h,8 h,12 h和24 h,细胞上清液中IL-1β(t=-30.869,t=-8.422,t=-13.999,t=-19.532,P<0.05)和TNF-α(t=-9.441,t=-14.053,t=-4.238,t=-4.124,P<0.05)的表达均高于空白对照组,且干预8 h时细胞上清液中IL-1β(F=21.48,P<0.01)和TNF-α(F=104.15,P<0.01)的表达高于4 h,12 h和24 h.独活寄生汤组应用独活寄生汤干预8 h造模细胞后,独活寄生汤浓度为100μg/ml、200μg/ml、300μg/ml时,细胞上清液中IL-1β和TNF-α的表达均低于空白对照组,差异具有统计学意义(F=323.95,F=2789.80,P<0.01),浓度300μg/ml时IL-1β和TNF-α表达低于100μg/ml和200μg/ml时,差异具有统计学意义(F=34.46,F=4.373,P<0.01).结论 脂多糖浓度为10 ng/ml时,可成功建立体外软骨细胞炎症模型,独活寄生汤浓度为300μg/ml时可有效抑制软骨细胞炎症模型IL-1β、TNF-α的表达.
-
川芎嗪对兔软骨细胞基质金属蛋白酶表达的影响
目的:研究川芎嗪对兔软骨细胞基质金属蛋白酶表达的影响.方法:①体外分离培养兔关节软骨细胞,并以其为实验模型;将实验分为3组,分别为正常对照组、白介素组、川芎嗪+白介素组;②MTT法检测细胞增殖情况;③Real-time PCR检测MMP-1,MMP-13和TIMP-1的mRNA表达量.结果:①MTT检测结果显示,川芎嗪+白介素组细胞增殖情况显著高于正常对照组和白介素组(P＜0.05);②Real-time PCR结果显示,川芎嗪+白介素组MMP-1和MMP-13的mRNA表达量显著低于白介素组(P＜0.05),而TIMP-1的mRNA表达量则显著高于白介素组(P＜0.05).结论:川芎嗪可抑制IL-1β对软骨细胞的炎症损伤,具有保护软骨细胞,延缓软骨基质降解的作用,临床上可作为OA的治疗用药.其机制可能与川芎嗪促进软骨细胞增殖,并下调MMP-1和MMP-13,上调TIMP-1表达有关.
-
TGF-β2体外诱导骨髓间充质干细胞表达软骨细胞表型的观察
目的:观察骨髓间充质干细胞(MSCs)在TGF-β2诱导下向软骨细胞表型转化的能力,探讨其作为软骨组织工程种子细胞的可能性.方法:抽取兔髂骨骨髓液3～4ml,进行原代和传代培养,传代后实验组以高糖DMEM无血清特定培养液诱导(含TGF-β210ng/ml、地塞米松10-7M、维生素C 50μmol/L),对照组以高糖DMEM无血清培养液培养,相差显微镜下观察细胞形态变化,免疫组织化学染色检测软骨特异性Ⅱ型胶原表达.结果:诱导后细胞体外扩增能力显著降低,细胞形态由成纤维样梭形向多角形、多边形或类圆形转变,诱导21天后细胞形态变化为显著,Ⅱ型胶原免疫组化染色深而均匀.结论:TGF-β2可有效诱导MSCs向软骨细胞表型转化,分泌软骨细胞特异性基质,有可能成为软骨组织工程较理想的种子细胞来源.
-
骨髓间质干细胞体外定向诱导分化为软骨细胞的实验研究
目的:探讨分离骨髓间充质干细胞(MSCs)并诱导其向软骨细胞转化的体外培养方法,为软骨组织工程的种子细胞来源提供实验依据.方法:抽取兔髂骨骨髓液,经梯度离心法和贴壁法进行体外培养,贴壁细胞传代,取第3代细胞在培养基中添加软骨分化诱导剂[含转化生长因子(TGF-β2)10ng/ml、地塞米松10-7mol/L、维生素C50μmol/L,经7、14、21d诱导培养后,倒置显微镜观察细胞形态,免疫组织化学染色检测软骨特异性Ⅱ型胶原表达.将诱导细胞与软骨支架材料-聚磷酸钙纤维/左旋聚乳酸(CPP/PLLA)复合,1周后终止培养,扫描电镜观察细胞黏附情况.结果:诱导后细胞体外扩增能力显著降低,细胞形态由成纤维样梭形向多角形、多边形或类圆形转变,诱导21d后细胞形态变化为显著,Ⅱ型胶原免疫组化染色深而均匀.诱导后的MSCs可在支架材料内良好黏附生长.结论:体外培养的MSCs可定向诱导分化为软骨细胞,分泌软骨细胞特异性基质,可用作软骨组织工程的种子细胞.
