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结核蛋白芯片联合PPD皮试检测对肺结核病快速诊断价值的研究
肺结核病疫情在我国仍较严重,是危害人民健康的重要传染病之一.目前,肺结核病的快速诊断依然是迫切需要解决的问题.结核免疫学诊断是结核病诊断和鉴别诊断的重要方法之一[1].为提高结核病快速诊断水平,通过对结核病患者进行血清结核蛋白芯片检测及PPD皮试,观察结核蛋白芯片联合PPD皮试对肺结核病的诊断意义,评价其用于临床诊断的应用价值.
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结核病的免疫学诊断
我国的结核病疫情相当严重,结核病的早期、快速诊断对于早期化疗和控制传播都有极其重要的意义.虽然结核病细菌学检查是结核病诊断的"金标准",然而涂片阳性率低、培养耗时长,不能满足临床需要,尤其是菌阴肺结核、肺外结核和儿童结核的诊断十分困难,而免疫学检查标本来源方便、简便、快速、灵敏、特异,目前已成为结核病重要的辅助检查手段.本文就结核病免疫学诊断的研究进展进行简要地介绍.
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结核分枝杆菌4种新抗原的克隆表达及血清学评价
目的 初步评价结核分枝杆菌4种新抗原Rv0432、Rv0674、Rv1566c和Rv1547的血清学诊断价值.方法 以结核分枝杆菌实验室标准参照菌株H37Rv全基因组DNA为模板PCR扩增Rv0432、Rv0674、Rv1566c基因的完整序列,Rv1547基因分为两段(Rv1547-1和Rv1547-2)扩增,与PET-32a表达载体构建重组质粒,重组蛋白利用亲和层析的方法进行纯化.待检测血清和BL21 (DE3)菌体蛋白孵育进行预处理.各重组抗原用ELISA对151份待检血清(41份健康组血清和110份细菌学阳性结核患者组血清)进行IgG抗体检测.检测结果用受试者工作特征曲线对其诊断效能进行分析和评价.采用t检验比较目的蛋白在结核患者组和健康组的差异性.结果 成功克隆表达和纯化了蛋白Rv0432、Rv0674、Rv1566c、Rv1547-1和Rv1547-2,ELISA结果显示Rv0432、Rv0674、Rv1566c、Rv1547-1和Rv1547-2的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、约登指数和曲线下面积分别为43.64%~ 92.73%、80.49%~92.68%、0.92 ~ 0.94、0.38 ~0.80、0.363~ 0.732和0.649~ 0.915.目的蛋白在结核组检测到的IgG抗体水平均大于健康组(P<0.000 1).结论 结核分枝杆菌新抗原Rv0432、Rv0674、Rv1566c、Rv1547-1和Rv1547-2具有良好的血清学检测价值,可作为结核病免疫学诊断的候选抗原.
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严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒刺突蛋白基因片段的表达及其初步应用
严重急性呼吸综合征(SARS)病毒为冠状病毒科.该病毒主要引起以破坏呼吸道肺上皮细胞为主的全身性疾病,引发免疫抑制和全身感染.同时,SARS病毒感染与全身血管病变有关.目前,在我国SARS感染后的免疫学诊断尚无完善的方法,细胞培养的抗原面临纯化困难和操作的危险性.我们利用基因重组的方法,表达了SARS冠状病毒S1蛋白的C端部分,此区域包含主要中和抗原位点[1].利用原核表达系统快速高效的特点,可以迅速表达重要的新病原活性蛋白,为进一步建立特异性诊断方法、疫苗动物试验、中和抗体诱导、基因工程疫苗的研制提供实验手段和依据.同时也为疫苗研究提供了新的战略思路.
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严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒N蛋白基因的表达及其初步应用
严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)的病原是SARS冠状病毒[1],该病毒引起以呼吸道肺上皮细胞损害为主的全身性疾病,引发免疫抑制而造成全身感染.同时,SARS病毒感染导致全身血管病变,是一种传染性很强的新病原.目前,在我国SARS感染后的免疫学诊断尚无完善的方法,细胞培养的抗原面临纯化困难和操作的危险性.我们利用基因重组的方法,在大肠杆菌中表达了SARS冠状病毒N蛋白全长基因,为进一步建立特异性诊断方法、基因工程疫苗的研制提供了备选实验材料.
