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等离子低温消融对椎间盘髓核形态学的影响
目的 探讨等离子低温髓核消融术中不同的消融时段椎间盘髓核组织的形态学改变.方法 选择2月龄实验用小型猪6只,平均体重22.5 kg,雌雄不计,选取L1～S1共30个椎间盘,随机分为5组消融,每组消融时间分别定为0、30、60、90和120 s.术后按照设定的时间取出完整椎间盘,取m髓核及终板行HE染色,在普通光学显微镜下观察病理变化.结果 消融后髓核组织主要表现为基质成分减少,髓核细胞聚集.随消融时间延长,消融区域髓核中心出现组织空洞,消融区域周围出现染色均匀的条带样基质.继续增加消融时间至120 s,消融区域无扩大,但区域内软骨细胞数量减少,部分软骨终板完整性受破坏.结论 等离子低温消融可使髓核内基质成分减少、细胞聚集,但延长消融时间并不能扩大消融范围,且可对软骨终板造成损伤.
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大鼠颈椎间盘老化及退变过程中髓核形态变化规律的实验研究
目的:研究颈椎间盘自然老化及退变过程中髓核软骨样细胞的来源和脊索性髓核向纤维软骨性髓核转化的规律及其与颈椎间盘退变的关系.方法:4周龄SD大鼠76只,随机分成两组.实验组40只大鼠通过截除前肢制备双后肢大鼠颈椎间盘退变的动物模型,按术后3、6、9、12个月4个时间段分组,每组10只;对照组36只大鼠未予处置,按实验开始后4、8、12、16个月分4组,每组9只.制备C4～5、C5～6和C6～7椎间盘中矢状面组织学切片,行HE、番红-O染色,研究观察不同老化及退变程度颈椎间盘髓核中软骨样细胞的起源和脊索性髓核向纤维软骨性髓核转化的规律.结果:随着颈椎间盘的不断老化,终板的软骨细胞向髓核迁移,脊索性髓核向心性皱缩并终完全被纤维软骨性髓核取代,在此过程中,软骨终板的厚度逐渐变薄,进而出现缺损或断裂;在颈椎间盘退变的过程中,这一转化完成的更快、更早.结论:髓核中的软骨样细胞由终板的软骨细胞迁移而来,通过向心性的产生和沉积胶原纤维,脊索性髓核逐渐被纤维软骨性髓核替代,这一过程既是颈椎间盘成熟和老化的自然环节也可能是颈椎间盘退变的启动环节.
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兔髓核内细胞的培养及生长曲线的测定
目的建立兔髓核内细胞的体外培养方法,绘制其生长曲线.方法取一月龄新西兰兔的髓核,胰酶和胶原酶消化, DMEM/F12培养基中培养,倒置显微镜观察细胞形态. MTT法测定细胞 OD值以绘制其生长曲线.结果原代培养髓核内细胞多为多角形,另有细胞为圆形或椭圆形,内含空泡.随传代培养的次数增加,细胞形态渐变为梭形,出现反分化的特性.生长曲线显示,髓核内细胞在 19d时达到高峰.结论成功建立了兔髓核细胞体外培养体系,为组织工程化椎间盘的研究打下基础.在实际应用时,以采取次代细胞为佳,并应将其培养至第 19天.
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后路腰椎间盘镜下修复硬脊膜撕裂一例
患者,男,26岁,腰5骶1椎间盘突出症3年,病后按摩、理疗多次,行硬膜外注射治疗2次.于2010年3月2日局部麻醉下行后路腰椎间盘镜下腰椎间盘摘除术,术中于黄韧带下用刮匙分离时,因粘连而致硬脊膜不规则破口长约1.0 cm.马尾神经随脑脊液的波动而疝出,患者即取头低脚高位,并用脑棉片于上位椎板下压迫硬脊膜至撕裂口处至没有明显脑脊液溢出,用小号髓核钳平行夹持7-0无损伤缝合线针,适当预弯针体前1/3,以利进出针,二根针分别由破口内而外缝过硬脊膜,通道外打单结,二针体部分由助手把持或血管外科的狗头夹夹持牵引,术者用神经探钩贴一侧结边推线前进至硬脊膜,依此再重复打两结,髓核钳咬断缝线,牵拉硬脊膜不再见马尾神经疝出,迅速摘除脱出髓核,冲洗伤口,彻底止血,取出压迫硬脊膜的椎板下脑棉片,再恢复水平体位,观察马尾神经未再疝出,脑脊液漏出明显减少,逐层严密缝合,关切口.
