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不同纯化方式对脂肪细胞活性的影响
目的 研究不同纯化方式对负压抽吸获得的脂肪颗粒悬液中各组分比例及细胞活性的影响.方法 常规肿胀麻醉下,通过负压抽吸的方式获得脂肪颗粒悬液,将其分为静置组、离心组和过滤漂洗组.①静置组:根据不同的静置时间(30 s、1 min、5 min、10 min、30 min、1 h、4 h、12 h、24 h)分为9组;②离心组:采取不同的离心时间(3、5、10 min)及不同离心速度(1000、2000、3000、4000 r/min)分为12组;③过滤漂洗组:根据所采取的纱布层数(1、2和5层)分为3组.采用Calcein-AM/Hoechst33342双荧光染色法检测脂肪细胞活性,计算细胞存活率.两样本之间的组间比较采用t检验,2组样本以上的组间比较采用one-way AVOVA分析.结果 静置组的油脂、脂肪颗粒、液体层在静置5 min时趋于稳定.②离心组:当离心速度为2000 r/min、离心时间为3 min时,脂肪细胞存活率及液体比例大.③过滤漂洗组:2层纱布过滤后收集的脂肪颗粒较多.④静置5 min法、2000 r/min离心3 min法及2层纱布过滤漂洗法的细胞存活率分别为(86.75±6.29)%、(89.05±7.16)%和(87.85±5.92)%,3组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 静置5 min法、双层纱布过滤漂洗法及2000 r/min离心3 min法脂肪细胞存活率均较高,3组比较差异无统计学意义.临床上进行少量脂肪填充时,可选择2000 r/min离心3 min法;进行大量脂肪组织填充时,过滤漂洗法则较为适用.
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工程化脂肪与正常脂肪组织的生长模式
脂肪组织大量缺损是困扰整形外科医生的一大难题,随着脂肪组织工程技术的发展,人工诱导脂肪再生为修复软组织缺损提供了新的可能.脂肪组织作为一个复杂的多细胞器官,其生长受到多种因素的影响.研究正常脂肪组织的生长过程及工程化脂肪的生长模式,可为建立协调的成脂微环境、实现定向可控的脂肪构建提供理论支持.
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取材方法对脂肪细胞损伤程度的人体观察
目的研究剪碎法、注射器法、吸管法取脂对脂肪细胞的损伤程度,以供临床参考.方法分别采用剪刀剪碎、22号特制钝头侧孔脂肪抽吸针头注射器抽吸、直径8mm无菌吸引头以1个标准大气压抽吸3种方法取脂,标本石蜡切片、Van-Gieson染色,镜下观察脂肪细胞损伤程度.结果剪碎法对脂肪细胞损伤率为(8.6±1.8)%,注射器抽吸法为(15.7±2.4)%,吸管法为(76.4±8.7)%,经统计学分析相互间差异有显著性意义.结论 3种方法中,剪碎法对脂肪细胞的损伤轻,注射器法居中、吸管法重.
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脂肪细胞与妇科恶性肿瘤关系的研究进展
流行病学研究显示,肥胖与肿瘤的发病率和死亡率之间存在相关性,肥胖患者体内含有大量脂肪细胞,而脂肪细胞主要通过两种方式影响妇科肿瘤的发生及发展.首先,肥胖者患子宫内膜癌风险较高.其体内大量的脂肪细胞可介导雄激素转化为雌激素,增加肥胖者患子宫内膜癌的风险(约6.3倍).同时过多堆积的脂肪使机体处于一种持续低度炎症状态.在这种激活状态下,脂肪细胞和炎症细胞分泌的脂肪因子和细胞因子可以促进肿瘤的发展.其次,卵巢癌在脂肪组织的附近生长,癌细胞可使脂肪细胞去脂化,去脂化的脂肪细胞可分泌脂肪因子,促进癌细胞的黏附、转移和浸润.同时,去脂化分解产生的脂肪酸可源源不断地转移至癌细胞内,支持肿瘤的进展和无限的生长.鉴于脂肪细胞可以产生大量脂肪因子并为肿瘤细胞的发展提供能量,研究脂肪细胞与肿瘤细胞的关系,将为妇科恶性肿瘤的治疗和预防提供新的靶点.
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瘦素与妊娠关系的研究进展
瘦素(leptin)是肥胖基因(obese gene,Ob)的表达产物,其分子量为16kD,主要由白色脂肪细胞产生,具有调节脂肪代谢的作用.近年的研究表明,leptin作为一种内分泌激素,具有多种重要的生理调节功能,且与妊娠关系密切.本文就瘦素与妊娠关系的研究进展作一综述.
