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滋阴润燥生津组方治疗干燥综合征疗效观察
目的：观察滋阴润燥生津汤治疗干燥综合征(SS)前后人体免疫球蛋白IgA、IgG、IgM的变化，分析其对机体免疫功能的调节作用。方法：收治SS患者120例，随机分为两组，治疗组60例予自拟滋阴润燥生津汤口服加雾化吸入治疗，对照组60例予口服硫酸羟氯喹片剂治疗，两组患者治疗前及治疗2个月后分别采集静脉血，检测免疫球蛋白指标的变化情况。结果：治疗组总有效率92.86%，对照组总有效率71.43%，两组比较差异有统计学意义(P＜0.05)，治疗组疗效优于对照组。治疗组治疗前后免疫球蛋白指标变化明显，有统计学意义(P＜0.05)，而对照组的变化无统计学意义(P＞0.05)，两组治疗后免疫球蛋白指标与比较差异有统计学意义(P＜0.05)，治疗组改善情况优于对照组。结论：滋阴润燥生津汤可有效地调节干燥综合征患者机体的免疫功能。
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罗红霉素治疗肺炎衣原体抗体IgG阳性偏头痛的临床观察
目的 探讨罗红霉素治疗肺炎衣原体抗体IgG阳性偏头痛的临床疗效观察和对血清中肺炎衣原体抗体IgG影响.方法 将门诊100例肺炎衣原体抗体IgG阳性偏头痛患者随机分为试验组和对照组各50例,在常规口服镇痛药(尼美舒利)和尼莫地平基础上,试验组:口服罗红霉素.结果 ①试验组:痊愈率50％,显效率40％,有效率8％,无效率2％,总有效率98％.对照组:痊愈率34％,显效率30％,有效率26％.无效率10％,总有效率90％,经R分析有显著性差异(P＜0.05).②试验前2组血清中2组肺炎衣原体抗体IgG滴度的比较,经统计学处理无显著生差异.结论 ①罗红霉素和尼莫地平治疗肺炎衣原体抗体IgG阳性偏头痛的疗效优于尼莫地平；②肺炎衣原体感染可能是偏头痛的病因.
关键词： 肺炎衣原体抗体IgG 偏头痛 免疫球蛋白类 罗红霉素 尼莫地平 -
食管癌患者血清细胞因子和免疫球蛋白水平的动态观察
目的 研究白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-8(IL-8)及免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)在食管癌患者血清中的水平变化,并探讨IL-2、IL-8、IgG、IgA、IgM水平在食管肿瘤临床分期之间的相关关系.方法 用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测了72例食管癌早期(I-II)患者、68例食管癌晚期(Ⅲ-Ⅳ)患者和120例对照者血清IL-2、IL-8水平,同时对食管癌患者血清免疫球蛋白IgG、IgA、IgM指标进行动态观察.结果 血清IL-2水平食管癌早期患者组[(1.69±0.53)ng/m1]和食管癌晚期组患者[(1.11±0.60)ng/m1]显著低于正常对照组[(2.78±0.51)ng/m1](P＜0.01),晚期患者较早期明显降低(P＜0.05);血清IL-8水平食管癌早期患者组[(85.48±6.14)ng/L]和食管癌晚期患者组[(121.41±6.22) ng/L]均显著高于正常对照组[(54.48±12.20)ng/L](P＜0.01),晚期患者较早期升高(P＜0.01);食管癌患者血清IL-2及IL-8水平与肿瘤的恶性化程度有明显相关性.而食管癌患者IgG[(12.23±2.50)g/L]、IgM[(1.60±0.80)g/L]含量与正常对照组IgG[(11.65±3.70)g/L]、IgM[(1.46±0.71)g/L]比较差异无统计学意义(P＞0.05),IgA的含量[(3.50±1.10)g/L]与正常对照组[(1.88±1.08)g/L]比较差异有统计学意义(P＜0.01),且随病情的恶化程度IgA水平的变化有增高趋势.结论 IL-8在食管癌发病过程中可能起着促进作用,而IL-2可能起着抑制作用,IgA 在食管癌病人中呈正相关;三者的免疫失调状态可能与食管癌密切相关;IL-2、IL-8、IgA 水平可作为食管癌病情监测的指标,同时对肿瘤的临床分期、疗效和预后的判断也有一定的帮助.
