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sHsps在小鼠正常腭发育和腭裂发生过程中的表达
目的研究sHsps在正常腭发育及腭裂发生过程中的表达情况.方法在GD10经口一次分别给予实验组孕小鼠80mg/kg的视黄酸(RA)、对照组孕鼠等体积的植物油,并分别于GD15-GD17取两组胎鼠的腭,利用RT-PCR方法半定量检测实验和对照组中sHsps的表达丰度.结果正常腭除Hspb10在GD17不表达外,其余Hsps基因在GD15-GD17均有明显表达,Hsp20、Hsp25、Hsp27、Hsp32、Hspb2、Hspb3、Hspb7表达丰度基本恒定,Hsp30、Hspb5随胚龄的增加而表达丰度增高,Hsp10、Hsp22、Hspb4、Hspb9在GD16出现表达高峰.Hsp30、Hsp32、Hspb4、Hspb10在GD15-GD17的表达丰度腭裂组明显高于正常组.Hsp10、Hsp60、Hspb5、Hspb9在GD15-GD17的表达丰度腭裂组明显低于正常组.Hspb9、Hspb10在正常腭发育和腭裂发生过程中的表达模式明显不同.结论15种Hsps除Hspb10在GD17不表达外,其余在GD15-GD17正常腭发育过程中均有明显表达,但不同Hsps的表达特点有所不同;Hsp30、Hsp32、Hspb4、Hspb10在腭裂发生中可能主要起应激保护反应,Hsp10、Hsp60、Hspb5、Hspb9、Hspb10可能与腭裂的发生有关.
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转HCY-2基因对鸡胚神经管发育的影响
为探讨新基因HCY-2与神经管畸形表型的关系及明确其是否具有基因毒性作用,应用脂质体介导基因转移技术将构建的含有全长HCY-2 cDNA(2014bp)的真核表达载体转入新生鸡受精卵,培养3.5天后观察其对神经管闭合时期胚胎的整体分子生物学效应,利用Western印迹和免疫组化等技术研究在整体环境下HCY-2蛋白的表达和分布情况.结果显示转HCY-2基因(5～20μg)可诱导早期鸡胚发生神经管畸变,而空载质粒组胚胎发育正常;Western印迹和免疫组化分析发现有HCY-2蛋白大量表达,主要分布于胚脑组织中,显著高于空载质粒对照组;透射电镜观察发现转HCY-2基因后,胚脑细胞超微结构受损和出现呈弥散分布的凋亡细胞.结论是HCY-2基因对神经管闭合时期的胚胎神经系统发育具有明显基因毒性作用,其编码蛋白在神经管畸形发生过程中可能具有重要意义.
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鸡胚胎微量血采集和其血红蛋白叶酸盐水平测定及意义
建立了10日龄鸡胚胎微量血采集方法,尿绒膜血管采血量约为100μl/胚胎,制成的纸血片再用微生物法测定其血红蛋白叶酸盐含量(叶酸盐/血红蛋白;μg/g).实验结果表明,滴至在鸡胚胎内壳膜表面的叶酸(folic acid, FA)和同型半胱氨酸(homocysteine, HCY)均能在短期内迅速通过内壳膜和尿绒膜而被吸收入血.滴注5μgFA后,血红蛋白叶酸盐吸收高峰时间点为60min时,剂量为22.26μg/g.单纯滴注HCY(8μ mol/胚胎)对胚胎血红蛋白叶酸盐水平影响不大(P>0.05).FA和HCY联合给药60min后,胚胎血红蛋白的叶酸盐水平明显下降(P<0.001),呈拮抗作用.此外,还评价了实验方法的优缺点.
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先心病病因及预防
先天性心脏病是指胚胎时期心脏血管发育异常而造成的疾病.先天性心脏病发生率占存活的新生儿的0.7%～0.8%.在世界各国这个数值大致相当,其中不包括早产儿的动脉导管未闭,主动脉的双瓣畸形或二尖瓣脱垂.在西方国家,先天性心脏病是引起儿童心血管疾病发生率和死亡率的主要原因.
