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抗原受体基因重排克隆性检测在淋巴瘤诊断中的应用
本研究旨在探讨抗原受体基因重排克隆性检测在淋巴瘤诊断中的意义.收集分析了31例淋巴瘤组织,石蜡包埋切片,HE染色后观察形态,免疫组织化学分析免疫表型.采用BIOMED-2标准化试剂盒检测抗原受体基因重排克隆性.结果表明,31例病例中形态学及免疫组织化学分析疑似T细胞淋巴瘤12例,T细胞反应性增生1例,B细胞淋巴瘤16例,B细胞反应性增生2例.基因重排克隆性检测免疫球蛋白(Ig)阳性率94.44% (17/18),T细胞抗原受体(TCR)阳性率92.31% (12/13),2例阴性.终12例确诊为T细胞淋巴瘤,B细胞淋巴瘤17例,反应性增生2例,阳性检出率为93%.结论:抗原受体重排基因克隆性分析是诊断淋巴瘤的一种有效辅助手段.
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IgH基因重排在B细胞非霍奇金淋巴瘤诊断中的应用
正常淋巴细胞在发育中是多克隆性质,但恶性肿瘤表现为单克隆性基因重排.所以,通过基因重排检测不仅可以鉴别淋巴组织是肿瘤性增生还是反应性增生,而且使准确判断细胞起源,完善淋巴瘤的分型成为可能[1].我们拟了解在本地区不同病理类型B细胞非霍奇金淋巴瘤(NHL)IgH基因单克隆性重排的发生率,旨在为鉴别部分淋巴组织是反应性增生还是肿瘤性增生,推测肿瘤细胞起源,指导治疗及判断预后提供参考指标.
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免疫组织化学切片再行荧光原位杂交检测方法的探索
荧光原位杂交( FISH)技术是一种分子细胞遗传学技术,其原理是通过标记有荧光素的探针与特异性的染色体和/或基因位点相结合,在细胞核中检测染色体和相应基因的变化[1]。 FISH技术被认为是目前检测乳腺癌HER2基因状态准确、可重复性高的方法,是当今白血病/淋巴瘤诊断和分型的重要手段之一,在发达国家正成为常用的辅助诊断技术。临床病理诊断中,常会遇到前期HE、免疫组织化学染色之后,要做FISH检测时,因组织太小或会诊的白片用完以致不能进行FISH检测。我们在工作中经过反复实验,尝试将免疫组织化学染色后的阴性切片,重新进行FISH检测,摸索出一种简便有效的方法,现介绍如下。
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克隆性基因重排在淋巴瘤诊断中的应用
大多数淋巴组织增生性病变通过组织形态学和免疫表型可得出肯定诊断,大约有5%~10%的病例表现复杂,即使做大量的免疫标志可能也难以鉴别其良恶性,免疫球蛋白和T细胞受体(TCR)基因克隆性重排可作为重要的辅助指标协助诊断,其基本原理是淋巴瘤(或其他淋巴细胞性恶性肿瘤)起源于单个恶性转化的淋巴细胞,相同的克隆具有相同的基因重排方式.
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淋巴瘤形态学诊断标准之我见
现代医学观点认为淋巴瘤的正确诊断应该建立在综合性原则基础之上才能做出更为符合实际的正确诊断[1-2],即综合分析,它包括形态学特点、免疫表型、临床表现和遗传学特征等在内的信息.其中形态学是淋巴瘤诊断的基础,其他任何技术信息用于淋巴瘤的诊断都不应离开形态学,否则会存在较大的误诊风险.病理医师每天都可能面临淋巴瘤的诊断,然而,书籍和文献中却查找不到明确的淋巴瘤诊断标准,那么病理医师依据什么做出诊断呢,诊断淋巴瘤的形态学标准是什么呢,这些年来笔者一直在思考这些问题,于2009年6月基本成形并制做PPT进行讲课.笔者现将对淋巴瘤形态学诊断标准的思考、认识和体会进行了文字总结,现介绍如下供读者思考.
