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西藏地区结核分枝杆菌耐药情况分析
我们对收集的50株分枝杆菌临床分离株进行了菌种鉴定和耐药分析,从一个方面揭示了西藏结核病的流行特征以及分枝杆菌的菌种分布和耐药情况.1 材料与方法1.1 痰标本的分离培养:受检对象留取清晨痰标本3～5 mL,采用4%NaOH经2～4倍体积消化20 min后, 5 000～10 000 r/min,离心10 min,沉淀经无菌100 μL pH6.8磷酸盐缓冲液洗涤2次,再加入1 mL上述缓冲液混悬沉淀,各取0.5 mL,接种于改良L-J 培养基中37 ℃培养.8周未见生长,报告分枝杆菌培养阴性.
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聚合酶链反应-反向斑点杂交法直接从BACTEC-960阳性培养物鉴定分枝杆菌菌种
目前,常规的分枝杆菌菌种鉴定需采用分枝杆菌培养物进行生长特性试验(生长速度、生长温度、光产色试验、多种鉴别培养基上生长试验)及生化特性试验(耐热触酶试验、硝酸盐还原试验、烟酸试验、吐温-80水解试验、尿素酶水解试验、芳香硫酸酯酶试验、铁离子吸收试验、亚碲酸盐还原试验)等10余项试验,综合分析判定结果,方法复杂、费时、准确度较差,难以满足临床诊断和治疗的需要.
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175株分枝杆菌菌种鉴定和药敏检测报告
分枝杆菌的菌种鉴定和药敏检测,对指导医生正确诊断结核病,合理有效地选择药物,防止耐药菌株的产生,减轻病人的经济开支,具有十分重要的作用.我室在2000年中共做了580件培养标本,分离出175株分枝杆菌,现将175株分枝杆菌的菌种鉴定和药敏检测的结果报告如下.
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非侵袭性真菌性鼻窦炎的实验室诊断及致病菌分析
目的 探讨非侵袭性真菌性鼻窦炎的实验室诊断方法,分析其致病菌,为鼻窦炎合并真菌感染的临床诊断、治疗提供依据.方法 对我院临床及鼻内镜下所诊断的10例真菌性鼻窦炎患者,鼻内镜手术时直接吸取病变的鼻窦黏膜及窦腔内容物,通过直接镜检、真菌培养、传统鉴定及分子生物学鉴定和组织病理学检查对其进行检查.结果 10例病例中,直接镜检阳性者8例;病理学检查可见真菌菌丝或者孢子者8例;接种培养及基因鉴定阳性者5例(感染菌株包括2例烟曲霉复合体、1例杂色曲霉、1例枝孢样枝孢霉、1例帚霉).不同方法检测出的阳性病例并非完全重叠.结论 真菌镜检、真菌培养、真菌分子生物学鉴定、组织病理学检查在诊断真菌感染时可以互补,有助于明确诊断及发现新菌株.
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杭州地区2009-2014年非结核分枝杆菌流行状况分析
目的 研究近6年杭州市非结核分枝杆菌(Nontuberculous m ycobacteria,NTM)的流行状况.方法 采用基因芯片和16S rRNA测序法鉴定2009年1月至2014年12月本院微生物实验室结核菌培养阳性的分离,并对相关资料进行总结分析.结果 6年间,从789例患者标本中分离798株分枝杆菌(剔除重复菌株),NTM分离株171株,占21.4％,从2009年的11.9％上升到2014年的25.8％,MTB的构成比例降低和NTM比例升高的趋势有统计学意义(P=0.014).NTM种群分布达18种,常见的是胞内分支杆菌、鸟分支杆菌和脓肿分支杆菌,分别占30.4％、26.3％和20.5％.NTM阳性患者中,男性占66.3％,女性占33.7％,45～74岁年龄段合计占65.5％.抗酸杆菌涂片检查阳性的病例中NTM检出率由2009年的8.0％上升到2014年的22.0％,趋势分析P=0.014.结论 杭州地区分枝杆菌中NTM构成比例持续升高,2014年已达25.8％,以胞内分支杆菌、鸟分支杆菌和脓肿分支杆菌为主.开展NTM菌种鉴定,对鉴别诊断和有效治疗有重要意义.
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83株呼吸道分离真菌的菌种及耐药性分析
真菌为条件致病菌,正常情况下属于呼吸道的过路菌,当机体免疫力低下时容易发生内源性感染.近年来各类标本,尤其是呼吸道标本或咽拭子真菌的检出率明显上升,且耐药性不断增加,为及时了解这一变化趋势,本文对83株自呼吸道分离的真菌,用VITEK Auto Microbic System(AMS)进行菌种鉴定,用ATB Fungus(ATB)进行药敏试验,现将结果报道如下.
