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结核病患者T细胞Notch1基因表达对IFN-γ和IL-4调控作用
目的 探讨结核病(TB)患者外周血Notch1基因表达对于扰素-γ(IFN-γ)和白介素4 (IL-4)调控作用.方法 收集TB患者外周血标本30例,淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞(PBMCs),siRNA-Notch1和pcDNA3.1(+)NICD1质粒通过Lipofectamine(R) 2000 Reagent分别转入到PBMCs,应用流式细胞术和Western Blot法检测Notch1基因表达,双抗体夹心酶联免疫吸附试验法检测培养上清液中IFN-γ和IL-4表达.结果 siRNA下调T细胞上Notch1基因表达(P＜0.05),细胞培养上清液中IL-4表达明显降低(P＜0.05);pcDNA3.1(+)-NICD1转染TB患者PBMCs,Notch1表达上调(P＜0.05),细胞培养上清液中IL-4表达明显增加(P＜0.05).但是IFN-γ的表达不受影响(P＞0.05).结论 在TB患者体内,Notch1信号的活化与T细胞分泌IL-4相关,与IFN-γ的分泌无关.
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三阴乳腺癌中Notch1和Wnt1的表达及其临床意义
目的 检测三阴乳腺癌组织(TNBC)中Notch1、Wnt1的表达并探讨其临床意义.方法 采用免疫组织化学SP法检测56例TNBC组织和30例癌旁正常乳腺组织Notch1、Wnt1的表达情况.结果 TNBC组织中Notch1、Wnt1的阳性表达率分别为62.5%(35/56)、53.6%(30/56),高于癌旁正常组织(P＜0.01);Notch1、Wnt1的阳性率在病理分期、肿瘤的大小、病理分级、cTNM和淋巴结转移方面比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).Notch1与Wnt1的表达呈正相关(r=0.671,P=0.000).结论 Notch1和Wnt1在TNBC中高表达,与TNBC的发生、发展和转移密切相关.
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人类疱疹病毒8型感染与卡波西肉瘤中TLR4、Notch1通路功能的相关性研究
目的 分析人类疱疹病毒8型(HHV8)感染与卡波西肉瘤中Toll样受体4(TLR4)、Notch1通路功能的相关性.方法 选择2015年8月—2017年10月新疆维吾尔自治区人民医院消化科内镜下获得并经病理学确诊的消化道卡波西肉瘤组织及瘤旁组织作为研究对象,测定组织中HHV8的感染情况以及TLR4通路分子、Notch1通路分子的表达量.结果 卡波西肉瘤组织中HHV8阳性率以及Notch1、JAG1、HES1、PTEN、CyclinD1的mRNA表达量与瘤旁组织比较显著升高(χ2=14.072,P=0.000;t=15.035、17.998、16.879、14.241、19.946,P均=0.000),TLR4、ICAM1、TNF-α、IL-1β 的mRNA表达量与瘤旁组织比较均明显降低(t=13.240、20.509、17.393、14.864,P均=0.000);HHV8感染的卡波西肉瘤组织中TLR4、ICAM1、TNF-α、IL-1β 的mRNA表达量与HHV8未感染的卡波西肉瘤组织比较均明显降低(t=17.063、11.671、14.491、15.048,P=0.000),Notch1、JAG1、HES1、PTEN、CyclinD1的mRNA表达量与HHV8未感染的卡波西肉瘤组织比较均明显升高(t=6.173、7.189、7.306、15.215、8.284,P均=0.000).结论 消化道卡波西肉瘤中HHV8感染率增加且与TLR4通路的抑制、Notch1通路的激活有关.