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淋巴瘤的临床表现及其在病理诊断中的意义
现代淋巴瘤的诊断是建立在综合性原则基础上的,即综合各种信息进行分析做出诊断,只有这样才能得到接近正确的诊断.而单一的"金标准"是不存在的(如纯形态或分子遗传学指标等).目前与淋巴瘤诊断有关的信息一般包括形态特征、免疫表型(免疫组织化学和流式细胞学)、分子遗传学特点和临床表现这4个方面[1-2].形态学是淋巴瘤诊断的基础,其他几方面的信息都不应离开形态独市做出诊断;免疫表型是淋巴瘤诊断不可缺少的依据;分子遗传学是部分疑难病例和特殊类型淋巴瘤诊断的重要依据;而临床信息有利于淋巴瘤的诊断和淋巴瘤类型的确定.
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流式细胞分析技术在淋巴瘤诊断中的应用
流式细胞分析技术(flow cytometry,FCM)是淋巴瘤诊断的一个重要工具.现代医学的迅猛发展使诊断学在整个临床医学中所占的比重逐渐增大,用于诊断的新学科、新技术也日益增多,如何将各种彼此独立的诊断资料加以综合分析从中得到对于临床治疗有用的信息是对现代医学的重大挑战.在淋巴及造血系统疾病的诊治中,常规血液学(包括涂片)、病理学(包括淋巴组织和骨髓的穿刺、活检)、免疫分型[包括FCM和免疫组织化学(IHC)]、细胞遗传学和分子生物学等等构成诊断的基础.如能将其中的各部分有效的加以整合便可以大限度地互补,大限度地避免不必要的重叠, 将正确的诊断信息及时提供给临床.病理医生处于整个诊断网络的中心,对于这一领域诊断信息的整合有着义不容辞的责任.笔者根据自己的工作经验,就FCM在淋巴瘤诊断中的应用作如下介绍.
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流式细胞分析在淋巴瘤诊断中的作用
从1957年Dr. Rappaport 奠定了淋巴瘤的分型后,其分类经历了多次大的修改[1-5].其修改次数之频繁,使病理学家,临床医生有时感到不适应.修改的原因在于免疫学(immunology), 细胞遗传学(cytogenetics) 和分子生物学(molecular biology) 的飞速发展.作为基础医学研究和临床前沿的血液淋巴学科受冲击大,同时亦受益大.到目前为止,新的亦是被广泛采纳的是WHO分类[5].
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流式细胞免疫分型在B细胞淋巴瘤诊断中的应用
随着流式细胞术及单克隆抗体技术的发展,流式细胞术以其快捷、敏感并能同时对多个参数进行定量分析等优点被广泛应用于淋巴造血系统疾病诊断及鉴别诊断中.目前在我国部分医院,该技术也被常规应用于白血病的诊断与鉴别诊断,但在淋巴组织增生性疾病诊断及鉴别诊断中的应用还没有得到应有的重视.我院自2000年初开展了淋巴组织增生性疾病流式细胞术免疫分型,积累了一定的经验,下面结合我院4例淋巴结活检病理及流式细胞免疫分型资料,探讨流式细胞术在B细胞淋巴瘤诊断中的应用价值.
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细胞周期蛋白D1表达、聚合酶链反应及荧光原位杂交检测t(11;14)(q13;q32)易位在套细胞淋巴瘤诊断中的应用
细胞遗传学和分子遗传学的研究证实,70%~80% 套细胞淋巴瘤(MCL)中可以检测到t(11;14)(q13;q32) [1-3],易位使位于11q13上的bcl-1癌基因(也称为PRAD1,parathyroid adenomatosis,甲状旁腺腺瘤病或CCND1)处于14q32上IgH基因增强子的调控下,从而被激活,使其编码的细胞周期蛋白(cyclin) D1过度表达.这种易位在其他小B细胞淋巴瘤中极其罕见,所以通过免疫学和分子遗传学方法检测cyclin D1表达和t(11;14)(q13;q32)可作为区别MCL和其他小B细胞性淋巴瘤的重要手段.我们采用免疫组织化学检测cyclin D1蛋白表达,用聚合酶链反应(PCR)和荧光原位杂交(FISH)分别检测t(11;14)(q13;q32),以比较三种方法的敏感性和优劣点,探讨如何合理应用组织学、免疫组织化学和分子遗传学方法为日常病理诊断MCL提供帮助.
