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Notch1信号在乙型肝炎病毒X基因介导的肾小管上皮细胞免疫活性异常中的作用
目的 探讨乙型肝炎病毒X基因(HBx)转染人近端肾小管上皮细胞系HK-2细胞后对其表达Notch1信号的影响,并观察Notch1信号在HBx介导的肾小管上皮细胞免疫活性中的作用.方法 用分子克隆的方法构建pcDNA3.1/myc-HBx质粒及pcDNA3.1/myc-Notch1质粒,转染HK-2细胞,并应用短发卡RNA(shRNA)沉默Notch1基因表达.将细胞分为7组:①正常培养组；②转染HBx空载质粒组；③转染HBx质粒组；④转染HBx质粒+Notch1空载质粒组；⑤转染HBx质粒+Notch1质粒组；⑥转染HBx质粒+Notch1 shRNA空载质粒组；⑦转染HBx质粒+Notch1 shRNA沉默质粒组.实时定量PCR和蛋白印迹法检测细胞中Notch1受体的变化,流式细胞术检测细胞表面人主要组织相容性复合物(MHC)-Ⅱ、CD40表达的变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清中白细胞介素(IL)4、干扰素(IFN)-γ水平.结果 HK-2细胞经转染HBx基因后,可高表达HBx,Notch1shRNA在HK-2细胞中的转染效率也高达70％,基因沉默有效；转染HBx基因组细胞Notch1水平高于正常培养组及转染HBx空载质粒组相比,且Notch1过表达组细胞表面MHC-Ⅱ、CD40表达均明显高于Notch1空载质粒组(9.69％±0.52％比4.90％±0.32％,21.56％ ±0.71％比15.74％±0.20％,均P ＜0.05),其上清液中IL-4水平亦高于Notch1空载质粒组(50.2±0.6比28.1±1.2,P＜0.05),而IFN-γ水平较低(11.9±1.7比18.8±0.8,P＜0.05).Notch1基因沉默后上述指标结果呈相反变化.结论 HBx基因转染HK-2细胞后可引起Notch1表达上调；Notch1又可促进细胞表面免疫分子的表达,并调控细胞因子分泌,终导致细胞损伤及免疫微环境的紊乱.
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表达小鼠Notch1胞内段基因慢病毒载体的构建及鉴定
目的 Notch信号通路在进化中高度保守,在细胞的生长和分化方面起重要作用.构建小鼠Notch胞内段(NICD)慢病毒载体,为Notch信号通路的研究奠定了基础.方法 从C57BL/6J小鼠脊髓组织提取总RNA,逆转录合成cDNA,用PCR方法获取NICD的基因序列,构建慢病毒表达NICD载体,感染HEK293T细胞,实时定量PCR和Western blot分析NICD基因在靶细胞的表达.结果NICD基因在靶细胞的表达水平升高.结论 成功构建表达小鼠NICD基因的慢病毒载体,为今后相关实验研究奠定了基础.
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miR-449a对人乳腺癌细胞MCF-7增殖及迁移能力的影响
目的:通过敲低微小RNA(microRNA,miRNA)-449a的方法研究miR-449a对人乳腺癌细胞MCF-7的增殖和迁移能力的影响.方法:采用miRNA芯片在乳腺癌细胞MCF-7和人正常乳腺细胞MCF-10A筛选具有表达差异的miRNA;化学合成法制备miR-449a的抑制剂(inhibitor),转染后经real-time PCR验证表达的变化;细胞增殖CCK-8实验对转染后细胞增殖能力进行检测;划痕实验检测细胞转移能力,transwell小室实验检测细胞侵袭的改变;蛋白免疫印迹法(Western blot)实验对MCF-7细胞增殖和迁移相关的β-catenin和E-cadherin蛋白进行检测;通过生物信息学软件预测miR-449a潜在靶基因为Notch 1,荧光素酶实验检测Notch l是miR-449a的靶基因.结果:分别收集MCF-7和MCF-10A细胞,芯片结果显示miR-449a在MCF-7细胞的表达水平显著高于MCF-10A;本研究将细胞分为未处理组(Mock组),阴性对照组(negative control组,NC组)和处理组,通过收集不同组MCF-7细胞进行试验,CCK-8结果显示miR-449a下调后MCF-7细胞增殖能力显著降低;划痕实验结果显示miR-449a表达降低导致MCF-7细胞转移能力降低;transwell实验结果显示MCF-7细胞侵袭受到抑制;Western blot结果发现miR-449a敲低后β-catenin表达降低,E-cadherin表达增加;荧光素酶试验结果显示,miR-449a能够显著降低Notch 1-3'-UTR质粒的荧光素活性(P＜0.01).结论:在乳腺癌细胞MCF-7中敲低miR-449a能够显著抑制癌细胞增殖和迁移,而这一变化可能通过降低Notch 1蛋白表达实现的.