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Notch 1信号蛋白在大鼠牙胚发育中的免疫组化表达研究
目的通过检测大鼠牙胚发育不同阶段Notch 1信号的表达情况,探讨其在牙齿发育过程中的作用.方法采用免疫组织化学染色技术观测大鼠孕期12、14、16、17、18、19d和出生后1、3、5、7、9d牙胚中Notch 1的表达.结果Notch 1的表达始于钟状中期.在钟状中晚期,Notch 1的表达在牙乳头间充质、成牙本质细胞层呈弱阳性,在内釉细胞层呈阳性.牙体组织形成开始,Notch 1则在成釉细胞的中间层有反复表达,在成牙本质细胞层中有一过性表达.牙齿萌出后,该信号在成牙本质细胞和成釉细胞表达均为阴性.结论Notch 1在牙胚发育过程中与成釉细胞分化有关,它可能在牙齿发育早期基质触发前成釉细胞向成釉细胞分化中起重要作用.
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Notch1与 Cyclin D1在乳腺增生症与乳腺癌中的表达分析
目的：分析 Notch1与 Cyclin D1在乳腺增生症与乳腺癌中的表达情况。方法选取乳腺癌患者110例作为 A 组，乳腺增生症患者110例作为 B 组，并选择同期入医院体检的健康者110例作为 C 组。采用免疫组织化学方法检测3组 Notch1受体蛋白和 Cyclin D1蛋白在组织中的表达。结果Notch1在 A 组和 C 组的阳性表达率低于 B组和 C 组（P ＜0．05），Notch1在 B 组和 C 组中的表达率无显著性差异（P ＞0.05）；3组 Cyclin 两两比较差异均有统计学意义（P ＜0．05）。结论Cyclin D1在乳腺癌和乳腺增生中高表达，以乳腺癌表达高；Notch1在乳腺癌中低表达，在乳腺增生中的表达与正常组织无显著性差别。
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miR-298调控Notch1对骨肉瘤细胞增殖和侵袭的影响
目的 探讨miR-298对骨肉瘤细胞增殖及侵袭的影响及其可能的机制.方法 通过qPCR检测不同骨肉瘤细胞株中miR-298及Notch1的表达差异;利用生物信息学方法预测miR-298的靶基因,并使用荧光光素酶报告基因及免疫蛋白印迹实验对靶基因的表达进行验证;将miR-298 mimics转染至骨肉瘤143B细胞中构建miR-298过表达模型,同时将Notch1 siRNA转染至骨肉瘤143B细胞中构建Notch1低表达模型,通过甲基噻唑基四唑(MTT)实验检测细胞的增殖能力、划痕实验检测细胞的迁移能力、Transwell侵袭实验检测细胞的侵袭能力.结果 miR-298在骨肉瘤细胞株呈低表达水平,而Notch1在骨肉瘤细胞中呈过表达状态,增强miR-298的表达,骨肉瘤细胞的增殖、侵袭、迁移能力显著减弱(P<0.05).双荧光素酶报告基因结果显示增强miR-298的表达后,Notch1的表达及活性相应下调,Notch1蛋白表达水平降低(P<0.05).抑制Notch1的表达,骨肉瘤细胞的增殖、侵袭、迁移能力显著减弱(P<0.05).结论 miR-298可负向调控Notch1的表达,抑制骨肉瘤细胞的增殖、迁移及侵袭能力.
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Notch1对人脐带间充质干细胞增殖、黏附及迁移影响的体外研究
目的 探讨Notch1基因的重组腺病毒转染对人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)增殖、黏附及迁移能力的影响.方法 按照不同腺病毒感染hUCMSCs分为实验组(Ad-Notch1)、阴性对照组(Ad-GFP)与空白对照组.以佳MOI转染hUCMSCs,观察细胞形态变化以及GFP蛋白的表达.比较3组细胞增殖能力、细胞周期、黏附能力及迁移能力.Western Bolt检测3组细胞Notch1蛋白的表达水平.结果 荧光下观察腺病毒成功感染细胞,阴性对照组和实验组均出现了GFP的表达,且随培养时间的延长表达量增高,可见光下观察实验组细胞增殖速度较快.实验组细胞的增殖能力(48、72、96 h)、黏附能力(12、16、20 h)及迁移能力均较阴性对照组及空白对照组增强(P＜0.05).Western Bolt检测实验组细胞Notch1蛋白的表达水平显著高于阴性对照组和空白对照组(P＜0.05).结论 Notch1能明显促进hUCMSCs的增殖、黏附和迁移.