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孕期阴道流血112例B超显像分析
孕期妇女阴道流血原因较多,B超检查可直观显示胚胎在子宫内的发育情况,对临床判断胚胎是否存活及诊断各种异常妊娠,具有重要指导意义.本文将20003～2005年的孕期阴道流血患者112例超声显像图分析如下.
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米非司酮配伍米索前列醇在稽留流产刮宫术前的应用
稽留流产是临床上较难处理的流产类型,传统的治疗方法是直接行刮宫术,但因胚胎或胎盘组织机化,与子宫壁紧密粘连而不易完全剥离,造成刮宫困难,且未产妇宫颈硬,宫颈扩张困难,使手术难度加大.本院于1999年1月～2004年1月对稽留流产患者在刮宫术前给予米非司酮配伍米索前列醇口服,取得了满意效果,现报告如下.
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畸形子宫早孕行药物流产16例报告
畸形子宫合并妊娠少见,早孕时要终止妊娠时可采用负压吸宫流产和药物流产.负压吸宫流产术时处理不当,易导致漏吸、子宫穿孔等并发症,而药物流产时药物直接作用于妊娠子宫,使绒毛膜滋养细胞变性坏死,宫颈扩张而胚胎排出.
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复发性流产患者淋巴细胞主动免疫治疗效果观察
复发性自然流产(RSA)目前认为可能与同种异体免疫调节机制失衡有关.笔者对封闭抗体(BA)缺乏的RSA患者进行淋巴细胞主动免疫治疗,诱导母体对胚胎的免疫耐受,取得了较为满意的效果.
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笑气吸入用于钳刮术临床观察
人工流产钳刮术为终止10～14周妊娠的一种方法,由于胚胎大,手术时间长,受术者痛苦较大,严重者不能配合手术,甚至出现人工流产综合征(RAAS).本院自2002年1月起,采用50%的氧气与50%的氧化亚氮(笑气)用于钳刮术镇痛,取得了良好效果.
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胎儿前腹壁畸形超声诊断分析
胎儿腹壁畸形是胚胎时期前腹壁发育不全引起的较少见的先天畸形,脐膨出、腹裂、肢体-体壁综合征是前腹壁畸形的主要类型.本文就产前B超声诊断并引产后证实的胎儿前腹壁畸形进行回顾性分析,旨在探讨前腹壁畸形的声像特点及超声检查的应用价值.
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不同来源人未成熟卵细胞体外成熟及胚胎发育的临床观察
目的:比较辅助生殖周期中不同来源未成熟卵细胞体外成熟(IVM)培养后的发育潜能.方法:根据卵细胞来源不同分为IVM组、卵泡减灭组和裸卵组.各组体外培养后的成熟卵细胞分批行夫精卵胞浆内单精子注射(ICSI),统计受精和胚胎发育情况.结果:3组间受精率、卵裂率和优质胚胎率差异无统计学意义(P＞0.05).结论:3种不同来源的未成熟卵细胞经IVM培养均能到达MⅡ期,ICSI受精后可获得形态学上的优质胚胎.
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冻融优质胚胎体外培养时间对临床结局的影响
目的:探讨玻璃化冷冻复苏后优质胚胎的培养时间对临床结局的影响.方法:采用回顾性研究方法,将2011～ 2012年在本院实施冻融胚胎移植(FET)的1061例分为3组,其中冷冻胚胎复苏后的优质胚胎培养2～4h移植为A组(96例);培养＞4～8 h移植为B组(615例);培养＞8 h移植为C组(350例),比较各组胚胎植入率、临床妊娠率、流产率及活产率.结果:3组患者年龄、不孕年限、体重指数、移植日子宫内膜厚度、移植胚胎个数无统计学差异(P＞0.05);胚胎植入率(24.7％、23.4％、28.2％)、临床妊娠率(43.8％、40.8％、44.9％)、早期流产率(4.8％、10.4％、12.1％)、活产率(40.6％、32.7％、37.4％)均无统计学差异(P均＞0.05).结论:玻璃化冷冻胚胎复苏后培养时间对FET周期临床结局无明显影响,可根据临床和患者情况,具体安排胚胎移植时间.