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真菌通用引物Its1和Its4在丝状真菌鉴定中的价值评价
目的 对真菌通用引物Its1和Its4在丝状真菌鉴定中的价值进行评价.方法 收集中山大学附属第一医院2012年1月至2012年8月间分离的丝状真菌11株,使用真菌通用引物Its1和Its4采用PCR法扩增核糖体基因,对PCR产物进行序列测定,将测序结果与GenBank中已知标准或临床菌株DNA序列比对,确定丝状真菌的菌种;同时与传统形态学鉴定方法进行比较,从而对真菌通用引物Its1和Its4在丝状真菌鉴定中的价值进行评价.结果 从DNA提取到序列测定结束,在2个工作日内即可完成.所有菌株均测序成功,测序结果与GenBank中的序列比对,烟曲霉、杂色曲霉、橘青霉、溜曲霉可以鉴定到种;黄曲霉和米曲霉、阿姆斯特丹散囊菌和冠突散囊菌由于高度同源性无法区分鉴定到种.结论 利用真菌通用引物Its1和Its4结合PCR技术和测序技术,可快速、准确将大部分丝状真菌鉴定到种.
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对德氏乳杆菌DM8909菌株的微生物学研究
通过对阴道正常菌群定性、定量研究表明,乳杆菌在阴道正常菌群中的检出率和数量都占有绝对优势,并对致病菌有拮抗作用.乳杆菌对维持阴道微环境,保持其健康状态具有重要意义,乳杆菌作为阴道病防治的微生态调节剂应用具有广泛的应用前景.本文就阴道乳杆菌的分离、生化反应特征、代谢产物分析及菌种鉴定等微生物学研究工作报道如下.1 材料与方法1.1 菌种的分离方法根据文献及本课题的阴道菌群与微生态疗法的研究结果 [1],确定乳杆菌为选种对象.用阴道拭子取阴道分泌物,接种于Lbs培养基上,37℃培养72 h.根据乳杆菌的特征筛选菌种.筛选菌落特征为:表面光滑或较光滑、大小不等(1～ 2 m m)、不透明或半透明、革兰染色镜检为G+杆菌、排列不规则、无芽胞、鞭毛及荚膜者列为候选对象,传代保存,以备进一步鉴定和筛选.
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不同时期小儿肺炎克雷伯菌耐药性检测及分析
为探讨肺炎克雷伯菌的耐药性及变迁,我们对我院儿科1997～1998年和2001年7月至2003年4月两个时期送检的痰、粪、血液标本进行细菌培养,采用法国生物-梅里埃公司生产的ATB全自动细菌及药敏测试仪进行菌株鉴定及药敏测试,探讨2个不同时期细菌耐药性的差异.将粪、痰液标本接种于EMB及S-S平板上,35℃18～24h;将血液标本接种于梅里埃公司生产的双相血培养瓶中,35℃,每24h观察1次,如有细菌生长,转血平板.取上述平板中的可疑菌落进行革兰染色,并按ATB鉴定系统标准程序进行菌种鉴定及药敏测试.
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MPB64特异性抗原检测在结核病临床快速诊断中的应用价值
据世界卫生组织估算,全球有近1/3的人群感染了结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis ,MTB),每年新增800-1000万患者,大约有300万人死于结核病.其中有部分肺结核病人同时感染非结核分枝杆菌(Nontuberculous mycobacterium,NTM).NTM的临床表现、X线检查特征与肺结核极其相似,痰涂片抗酸染色直接镜检二者在形态上很难鉴别,但在临床治疗上差别很大,结核分枝杆菌(MTB)对一线抗结核药物(INH、RFP、EMB、SM)敏感而多数非结核分枝杆菌(NTM)对抗结核药耐药率高或对抗结核药物呈天然耐药[1],若按结核病治疗,即使病人经过长期规则化疗,疗效也依然不好,成为所谓的"难治、复治"结核病人.由此可见,分枝杆菌的培养和菌种鉴定对结核病的诊断、鉴别诊断和有效化疗有着重要的作用.
