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丙烯酰胺对大鼠神经组织NRG1蛋白量的影响
目的 探讨丙烯酰胺( acrylamide,ACR)染毒不同时间对神经组织和血清中NRG1的影响.方法 雄性SD大鼠80只,随机分为对照组和丙烯酰胺(ACR)组.丙烯酰胺大鼠腹腔注射20 mg/kg的ACR,每周5次；对照组腹腔注射等量的生理盐水.在ACR染毒后第7、14、21和28天观察大鼠的一般状况,检测大鼠神经行为的变化.免疫组化方法观察大鼠小脑、脊髓、坐骨神经NRG1蛋白定位,并采用ELISA法检测神经组织和血清蛋白NRG1的影响.结果 与对照组比较,ACR染毒28 d后大鼠体重出现明显下降；第21和28天时大鼠舔后爪时间明显延长；ACR染毒7d可见脊髓NRG1显著下降,并持续到染毒28 d；小脑中的NRG1在第21天下降了44.74％,差异有显著性.坐骨神经中NRG1出现先上升,然后呈下降趋势；染毒14 d时血清中NRG1开始下降,其下降趋势与脊髓的变化是一致的.免疫组化结果显示NRG1表达在小脑的分子层、浦肯野细胞和颗粒层细胞、脊髓灰质神经元和白质中神经胶质细胞、坐骨神经的雪旺氏细胞.结论 丙烯酰胺导致的神经组织中NRG1的表达显著下降.
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Neuregulin-1对血管生成的影响
Neuregulin-1（NRG1）简称神经调节因子1，属于NRG家族的一员，广泛存在于人体各组织之中。NRG是一个由4种基因编码的多肽家族，其包含4种异构体NRG1、2、3和4。NRG的功能性受体由erbB酪氨酸激酶受体所组成。ErbB蛋白属于跨膜酪氨酸激酶的表皮生长因子受体（EGFR）家族成员。NRG通过与特异性ErbB受体结合，并活化后者而发挥其相应的生物学效应。本文总结归纳NRG1对血管方面的影响和作用。
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许旺细胞培养液诱导NRG1蛋白转染骨髓基质干细胞向类神经元样细胞的转化
背景：国内外研究人员已经利用化学方法或单纯与许旺细胞共培养方法成功将骨髓基质干细胞诱导为许旺细胞样细胞，但仍存在一些弊端，前者对细胞有一定毒性，后者诱导速度慢，耗时较长。
目的：探讨大鼠的许旺细胞培养液诱导NRG1转染的骨髓基质干细胞分化成神经组织细胞的可行性。
方法：利用NRG1转染骨髓基质干细胞，待生长状态稳定后，将培养液更换为许旺细胞的培养液，置于37℃、体积分数为5%CO 2培养箱中培养。
结果与结论：经许旺细胞培养液诱导10 d后，光镜下可观察到NRG1转染的骨髓基质干细胞胞体开始回缩，呈梭形，出现许旺细胞样细胞，呈岛屿状紧密排列，免疫荧光染色鉴定诱导后细胞S-100、NSE和GFAP呈阳性表达，NSE表达阳性率为25.32%，GFAP表达阳性率为38.69%，S-100表达阳性率为35.99%，结果表明许旺细胞分泌的细胞因子和NRG1蛋白共作用可以诱导骨髓基质干细胞高效地向神经组织细胞分化，并表达许旺细胞、神经元和胶质细胞表面抗原。 -
NRG1-ErbB2信号通路对骨癌痛大鼠脊髓胶质细胞及IL-1β的影响
目的 探讨NRG1-ErbB2信号通路对骨癌痛大鼠脊髓胶质细胞和IL-1β的影响.方法 雌性SD大鼠,随机分为3组,每组12只.Sham组(假手术组);CIBP组:大鼠胫骨内注射Walker256乳腺癌细胞构建骨癌痛模型;CIBP+ PD168393组:构建CIBP模型后6d,鞘内注入PD168393 10 μg,每日1次,连续9d,其余组鞘内注入生理盐水.接种瘤细胞后14 d,检测大鼠脊髓背角GFAP、OX42和IL-1β的变化.结果 接种瘤细胞后14d,CIBP组大鼠GFAP、OX42积分光密度值明显高于Sham组,差异有统计学意义(P＜0.01),肿瘤细胞的植入能诱导大鼠同侧脊髓背角GFAP和OX42的表达显著增加,并使星形胶质细胞和小胶质细胞的胞体肥大.而给予ErbB2受体抑制剂PD168393可明显抑制脊髓背角神经化学物质的改变,GFAP和OX42的表达均明显降低(P＜0.01).CIBP组IL-1β于接种瘤细胞后14d表达增加,明显高于Sham组(P＜0.01),给予PD168393能显著抑制IL-1β表达增加(P＜0.01).结论 大鼠胫骨接种瘤细胞后,脊髓背角内星形胶质细胞和小胶质细胞被广泛激活,IL-1β释放增加,阻断NRG1-ErbB2受体信号通路能有效抑制脊髓胶质细胞的表达和活化及炎症介质IL-1β的释放,从而产生镇痛作用.
