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介绍一种简单补救ELA显色系统失灵的方法
酶联免疫吸附实验(ELA)应用的试剂都是生物活性物质,在保存和使用过程中试剂容易失效.ELA大部分应用H2O2为底物氧化四甲基联苯胺(TMB)显色做为指示系统,H2O2是ELA底物中的关键试剂之一,但由于H2O2能自身氧化缓慢分解成O2和H2O使ELA显色系统失灵.我室购买的上海荣盛生物技术有限公司生产的ELA检测HBsAg试剂盒(批号为2000314),可能由于保存和使用不当等原因使该试剂的显色指示系统在保质期内(保质期为六个月)失去指示作用,为了恢复指示系统的功能,经过多次实验表明在显色剂中重新加入适量H2O2溶液取得满意效果.
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试用扩增仪裂解血清标本
HBV-DNA的PCR检测中一般厂家的试剂盒说明书上标本的裂解处理都是在沸水中煮沸15 min后高速离心,但是无专门配置的煮沸装置,在煮沸过程中离心管盖子容易冲开而进水,经常返工,操作很不方便.笔者试用PCR扩增仪裂解血清标本,结果令人满意,现报告如下.
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包被管的固定振荡
目前在临床检验中用包被管作免疫测试已经是很普遍了。试剂盒中带有成套的包被管和支架,用着十分方便,使以往自己预包被的劳动也取消了,深受广大基层医院的欢迎。我们在使用中发现,试剂盒中的包被管支架通常是4.6 cm宽,而微量振荡器上的铁托架是8.8 cm宽,放在上面不能固定,振荡的效果不理想。我们针对这一问题作了以下改制,将铁托架上的一侧边两端打两个孔,在孔中加上螺栓,螺栓长为4.5 cm左右,调整螺栓就能将窄的包被管支架固定在振荡器的铁托架上,收到了满意的振荡效果。 如果不想如此复杂的改制,就用预包被板锯成3.8 cm宽的一个板条,振荡时与4.6 cm宽的包被管支架一起放在振荡器的铁托架上也能起到固定的目的,遇有其他宽度的包被管支架,再做一个就可以了,这样也很方便。 经过我科的应用效果满意,这点实验中的小方法,希望能给同行们一点帮助。
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介绍一种接种环容量简易标定法
尿液定量细菌培养,接种环的容量直接影响检验结果的准确性,我们利用高密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒中酶试剂标定接种环容量,在实际检验中,效果满意.
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国产免疫球蛋白试剂盒在Array-360免疫检测仪上的应用和评价(摘要)
目的:为寻找高质量国产免疫球蛋白及补体试剂,替代进口试剂,以降低成本.方法:采用速率散射比浊法,将奥博国产和Beckman进口两种免疫球蛋白(IgG、IgA、Ig M)和补体(C3、C4)抗血清,在Beckman Array-360全自动免疫化学检测系统上进行了对比检测.结果:奥博国产IgG、IgA、IgM、C3和C4抗血清直接与Beckman相应任意批号抗体卡,CAL-1液匹配定标.批内变异系数CV值均小于5%,批间变异系数CV值均小于 8%,其检测下限与Beckman抗血清接近,符合免疫试剂质量要求.应用奥博国产和Beckman 进口IgG、IgA、IgM、C3、C4抗血清,将40例住院患儿血清标本分成两组同时检测,两种结果经相关分析,相关系数(r)分别为:IgG:0.999、IgA:0.999、IgM:0.999、 C3:0.998、C4:0.998.结果呈极度正相关(P<0.01).结论:奥博国产IgG、I gA、IgM、C3和C4抗血清符合质量要求,完全适用于Beckman Array-360全自动免疫检测系统,可代替进口试剂进行上述诊断项目的检测,降低成本,减轻患者的经济负担.
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血清启动在无机磷测定中的应用
"中生"公司生产的无机磷试剂盒采用钼酸法测定血清中的无机磷(P),此试剂说明书要求将液体R1试剂和液体R2试剂予先混合成工作试剂,然而工作试剂保存时间只有24 h,常造成试剂浪费.在意大利BT3000型全自动生化分析仪上可以运用血清启动(Serum Starter)进行测定,避免了人工配制工作试剂的麻烦,有效节约试剂,此方法也可推广用于大部分的液体双试剂测定项目.