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Notch1和 c-myc 在三阴乳腺癌中的表达及意义
目的：检测三阴乳腺癌组织（ TNBC）中Notch1、c-myc表达并探讨其意义。方法采用免疫组织化学S-P法检测63例TNBC组织和30例癌旁正常乳腺组织Notch1、c-myc的表达情况。结果 TNBC组织中Notch1、c-myc阳性表达定位于细胞质和细胞核，其表达率分别为71怂．43％（45/63）、69．84％（44/63），明显高于癌旁正常组织（ P ＜0．01）；63例TNBC组织中，Notch1、c-myc蛋白在组织学分级Ⅲ级阳性表达率高于Ⅰ～Ⅱ级（ P ＜0．05），Notch1、c-myc的病理分期Ⅲ-Ⅳ期的表达率高于Ⅰ～Ⅱ期（ P ＜0．05），Notch1、c-myc阳性表达与淋巴结转移有关（ P ＜0．05）；相关性分析显示，二者之间呈正相关（ P ＜0．05）。结论 Notch1、c-myc在TNBC中呈明显高表达，与TNBC的发生、发展和转移密切相关。
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Notch1、IGF-1在非小细胞肺癌EGFR不同基因状态下的表达及临床意义
目的:探讨Notch1、IGF-1在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)不同基因状态下的表达及临床意义.方法:采用免疫组化SP法分别对38例EGFR野生组、47例EGFR突变组进行Notch1、IGF-1的蛋白表达检测.结果:Notch1、IGF-1在NSCLC中EGFR突变组的阳性表达率分别为59.6％、78.7％,均明显高于EGFR野生组,差异具有统计学意义(P＜0.05);Notch1与IGF-1在两组中阳性表达均呈正相关(P＜0.05).结论:Notch1与IGF-1在NSCLC各组中均表达上调,提示在NSCLC靶向药物的敏感性检测中可能起重要作用;Notch1信号高表达间接揭示为EGFR-TKIs耐药的重要因素.
关键词： Notch1 IGF-1 非小细胞肺癌 EGFR-TKIs耐药 -
HMGB1与Notch1在乳腺癌浸润和转移中的作用及其相关性
目的：在乳腺癌组织中分别检测HMGB1和Notch1蛋白的表达，分析其与临床病理特征之间的相关性，着重探讨乳腺癌浸润和转移过程中两者的意义。方法：采用免疫组化SP法检测HMGB1和Notch1蛋白在60例乳腺癌组织及20例癌旁正常乳腺组织中的表达情况，并分析两者与乳腺癌患者临床病理学特征的关系。结果：HMGB1和Notch1蛋白在乳腺癌组织中表达都高于癌旁正常组织(P＜0.05)。HMGB1蛋白主要表达于细胞核中，少量可见细胞质；Notch1蛋白主要表达于细胞质中。在乳腺癌组织中，HMGB1阳性表达率为76.67%（46/60），Notch1阳性表达率为80.00%（48/60）；在癌旁正常组织中，HMGB1阳性表达率为15.00%（3/20）， Notch1阳性表达率为10.00%（4/20）。HMGB1和Notch1的表达情况与乳腺癌的淋巴结转移、组织学分级、临床分期，均有关(P＜0.05)，两者在乳腺癌组织中的表达呈正相关关系( r=0.414，P=0.000)。结论：HMGB1和Notch1可能在乳腺癌的发生、发展中起重要作用，两者的高表达有可能作为预测乳腺癌浸润、转移的指标。
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Notch1信号通路与急性T淋巴细胞白血病关系的研究进展
急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)是一类预后不良的恶性淋巴细胞增殖性疾病,是我国儿童和青少年常见的恶性疾病之一,现阶段主要采取化疗的方式予以治疗.近年来,传统的化疗手段与效果取得了显著改善,但仍存在诸多问题,例如化疗药物抵抗的患者预后差、化疗毒副作用明显、缺乏敏感的生物标记物判断预后等.T-ALL的发病机制有待于进一步研究,开发新的有效药物与更合理的用药方式迫在眉睫.近些年的研究表明Notch1信号通路的异常激活与T-ALL的发生与发展存在紧密的联系,这使得T-ALL发生、发展与治疗的Notch1机制逐渐成为研究的新热点.本文就Notch1与T-ALL的发生与发展以及针对Notch1的潜在的治疗手段进行综述.