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复发性外阴阴道念珠菌病菌种的26S rDNA序列分析
目的 探讨基于核糖体基因26S rDNA D1/D2区序列分析法在临床酵母菌菌种鉴定中的应用.方法 收集来源于复发性外阴阴道念珠菌病分泌物标本93株,PCR扩增其26S rDNA D1/D2区,对扩增产物进行序列测定和分析,并与基因库中的基因序列进行同源性比对.结果 所有菌株均鉴定到种,同源性达99%和100%,同属于真菌双核亚界、子囊菌门、酵母菌科的3个属,89株为candida,3株为Kodamaea,1株为Pichia.其中candida中有7个种,38株candida glabrata,23株 candida albicans,16株candida parapsolisis,9株candida metapdilosis,1株candida orthopsilisis,1株 candida tropicalis,1株candida nivariensis;3株Kodamaea ohmeri;1株Pichia kudriavzevii.结论 复发性外阴阴道念珠菌病的病原体主要为candida属的candida glabrata、candida albicans 和candida parapsolisis,非candida albicans占75.27%是其特征;26SrDNA D1/D2区序列分析为临床酵母菌的分子水平鉴定提供了一种准确、可行的方法.
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复杂型外阴阴道念珠菌病的致病菌种及对其治疗药物的选择与评价
外阴阴道念珠菌病(VVC)是一种常见的女性生殖道疾病,主要由白色念珠菌引起,流行病学显示,外阴阴道念珠菌病的发病率持续上升,不断增加的由非白念珠菌引起的复杂型VVC使VVC的诊断和治疗更为复杂,并出现了对常用抗菌药耐药的现象[1].为了更有效的诊断和治疗VVC,中华医学会妇产科学会2004年发布了VVC诊治规范.本研究通过对伊曲康唑、氟康唑治疗复杂型VVC的临床疗效观察及致病菌种鉴定,指导临床用药提供帮助.
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纤溶酶产生菌的分离筛选与鉴定
目的 分离筛选具有较高纤溶活性的产酶菌株,对产酶菌株进行初步鉴定,并进一步对产酶菌株的体外溶栓机制进行初步研究.方法 用生理盐水浸提实验菌固体发酵的大豆制备纤溶酶粗酶,通过纤维蛋白平板法筛选具有较高纤溶活性的产酶菌株,并进一步对菌株的菌落形态、菌体特征和生理生化特征进行鉴定.同时采用加热纤维蛋白平板法对菌株产生的纤溶酶在体外水解纤维蛋白的方式进行研究.结果 从采集的多个样品中分离筛选到两株具有较高纤溶活性的产酶菌株C1A-01和C1A-03,初步确定这两个菌株均属于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis).体外溶栓实验表明,C1A-01和C1A-03是通过直接溶解纤维蛋白的方式发挥溶栓作用,而不是通过激活纤溶酶原间接起作用.结论 获得了两株产较高纤溶酶活性的枯草芽孢杆菌菌株C1A-01和C1A-03,而且溶纤方式特殊,有望开发成新一代的抗栓溶栓药物.
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脑膜炎患者脑脊液中基因芯片法鉴定出金色分枝杆菌1例报告
临床上不少非结核分枝杆菌病被漏诊或误诊为结核病,脑脊液中检出非结核分枝杆菌非常少见.我院分枝杆菌菌种鉴定基因芯片检测系统通过借助核酸分子杂交配对的特性对DNA样品的序列信息进行高效的解读和分析,可以对目前国内发病率较高的17种分枝杆菌进行菌种鉴定,具有较好的临床辅助意义.现报告1例经基因芯片法检测脑脊液得以确诊的病例,供参考.
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1%环吡酮胺软膏治疗浅部真菌病172例
黑龙江省邮电医院皮肤科于2001年5月-2002年8月应用北京万辉药业集团生产的1%环吡酮胺软膏(环利)治疗172例皮肤浅部真菌病,同时进行菌种鉴定,取得满意疗效,现总结如下:
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分枝杆菌临床分离株菌种的分子鉴定
目的 建立对临床分离分枝杆菌菌种快速、精确鉴定的方法学平台,了解分枝杆菌菌种的分布,为结核分枝杆菌(MTB)和非结核分枝杆菌(NTM)病临床精确诊断和有效治疗提供依据.方法 330株分枝杆菌分离株来自于2007年5月至2008年12月在哈尔滨市胸科医院诊断为结核病的住院患者.菌株灭活后提取基因组DNA,采用PCR方法,结合PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)和DNA序列测定方法进行菌种精确鉴定.结果 330株临床分离菌株全部精确鉴定,其中328株[占99.4％(328/330)]为结核分枝杆菌复合群(MTBC),2株[占0.6％(2/330)]为NTM.328株MTBC中,MTB 326株、非洲分枝杆菌(M.African)1株、田鼠分枝杆菌(M.microti)1株,分别占MTBC的99.4％ (326/328)、0.3％(1/328)和0.3％(1/328).经测序和基因组同源性分析发现,2株NTM为胞内分枝杆菌(MAC),与MAC的同源性分别为99％和93％,2株菌之间的同源性为93％.结论 建立了临床分离分枝杆菌菌种快速鉴定的方法学平台,临床诊断为结核病的患者MTB比例占绝对优势,也发现有M.African、M.microti和NTM感染.