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桥本甲状腺炎与甲状腺原发性淋巴瘤基因重排检测
目的探讨桥本甲状腺炎(HT)和甲状腺原发性淋巴瘤(PTL)的免疫球蛋白(Ig)基因重排特点及2种疾病的相关关系.方法收集PTL 11例(PTL组),HT 38例(按组织形态学分为HT组和可疑PTL组),以及相关临床资料.应用PCR技术,采用VH、FR3A、FR3κ共3对引物,对3组标本的Ig重链和轻链的基因重排情况进行检测.结果可疑PTL组重排单克隆率(40.0%)显著高于HT组(10.7%);PTL组重排单克隆率(72.7%)显著高于可疑PTL组.各组女性患者均显著高于男性,但PTL组男性比例较前两组有所提高.3组病变患者甲状腺球蛋白抗体及甲状腺过氧化物酶抗体的滴度与重排结果无关联.结论PTL与HT在形态学上有交叉,通过PCR技术对这2种疾病中淋巴组织的Ig基因重排的检测,提示桥本甲状腺炎可能进展到甲状腺淋巴瘤,基因重排出现单克隆性早于形态学表现.
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轻链肾病的病理学特点
目的探讨轻链肾病(light chain nephropathy,LCN)的病理学特点及其诊断方法.方法对7例LCN进行了系统的光镜、免疫荧光及透射电镜检查,并进行轻链蛋白(κ、λ)的免疫荧光和免疫电镜标记.结果 7例的光镜表现不一,3例系膜结节状硬化性肾小球病,1例系膜轻至中度增生;其余3例为管型肾病,肾小球病变轻微.免疫荧光检查:7例均可见单一品种的轻链蛋白在肾小球系膜区团块状,及肾小球基底膜、肾小管基底膜和小血管壁呈线性沉积.透射电镜检查可见肾小球系膜区和基底膜内侧、肾小管基底膜外侧及小血管壁的颗粒状电子致密物沉积.免疫电镜标记显示,肾小球基底膜内侧和系膜区、肾小管基底膜外侧及小血管壁的颗粒状沉积物均可被单一品种轻链蛋白(5例κ,2例λ)标记.结论典型的LCN呈系膜结节状硬化性肾小球病,电镜观察到LCN的特征性超微结构改变具有诊断意义,结合轻链蛋白(κ、λ)的免疫荧光或免疫电镜检查可进一步确诊,尤其对光镜病变不明显的LCN更有意义.
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显微镜型多血管炎肾活检病例的临床病理分析
目的 探讨血清抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)及肾小球内有无免疫球蛋白(Ig)沉积在显微镜型多血管炎(MPA)肾活检病例中的病理诊断价值及其临床病理意义.方法 34例MPA均为该系2000年1月至2007年3月7年间的就诊患者,其临床资料比较完整,后经肾穿刺活检而确诊者,分别对其血清ANCA阳性和阴性及肾小球内有无Ig沉积的临床病理特点进行比较.结果 34例MPA患者,约1/5～1/2病例伴有各种肾外症状;经血清ANCA检测,阳性者26例(76.5%);阴性者8例(23.5%);其尿蛋白多呈轻～中度,呈肾病综合征者仅3例;肾功能减退者32例.经病理检查显示,24例为新月体性肾炎,8例为局灶节段性肾炎,其他类型者仅2例;伴肾血管坏死或内膜炎症7例,内膜增厚24例;伴间质炎性细胞浸润29例,其中21例伴有中性粒细胞浸润.经临床与病理比较分析,发现ANCA阳性组的新月体形成率显著高于ANCA阴性组(P＜0.05);在26例ANCA阳性组病例中,肾小球Ig沉积者的尿蛋白定量显著高于无Ig沉积组(P＜0.05),其中1例合并IgA肾病.结论 对MPA的诊断有赖于对患者血清ANCA的检测和肾活检组织的病理学检查;ANCA是促进肾小球新月体形成的一个重要因素;Ig在肾小球内的沉积对患者蛋白尿的加重起促进作用.