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华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶的基因表达与在ELISA诊断上的应用研究
目的探讨重组华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶在华支睾吸虫病血清学诊断上的应用价值. 方法以成虫cDNA为模板PCR扩增GenBank中一个华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶(No. AF093242,简称CysB)的部分基因片段,亚克隆到pTrcHis表达载体,转化入大肠埃希菌DH5α.表达出的重组蛋白经亲合层析纯化后用于ELISA检测华支睾吸虫及其他寄生虫感染血清,评价其诊断应用价值. 结果成功克隆与表达CysB基因片段,纯化后的重组蛋白用于华支睾吸虫病诊断的敏感性达96.0%(48/50),与其他寄生虫病的总交叉反应为3.8%(1/26),而对比实验中可溶性粗抗原(CAA)用于检测的敏感性为88.0%(44/50),与其他寄生虫感染血清无交叉反应. 结论重组华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶(CysB)用于ELISA诊断技术具有较高的敏感性及特异性,有希望成为可溶性粗抗原的替代之一.
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对长江流域抗洪转退官兵血吸虫感染的调查
1998年夏,我国长江、嫩江流域发生了特大洪涝灾害,山东临沂籍320名转退官兵参加了长江流域抗洪抢险。根据上级指示精神,于1999年5~7月对上述官兵进行了血吸虫感染情况调查,现将结果报道如下。1 内容与方法1.1 调查对象 参加长江流域抗洪抢险的转退官兵。1.2 调查内容 一般情况、病史、症状、体征、皮内实验和免疫学诊断。1.3 调查方法 对目标人群筛检性普查,筛检出的高危人群进行诊断性调查,所有被调查者均进行皮内实验,对皮内实验阳性者做间接血凝试验。2 结果 1998年参加长江流域抗洪抢险临沂籍转退官兵共320人,本次实查226人,调查率为70%,其中皮试阳性19人,阳性率为8.05%,间接血凝试验19人全部阴性。3 小结 本次调查实查率仅为70%,原因在于退役官兵离开部队时间较长,很多人已外出打工。本次调查未发现血吸虫感染阳性者,因为该人群大多在接触疫水前进行过预防服药,完成抗洪抢险任务后原部队进行过血吸虫感染调查和预防性治疗。另外,本次调查目标人群标本较小,实查率不高,也可能是未发现感染者的原因之一。 建议对调查的部分目标人群继续有计划地进行追踪观察,以保证抗洪转退官兵不因感染血吸虫病而对身体造成危害。
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囊虫病的免疫诊断现状与展望
囊虫病是一种呈世界分布的人兽共患寄生虫病,对人类健康危害极大,尤其是脑囊虫病,如不及时治疗或治疗不当往往使人致残甚至危及生命.囊虫病的免疫学诊断可以弥补病原学、流行病学、影像学诊断的不足,在诊断和鉴别诊断中具有重要地位.近年来囊虫病的免疫学诊断发展很快,现将主要诊断方法和目前囊虫病诊断的工作重点及存在的主要问题综述如下.
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囊虫病免疫诊断的研究进展
囊虫的诊断除皮肌型患者可采取皮下结节检查确诊外,单纯脑型患者的诊断常根据临床症状、影像学诊断和免疫学检测的结果进行综合判断获得,当临床症状、影像学指标不典型及疾病早期时,诊断往往有一定的困难.免疫学诊断弥补了临床诊断及影像学诊断的不足,具有重要的临床价值.近年来国内外学者对囊虫病的免疫诊断进行了大量的研究工作.诊断试剂的不断更新,免疫检测手段的换代,使得该领域的研究不断推陈出新,在抗原分析与研究方面已日益扩展到了异种抗原、纯化抗原、基因重组抗原等领域;在检测技术上亦从简单的凝集试验涉及到了免疫标记、酶联免疫印渍、杂交瘤制备、DNA重组技术等领域.现将国内外有关研究近况综述如下.
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弓形虫病免疫学诊断研究进展
目前诊断弓形虫的方法大致分为3类:1)病原学检查方法;2)免疫学方法;3)分子生物学方法.本文综述了免疫学方法在弓形虫感染诊断中的应用及弓形虫抗原研究进展.
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全国人体重要寄生虫病现状调查中囊虫病试剂盒批间差异的比较
猪囊尾蚴病(Cysticercosis cellulose)又称囊虫病,是一种分布广泛的人兽共患寄生虫病,在我国28个省(区、市)均有流行[1].由于囊尾蚴常寄生在脑、肺、脊髓等深部器官[2],病原学检查很难进行,所以囊虫病的免疫学诊断显得尤为重要,这不仅可以弥补病原学、流行病学、影像学诊断的不足,而且操作简单、快速,适用于基层和现场.为了解当前我国重要寄生虫病的流行情况,为21世纪有计划、有重点地开展寄生虫病防治工作提供科学依据,卫生部决定开展全国人体重要寄生虫病现状调查.囊虫病为本次调查的一类病种,采用免疫血清学检测的方法,所用的囊虫病试剂盒通过招标评比的形式由指定厂家提供.为了更好地了解和控制其质量,对厂家生产的试剂盒随机抽取了3批,作了比较.