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进口质控物不能作酶活力测定校准品
近二十年来,由于开展酶测定标准化工作以及自动生化分析仪的广泛应用,大大提高了临床实验室酶活力测定的精密度和准确度.尽管如此,同一种酶用相同的试剂在不同仪器上测定或同一方法不同试剂盒在同一仪器上测定,结果存在较大差异,很难统一.用什么方法来消除这种差异,仍是目前实验室关注的焦点.以前有报道用宝灵曼质控血清作标准品可消除不同仪器间测定结果的差异[1].我们用相同仪器及试剂对4种共8个批号的进口质控品的四种酶进行测定,并与靶值比较,再以此质控品校准病人结果,发现测定值与靶值有较大差异,校准后的病人结果也并未得到统一.
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血清蛋白电泳试剂盒使用方法的探讨
本文使用的Sebia血清蛋白电泳试剂盒,选用了低浓度的琼脂糖凝胶作为电泳的支持介质,故相当于自由界面电泳,其图谱分离清晰、透明度高、敏感性强,但在厂家提供的试剂盒中仅有7,15,30人份三种规格,对用户的使用有一定的约束.本文旨在探讨更灵活地分次使用蛋白电泳试剂盒的方法,现报道如下.
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复溶后平衡时间对干粉试剂稳定性的观察
近年来,随着医学科学技术的迅速发展,各种自动化生化分析仪和商品化试剂盒已广泛应用于临床实验室,在短时间内为临床提供了大量实验诊断数据.酶法干粉试剂复溶后的稳定性如何,直接关系到检测结果的准确与否.
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NOVA 16全自动急诊生化分析仪试剂包内标准A液的研制与应用
目的:研制NOVA 16全自动急诊生化分析仪试剂包内标准A液.方法:根据电极法测定Na、K、Cl、TCO2、Urea、Cr、Glu、Hct的原理及标准液配制的有关要求配制类似于血浆水的A液.结果:自配内标准A液与原装内标准A液的主要理化指标:pH 、渗透压、电极斜率、线性范围均一致,自配内标准A液的精密度与原装内标准A液所测结果之间的相关性(r=0.950~1.000)及自配A液的批内(P>0.05)、批间(P>0 .05)稳定性较好,长期使用对电极无损害.结论:自配内标准A液的准确度与精密度符合临床要求,提示自配内标准A液可替代原装内标准A液.
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自动生化分析仪应用中的几个问题
自动生化分析仪的种类很多,临床实验室大多选用任选式自动生化仪,其工作原理为比色分析法,由微处理器及储存预约控制各个部件的运作,作自动加样、比色、计算结果、打印报告等.一份样品可选择试剂仓内预置试剂盒的一项或全部的生化控制[1],如奥林巴斯、贝克曼、日立、东芝等系列分析仪.
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酶活性测定的质量保证
随着自动生化分析仪在各医院的普及,酶的连续监测法测定已成为临床酶活性测定的常规方法.但在实际工作中,由于所用的仪器种类繁多,试剂盒品种不一,实验室工作人员业务能力的差异等,造成不同实验室间的测定结果差异较大.本文就酶活性测定的质量保证和标准化作一些探讨,现报告如下.
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采用不同的质控形式对天津市免疫球蛋白类检验的室间质评结果分析
免疫球蛋白和补体的检验是临床实验室的常规项目,常用的方法是琼脂扩散法、透射比浊法和散射比浊法。所用的主要厂家试剂盒约有十多种,由于试剂盒缺少统一的标准和检验方法学的差异[1],免疫球蛋白和补体的检验结果不稳定和可比性差。2000年我中心通过不同的质控方式、采用多个样本,加大质控力度,深化室内质控,从而提高免疫球蛋白的检测水平。1 材料和方法1.1 材料①质控血清购自卫生部临检中心的室间质评血清。②对天津市41家参控实验室免疫球蛋白及补体的质控结果进行分析。
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血清铁5-Br-PADAP直接光度法自动分析试剂盒的研究与评价
目的研制、评价血清铁 5-Br-PADAP自动分析法试剂盒.方法在表面活性剂存在下,用2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-二乙氨基酚(5-Br-PADAP)作显色剂双试剂两点终点法测定血清铁.结果该法线性范围0~85 μmol/L,平均回收率为99.7%,批内变异系数(CV)和批间变异系数分别为0.014%~0.016%和0.016%~0.025%,与原子吸收分光光度法比较具有良好的相关性,Y=0.993 9X+0.116 9,r=0.988 9,P>0.05.107例健康人血清铁含量为9.22~29.62 μmol/L(±2s).结论用该试剂盒双试剂自动化分析法测定血清铁方法简便、灵敏可靠,适合临床应用.