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Nothch1与非小细胞肺癌上皮间质转化关系初探
目的 研究Nothch1与非小细胞肺癌上皮间质转化(EMT)关系.方法 采用免疫组化法和RT-PCR法对我院40例非小细胞肺癌患者的Notch1,E-cadherin和Vimentin蛋白和mRNA的表达情况进行检测,并分析其相关性.结果 Notch1在EMT(+)组的阳性表达率明显高于EMT(-)组,两者在NSCLC组织中表达具有相关性.结论 Notch1可能参与了NSCLC患者的EMT过程,阻断Notch信号通路可能会抑制NSCLC患者的EMT过程.
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miR-34a对脐血间充质干细胞增殖和分化的影响
目的：探讨miR-34a对脐血间充质干细胞（MSCs）增殖和分化的影响，以及作用机制。方法将miR-34a或anti-miR-34a转染分离得到的MSCs，用notch抑制剂DAPT处理miR-34a沉默的细胞；MTT分析对细胞增殖的影响；免疫组化法分析对细胞分化的影响；RT-PCR和western检测Notch1、Hes1的表达。结果 miR-34a过表达明显抑制MSCs增殖，而沉默后细胞增殖能力明显升高（P<0.05）；此外，miR-34a过表达促进细胞NeuN阳性比率，而沉默后细胞促分化能力降低（P<0.05）。 miR-34a抑制细胞中Notch1、Hes1的表达，加入DAPT后miR-34a沉默诱导的细胞增殖能力明显下降，同时细胞分化能力增加。结论 miR-34a可通过Notch1通路来抑制脐血MSCs的增殖及促分化，提示其将成为颅脑损伤治疗中的潜在靶标。
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Notch1对肺纤维化小鼠肠黏膜屏障的影响及作用机制研究
目的 探讨Notch1在肺纤维化肠黏膜屏障中的影响及其作用机制.方法 将24只健康雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(N组)、肺纤维化模型组(I组)、肺纤维化+Notch1抑制组(I+D组).I组、I+D组气管内注入博来霉素造模,I+D组在造模后1周开始腹腔注射Notch1抑制剂DAPT.在造模后28 d全部处死小鼠,取小鼠血液、肺脏、回肠末端10 cm.血液离心后的血清用于ELISA测量丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的含量.右肺、5 cm回肠石蜡包埋后采用HE、Masson染色,并测量肠黏膜、肠绒毛以及肠隐窝的高度.PCR测量左肺、5 cm回肠末端的Notch1mRNA含量.结果 小鼠肺部HE染色、Masson染色、Ashcroft评分提示I组存在明显的纤维化改变,与N组、I+D组比较差异有统计学意义(P<0.05).I组小鼠肠黏膜厚度、绒毛高度、血清中T-SOD、GSH-PX含量明显低于N组、I+D组,肠道Chiu''s分级、血清MDA的含量明显高于N组、I+D组,差异有统计学意义(P<0.05).表明IPF小鼠肠黏膜上皮细胞完整性被破坏、黏膜损伤.小鼠肠隐窝深度的测量结果提示I组肠隐窝细胞增生明显高于N组、I+D组,差异有统计学意义(P<0.05).I组肺组织、肠道组织中Notch1 mRNA的表达高于N组、I+D组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 Notch1表达增高促进了肺纤维化的发生,小鼠肺纤维化体内存在肠黏膜的损伤、坏死脱落,Notch1同时可以通过肠上皮隐窝增生介导肠上皮损伤后修复.
