首页 > 文献资料
-
36例泌尿生殖道支原体培养、鉴定及药敏分析报告
近年来,非淋菌性尿道炎在我国的发病呈上升趋势。我省登记的NGU也从1989年的16例上升到1998年的963例。引起NGU的主要病原体之一是支原体。据文献报道,由于抗生素的大量使用,支原体对原来敏感的药物也出现了耐药。鉴于比,我们于1999年4月至2000年11月采用了支原体、鉴定、药敏一体化试剂盒对做STD常规检测的病人作了支原体的耐药检测。结果报告于下:……
-
昆明地区NGU支原体检测及药敏试验
目的了解昆明地区NGU患者支原体感染与药物敏感情况.方法:使用支原体解脲型、人型培养、鉴定、计数及药敏一体化试剂盒.结果:365例NGU患者检出支原体158例,总检出率44.38%,UU为42.98%.9种抗生素敏感的前四位是交沙霉素(91.8%),强力霉素(75.3%),美满霉素(72.2%),司巴沙星(71.5%);耐药的前四位为庆大霉素(58.9%)甲砜霉素(34.2%),美满霉素(20.3%),强力霉素(17.1%).结论:昆明地区NGU患者支原体感染以UU为主,治疗应首选交沙霉素.
-
云南石林县农村彝族人群梅毒和HBsAg血清学检测结果
为了解彝族健康人群感染梅毒和HBsAg的情况,我们于2000年4月在石林彝族自治县对土生土长的部分人作了血清学调查。现将结果报告如下: 1 材料和方法 1.1 对象 石林县圭山乡二个办事处的部分常住农村人口,共计315人,均为彝族。其中男性152人,女性163人;年龄17~78岁,平均38岁。 1.2 仪器和试剂 1.2.1 梅毒 采用兰州生物所出品的TRUST试剂盒进行初……
-
几种丙型肝炎抗体酶联免疫诊断试剂质量分析
目的:了解目前临床上常用的几种丙型肝炎抗体(抗-HCV)酶联免疫诊断试剂的质量情况。方法:选用三种国内不同厂家生产的抗-HCV酶联免疫诊断试剂盒,对40份来自医院的抗-HCV阳性病人血清(以雅培i1000检测结果为准)、40份常规体检抗-HCV阴性血清、1份上海市临检中心抗-HCV室内质控品进行检测。从而对三种试剂的灵敏度、特异性、相对符合率及精密度进行分析。结果:三种国产试剂灵敏度均达100%。其中试剂盒A和试剂盒C的相对特异性均为97.5%,相对符合率均为98.75%。试剂盒B的相对特异性与相对总符合率均为100%。三家厂家试剂CV分别为14.8%、13.3%、10.9%。结论:国产抗-HCV酶联免疫试剂灵敏度已符合要求,特异性及精密度的提高依然是主要问题。影响试剂盒质量的因素是多方面的,不同批次试剂盒在使用前应注意抽检,以确保检测结果的可靠。阳性结果应做两次检验,避免假阳性结果的报出。
-
商品化酶联免疫HCV抗体诊断试剂盒性能评估
HCV抗体酶联免疫法诊断试剂目前已经发展到第3代,其灵敏度和特异性较1代和2代试剂均有很大改善,现广泛应用于血液制品、献血员的筛选和丙型肝炎病毒感染的辅助诊断.由于HCV感染者血液循环中存在针对HCV不同蛋白的抗体,且具体针对某种蛋白的抗体是否出现、出现的时间、持续时间长短均有所差异[1].因此,ELISA测定HCV抗体时所使用的包被抗原必须全面,才能有效地检出所存在抗体,但在实际检验过程中由于不同的抗HCVELISA试剂盒生产厂家所使用HCV抗原的来源、质量及包被浓度不同,使得在检测中对同一份标本,尤其是对较弱阳性的样本或仅出现针对HCV单个蛋白成份的抗体样本,所测定的结果有时会出现很大的差异,所以对国内外不同厂家试剂盒性能水平进行评估具有很大意义.