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头孢唑啉对人髓核组织的渗透性初步研究
目的建立头孢唑啉血清、髓核浓度的测定方法,观察其对人体椎间盘的渗透性.方法 5例腰椎间盘突出的病人,给予头孢唑啉2 g静脉滴注30 min,给药完毕后,即行手术取髓核,同时抽取静脉血,用高效液相色谱法(HPLC)测定髓核和血清的头孢唑啉浓度.结果头孢唑啉在0.6～4.3 μg/g及40～500 μg/ml范围内药物浓度(C)X和药物峰面积与内标物峰面积之比(A头孢唑啉/A内标)Y线性关系良好,血清标准曲线Y=1.7349X+0.0120 , r=0.9998;髓核标准曲线Y=1.9098X-0.0088,r=0.9992.头孢唑啉在髓核中的药量分布个体差异较大,且髓核内药量与血清药浓间无相关性(r=0.122,P>0.05).结论本法可同时测定头孢唑啉在血清和髓核中的药物浓度,以满足临床药物监测的需要.
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LC/MS/MS方法研究克林霉素对人髓核组织的渗透性
目的 建立测定人血清和髓核中克林霉素的液相色谱-串联质谱联用法,并试用于临床受试者静脉滴注克林霉素磷酸酯后克林霉素在髓核的分布情况.方法 血清和髓核样品经乙腈沉淀蛋白后,以乙腈-1%甲酸(70:30,v/v)为流动相,林可霉素为内标,采用Hypersil BDS C18柱分离,通过液相色谱串联质谱仪,以选择反应监测(SRM)方式进行检测.结果 血清中克林霉素线性范围为500～20000 ng/ml,定量下限为500ng/ml;髓核中克林霉素线性范围为20～400ng/g,定量下限为20ng/g;9例临床受试者血清中克林霉素浓度为2674±1114 ng/ml,髓核中克林霉素浓度为51.2±39.5 ng/g.结论 静脉滴注克林霉素磷酸酯后能部分渗透到药理作用靶点髓核.
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肌间隙入路腰椎间盘退变模型的构建
目的 探讨背长肌与腹外斜肌间隙入路纤维环穿刺法构建兔腰椎间盘退变模型的可行性.方法 新西兰大白兔6只,从兔子背长肌与腹外斜肌间隙入路暴露椎体和椎间盘,L2/3为对照组,不暴露也不穿刺椎间盘；L3/4为假手术组,剪断L4右侧横突后暴露椎间盘,但不进行穿刺；L4/5、L5/6为穿刺组,剪断L5、L6右侧横突后暴露椎间盘并用18G针穿刺构建模型.分别在术前及术后4周对实验动物进行X线和磁共振(MRI)检查,4周后处死实验动物,取材后行组织学及免疫组织化学检查.结果 术后4周,X线检查显示模型组L4/5、L5/6椎间盘高度明显降低、骨赘形成、终板硬化,MRI T2加权像亦见椎间盘高度下降,其椎间盘髓核信号明显减弱；大体观察见该组椎间盘髓核组织较少并组织松脆,呈淡黄色改变；组织学观察髓核脊索细胞数量减少,免疫组织化学观察到髓核Ⅱ型胶原表达比对照组和假手术组明显减少.结论 本研究为椎间盘退变的研究提供了一种较为理想的、相对可靠的动物模型.