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长链非编码RNA MALAT1在舌鳞状细胞癌中的表达及生物学意义
目的:探讨MALAT1在人舌鳞状细胞癌组织及细胞株中的表达及生物学意义.方法:通过实时荧光定量PCR,应用GraphPad.Prism.v5.0软件包检测MALAT1在60例舌鳞状上皮细胞癌组织中及SCC9、SCC15、SCC25、CAL27 4株鳞状细胞癌细胞系中的表达;利用生物公司构建的慢病毒干扰载体GV248建立舌鳞状细胞癌稳转细胞株,通过生物基因芯片分析,应用GraphPad.Prism.v5.0软件包检测凋亡相关基因BNIP3L、NRG1的表达,并进行统计学处理.结果:MALAT1基因在舌鳞状细胞癌组织及4株舌鳞状细胞癌细胞株中的表达较对照组显著增高(P＜0.05);经沉默MALAT1后,CAL27及SCC25中MALAT1基因的沉默效率较阴性组降低75％以上;凋亡相关基因BNIP3L、NRG1表达显著下调.结论:MALAT1基因在舌鳞状细胞癌组织和细胞株中高表达;下调MALAT1基因表达后,引起肿瘤凋亡相关基因BNIP3L、NRG1的表达下调,MALTA1有望成为新的肿瘤治疗靶点.
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NRG1-ErbB4信号通路在氯胺酮抗抑郁中的作用
目的 观察氯胺酮抗抑郁过程中大鼠海马神经调节蛋白1(NRG1)、表皮生长因子4(ErbB4)及微清蛋白(PV)的变化,探讨NRG1-ErbB4信号通路在氯胺酮抗抑郁中的作用.方法 雄性Wistar大鼠24只,200～250 g,随机均分为四组(n=6):对照组(C组)、抑郁组(D组)、氯胺酮组(K组)及NRG1+氯胺酮组(N组).N组大鼠行侧脑室置管.休息1周后,D、K、N组行强迫游泳15 min建立大鼠抑郁模型.次日N组大鼠侧脑室给予NRG1；30 min后,C、D、K、N组分别经腹腔注射生理盐水1 ml、生理盐水1 ml、氯胺酮10mg/kg、氯胺酮10mg/kg;给药后30 min行强迫游泳实验,记录5 min内不动时间.行为学测试后,取大鼠海马组织,采用ELISA法测定NRG1的含量,采用Western Blot法检测ErbB4、p-ErbB4及PV蛋白水平.结果 与C组比较,D组强迫游泳不动时间明显延长(P＜0.01),NRG1、p-ErbB4及PV表达明显上调(P＜0.05).与D组比较,K组强迫游泳不动时间明显缩短(P＜0.01),NRG1、p-ErbB4及PV表达明显下调(P＜0.05或P＜0.01).与K组比较,N组强迫游泳不动时间明显缩短(P＜0.05),NRG1、p-ErbB4及PV表达明显上调(P＜0.05或P＜0.01).各组大鼠自主活动及ErbB4表达水平差异无统计学意义.结论 NRG1 ErbB4信号通路下调参与了氯胺酮的抗抑郁作用.
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上调NRG1对甲状腺癌细胞增殖和凋亡的影响及可能机制
目的:探讨神经调节蛋白1(neuregulin 1,NRG1)对甲状腺癌细胞系MDA-T32和B-CPAP增殖和凋亡的影响及可能机制.方法:构建pCDNA3.1-NRG1过表达载体,脂质体法转染甲状腺癌细胞系MDA-T32和B-CPAP,qRT-PCR检查转染组与对照组NRG1基因表达,Western blotting法检测各组细胞NRG1蛋白表达.用CCK-8法检测细胞的增殖能力.流式细胞术检测Annexin V/PI双染各组MDA-T32细胞的凋亡情况.Western blotting法检测凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax和Bcl-2的表达.结果:pCDNA3.1-NRG1成功转染MDA-T32和B-CPAP细胞,转染后qRT-PCR和Western blotting结果显示NRG1基因和蛋白表达水平上调.高表达NRG1能抑制MDA-T32和B-CPAP细胞的增殖.流式细胞术结果显示,NRG1诱导MDA-T32和B-CPAP细胞凋亡.Western blotting结果显示NRG1高表达可以促进MDA-T32和B-CPAP细胞Caspase-3、Bax的表达,抑制Bcl-2的表达.结论:NRG1能够抑制甲状腺癌细胞的增殖,通过调节线粒体凋亡通路诱导凋亡.