-
促甲状腺素化学发光免疫定量检测试剂盒的研制
目的:研制人血清中促甲状腺素(TSH)的化学发光免疫检测试剂盒.方法:采用辣根过氧化物酶标记的抗TSHβ亚单位特异性单克隆抗体(mAb),与固相包被的抗TSHα亚单位的另一mAb配对,以鲁米诺作为底物,采用两步法建立了双位点夹心法人血清TSH的化学发光免疫定量分析法.结果:该方法灵敏度为0.0788 mIU/L,批内CV平均为4.7%,批间CV平均为8.4%,平均回收率为93.05%.该检测与LH、FSH和HCG无交叉反应.部分实验样品的测试结果显示该试剂与国外同类试剂(雅培architect i2000)的测定结果明显相关(r=0.984).结论:该方法具有较高的灵敏度、重复性和准确度,与其他同类产品相比简便、快捷、成本低,适于临床检测和科研应用.
关键词: 促甲状腺激素(TSH) 化学发光免疫分析法 试剂盒 -
核酸吸附快速分离法与国外同类试剂盒及传统方法的比较与评估
目的 评价核酸吸附材料及配套系列核酸分离试剂,与国外同类试剂盒及传统方法提取核酸结果的比较,探讨其替代国外同类产品的可行性.方法 将核酸吸附法、传统法及国外三种试剂盒分为5组(A,B,C,D,E)进行比较,每组分别从细胞、细菌、血液、植物中提取DNA和RNA,采用紫外分光光度法检测浓度,以吸光度A值检测样品纯度,凝胶电泳法检测核酸完整性.结果 DNA含量:A组14.073±0.033 μg/ml,B组4.31±0.041 μg/ml,C组14.325±0.030 μg/ml,D组13.876±0.023 μg/ml,E组12.654±0.012 μg/ml,A组与B组相比差异有统计学意义(t=11.175,P<0.05),与其他各组相比差异无统计学意义(t=0.014,P=0.989;t=-0.525,P=0.627;t=0.453,P=0.674).RNA含量:A组287.740±0.036 μg/ml,B组32.121±0.055 μg/ml,C组285.12±0.027 μg/ml,D组276.10±0.034 μg/ml,E组264.36±0.071 μg/ml,A组与B组相比差异有统计学意义(t=29.284,P<0.05),与其他各组相比差异无统计学意义(t=-0.22,P=0.836;t=-0.825,P=0.456;t=0.474,P=0.66).DNA纯度;A组1.828±0.016,B组1.201±0.013,C组1.836±0.022,D组1.819±0.014,E组1.796±0.025,A组与B组相比差异有统计学意义(t=7.448,P<0.05),与其他各组相比差异无统计学意义(t=-0.099,P=0.926;t=0.111,P=0.917;t=-0.833,P=0.452).RNA纯度:A组1.952±0.021,B组1.331±0.017,C组1.950±0.018,D组1.947±0.026,E组1.879±0.034,A组B组相比差异有统计学意义(t=8.755,P<0.05),与其他各组相比差异无统计学意义(t=0.024,P=0.982;t=0.061,P=0.954;t=1.434,P=0.225).A组和C,D,E组提取的核酸无降解,完整性好.B组核酸出现降解现象,完整性差.结论 核酸吸附分离法较传统法简单快速,提取的核酸纯度高、产量高,不使用酚-氯仿有机溶剂,与国外同类试剂盒效果相当,为替代国外同类产品及实现技术原始创新奠定了实验基础.
-
自制HLA-B27基因检测试剂盒的应用
目的 检验自制HLA-B27基因检测试剂盒的可靠性.方法 根据序列特异性引物聚合酶链反应(SSP-PCR)原理,通过对HLA数据库上HLA-B位点基因序列的比对,分析选择出B27特异序列合成引物,进而对PCR反应体系和条件进行摸索优化,自制HLA-B27基因检测试剂盒,同时以北京思而成B27基因检测试剂盒为对照试剂盒,对254例疑似强直性脊椎炎、急性葡萄膜炎等患者EDTA抗凝血的B27基因进行检测,结果和对照试剂盒进行比较,分析其一致性.结果 自制试剂盒疑似患者的HLA-B27阳性检出率为35.8%,对照试剂盒的检出率36.6%,经配对χ2检验,χ2=0.125,P=0.727>0.05,两试剂盒阳性检出率差异无统计学意义.结论 自制试剂盒的成本低,具有一定的实验室研究应用价值.