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三阴乳腺癌中Notch1 AKT1和eIF4E的表达及临床意义
目的：检测三阴乳腺癌组织（TNBC）中Notch1、AKT1和eIF4E表达并探讨其意义。方法采用免疫组织化学S-P法检测56例TNBC组织和30例癌旁正常乳腺组织 Notch1、AKT1和eIF4E的表达情况。结果 TNBC组织中Notch1、AKT1和eIF4E阳性表达定位于细胞质和（或）细胞核，其表达率分别为62％（35/56）、57％（32/56）和61％（34/56），明显高于癌旁正常组织（ P ＜0．01）；56例 TNBC组织中，Notch1、AKT1和eIF4E蛋白在组织学分级Ⅲ级阳性表达率高于Ⅰ＋Ⅱ级（ P＜0．05），Notch1、AKT1和eIF4E的病理分期Ⅲ～Ⅳ期的表达率高于Ⅰ～Ⅱ期（ P＜0．05），Notch1、AKT1和eIF4E阳性表达与淋巴结转移有关（ P＜0．05）；相关性分析显示，三者之间呈正相关（ P＜0．05）。Cox回归多因素分析显示Notch1和eIF4E的阳性表达是独立预后因素。结论 Notch1、AKT1和eIF4E在TNBC中呈明显高表达，与TNBC的发生、发展和转移密切相关。
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慢性氟中毒对大鼠肝脏Notch1、Hes1蛋白表达影响
目的 探讨慢性氟中毒对肝损害中Notch1、Hes1蛋白表达的影响.方法 36只SD大鼠按体重随机分为3组,每组12只,对照组饮用含氟量＜1 mg/L自来水,低、高氟组分别饮用含氟化钠5、50 mg/L的自来水,饲养6个月后检测尿氟,取股骨测定骨氟,检测血清中肝功能指标;应用免疫组织化学和蛋白印记法检测肝脏组织中Notch1、Hes1及凋亡因子Bcl-2、Bax的蛋白表达;测定肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及脂质过氧化物(LPO)含量;原位末端转移酶标记法检查肝组织中凋亡细胞定位及数量.结果与对照组比较,低、高氟组大鼠尿氟、骨氟含量分别为[(1.89±0.12)、(2.19±0.17) mg/L与(2.10±0.16)、(2.21±0.10) mg/kg]明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05),低、高氟组大鼠肝组织中Notch1、Hes1蛋白表达量分别为[(0.55±0.32)、(0.71±0.28)与(0.74±0.92)、(0.88±0.29)]明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05);与对照组比较,染氟大鼠肝LPO含量逐渐升高,S0D、GSH-Px活性逐渐下降;与对照组比较,低、高氟组Bc1-2蛋白表达[(0.94 ±0.24)、(0.71±0.22)]明显降低,Bax蛋白表达[(1.25±0.42)、(1.43±0.46)]显著升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);与对照组比较,染氟大鼠肝细胞凋亡细胞数增多.结论过量氟可引起肝脏氧化应激及肝细胞凋亡,Notch信号通路可能参与氟中毒引起肝脏损伤发病过程.
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失答剌知丸对脑缺血再灌注大鼠海马区Notch1和Jagged1含量的影响
目的:观察失答剌知丸对脑缺血再关注大鼠海马区Notch1和Jagged1含量的影响.方法:将102只SD大鼠随机分为17组,每组6只,分别为:空白组,假手术组,模型组,尼莫地平组,失苔刺知丸高剂量组、中剂量组和低剂量组,其中后5组分别依据再灌注时间的不同分为1d、3d、7d组.以上各组除空白、假手术组外,均采用线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型(MCAO).其中空白组、假手术组、模型组均用生理盐水灌胃;尼莫地平组给予浓度为1.08 g/L灌胃;失苔剌知丸组则以浓度分别为4.5 g/mL、3.0 g/mL和1.5 g/mL灌胃;以上各组每天同一时间灌胃,2次/d.各组分别在缺血再灌注1d、3d、7d各时间点取材,检测Notch1和Jagged1水平.结果:(1)空白组与假手术组对比没有统计学意义(P＞0.05);(2)模型组和各药物组相较于空白组、假手术组均有统计学意义(P＜0.05);(3)各药物组相较于模型组均有统计学意义(P＜0.05);(4)尼莫地平组与失苔刺知丸低剂量组对比有统计学意义(P＜0.05),与失苔刺知丸中剂量组对比没有统计学意义(P＞0.05),与失苔剌知丸高剂量组对比差异性显著(P＜0.01);(5)失苔剌知丸低、中、高剂量组,随着1d、3d、7d时间点的延长,Notch1和Jagged1表达量依次呈上升趋势,其中尤以7d组表达量高.结论:失答刺知丸治疗脑缺血可能与自身药效和促进海马区Notch1和Jagged1表达水平有关.