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显微切割技术联合聚合酶链反应在淋巴瘤诊断中的应用
霍奇金病(HD)的分型比较明确,并因其含有典型的R-S细胞而比较容易诊断,但非霍奇金淋巴瘤(NHL)的诊断,特别是与淋巴细胞反应性增生的鉴别诊断, 一直是临床病理诊断工作中的难点。免疫组织化学染色技术是区分B细胞和 T细胞淋巴瘤的重要手段,但该技术在多数情况下并不能鉴别淋巴细胞的良性和恶性增生。90年代,随着聚合酶链反应(PCR)技术的问世和发展,分析免疫球蛋白重链(IgH)基因和T细胞受体(TCR)基因重排,为鉴别淋巴细胞单克隆增生以及微小残留病灶检测和发现早期转移提供了一种有效的方法,对指导临床治疗和判断预后也有重要意义,已广泛应用于临床工作。但由于淋巴瘤组织,除了淋巴瘤细胞以外,还包括反应性增生的B细胞或T细胞,以及基质细胞等非肿瘤细胞,这些非瘤组织细胞的基因组DNA会掩盖瘤细胞基因组DNA的扩增,从而导致PCR假阴性结果。
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超声引导下粗针穿刺活检在淋巴瘤诊断中的价值
淋巴瘤对放、化疗非常敏感,及早诊断和治疗是提高患者生存率的关键[1]。淋巴瘤的精确分型对于临床正确治疗该病至关重要[2],能否在穿刺活检的组织标本中进行亚型的精确分型,是评估其临床有效性的重要方面。近年来超声引导下经皮粗针穿刺活检(core needle biospy,CNB)作为一种微创活检方法,已应用于淋巴瘤的早期诊断中。本研究的目的是评价超声引导下CNB对53例深部淋巴结及结外脏器淋巴瘤诊断的价值和安全性。
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非霍奇金淋巴瘤的临床进展
近几年,非霍奇金淋巴瘤(NHL)取得了重要的临床进展.首先,随着免疫学的进展和免疫组织化学在淋巴瘤诊断中的应用,国际淋巴瘤研究组于1994年提出了新的欧美淋巴瘤分类(REAL)方案[1-2],并逐步在欧美国家得到了广泛的应用.1997年以后,世界卫生组织(WHO)根据REAL分类原则对其做了进一步修改[3-5].临床治疗方面,多项前瞻性随机研究证明,早期非霍奇金淋巴瘤化疗和放射治疗综合治疗疗效优于单纯化疗,而且毒副作用较低[6-7].对于晚期滤泡型非霍奇金淋巴瘤,化疗合并干扰素的疗效优于单纯化疗[8,9].与此同时,随机研究证明,CHOP作为一线化疗方案,其疗效和其它更强化疗方案相同[10-12].CHOP仍是临床各期NHL的首选治疗方案.此外,1993年提出的国际预后指数,对判断NHL的预后有非常重要的指导意义[13].新的REAL分类明确指出,恶性淋巴瘤不是一种疾病,而是一类疾病,它包含不同的病理类型.每一种病理类型即一种独立的疾病,它有各自的形态学、免疫表型、基因特征、相应的正常组织来源、临床病程和预后等特点.这对临床医生提出了更高的要求,要求掌握每一种NHL亚型的病理、免疫学、分子生物学、组织来源、临床表现和预后,并且针对性地提出不同的治疗方法,判断预后.REAL分类的提出,为临床治疗的特殊性和个体化原则提供了理论基础.下面逐项介绍病理分类、治疗和预后等方面的进展.
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淋巴瘤影像学应用进展与问题对策
淋巴瘤是一种全身性恶性肿瘤病变,多部位均可受累,发病率呈逐年上升趋势.临床上诊断淋巴瘤的"金标准"是病理论断,但是近年来随着各种影像技术,包括X射线诊断、CT、MRT、核医学检查(SPECE、SPECI/CT、PET、PET/CT等)的迅速发展,其在淋巴瘤诊断、分期、再分期、治疗以及预后评价等方面中发挥重要的作用.