-
酶标仪程序设置及应用
ELISA(酶联免疫吸附实验)以其灵敏度高、特异性强、标本用量少、检测费用低等优点,已成为基层实验室的常规检测方法.酶标比色仪作为ELISA的主要仪器,其设置、使用、维护得当与否耨对实验结果有很大影响.在对基层实验室的检查中,笔者发现许多实验室技术人员由于对酶标仪程序设置不熟悉,不能按需要自行设置比色程序,往往只能使用购机时由专业人员设置的一个程序,造成一个检测项目的多个厂家的试剂盒,甚至多个检测项目共用一个程序比色,直接影响到检测结果的准确性.
-
用方法决定图选择胆固醇试剂盒
目的判断A公司的酶法测胆固醇试剂,是否可以代替现用的B公司同样方法的试剂.方法按NCCLS的有关文件要求进行实验,用方法决定图和血清胆固醇医学决定水平为6.21 mmol/L处的SE,做替代性的判断分析.结果A公司的酶法测胆固醇试剂盒,性能优秀,SE小于5%.结论A公司的试剂可以代替现用的B公司的试剂,若将A试剂盒的"标准液"更换为"校准品"血清,检测结果会更理想.
-
国产自动化电泳试剂盒研制初探
近几年来,自动化电泳仪的引进和电泳试剂盒的应用,在点样、样品转移、染色等关键步骤上的规范化和自动化,大幅度地减少了长期以来干扰这项技术重复性差、变异度大的弊端,增加了这一传统技术的准确性和精密度.
-
TG、TM及甲状腺激素在甲状腺疾病中的含量及关系
采用放射免疫技术定量测定各种甲状腺疾病血清中的HTG、TG、TM及甲状腺激素含量。探讨甲状腺抗体与甲状腺激素之间的关系,为临床诊断治疗提供可靠的实验依据。1 材料与方法1.1 临床资料根据各种甲状腺疾病发病机理不同分为4组:甲亢组106例,男32例,女74例,平均34.1±10.6 y。亚甲炎组51例,男8例,女43例,平均38.2±12.7 y。甲状腺癌组19例,男7例,女12例,平均47.0±11.9 y。甲低组31例,男11例,女20例,平均42.6±12.0 y。以上病例来自我院门诊、住院诊断明确患者。健康组30例,男、女各15例,平均33.1±8.4 y。均为健康自愿献血员。1.2 标本采集及实验方法常规分离血清,置-30 ℃冻存批量测定T3、T4、TSH、HTG、TG、TM含量。采用放射免疫法,按各试剂盒说明书进行。试剂盒由中国原子能和北方生物技术研究所提供。各项指标符合放射免疫定量分析要求。统计用t检验和百分率。
-
ACS:180SE化学发光免疫分析仪常见故障的排除
我科引进德国Bayer公司研制的ACS:180SE化学发光免疫分析仪,并采用该公司提供为仪器相匹配的吖啶酯标记的免疫试剂盒,一台仪器可完成肿瘤、激素等40多项目的检测程序.该机具有无污染环境,自动化程度高,检测灵敏度高(小检出值为10-18ng/ml)等优点,比放射免疫分析更胜一筹.通过一年的使用,我们发现该仪器易出现以下常见故障,积累了排除故障的经验,总结如下:
-
关于ELISA试验中终止液浓度的探讨
临床ELISA测定按其测定结果方式分为定性和定量两大类.定性测定只是对标本中是否含有待测抗原或抗体作出"有"或"无"的结论,分别用"阳性"或"阴性"来表示.而定量测定则是对标本中待测抗原或抗体的多少进行定量值测定.ELISA定性测定的"阴性"或"阳性"判定是依据试剂盒所确定的阳性判断值(Cut-off)来进行的.试剂盒的Cut-off值的设立是建立在一系列科学试验及统计学研究基础上的.但在临床检验操作中,对显色较深标本加终止液后可能会导致吸光度反而降低的现象,这主要是由于测定孔由黄色变为黄绿色沉淀而造成的吸光度下降,为了尽量减少此现象的发生,我们在实际工作中人为提高终止液浓度(2mol/L H2SO4提高到4mol/L H2SO4),起到了良好效果.现将操作方法进行如下实验验证:
-
对乙型肝炎聚合酶链反应(PCR)检验结果溯源性的思考
乙型肝炎是我国常见的传染病之一.检测HBVDNA是判断病毒的复制水平、患者的病情、疗效和预后的主要指标[1].在目前的临床应用中,较常用的是荧光定量技术(FQ-PCR).但是,临床上现在应用的试剂盒中,存在着三个基本问题:①标准采用了互补DNA(cDNA)或质粒DNA,忽略了提取过程中的影响因素;②标准和病人标本之间存在基体误差;③试剂盒中的临界阳性对照、强阳性对照的量值不确定,只是一个范围[2~4].所以要实现聚合酶链反应的溯源性重点落在了校准品上(商品化的试剂,先进的扩增仪,标准化的操作程序均固定).考虑到以上三个问题,本实验采用了国际公认的FQ-PCR法,在通过国家技术验收的临床基因扩增检验实验室,应用深圳匹基的HBVDNA荧光定量试剂,采用国家临检中心提供的定值质控血清,实现乙型肝炎聚合酶链反应检验结果的溯源性.