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肾脏早期淀粉样变临床病理特点
目的探讨光学显微镜尚未表现明显特点的早期肾淀粉样变(amyloidosis, AL)的临床病理特点及诊断方法.方法回顾性分析该院1994～2001年间诊断的肾AL病例,重点对其中15例光镜未能及时诊断而通过透射电镜诊断的早期AL病例,进行临床病理特点的分析,并对其肾活检组织进行了轻链蛋白(κ、λ)的免疫电镜定位检测.结果 15例均为早期肾AL,发病年龄以中老年为主,突出表现为肾病综合征,偶见镜下血尿及高血压,肾功能正常.多数以肾脏病为初诊症状.肾活检组织光镜观察病变表现轻微,可有系膜轻度增生或基底膜空泡变性及轻度增厚;免疫荧光表现不一,部分病例全部阴性,部分表现免疫球蛋白及补体沿系膜区或毛细血管壁不同程度的沉积,均有单一品种的轻链蛋白沉积;光镜初步诊断为肾小球微小病变4例,轻度系膜增生性肾小球肾炎5例,Ⅰ期膜性肾病5例和1例管型肾病;电镜观察可见系膜区、基底膜及小动脉壁上的淀粉样纤维分布;补作刚果红染色时,呈阳性反应;免疫电镜可观察到轻链蛋白被标记于淀粉样纤维部位,证实15例均为轻链型AL.结论电镜检查是发现及早期诊断肾淀粉样变的重要手段,单一品种的轻链蛋白沉积有一定的诊断意义,结合免疫电镜检查可进一步确诊和分型.
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套细胞淋巴瘤中免疫球蛋白重链可变区基因突变状态及其与预后的关系
目的 探讨套细胞淋巴瘤(MCL)免疫球蛋白重链可变区(IgVH)基因突变状态与各临床病理因素间的关系,进一步了解MCL的生物学行为.方法 对60例确诊为MCL病例,使用BIOMED-2系统的FR1-JH及FR2-JH两套引物扩增IgVH基因序列,并T载体克隆测序,利用Pubmed在线数据库Ig-BLAST进行核苷酸序列比对,分析其与各临床病理因素间的关系.结果 以98％为标准,60例MCL中未突变组36例(60.0％)克隆出40条功能性Ig基因序列,突变组24例(40.0％)克隆出28条功能性Ig基因序列;MCL对VH3-21(27,9％)及VH4-34(19.1％)有使用偏倚性,前者多见于未突变病例,后者多见于突变病例;19例(9例未突变、10例突变)有克隆内差异;IgVH基因的突变状态、特定VH基因片段与预后无关(P＞0.05).结论 MCL是一异质性实体;对VH3-21和VH4-34有使用偏倚性,提示在MCL发生发展中某种或某些特定抗原起一定作用;IgVH基因突变状态、特定VH基因片段与预后无关.
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原位杂交对胃粘膜相关组织淋巴瘤的免疫球蛋白轻链的检测
目的 评价mRNA原位杂交方法检测免疫球蛋白轻链限制性在胃粘膜相关组织淋巴瘤诊断中的应用价值。方法 用非同位素标记寡核苷酸mRNA探针原位杂交方法检测27例原发性胃粘膜相关淋巴瘤和5例慢性胃炎,对其中的肿瘤细胞、淋巴细胞及浆细胞的免疫球蛋白κ和λ轻链的比例进行分析，以确定肿瘤细胞的轻链限制性及浆细胞的单克隆性。结果 27例原发性胃粘膜相关淋巴瘤中有10例出现轻链限制性(37%)，其中5例(5/9)为低度恶性病例，5例(5/18，28%)为高度恶性病例。单克隆性的浆细胞只在低度恶性病例中检出。慢性胃炎标本及肿瘤旁组织中未检测出轻链限制性。结论 mRNA原位杂交方法检测轻链限制性是诊断胃淋巴瘤的一个有用工具。低度恶性淋巴瘤中单克隆性浆细胞的存在，可作为诊断早期胃粘膜相关淋巴瘤的依据之一。
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人源抗HIV-1 gp120趋化蛋白受体结合位点Fab单克隆抗体基因的获得
目的筛选人源抗HIV-1 gp120趋化蛋白受体结合位点噬菌体Fab单克隆抗体基因.方法根据HIV-1 gp120趋化蛋白受体结合位点的氨基酸序列合成23肽,并以此为固相抗原从HIV-1噬菌体Fab抗体库筛选阳性克隆,并进行鉴定及序列测定.结果获得了1株抗HIV-1 gp120趋化蛋白受体结合位点的人源Fab抗体克隆,具有较高的亲和力、特异性和抑制率,序列测定及分析显示该抗体属IgG Ⅰ亚类,κ型,重、轻链可变区分别属VhⅢ和VκⅢ基因家族.结论成功地获得了人源抗HIV-1 gp120趋化蛋白受体结合位点噬菌体Fab单克隆抗体基因.