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多节段颈椎(旋转)牵引力与髓核内压力之间关系的分析
目的研究多节段颈椎(旋转)牵引力与髓核内压力之间的变化关系.方法采用指数曲线模型对实验数据进行回归处理,分析比较各节颈椎髓核内压力下降值P的变化情况.结果在先拉伸后旋转的情况下,拉伸使得P值增加,旋转则使得P值减小;颈椎C3-4节段的P值始终大于C5-6节段的P值,而颈椎C4-5节段的P值则表现出不同的规律.结论颈椎各节段受力后的P值变化规律是相似的:P值的变化与颈椎节段的位置并不存在单调增加或单调减少的关系.
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FasL-844T/C基因多态性与退变腰椎间盘髓核FasL表达的关系
目的 研究FasL-844T/C基因多态性、腰椎MRI和退变的腰椎间盘髓核组织中FasL表达之间的关系.方法 采集105例腰椎间盘突出症患者静脉血和髓核组织;利用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析对FasL-844T/C基因多态性进行了检测;采用S-P法染色检测FasL在髓核组织中的表达.结果MRI研究发现,与CC基因型携带者相比,携带TT基因型的个体腰椎间盘退变的积分显著增高(P=0.003);与CC基因型携带者相比,TT基因型携带者髓核细胞表达FasL的积分有统计学差异(P=0.048),但CT基因型携带者与CC基因型携带者之间髓核细胞表达FasL的积分无统计学差异(P=0.264);腰椎间盘退变积分和椎间盘髓核组织FasL表达无相关性.结论 FasL-844T/C基因多态性与腰椎间盘突出症患者的椎间盘髓核组织FasL表达存在相关性;腰椎间盘退变积分和椎间盘髓核组织FasL表达无相关性.
关键词： 腰椎间盘突出症 腰椎间盘退变 髓核 FasL-844T/C基因多态性 -
颈椎牵引力与髓核内压力之间变化关系的简易分析模型
目的利用颈椎牵引力与髓核内压力之间变化关系的实验数据,找出一种合适的简易分析模型.方法建立多种非线性数学模型,通过回归分析,计算相关系数和方差的大小,测试各个数学模型对实验数据点变化的预测能力.结果对数曲线模型明显不适合,2次曲线模型和幂曲线模型的预测能力较差,指数曲线模型和3次曲线模型吻合数据点的变化趋势.结论指数曲线与实际的实验数据点的变化趋势吻合.利用该曲线,可以得到连续的不同颈椎牵引力下的椎间盘髓核内压力下降值,为有关的理论分析提供了方便.
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腰椎间盘突出症患者血清、尿液和髓核中锌、铜的变化规律
目的:了解腰椎间盘突出症患者体内锌、铜代谢规律.方法:将48例腰椎间盘突出症患者分为3组(青年、中老、老年组),测定其血清、尿液和髓核组织锌、铜的含量.结果:血清和髓核组织中锌、铜含量随增龄呈逐渐增高趋势,尿锌含量逐渐减少,尿铜含量各年龄组间无明显改变(P＞0.05).髓核组织中锌含量曲线与血清锌存在明显相关性(r=0.978,P＜0.01);与尿锌含量呈负相关性(r=-0.959,P＜0.01);结论:提示锌、铜含量的变化在髓核的退变及纤维化中起一定作用,在锌的代谢中血清和髓核之间存在某种协调关系;血清和髓核中铜含量的变化与尿铜的排出量无关.