-
在罗氏ELECSYS-1010电化学发光免疫分析仪上节约试剂的一种方法
ELECSYS-1010是罗氏公司生产的应用于超微量检测的电化学发光免疫分析仪,可对激素类、糖类抗原、各种肿瘤标志物等进行定量测定.其特点是自动化程度高、灵敏、准确、快速、无放射污染,但试剂昂贵,能否正确使用,避免浪费,降低试剂消耗,特别重要.在实际工作中,我们发现在ELECSYS-1010仪器上显示为零的试剂盒,底部还剩余少量试剂.
-
维生素C严重干扰尿酸测定一例
全自动生化分析仪测定尿酸所用试剂盒多为酶偶联过氧化物酶(POD)比色法或尿酸酶-POD-DHBS(3,5-二氯-2-羟苯磺酸)法.这两种方法的试验盒都牵涉到过氧化物酶催化的氧化还原反应,因而易受到标本中一些具有还原性的物质的干扰,包括多种药物[1].近,我们遇到1例儿童血清标本中尿酸因受药物影响而测定值为0 μmol/L的情况,现报告如下.
-
ACCESS化学发光仪定标曲线再利用的方法介绍
ACCESS全自动微粒子化学发光免疫分析系统,具有检测速度快、灵敏度高、试剂稳定时间长等优点,但试剂不开放,检测成本高,尤其是更换新批号的试剂时需重新测试制作新的定标曲线,导致每个新批号试剂盒至少12 TEST的试剂不能用于临床标本的测定.如何在保证检测质量的情况下降低成本,成为用户关心的问题.我们在实际工作中,摸索出以下几种方法可重复利用定标曲线,从而大大降低成本,经过一年多的结果观察,效果满意,现介绍如下:
-
生化自动分析仪的参数设置与质量保证
实验室开展的每项化验项目都有其操作规程,有的简写成操作卡放在实验台上,便于随时查看.操作规程和操作卡的建立则体现在实现全自动生化分析的实验室根据试剂盒说明书和仪器的性能原理而设置的实验参数中.全自动生化分析仪的实验参数大多可分为三个方面:①通用参数,又称鉴别参数,包括项目编号、实验名称、计算实验、双项同测实验选择、实验项目组合等.②具体的实验参数,有的称为化学参数,包括的项目有:样品体积分数、波长的选择、方法的类型、反应方向、反应温度、信号的拾取时间、试剂空白核对、样品空白、反应线核对等.③其它一些参数,包括校正参数、质控参数、参考值范围设置、比色杯使用参数等.只有对每一参数的含义、用途和影响因素有全面清晰的了解,并结合对试剂盒和仪器说明书的全面深入的掌握,才能正确设置实验参数.下面就几方面具体的实验参数设置讨论如下.
-
正确使用以Trinder反应为原理的试剂盒
Trinder反应广泛应用于生化检验,如血清胆固醇、甘油三酯、HDL-C、葡萄糖等测定.商品试剂盒多为液体双试剂,由酶试剂和酚试剂组成,测定时酶、酚试剂按一定比例混合为工作液使用.部分未使用全自动生化分析仪的基层实验室,手工操作时未预配工作液,而是先将标准液和样品加好,再分别加入酶和酚试剂反应后比色测定.