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分析胚胎停止发育的原因及其预防护理
目的:研究分析胎停止发育的原因及其预防护理.方法:选取我院2013年2月至2014年2月诊断出的120例胚胎停止发育患者作为观察组,另选120例胚胎正常发育者作为对照组,对2组的进行相关因素的非条件Logistic回归分析和对比.结果:与胚胎停止发育的发生率相关的有睡眠不足6 h/d、以往流产史、吸烟、饮酒等多项原因(P＜0.05).结论:我院研究得出,导致胚胎停止发育的危险因素有饮酒、吸烟的情况、有流产史、工作强度较大、经常睡眠＜6h/d、孕期心情抑郁等,对其预防护理的过程中,需要进行适当的体育锻炼等.
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子宫内膜容受性与子宫内膜异位症相关性不孕
子宫内膜异位症(EMS)是子宫内膜腺体或间质异位到宫腔之外的部位发生种植和侵润性生长,常见于腹膜和卵巢.作为一种常见的妇科良性疾病,在伴有盆腔症状或低生育力的育龄妇女中,发病率高达60％,给患者及其家属带来了沉重的生理和心理负担.窗口期是指黄体生成素(LH)高峰后第5 ～ 10天,子宫内膜对胚胎的容受性达到适水平.
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阻断协同刺激分子对大鼠母胎界面中Caspase-3、Laminin B 的表达及妊娠结局的影响
目的:探讨阻断协同刺激分子CD86对自然流产模型孕鼠母胎界面Caspase-3和Laminin B的表达及妊娠结局的影响.方法:实验组于妊娠第4.5天腹腔注射大鼠抗小鼠CD86单克隆抗体,对照组注射大鼠同型IgG2b,而正常妊娠组不作任何处理.于妊娠第13.5天计算胚胎吸收率,用免疫组化法测定Caspase-3和Laminin B 的表达.结果:实验组的胚胎吸收率显著低于对照组(χ2=7.441,P＜0.05);实验组中Caspase-3蛋白阳性表达率明显低于对照组(P＜0.05),实验组中Laminin B 蛋白阳性表达率明显高于对照组(P＜0.05).结论:妊娠早期阻断协同刺激分子CD86可使母胎界面中的Caspase-3和Laminin B 分别通过各自不同的途径来发挥免疫耐受作用,并使自然流产模型孕鼠的胚胎吸收率降低至正常妊娠水平.
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昆明鼠自体卵丘细胞与早期胚胎序贯共培养对胚胎体外发育潜能的影响
目的:评价昆明鼠胚胎与自体卵丘细胞序贯共培养对提高早期胚胎体外发育潜能的影响.方法:分两组进行实验,序贯共培养组使用分离培养的卵丘细胞与序贯培养液构建培养体系,与昆明鼠早期胚胎进行共培养;序贯培养组使用序贯培养液对早期胚胎进行序贯培养,观察两组胚胎各阶段囊胚形成率,检测囊胚总细胞数、囊胚细胞凋亡数,囊胚进一步培养获得的干细胞系数.结果:序贯共培养3d后总的囊胚形成率为68.13%,序贯培养组囊胚形成率为45.31%(P<0.05);囊胚总细胞数分别为76.52和38.57(P<0.05),细胞凋亡率分别为7.44%和16.28%(P<0.05).将囊胚进一步培养,共培养组干细胞建系率为12.50%,序贯培养组未能建系.结论:昆明鼠胚胎与自体卵丘细胞序贯共培养与序贯培养比较,前者能更好地模拟体内环境,提高早期胚胎体外发育潜能.