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绝经后妇女血清瘦素水平与骨量变化的关系
瘦素是肥胖基因的产物,又是骨组织的旁分泌和自分泌激素,由脂肪细胞合成和分泌.瘦素促进人成骨细胞胶原的合成、细胞分化及细胞外骨矿化结节的形成[1].
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瘦素与妊娠的关系
1994年,Zhang等[1]成功克隆和测序了小鼠和人类的肥胖基因(obese gene,Ob),确定了其编码蛋白产物为瘦素(lep-tin).瘦素主要由脂肪细胞产生、分泌,进入血液,传递体内脂肪含量的信号给中枢神经系统,从而抑制摄食、增加能量消耗、减轻体重、控制能量平衡.随着研究的深入,发现瘦素与妊娠关系密切,现就瘦素与妊娠的研究进展综述如下.
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想减体重就动起来
癌症与肥胖有密切的关系,以乳腺癌和结肠癌为代表的许多种癌,肥胖都是的危险因素.肥胖还不利于癌症康复,为什么呢?脂肪细胞能分泌类生长因子,刺激细胞生长.
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三维培养下脂肪细胞对乳腺癌MCF-7细胞迁移影响及其机制的初步研究
目的 自体脂肪移植在乳腺癌患者乳房重建中的应用日益广泛,但移植的脂肪细胞与乳腺癌细胞发生哪些相互作用目前研究较少.本研究通过构建三维培养的乳腺癌细胞与脂肪细胞共培养模型,观察脂肪细胞对乳腺癌细胞迁移的影响及潜在分子机制.方法 采用Matrigel胶对乳腺癌MCF-7细胞进行三维培养,观察细胞生长形态及方式;取成年女性腹部脂肪组织进行接种培养,通过Transwell小室建立乳腺癌MCF-7细胞与脂肪细胞共培养模型及MCF-7单独培养模型,比较MCF-7细胞迁移水平的变化;采用Affymetrix表达谱芯片分别构建共培养后及单独培养的MCF-7细胞表达谱,寻找差异表达基因.结果 乳腺癌MCF-7细胞在Matrigel胶中生长呈现多细胞球形体;共培养12 h后,共培养组MCF-7细胞每高倍镜视野迁移数为(267±48)个,单独培养组为(125±21)个,共培养后的MCF-7细胞迁移能力显著增强,t=5.421,P=0.005 9.表达谱芯片共筛出差异表达基因18个,其中表达上调基因15个,表达下调基因3个.结论 脂肪细胞能够显著增加乳腺癌MCF-7细胞的迁移能力,推测可能与BCAS1、S100P、S100A10、S100A11及ANXA2基因有关.
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人乳房脂肪细胞的培养及其在乳房再建组织工程学中应用的研究进展
组织工程学是应用细胞生物学和工程学的原理,研究开发修复、改善损伤组织结构和功能的生物替代物的一门科学.其基本原理和方法是,将体外培养扩增的正常组织,吸附于一种生物相容性良好并可被机体吸收的生物材料上,形成复合物,再将细胞-生物材料复合物植入机体组织/器官病损部位,细胞在生物材料逐渐被机体降解吸收的过程中,形成新的具有形态和功能的相应组织、器官,达到修复创伤和重建功能的目的.
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乳腺错构瘤一例
患者,女,39岁.因右乳无痛肿块入院.查体:有乳外下象限触及一约3.5 cm×3 cm×3 cm圆形肿物,与皮肤无粘连,边界清楚,活动,质地稍软、无压痛.乳腺扫描提示良性肿瘤.穿刺细胞学检查,抽吸出少量淡黄色黏物,即涂片2张.固定染色镜下见较多成熟脂肪细胞、纤维母细胞、少量平滑肌细胞等.
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脂肪源细胞因子与脑血管病的基础与临床研究进展
脂肪组织能分泌一系列脂肪细胞因子,包括瘦素、肿瘤坏死因子-α、纤溶酶原激活剂抑制物-1、白介素-6、抵抗素、脂联素等,这些脂肪细胞因子共同参与了机体的能量代谢,并通过胰岛素抵抗等多种途径参与了脑血管病的发生、发展,成为代谢综合征及其大血管并发症发病的共同土壤.
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重视脂肪代谢性肌病的病因学诊断
人体内的脂肪有两种存在形式,一是脂肪组织细胞内的甘油三酯,另一种是存在于脂肪细胞以外的其他各种组织细胞胞质内的甘油脂滴.在长时间禁食和持续性肌肉收缩等情况下,脂肪细胞内的甘油三酯以游离脂肪酸的形式进入血液,通过被动扩散进入肌肉的细胞质内[1].