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人源抗狂犬病毒基因工程单链抗体的研究
目的 研制人源抗狂犬病毒基因工程抗体.方法 从具有高滴度狂犬病毒抗体的疫苗接种者采集外周血淋巴细胞,通过pHAL14载体和高效噬菌体系统构建人源抗狂犬病毒单链基因工程抗体库,经纯化的狂犬病毒aG株富集筛选,通过ELISA和IFA鉴定阳性抗体克隆并进行序列测定.利用IgG表达载体VH/VK双质粒系统瞬时转染293T细胞实现IgG抗体的分泌型表达,通过亲和力测定和中和试验鉴定IgG抗体功能.结果 成功地获得了6株抗狂犬病毒糖蛋白的人源单克隆抗体,非竞争ELISA显示6株抗体具有较高的亲和力,体外中和试验证实这6株人源单抗对狂犬病毒CVS株无中和活性,对aG株具有较强的中和活性.结论 从免疫库中获得了6株人源单克隆抗体,为狂犬病毒的鉴别诊断和治疗奠定了基础.
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人源抗狂犬病毒基因工程单链抗体的研究
目的 研制人源抗狂犬病毒基因工程抗体.方法 从具有高滴度狂犬病毒抗体的疫苗接种者采集外周血淋巴细胞,通过pHAL14载体和高效噬菌体系统构建人源抗狂犬病毒单链基因工程抗体库,经纯化的狂犬病毒aG株富集筛选,通过ELISA和IFA鉴定阳性抗体克隆并进行序列测定.利用IgG表达载体VH/VK双质粒系统瞬时转染293T细胞实现IgG抗体的分泌型表达,通过亲和力测定和中和试验鉴定IgG抗体功能.结果 成功地获得了6株抗狂犬病毒糖蛋白的人源单克隆抗体,非竞争ELISA显示6株抗体具有较高的亲和力,体外中和试验证实这6株人源单抗对狂犬病毒CVS株无中和活性,对aG株具有较强的中和活性.结论 从免疫库中获得了6株人源单克隆抗体,为狂犬病毒的鉴别诊断和治疗奠定了基础.
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人源抗EV71病毒基因工程抗体的研究
目的 研制人源抗EV71病毒基因工程抗体.方法 采集多个患儿外周血淋巴细胞,构建人源抗EV71单链(scFv)噬菌体抗体基因文库.用纯化的EV71 VPI蛋白对抗体库进行筛选,将筛出抗体的轻链和重链通过序列测定确定抗体轻重链型别后分别克隆入全抗体表达载体pAC-LCH3R后转染昆虫Sf9细胞,利用杆状病毒/昆虫细胞系统实现全抗体的分泌型表达.结果 成功地获得了1株抗EV71病毒VPI蛋白的人源单克隆抗体,利用ELISA、IFA对所获人源单克隆抗体的功能特性进行鉴定,表达成分泌型IgG全抗体在体外与A型及C4亚型EV71病毒的中和反应结果 显示为阴性.结论 从免疫库中获得了1株人源非中和单抗,为EV71病毒引起的手足口病的鉴别诊断奠定了基础.