-
转化生长因子β1在兔骨髓间充质干细胞分化为软骨细胞中的作用
目的:通过转化生长因子β1诱导兔骨髓间充质干细胞,观察干细胞向软骨细胞分化效果.方法:纯化兔骨髓间充质干细胞;免疫荧光法检测细胞表面标志;用含转化生长因子β1的诱导液培养骨髓间充质干细胞;MTT测定不同诱导液下的细胞的增殖活性;免疫组化检测Ⅱ型胶原蛋白表达.结论:含TGF-β1的诱导液可有效诱导MSCS向软骨细胞表型转化,且骨髓间充质干细胞向软骨分化所需的特异性细胞外基质Ⅱ型胶原明显升高,分泌软骨细胞特异性基质,因此有可能成为软骨组织工程较理想的种子细胞来源.
-
中药单体与骨关节炎软骨细胞凋亡的研究进展
骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一种常见的关节退行性疾病,也是引起中老年人关节疼痛的常见原因之一,严重影响人类健康.近年研究显示,软骨细胞的凋亡在OA的发生、发展中产生了重要影响.因此,研究中药,尤其是中药单体对关节软骨细胞凋亡的影响将有助于OA的防治.为此,本文针对近年来软骨细胞凋亡及中药单体对其作用的研究进展作一简要综述.
-
喹诺酮类药物对软骨细胞毒性的研究与分析
目的 评价喹诺酮类药物对幼龄大鼠、兔软骨细胞的相对毒性及对细胞外增殖和蛋白多糖分泌的影响.方法 检索中国核心期刊网、中国生物医学文献网、中国学术期刊综合数据库近三年有关喹诺酮类药物对软骨细胞毒性的相关研究报告114篇,分类立项进行Meta分析.结果 喹诺酮类药物使细胞形态发生改变,对幼龄大鼠及兔细胞增殖具有抑制作用,对蛋白多糖分泌具有抑制作用,随幼龄鼠、兔周龄增大而减弱,随培养时间延长而增强.结论 喹诺酮类药物对幼龄大鼠、兔软骨细胞增殖和蛋白多糖分泌有明显抑制作用.
-
距骨骨软骨病损的临床治疗进展
距骨骨软骨病损是踝关节慢性疼痛的主要病因之一,可根据病史、体格检查、影像学检查确诊.目前,无临床症状的距骨骨软骨病损可采取保守治疗.小面积损伤病灶(直径<15 mm),骨髓刺激技术可取得良好效果,包括关节镜下微骨折术、钻孔术等.大面积软骨缺损或骨髓刺激疗法效果不佳者需手术,手术方法包括自体或异体骨软骨移植术、自体软骨细胞移植术等.各方法的远期疗效目前尚不明确,需综合骨软骨损伤范围和分期等因素选取治疗方法.本文综述了目前距骨骨软骨病损的诊断和临床治疗进展.
-
海鲜过量易诱发关节炎
韩国一项新研究发现,三文鱼等海鲜、红肉、可可及鸡肉等富含锌的食物容易导致令患者疼痛不堪的骨关节炎.新研究中,为了验证软骨细胞中的锌离子水平在骨关节炎中所起的作用,韩国光州科学技术院全张秀博士及其同事检测了来自骨关节炎患者以及骨关节炎小鼠模型的软骨.
-
雪莲注射液对兔关节软骨细胞的影响
目的研究雪莲注射液对兔关节软骨细胞代谢的影响.方法采用兔关节软骨细胞进行体外培养,观察不同浓度的雪莲注射液对软骨细胞的蛋白多糖、蛋白质和DNA的合成的影响.结果雪莲注射液在其有效成分总黄酮于2.5～50μg/ml浓度范围内显著促进软骨细胞蛋白多糖、蛋白质、DNA的合成(p＜0.01),提示雪莲注射液具有软骨保护作用.