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miR-125a-3p下调胃癌细胞NRG1表达并抑制细胞增殖
目的:探讨microRNA-125a-3p(miR-125a-3p)在胃癌细胞恶性增殖中的作用及调控机制.方法:qRT-PCR法检测各肿瘤细胞系及正常对照细胞系中miR-125a-3p的表达,应用microRNA类似物(Mimic及Inhibitor)转染技术改变细胞内miR-125a-3p表达.Western-blot检测NRG1蛋白表达水平的改变.XTT、平板克隆及裸鼠成瘤试验检测处理后胃癌细胞的增殖能力.流式细胞术检测细胞周期变化情况.结果:miR-125a-3p在多个胃癌细胞系中表达均低于永生化胃黏膜上皮细胞系(P＜0.01).利用类似物转染可以有效改变肿瘤细胞miR-125a-3p的表达(P＜0.01).miR-125a-3p过表达可以降低NRG1蛋白的表达、抑制细胞周期进展,并降低胃癌细胞系的体外和在体增殖能力,抑制miR-125a-3p表达可以见到相反结果.结论:miR-125a-3p可通过调控NRG1表达在胃癌中起到抑癌作用.miR-125a-3p可以抑制胃癌细胞的恶性增殖,因此具有成为胃癌治疗新策略候选靶点的可能.
关键词： microRNA-125a-3p NRG1 胃癌 细胞恶性增殖 -
NRG1在肝细胞肝癌中杂合性丢失和蛋白表达的研究
目的:分析在肝细胞性肝癌中NRG1基因的两个多态性位点D8S278 和D8S499杂合性丢失(loss of heterozygosity,LOH)情况及其与NRG1蛋白表达水平之间的关系,探讨NRG1在肝细胞肝癌发生发展中的作用.方法:酚氯仿抽提经石蜡包埋的肝癌和癌旁正常组织DNA,进行PCR扩增,扩增出来的产物进行变性聚丙烯酰胺凝胶电泳并分析两位点杂合性丢失情况;用免疫组织化学方法检测肝癌组织和癌旁正常组织中NRG1的表达情况.结果:D8S278 和D8S499的LOH率分别为32.43%(24/74)、37.86%(26/69),总频率为48.65%(36/74);NRG1在肝癌组织中的阳性表达率为67.57%(50/74),显著低于在正常组织中的表达水平(97.30%,72/74)(P<0.05),这种降低与NRG1基因多态性位点的LOH有关;NRG1表达下调与肿瘤大小、Edmondson分级相关,而与年龄、性别、HBsAg、AFP、肝硬化和肝内外转移无明显相关.结论:NRG1基因可能是肝细胞肝癌的一个候选抑癌基因,在肝癌发生发展中起一定的作用;可为临床诊断、治疗及预后评估提供理论依据.
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氯胺酮致小鼠产生类精神分裂症与NRG1、ErbB4 mRNA表达的相关性
目的 探讨氯胺酮连续给药致小鼠产生的类似精神分裂症症状,与精神分裂症易感基因神经调节蛋白1(neuregulin-1,NRGI)及其受体ErbB4 mRNA表达的相关性,为研究精神分裂症的可能发病机制提供参考依据. 方法 50只雄性昆明种小鼠,随机分为生理盐水组、氯胺酮小剂量(25 mg/kg)、中剂量(50mg/kg)、大剂量(100mg/kg)组和氯氮平治疗组,腹腔注射给药,1次/d,连续7d.氯氮平组在连续腹腔注射7d氯胺酮(1次/d,每次100mg/kg))后,再用氯氮平灌胃7d(1次/d,每次20mg/kg).HE染色观察海马神经元的变化;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测海马中NRG1及ErbB4 mRNA的表达.结果 注射7d氯胺酮后,大剂量组海马区NRG1及ErbB4 mRNA的表达显著减少. 结论 氯胺酮诱导小鼠产生类似精神分裂症的症状,可能与海马区NRG1及ErbB4 mRNA的表达减少相关联.