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重大传染病诊断技术
近年来,我国在突发传染病,尤其是严重急性呼吸道综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)和甲型H1N1流感等的防控经验显示,诊断试剂在传染病的预防和控制中发挥着越来越重要的作用.这些诊断试剂从方法学上讲,主要分为两大类,即免疫学诊断和分子诊断.本文对这两类诊断技术进行简要综述.
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努力规范肝脏疾病的免疫学诊断
病毒性肝炎和非病毒性肝脏疾病诊断和监测是目前临床面临的重要问题,不断提高肝脏疾病免疫学诊断的质量,可为临床提供必要的诊断和监测指标,也有助于规范临床检测和诊疗工作.
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类风湿关节炎免疫学诊断方法及其临床意义
类风湿关节炎(RA)是一种以慢性破坏性多关节炎为主要表现的全身性自身免疫病.以双手、腕、膝、踝和足关节的对称性多关节炎为主,可伴有发热、贫血、皮下结节及淋巴结肿大等关节外表现,血清中可出现多种自身抗体.RA的发病为抗原驱动、T淋巴细胞介导,且与遗传相关的过程.但迄今为止,RA病因和发病机制尚不完全明确,而且缺乏特异性诊断方法.
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蓝氏贾第鞭毛虫感染的免疫学诊断方法
蓝氏贾第鞭毛虫感染可引起人及其他哺乳动物腹泻.近年来,贾第虫病的严重性和危害性日益受到重视.本文对蓝氏贾第鞭毛虫感染的免疫学诊断方法研究进行了综述,比较了各种方法的优缺点,简要介绍了一些商品化试剂盒的使用情况.贾第虫病免疫学诊断方法的应用,对贾第虫病的临床诊断、治疗、预后将带来极大的方便.
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结核病的诊断与误诊
结核病的诊断有两个世界.在一个世界,痰涂片镜检是唯一可用的方法.通常在病人支付的起的情况下,可能还有一些放射性的方法.在另一个世界,有所有可用的现代化技术,包括痰培养、核酸扩增、分子诊断和一些尖端的放射性技术,如计算机断层扫描和正电子发射断层扫描.在这两个世界,结核病的诊断或误诊有很大的不同.本文概述了结核病的临床、影像学、分子生物学和免疫学诊断,并着重介绍结核病诊断常见的困难和缺陷.
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结核病免疫学诊断新进展——T-SPOT.TB
结核病一直是危及人类健康的主要传染病之一,在全球所有传染性疾病中,结核病已成为成年人的首要死因.据WHO估计,2007年全球约有927万新发结核患者,175万人死于结核病[1].
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肾结核免疫学诊断方法对比研究
目的:比较三种血清学诊断方法对肾结核诊断的效果.方法:采用免疫层析法和ELISA法检测血清中特异性抗体.结果:52例肾结核、105例健康人和126例肾脏病患者血清标本中,抗LAM抗体检测阳性率分别为59.6%,0%和0%;抗38ku和细胞质膜抗原抗体检测阳性率分别为82.7%、0.9%和2.4%;抗PPD抗体阳性率分别为76.9%、8.5%和11.1%.抗LAM和抗38ku抗体联合检测,肾结核患者阳性检出率达88.5%.结论:抗LAM和抗38 ku抗体快速检测方法能够在半小时内对肾结核作出初步诊断和鉴别诊断.
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重组抗原用于弓形虫病免疫学诊断的研究进展
刚地弓形虫( toxoplasma gondii)1简称弓形虫,寄生于人及多种脊椎动物的有核细胞内,引起严重的人兽共患寄生虫病.该虫可由孕妇经胎盘垂直传给胎儿使其患先天性弓形虫病.对于免疫功能低下或免疫受抑制者,常可引起多脏器和组织损害,继发获得性弓形虫病.当免疫功能衰竭时该病呈广泛播散,迅速发生致死性感染.因此对弓形虫感染的防治或弓形虫病的诊断的研究具有非常重要的意义.
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一个识别与Leu-15不同表位的抗人CD11b单克隆抗体4F8
CD11b为髓细胞系相关性单克隆抗体(单抗),在白血病的免疫学诊断、感染性疾病的鉴别及树突状细胞(DC)和粘附分子研究方面均具有重要意义[1-5].ZCH-7-4F8(简称4F8)为分泌CD11b单抗的杂交瘤株,其单抗4F8已于1996年和2000年分别被递交第6和第7届国际人类白细胞分化抗原协作组会议(HLDA6,LDA7)进行了鉴定和正式命名[6,].我们对该杂交瘤株所分泌的抗体与国际标准CD11b单抗进行了比较研究,现将结果报道如下.