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间充质干细胞的研究进展
骨髓组织中,除含造血干细胞外,还含有另一类为间充质干细胞.它是一群均一的细胞,具有自身的增殖表征及组织化学特征.它在适宜的微环境中能分化为成骨细胞、软骨细胞、肌腱细胞、脂肪细胞和星状神经细胞等,它易于分离获取扩增,易于外源基因导入表达,有望成为细胞治疗和基因治疗的新型靶细胞,具有广阔的应用前景.
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脂肪细胞分化与甲状腺相关眼病
脂肪细胞分化是一个复杂的过程,受PPARγ及C/EBP等多种分化转录因子的调控,其分化异常与甲状腺相关眼病的发生、发展有密切关系.深入研究眶脂肪细胞分化的分子机制将有助于进一步了解甲状腺相关眼病的发病机制,为寻求合理的治疗方案提供理论依据.
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人恒牙牙髓干细胞分化为脂肪细胞的体外实验研究
目的 验证人恒牙牙髓组织来源的牙髓干细胞在体外向脂肪细胞的定向分化,并对分化后的细胞进行鉴定.方法 从正畸治疗减数拔除的恒前磨牙中分离牙髓组织,应用酶消化法获得牙髓细胞.单抗Stro-1标记、免疫磁珠阳性分选系统分选获得牙髓干细胞,第3代牙髓干细胞用成脂肪向诱导培养基向脂肪细胞诱导分化.用油红O染色鉴定成脂肪向分化,RT-PCR检测脂肪细胞的特异相关或标志基因.以同期培养的未诱导的普通培养基培养的DPSCs做阴性对照;以同期培养的骨髓间充质干细胞成脂肪向分化的结果做阳性对照.结果 人恒牙牙髓干细胞经成脂肪向培养基诱导后表现出脂肪细胞特性,油红O染色结果为阳性,RT-PCR检测成脂肪向分化相关基因过氧化物酶增殖物激活受体γ2、脂肪酶结合蛋白aP2和脂蛋白脂酶均有阳性表达.结论 人恒牙牙髓干细胞在体外具有分化为脂肪细胞的潜能.
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人体脂肪基质细胞复合藻酸盐异位软骨生成的研究
目的分离培养人体脂肪基质细胞,经成软骨定向诱导后复合藻酸盐凝胶,研究其异位软骨生成能力.方法将脂肪抽吸术获取的人体脂肪机械分割,通过I型胶原酶消化后得到脂肪基质细胞,在BGJb培养基中原代培养10 d,消化传代后在含体积分数10%FBS及6.25 mg/L胰岛素,10μg/L TGF-β1,50 mg/L维生素C的DMEM/F12培养基中诱导培养14 d,获取的细胞按1×1010/L的细胞密度与质量分数为1.2%的藻酸钠复合,加入102mmoL/L CaCl2充分混匀,使之交联,将细胞-藻酸盐凝胶1 ml注入每只体重为25g的BALB/C裸小鼠背部皮下(共4只),同时在裸小鼠臀部两侧皮下各注入相同量的无细胞藻酸盐及单纯细胞作为自身对照.术后4、8周各处死2只动物,取材固定、脱钙、包埋后切片染色,镜下观察.结果经连续诱导培养14 d的脂肪基质细胞已具明显成骨表型(细胞基质中富含硫酸软骨素及Ⅱ型胶原).4、8周时,注射细胞-藻酸盐凝胶标本均显示明显的软骨形成,肥大的软骨细胞位于富含硫酸蛋白多糖的基质中,而自身对照注射的无细胞藻酸盐及单纯细胞在术后3~4周已完全吸收.结论脂肪基质细胞经过诱导培养后具有向软骨细胞表型分化的潜能.
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腮腺巨大脂肪瘤二例
脂肪瘤是一种来源于脂肪组织的良性肿瘤,其肿瘤实质细胞为脂肪细胞.多见于40~60岁的成年人,且一般多发生于皮下,好发于肩、背、臀部及大腿内侧,颌面部发病也常见.口腔颌面部多见于颈部、面颊部等脂肪较多的地方,口内及腮腺区少见.揭阳市人民医院五官科2008年收住右腮腺区巨大脂肪瘤二例,现在回顾临床资料,并结合国内外文献进行临床总结分析,报告如下.
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运动与脂肪动员研究进展
储存在脂肪细胞中的脂肪被脂肪酶逐步水解为游离脂肪酸及甘油并释放人血以供其它组织氧化利用的过程称为脂肪动员.脂肪的动员和氧化利用障碍不仅影响机体的氧化供能,还可导致肥胖及与之相关的胰岛素抵抗、血脂紊乱、高血压等代谢综合征的发生,而运动不仅对脂肪的动员和氧化利用具有直接作用,也可通过神经、激素和血循环对机体的脂肪动员和氧化利用发挥调节作用,长期运动也可能会对基础状态和应激状态下机体调节脂代谢的能力具有改善作用.