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人源抗EV71病毒基因工程抗体的研究
目的 研制人源抗EV71病毒基因工程抗体.方法 采集多个患儿外周血淋巴细胞,构建人源抗EV71单链(scFv)噬菌体抗体基因文库.用纯化的EV71 VPI蛋白对抗体库进行筛选,将筛出抗体的轻链和重链通过序列测定确定抗体轻重链型别后分别克隆入全抗体表达载体pAC-LCH3R后转染昆虫Sf9细胞,利用杆状病毒/昆虫细胞系统实现全抗体的分泌型表达.结果 成功地获得了1株抗EV71病毒VPI蛋白的人源单克隆抗体,利用ELISA、IFA对所获人源单克隆抗体的功能特性进行鉴定,表达成分泌型IgG全抗体在体外与A型及C4亚型EV71病毒的中和反应结果 显示为阴性.结论 从免疫库中获得了1株人源非中和单抗,为EV71病毒引起的手足口病的鉴别诊断奠定了基础.
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人源腺病毒伴随病毒Ⅱ型单克隆抗体Fab段及其全抗体的研制
目的运用噬菌体表面表达技术,获得基因工程抗腺病毒伴随病毒抗体Fab、IgG.方法从酶联免疫吸附试验阳性的人外周血中分离淋巴细胞,提取总RNA,逆转录cDNA,聚合酶链反应扩增人IgG Fab轻、重链基因,利用pComb3载体构建噬菌体抗体库.用纯化的腺病毒伴随病毒为固相抗原筛选抗体Fab段,并在E.coli中进行分泌性表达.通过ELISA和间接免疫荧光试验、筛选和鉴定Fab抗体,并进行序列测定.然后将其重链和轻链基因克隆到全抗体表达载体pAC-L-Fc上,转染昆虫sf-9细胞,利用杆状病毒/昆虫细胞系统实现全抗体的分泌型表达,免疫沉淀试验鉴定它的抗蛋白.结果分离到一株Fab克隆AAVs-31,腺病毒伴随病毒抗原和抗Fab抗体直接ELISA检测阳性,间接免疫荧光试验呈阳性,序列分析结果表明是一新的序列,所获得的基因为人源IgG Fab基因,由Gamma链和Kappa链组成.表达的全抗体ELISA反应、免疫荧光反应和间接免疫荧光试验均为阳性,免疫沉淀试验结果显示它结合病毒颗粒,不结合任一VP1、VP2、VP3单独衣鞘蛋白.结论用噬菌体表面表达技术首次获得了抗腺病毒伴随病毒Ⅱ型单克隆抗体Fab段,并在真核系统中表达了其全抗体,它们识别的可能是衣鞘蛋白组装时形成的表位.
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抗人巨细胞病毒中和性人源基因工程抗体的研究
目的研究抗人巨细胞病毒(HCMV)人源基因工程抗体.方法采用噬菌体表面展示技术,首先从HCMV感染者外周血中分离淋巴细胞,提取RNA,逆转录后用特异性引物扩增轻、重链基因,然后插入噬菌体载体pComb3,构建噬菌体抗体库.使用纯化的HCMV病毒裂解物对噬菌体抗体库进行4轮富集,然后通过ELISA筛选阳性克隆,并对获得的克隆进行功能鉴定.结果克隆和表达了3株抗HCMV人源Fab抗体,经ELISA证明均具有抗原结合活性,间接免疫荧光试验证明具有较高的特异性,后通过病毒中和试验证明其中2株具有中和活性.结论获得2株抗HCMV人源Fab抗体,具有一定的中和活性,为下一步研究抗HCMV人源全抗体奠定了基础.
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肠道病毒71感染病毒载量与细胞因子和免疫球蛋白水平的相关性
目的 检测手足口病患儿肠道病毒71型(EV71)病毒载量与白介素6(IL-6)、白介素10(IL-10)、S100B、免疫球蛋白A(IgA)、G(IgG)水平,探讨EV71病毒载量与细胞免疫、体液免疫以及病情轻重的关系.方法 收集本院儿科确诊的手足口病例385例,根据临床症状和体征将其分为轻度组(237例)和重症组(148例).患儿咽拭子采用实时荧光定量反转录PCR技术检测EV71病毒核酸;采用双抗体夹心法检测患儿血液和脑脊液中白介素6(IL-6)、白介素10(IL-10)及S100B水平;免疫比浊法检测血清IgA、IgG水平.结果 EV71病毒载量在重症组与轻度组间差异无统计学意义(P＞0.05);血清IL-6、IL-10和脑脊液S100B水平均与病情轻重呈高度相关性(P＜0.01),脑脊液IL-6、IL-10、WBC计数与病情轻重呈低度正相关性(P＜0.05),血清S100B与病情轻重呈中度正相关(P＜0.01);IgA、IgG水平均与病情轻重呈中度负相关性(P＜0.05).结论 EV71病毒载量的高低与患儿免疫状态无关,也不能作为判断病情轻重的关键因素.