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番茄红素对PS1/APP小鼠前额叶GRP78、Notch1表达及学习记忆的影响
目的 探讨番茄红素对PS1/APP小鼠前额叶皮质区Notch1、GRP78表达及学习记忆功能的影响.方法 将18只6月龄的PS1/APP小鼠随机平分为3组,分别为正常对照组、模型组、模型组+番茄红素组;利用Morris水迷宫测试小鼠学习记忆功能,免疫组化、Western blot检测Notch1和GRP78在小鼠前额叶皮质区的表达情况.结果 番茄红素明显改善PS1/APP小鼠的空间学习记忆功能,下调前额叶皮质区Notch1和GRP78的表达水平.结论 番茄红素改善PS1/APP小鼠学习记忆功能可能与下调前额叶皮质区Notch1和GRP78蛋白的表达水平相关.
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不同浓度姜黄素对体外培养小胶质细胞过度活化的抑制作用
背景:过度活化的小胶质细胞会释放大量的神经毒性因子损伤神经功能.目的:观察不同浓度的姜黄素对体外培养小胶质细胞过度活化的抑制作用.方法:取新生48 h内Wistar大鼠用于小胶质细胞的提取及原代培养,分别加入1,5,20 μmol/L的姜黄素抑制3,7 d,观察细胞形态,CD11b/c的表达,Notch1 mRNA的表达.结果与结论:原代培养的小胶质细胞折光性强,以圆形多见,呈过度活化状态.姜黄素干预后静止细胞阳性率明显升高,在培养第7天时阳性率达到高峰.RT-PCR结果显示,1,5,20 μmol/L姜黄素都可明显抑制小胶质细胞Notch1 mRNA的表达.以5 μmol/L姜黄素的抑制效果显著(P < 0.01).说明姜黄素对体外培养的小胶质细胞过度活化的抑制作用存在剂量依赖性.
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骨髓间充质干细胞Notch1信号通路异常与骨髓瘤骨病
背景:多发性骨髓瘤骨病的发病机制目前尚未完全明确,骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化障碍参与其中,而Notch1信号通路在间充质干细胞的增殖分化中起重要作用.目的:探讨Notch1信号通路在多发性骨髓瘤骨病中的作用.方法:分离培养多发性骨髓瘤患者和正常人骨髓间充质干细胞,Real-time PCR和Western blot检测成骨诱导分化前后Notch1和成骨基因Runx2的表达,以及Von Kossa染色鉴定钙质沉积程度.在多发性骨髓瘤患者间充质干细胞成骨诱导分化过程中,加入Notch1信号通路抑制剂DAPT和安慰剂,48 h后real-time PCR和western blot鉴定Notch1信号通路下游分子Hes1和成骨指标Runx2表达,2周后Von Kossa染色鉴定钙质沉积程度.结果与结论:成骨诱导48 h后,间充质干细胞的Notch1表达减低,但是骨髓瘤患者间充质干细胞的降低幅度小于正常对照间充质干细胞;48h后Runx2的表达在骨髓瘤患者间充质干细胞的表达明显弱于正常对照间充质干细胞;2周后,Von Kossa染色鉴定钙质沉积程度,骨髓瘤患者间充质干细胞明显弱于正常对照间充质干细胞;48h后Hes1表达在DAPT组明显低于安慰剂组;而Runx2的表达在DAPT组明显高于安慰剂组.2周后DAPT组钙质沉积明显强于安慰剂组.实验说明多发性骨髓瘤患者的间充质干细胞中,Notch1信号通路失活缺陷可能抑制其向成骨细胞分化.