关键词: 铁 血清 自动分析法 试剂盒 5-Br-PADAP -
如何将限量试剂盒中的残液用完
随着医院实验室进口设备的引进,进口试剂盒的应用越来越广泛.其中有些进口设备的配套试剂为限量试剂盒,即仪器本身能够记录试剂的用量,到一定数目就不能再应用,雅培公司生产的TDx血药浓度监测仪和IMx全自动免疫分析系统等仪器即属此类.
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瘢痕疙瘩p53基因检测试剂盒的临床应用
目的:在浙江地区对瘢痕疙瘩p53基因检测试剂盒进行临床实验,评价此试剂盒的准确度和有效性.方法:采用聚合酶链反应-反向点杂交方法建立的试剂盒检测了浙江地区75例瘢痕疙瘩患者与75例正常对照的p53基因第72位密码子多态性位点的基因型.结果:瘢痕疙瘩组的Pro等位基因及Pro/Pro基因型频率明显高于对照组(P值分别为0.014、0.015),Pro/Pro基因型者患瘢痕疙瘩的风险性明显增高(OR=2.404,955CI∶1.182~4.887).结论:p53基因检测试剂盒可以预测瘢痕疙瘩高危个体,对于临床诊断和治疗方面也有一定的指导意义,并具有良好的可重复性和特异性.
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解脲脲原体感染180例药敏试验分析
1材料与方法标本均采自2004年5月~2005年1月首次来本院就诊并疑为泌尿生殖道感染的734例患者,采用解脲脲原体分离鉴定、计数、药敏试剂盒(珠海丽珠试剂有限公司生产),按照说明书进行接种培养和结果判定.
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10种抗生素对支原体的抗菌作用分析
为了给临床治疗支原体感染提供实验室依据,我们采用支原体IST试剂盒,用10种抗生素对检出的172株支原体进行药敏检测及抗菌作用分析,结果报告如下.
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梅毒螺旋体Nichols株的液氮冷冻保存及不同传代周期的结果观察
1948年Nelson等[1]首先建立了梅毒螺旋体制动试验(TPI),到70年代至今已被更为敏感、特异性良好、既经济又简便的荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)、梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)、梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)所代替.这类特异性试验试剂盒的研制都是以梅毒螺旋体Nichols株作为特异性抗原的,因此,Nichols株的保存、传代、抗原纯化是特异性试验试剂盒研制的关键.我们性病中心的梅毒螺旋体Nichols株是1978年自WHO引进,采用家兔睾丸传代和液氮内保存至今,按常规我们每隔3~4个月复苏菌株接种家兔1次,为了解延长传代间隔期、菌株活性及发病情况有无变化,我们做了3种不同传代周期的观察研究,现报告如下.
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酵母样真菌液体培养药敏试剂盒的研制
目的 为酵母样真菌药敏提供操作简便、经济实用、准确可靠的体外液体药敏试剂盒,给临床用药提供参考依据.方法 参照美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)M27-A方案,根据药物MIC值,参照文献建立高低两个药敏浓度的液体培养药敏试剂盒;用标准参考菌株(c.P,ATCC 22019、C.k,ATCC 6258)为试验菌株测定试剂盒的重复性和稳定性;用221株临床分离株与ATB FUNGUS 3药敏试剂盒进行比较.结果 批内MIC符合率为97.50%,批间MIC符合率为95.83%;试剂盒在-20℃保存6个月内稳定,MIC符合率都在90.00%以上;与ATB FUNGUS 3药敏试剂盒一致性较好,Kappa>0.7,P<0.05.结论 酵母样真菌培养药敏试剂盒可以满足临床检验需求,值得推广应用.