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横纹肌肉瘤发生血液和骨髓侵犯一例
患者,女,18岁.因乏力伴排便障碍2周,于2002年4月18日入院.入院查体:轻度贫血貌,全身皮肤散在出血点,双侧颈部、左锁骨上及双侧腹股沟可扪及数个肿大淋巴结(0.5 cm×1 cm或2 cm×2 cm大小),质中,轻压痛,活动,边界清,无黏连,心肺无异常发现,肝、脾无肿大,双侧臀沟及肛周可触及皮下肿块,质硬,固定,无压痛,边界不清,累及外阴、阴唇,约20 cm×15 cm.既往体健,1个月前曾患"带状疱疹",已愈.血常规:WBC 7.0×109/L,BPC 22×109/L,Hb 102 g/L,分类不明细胞占0.06.骨髓象:增生活跃,分类不明细胞占0.360,此类细胞胞体大,双核,胞浆空泡较多,可疑淋巴瘤、恶性组织细胞病或髓外肿瘤骨髓浸润.行颈部淋巴结活检,胸部CT未见异常,腹部CT示腹膜后淋巴结肿大,脾大,支持淋巴瘤诊断.予CHOP(环磷酰胺、长春新碱、阿霉素、泼尼松)方案化疗1个疗程,淋巴结活检病理检测报告:考虑为淋巴结转移性胚胎性横纹肌肉瘤.
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胃肠道淋巴瘤TCRγ基因重排分析及其意义
胃肠道淋巴瘤是常见的结外淋巴瘤之一,其诊断较为复杂,误诊率高.诊断通常要根据临床症状、形态学、免疫组织化学和分子生物学等综合判断.由于T细胞受体γ(TCRγ)基因重排发生在T细胞分化的早期,并且在两种不同表型的T细胞(αβ和γδ)中都存在TCRγ基因重排,因此,TCRγ基因重排成为检测淋巴瘤T细胞单克隆基因重排常用的靶基因.我们选用TCRγ通用引物,采用PCR、琼脂糖凝胶电泳及单链构象多态性分析(SSCP),检测并分析了40例胃肠道淋巴瘤基因重排的情况,探索这些方法在胃肠道淋巴瘤诊断和研究中的意义.
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中国弥漫大B细胞淋巴瘤诊断与治疗指南
弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)是成人淋巴瘤中常见的一种类型,并且是一组在临床表现和预后等多方面具有很大异质性的恶性肿瘤.其发病率占非霍奇金淋巴瘤(NHL)的31% ~34%,在亚洲国家一般>40%[1-2].既往,DLBCL的治疗以化疗为主,患者在接受包含蒽环类药物的联合化疗后,约1/3患者可获得5年生存率[3-4].利妥昔单抗联合化疗的治疗方案使DLBCL患者的长期生存率明显提高[5-8].而PET-CT引入疾病评估体系后,能更精确地指导临床治疗和预后判断.
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中国滤泡性淋巴瘤诊断与治疗指南
滤泡性淋巴瘤(FL)在CD20+B细胞淋巴瘤中发病率仅次于弥漫大B淋巴瘤(DLBCL)为第二大亚型,我们根据新的NCCN指南及一些相关的循证医学数据,结合目前我国淋巴瘤的诊治水平和现状制订下列指南.一、定义FL是惰性淋巴瘤的一种类型.FL是非霍奇金淋巴瘤(NHL)中较常见的类型,在西方国家占NHL的22%~35%.在国内所占比例较西方国家偏低,占NHL的8.1%~23.5%,我国发病率有逐年增加的倾向,发病年龄较国外相对偏低.
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超声造影对原发性肝非霍奇金淋巴瘤的诊断价值
本研究对3例原发性肝非霍奇金淋巴瘤的二维超声、超声造影及病理组织学资料进行总结,初步探讨原发性肝淋巴瘤二维超声及超声造影表现,以评价超声造影在原发性肝非霍奇金淋巴瘤诊断中的应用价值.
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肾脏淋巴瘤的影像学研究及比较分析
多例文献报道[1-3],肾脏是结外淋巴瘤易侵犯的器官之一,但目前临床中常规影像学检查常很难对其做出准确诊断[4].提高临床诊断率,探索较为准确的影像学检查方法,给医技和临床医生带来了新的要求.现将我科采取不同影像学检查对32例肾淋巴瘤诊断的结果报告如下.