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卵泡液干细胞因子水平对卵母细胞发育、受精和卵裂影响的实验研究
目的:探讨卵泡液中干细胞因子(SCF)水平对卵母细胞发育、受精和卵裂的影响.方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测68例体外受精-胚胎移植患者卵泡液中SCF水平,分析其与卵母细胞发育、受精和卵裂的关系.结果:卵泡液SCF水平为526±58ng/L,显著高于血清SCF水平(389±31ng/L)(P＜0.01).含成熟卵母细胞的卵泡液SCF水平为540±62ng/L,高于含未成熟卵母细胞者(515±55ng/L)(P＜0.05);受精卵的SCF水平(538±61ng/L)高于未受精卵(519±56ng/L)(P＜0.05);Ⅰ级和Ⅱ级胚胎的SCF水平(536±59ng/L、531±60ng/L)高于Ⅲ级和Ⅳ级胚胎(522±56ng/L、520±55ng/L)(P＜0.05).结论:卵泡液SCF可促进卵母细胞发育,提高受精卵发育潜能.
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胚胎干细胞试验及其在毒理学发育毒性安全性评价中的应用
为解决胚胎毒性体内筛选方法需要大量的动物及人力、耗时、耗力的问题,介绍了胚胎干细胞试验及其在毒理学发育毒性安全性评价中的应用.胚胎干细胞试验可同时检测不同受试物对细胞增殖和分化的影响,通过受试物对细胞及个体的发育毒性和致畸能力的判断,将受试物分成3类, 即无胚胎毒性、弱胚胎毒性和强胚胎毒性,该试验方法大大提高了体外替代实验的预测符合率.干细胞试验方法有望成为研究受试物胚胎毒性的体外替代实验模型.
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不同促排卵方案与胚胎早期卵裂及胚胎发育相关性分析
目的 探讨不同促排卵方案对2PN胚胎早卵裂及胚胎发育的影响.方法 回顾性分析该中心2016年1—12月采用5种不同促排卵方案的常规体外受精胚胎的早卵裂率及胚胎发育情况.结果 5组方案中患者的年龄、FSH、LH、E2及AMH比较,各组之间差异有显著性意义.体重指数、P、PRL各组之间差异无统计学意义(P>0.05).卵子成熟率分别为98.7％、97.0％、95.9％、96.5％、94.2％,各组间差异有统计学意义(P<0.05).正常受精率分别为87.9％、81.4％、77.0％、81.3％、85.4％,各组间差异有统计学意义(P<0.05).早卵裂率分别为55.8％、53.9％、53.2％、47.1％、44.3％,各组间差异有统计学意义(P<0.05).可用胚胎率分别为80.6％、81.4％、73.8％ 、77.2％、81.8％,各组间差异有统计学意义(P<0.05).优胚率分别为27.7％、25.7％、25.4％、28.4％、38.9％,各组间差异有统计学意义(P<0.05).结论 不同卵巢储备的患者,年龄、AMH及FSH可以预测卵巢的储备能力.采用不同促排方案与患者胚胎的早卵裂有一定的相关性,通过个性化促排卵方案可以改善胚胎后续发育.
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测定雌二醇和孕酮对异位妊娠的诊断价值
胚胎正常着床于子宫时,需要一定水平的血清雌二醇和孕酮.如果血清雌二醇和孕酮均降低,会影响输卵管的功能,可能导致胚泡异位植入,即异位妊娠.因此,临床上常将血清雌二醇和孕酮水平的检测作为异位妊娠的辅助诊断.本实验通过输卵管妊娠和正常宫内孕孕妇血清雌二醇和孕酮水平的检测,探讨血清雌二醇和孕酮的不同水平,对胚胎着床的影响.