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髓核源性坐骨神经病大鼠背根神经节磷酸化p38MAPK表达的变化
[目的]观察髓核源性坐骨神经痛大鼠模型中背根神经节磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)表达的变化及其与炎性反应和机械痛敏的关系.以探讨腰椎间盘突出症的病理机制.[方法]选择成年SD雄性大鼠66只随机分为空白组(12只)、假手术组(18只)和模型组(36只).模型组在左腰5神经背根神经节(L5DRG)自体髓核移植以建立大鼠非压迫性腰椎间盘突出模型,假手术组自体肌肉移植.空白组不进行手术.测量各组大鼠术前至术后21 d的左后肢50%机械性撤足阈值(50%PWT)以测定机械痛敏的变化,空白组、假手术组术后7 d及模型组术后7、14、21 d各12只大鼠取左腰5DRG用免疫组化法测定环氧化酶-2(COX-2)与p-p38MAPK的阳性细胞比率.[结果]假手术组50%PWT术后无明显变化,模型组术后7 d出现明显的50%PWT下降损伤,术后14 d达低值,术后21 d部分恢复;空白组、假手术组术后7 dDRG的COX-2和p-p38MAPK微弱表达.模型组术后7 d DRG的COX-2和p-p38MAPK高表达.模型组术后14 d DRG的COX-2和p-p38MAPK表达更高,模型组术后21 d DRG的COX-2和p-p38MAPK表达减弱.[结论]背根神经节的P-p38MAPK的表达与非压迫性髓核所致炎性反应和坐骨神经病理性神经痛的变化密切相关.
关键词： 髓核 磷酸化P38丝裂原活化蛋白激酶 背根神经节 环氧化酶-2 坐骨神经痛 -
低浓度医用臭氧与医用纯氧对犬髓核组织形态的影响
目的评估低浓度医用臭氧、医用纯氧对正常髓核组织的影响.方法家犬4只,透视下用20G无损伤针穿刺犬实验椎间盘并注入3 ml的低浓度(6μg/ml)医用臭氧或医用纯氧,退针时在椎旁间隙内注入7 ml低浓度医用臭氧或医用纯氧.每只动物L6-7和L6-6椎间盘注射医用臭氧,而L4-5和L3-4注射医用纯氧,共计注射16个椎间盘.2只家犬注射医用臭氧或氧气1次,并在术后1个月和2个月处死取标本;另2只家犬注射医用臭氧或氧气2次,以同样的方式处死取标本.所取标本包括实验和对照椎间盘的髓核、终板、邻近的神经根、脊髓和腰大肌,分别作大体和显微镜下观察.结果所有动物术后没有明显的行为异常.臭氧注射1个月和2个月后髓核组织的体积有轻度缩小,但组织学上髓核组织未显示明显的细胞坏死,仅见基质内有轻度的纤维增生.注射医用氧气的髓核组织无论在大体或是在组织学上与对照髓核组织比较均未显示有明显差别.对于终板、脊髓、神经根及腰大肌组织,低浓度臭氧及医用纯氧均未显示明显的影响.结论低浓度医用臭氧对正常髓核组织影响轻微,提示医用臭氧治疗腰椎间盘突出症时应达到一定的臭氧浓度才能取得较好治疗效果.医用纯氧对正常髓核没有明显影响.
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自动温热牵引机治疗腰椎间盘突出症疗效观察
腰椎间盘突出症是一种常见病、多发病,主要是由于腰椎间盘的纤维环破裂,其髓核连同残存的纤维环和覆盖其上的后纵韧带向椎管内突出,压迫附近的脊神经根,产生以腰腿痛为主要症状的疾病.我科于2006年5月以来采用自动温热牵引机治疗腰椎间盘突出症68例,效果满意.现报告如下.
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腰椎间盘突出症临床症状体征的严重度与髓核突出大小的关系
目的:探讨腰椎间盘突出症患者临床症状体征的严重度和髓核突出大小之间的相关性.方法:129例确诊为腰椎间盘突出症患者,测量每例患者与髓核突出大小有关的CT指标(髓核在矢状面上的突出大小,髓核在水平面上的突出大小,髓核在额状位的突出大小,髓核突出压迫神经根的方式,髓核突出压迫硬膜囊的方式).对患者进行体检了解症状体征的严重度,把症状体征的严重度分为轻、中、重3个等级.再对症状体征的严重度和CT指标进行spearman秩相关检验.结果:髓核在矢状位的突出大小与症状体征严重度无明显关系(r=0.015,P=0.145).髓核在水平位上、额状位上的突出大小,髓核压迫神经根的方式、压迫硬膜囊的方式与症状体征严重度有明显相关性.结论:突出髓核在额状位上的大小与腰椎间盘突出症症状体征的严重度密切相关.髓核在水平位及髓核压迫神经根、硬膜囊的方式与腰椎间盘突出症的症状体征严重度有相关性,但相关性不密切.