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不同剂量乙肝疫苗与HBIG联合免疫阻断HBV母婴传播的效果对比
目的 探讨10 μg和20 μg乙肝疫苗与HBIG联合免疫阻断HBV母婴传播的效果.方法 124例HBsAg阳性孕妇所生的婴儿随机分为两组,即10 μg乙肝疫苗组和20 μg乙肝疫苗组.婴儿于出生6h内及30 d分别注射200 IU HBIG,同时分别于出生24 h内、1个月及6个月注射3次10 μg或20 μg重组酵母乙肝疫苗.检测婴儿出生时以及1岁时血清HBV标志物.结果 两组新生儿血清HBsAg、HBeAg及抗-HBe阳性率与滴度之间差别均无统计学意义(P＞0.05).所有新生儿血清HBV DNA水平均小于检测下限(500 U/ml).出生12个月时,所有124例婴儿血清HBsAg和HBeAg检测结果均为阴性;血清HBV DNA水平均在检测下限以下;10 μg和20 μg乙肝疫苗组血清抗-HBs阳性率分别为90.3％和96.8％,差异无统计学意义(P＞0.05);抗-HBs水平分别为325.5±342.2 mIU/ml和463.7±353.3 mIU/ml,后者显著高于前者(P=0.01).而且,20 μg乙肝疫苗组产生高应答抗-HBs(＞ 100 mIU/ml)的比例显著高于10μg乙肝疫苗组(P =0.035).结论 20 μg乙肝疫苗联合HBIG方案阻断HBV母婴传播的效果优于10 μg乙肝疫苗联合HBIG方案.
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免疫球蛋白对艾滋病伴发格林巴利综合征患者的治疗作用
目的 探讨免疫球蛋白对获得性免疫缺陷综合征(AIDS)伴发格林巴利综合征(GBS)患者的治疗作用.方法 回顾性分析1例经临床及实验室确诊的AIDS伴发格林巴利综合征患者的临床资料,并文献检索分析.结果 患者临床表现为格林巴利综合征,经实验室诊断艾滋病,经免疫球蛋白、抗病毒治疗后周围神经损伤痊愈,人类免疫缺陷病毒(HIV)数量减少.结论 免疫球蛋白治疗对HIV感染伴发的格林巴利综合征有治疗作用,对抗病毒治疗有益.
关键词： 获得性免疫缺陷综合征 格林巴利综合征 HIV 免疫球蛋白类 -
流感病毒中和性基因工程Fab抗体的研制
目的获得基因工程抗流感病毒抗体，为检测其粘膜用药在动物模型中的抗病毒效果奠定基础。方法 从酶联免疫吸附试验阳性的人外周血中分离淋巴细胞，提取总RNA，Oligo\|Dt逆转录Cdna，聚合酶链反应扩增人IgG轻、重链基因，利用pComb3载体构建噬菌体抗体库。用纯化的流感病毒A/Sydeny/5/97(H3N2)为固相抗原筛选抗体Fab段，并在大肠埃希菌中进行分泌性表达。通过血凝抑制实验、免疫荧光实验和病毒中和实验选择具有中和作用的Fab抗体。结果 分离到两株Fab克隆，IV-2和IV-6，流感病毒抗原和抗Fab抗体直接ELISA检测阳性，间接免疫荧光实验呈阳性。它们都具有血凝抑制作用，病毒中和实验显示能使病毒滴度下降30倍和20倍。结论 获得了两株具有病毒中和活性的人源抗流感病毒悉尼株的Fab段抗体，为进一步的表达纯化及粘膜给药研究其抗病毒效果提供材料。