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细菌性肺炎菌种鉴定及其药敏性分析
目的 探讨细菌性肺炎菌种鉴定及其药敏性.方法 选择接受治疗的细菌性肺炎老年患者136例.所有患者均签署知情同意书.对两组患者.对所有患者进行标本采集、细菌培养、菌种鉴定,并对所有菌种进行各类药物敏感性测试.结果 观察组患者检出143株,其中7例患者检出两种菌群.在8种药物敏感性的比较结果显示,该两种菌群对阿米卡星、亚胺培南、美罗培南的敏感性高,且在铜绿甲单胞菌药敏检测中,其对亚胺培南、美罗培南表现出100％ 药敏性.结论 老年细菌性肺炎患者致病菌种可能为肺炎克雷伯菌、铜绿甲单胞菌,该两种菌群对阿米卡星、亚胺培南、美罗培南表现出较高药物敏感性,以上药物可作为细菌性肺炎治疗首选药物,改善患者疗效,有深入研究价值.
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温州市非结核分枝杆菌菌种的地域分布特点
[目的]了解温州市11个区县呼吸道非结核分枝杆菌(NTM)的菌种分布情况.[方法]对2014年1月至2017年5月分离鉴定的NTM菌株,利用16S rRNA和hsp65基因测序或基因芯片进一步鉴定至种.[结果]菌种鉴定为NTM 293株(已剔除重复菌株),NTM种类达15种,以鸟分枝杆菌复合群(MAC)和脓肿分枝杆菌占绝对优势(89.4％,262/293),其他菌种仅占10.6％(31/293).分离NTM菌株数居前6位的区县依次为鹿城(28.7％,84/293)、 瓯海(13.7％,40/293)、 乐清(12.6％,37/293)、 永嘉(11.6％,34/293)、 苍南(10.6％,31/293)和瑞安(9.6％,28/293).鹿城、 龙湾、 瓯海、 瑞安、 永嘉和平阳等6个区县的前3位菌种均依次为胞内分枝杆菌、 脓肿分枝杆菌和鸟分枝杆菌,胞内分枝杆菌是除苍南外各区县常见的菌种.[结论]温州市各区县的NTM菌种主要为胞内分枝杆菌、 脓肿分枝杆菌和鸟分枝杆菌,地域分布存在一定差异.
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念珠菌感染的微生物学检查
近年来,由于免疫受损人群的出现,各种侵入性诊断和治疗技术的运用,广谱抗生素、激素、免疫抑制剂的广泛使用,使得真菌感染有明显上升的趋势,其中常见的是念珠菌引起的感染.在白血病、肿瘤、获得性免疫缺陷综合征、骨髓或器官移植、烧伤、早产等患者的样品经常可以分离出念珠菌[1].
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非结核分枝杆菌肺病的病原菌检出情况分析
目的 分析我院1986—1997年及2000—2005年非结核分枝杆菌(NTM)的检出情况.方法 对222株非结核分枝杆菌用传统方法进行菌种鉴定.结果 按Runyon分类法,1986—1997年检出Ⅰ群非结核分枝杆菌15株(15.5%),Ⅱ群非结核分枝杆菌4株(4.2%),Ⅲ群非结核分枝杆菌23株(24.0%),Ⅳ群非结核分枝杆菌54株(56.3%);2000—2005年检出I群非结核分枝杆菌30株(16.1%),Ⅱ群非结核分枝杆菌11株(5.9%),Ⅲ群非结核分枝杆菌51株(27.4%),IV群非结核分枝杆菌94株(50.6%).两组比较差异无统计学意义(P均＜0.05).1986—1997年共检出非结核分枝杆菌96株,分属于6个不同菌种;2000—2005年共检出非结核分枝杆菌186株,分属于14个不同菌种,非结核分枝杆菌检出的菌种种类较前增多,上升了133.3%,而且非结核分枝杆菌的绝对检出数量本世纪初5年间比上世纪11年间提高了93.8%.结论 我院非结核分枝杆菌检出的绝对数和菌种的种类2000—2005年比1986—1997年均增多,提醒我们应进一步做好NTM肺病的临床流行病学研究工作,为全面防治该病提供科学依据.