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脱细胞兔髓核支架的形态学及体外细胞毒性研究
目的：运用去污剂及核酸酶法制备兔脱细胞髓核支架，体外评价该支架的形态学及细胞毒性改变，探讨其作为组织工程髓核支架的可行性。方法：取健康成年新西兰大白兔髓核组织50枚，随机分为新鲜对照组（n＝25）和脱细胞组（n＝25），后者用0．3％TritonX-100＋0．5％脱氧胆酸钠联合核酸酶进行脱细胞处理24 h ，通过肉眼观、病理染色及扫描电镜观察髓核形态改变、细胞脱除和细胞外基质变化情况，并取兔骨髓间充质干细胞为对象，运用CCK-8法及死活细胞染色法在体外评价该支架的细胞毒性。结果：髓核脱细胞支架形态保持良好，细胞清除彻底，细胞外胶原基质结构破坏较小，与正常髓核相比，支架组织及其浸提液对兔骨髓间充质干细胞无明显毒副作用。结论：TritonX-100与脱氧胆酸钠联合核酸酶可有效脱除髓核细胞成分，较好地保留细胞外基质结构，且该支架对骨髓间充质干细胞无明显毒副作用，可以作为髓核组织工程研究的理想材料。
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椎板咬骨钳及髓核钳在鼻内窥镜下经鼻泪囊鼻腔吻合术中的应用
慢性泪囊炎为临床常见的泪器疾病,泪道阻塞问题既往多采用经鼻外内眦部行泪囊鼻腔吻合术解决.随鼻内窥镜和鼻、眼相关外科的发展,近几年耳鼻咽喉科医师对鼻内进路的鼻腔泪囊造口术发生了兴趣,该术式的优点是治愈率高,面部无手术切口瘢痕.我自2003年5月至2006年5月,采用鼻内窥镜下鼻内泪囊鼻腔吻合术中运用椎板咬骨钳及髓核钳造骨孔,治疗慢性泪囊炎22例,术后近期随访效果满意,现报告如下.
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腰椎间盘突出症的诊断和治疗
1引言腰椎间盘突出症是因椎间盘变性,纤维环破裂,髓核突出刺激或压迫神经根、马尾神经所表现的一种综合征,占下腰痛的10%～15%.90%～96%的腰椎间盘突出发生于第4腰椎、第5腰椎间隙和第5腰椎、第1骶椎间隙.其它间隙的腰椎间盘突出约占3%～5%.
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腰椎间盘突出症的诊治及预防
腰椎间盘包括髓核,包绕髓核的纤维环以及上下软骨板,它位于两个椎体骨之间,具有弹性,吸收震荡,维持腰椎间的稳定,参与腰椎的运动,可把它比喻为具有万向活动功能的骨间高级弹性垫片.在腰椎前方较厚,后方较薄,后方纤维环相对薄弱,它的后侧即是马尾神经和发出的神经根.当椎间盘退变后,弹性减弱,脆性增加,髓核通过薄弱的纤维环或破裂的纤维环向后脱出或膨出,压迫马尾神经或神经根,引起一系列临床症侯群,称之为腰椎间盘突出症.
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经皮穿刺椎间盘切吸术治疗腰椎间盘突出症 (附73例报告)
继1975年Hijkata首次经皮后外侧穿刺切除椎间盘及髓核治疗腰椎间盘突出症取得疗效后,这一介入性的治疗方法逐渐被推广使用.我院1 997～1999年应用经皮穿刺椎间盘切术(PLD)治疗腰椎间盘突出症,获得了较好的效果,现将资料较完整的73例报告如下.