关键词： miR-449a 人乳腺癌MCF-7细胞 Notch1 增殖 迁移 -
降钙素基因相关肽对大鼠肺泡上皮Ⅱ型细胞间质转分化的作用及机制
目的:观察降钙素基因相关肽(CGRP)对大鼠肺泡上皮细胞间质转分化(EMT)的作用并探讨其机制.方法:实验设Control组、TGF-β1(5 ng/ml)、CGRP(1、10、100 nmol/L)组、CGRP8-37(1μmol/L)+CGRP(100 nmol/L)组.每组设9个复孔.细胞分别用CGRP或加CGRP8-37预处理1h,再用转化生长因子β1(TGF-β31)处理48h.MTT法检测大鼠肺泡上皮Ⅱ型细胞(RLE-6TN细胞)活性.分别采用Real-time PCR和Western blot检测细胞E-cadherin、α-SMA、eIF3a、Notch1和collagen Ⅲ mRNA及蛋白表达.结果:与TGF-β1(5 ng/ml)相比,不同剂量CGRP(1、10、100 nmol/L)均可明显提高RLE-6TN细胞活性,显著抑制eIF3a、Notch1、α-SMA及collagen Ⅲ胶原的表达,上调E-cadherin的表达,而CGRP的这些作用可以被CGRP阻断剂CGRP8-37所取消.结论:CGRP对EMT具有一定的抑制作用,其机制可能与其抑制Notch1、eIF3a表达有关.
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慢病毒Tet-On系统调控Notch1-EGFP融合蛋白在PC12细胞中表达的研究
目的:构建Tet-On系统调控的人源性Notch1胞内段(NICD)和EGFP融合蛋白的慢病毒真核表达载体,并探讨Notch1-EGFP在PC12细胞中的表达条件.方法:采用RT-PCR从人胎盘组织中获得NICD的cDNA,利用PCR扩增pEGFP-Cl质粒中EGFP的编码序列,两者均定向克隆到pcDNA3.1(+)质粒中组成Notch1-EGFP片段,将该片段进一步酶切回收,并定向克隆到pLVX-Tight-puro载体获得pLVX-Notch1-EGFP.将构建好的质粒进行病毒包装并感染PC12细胞,抗性筛选2周.在不同时间点和不同浓度Dox作用下,用荧光显微镜观察EGFP表达,流式细胞术检测Notch1表达.结果:酶切和DNA测序均证实pLVX-Notch1-EGFP质粒构建成功.镜下可见感染后的PC12细胞在500 ng/ml Dox诱导36 h时90％以上细胞均表达EGFP.流式细胞术检测Notch1表达结果显示,随着Dox浓度增加,Notch1阳性细胞百分比逐渐增加；随着Dox诱导时间延长,Notch1阳性细胞百分比逐渐增高,到36h时达到高(81.5％).结论:成功构建携带Notch1-EGFP融合蛋白的Tet-On调控的慢病毒真核表达载体,实现在PC12细胞中调控Notch1-EGFP融合蛋白的表达.
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S100A6、Notch1在多发性骨髓瘤患者中的表达及其临床意义
目的 探讨S 100A6、Notch1在多发性骨髓瘤(MM)患者中的表达及其临床意义.方法 以28例MM患者为研究对象,以20例白细胞、血小板略低但骨髓检查未见异常者为对照,采用real time PCR法检测骨髓单个核细胞S100A6、Notch1的表达;采用免疫组化染色法检测S100A6、No.hi蛋白在MM患者骨髓和髓外浸润组织活检病理切片中的表达;采用real time PCR法和Western blot法检测siRNA沉默骨髓瘤U266细胞S100A6基因后对Notch1 mRNA和蛋白水平的影响.并结合临床进行相关分析.结果 ①S 100A6、Notch1 mRNA表达水平:初发MM患者组分别为2.19±1.25、2.98±0.64,均高于对照组(0.71±0.20、0.58±0.39)和稳定期患者组(0.85±0.26、0.72±0.40)(P值均＜0.05);伴髓外转移组(8例)分别为3.36±1.23、5.71±3.96,均高于无髓外转移组(20例)(1.40±0.25、1.16±1.oo).②S100A6与Notch1 mRNA表达呈正相关(r=0.505,P=0.007).③MM患者骨髓和髓外浸润组织活检病理切片均可见浆细胞S 100A6、Notch1阳性表达.④siRNA转染U266细胞48 h后S100A6基因表达沉默,Notch1 mRNA及蛋白水平明显下降.结论 S100A6、Notch1表达与MM疾病发生、进展、髓外转移相关,二者具有显著相关性,可作为MM诊断及预后的指标.
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再生障碍性贫血患者CD4+ CD25+ CD127low调节性T细胞及Notch1表达水平的变化
目的 测定再生障碍性贫血(AA)患者治疗前后外周血CD4+ CD25+ CD127low调节性T细胞(Treg)的数量及叉头翼状螺旋转录因子(FOXP3)mRNA、Notch1 mRNA的表达水平,探讨Treg在AA发病中的作用及其机制.方法 流式细胞术检测29例初发AA患者、14例环孢素(CsA)治疗后恢复期及11例治疗后未恢复期患者外周血中CD4+ CD25+ CD127low T细胞、CD4+ CD25+ T细胞的数量,并与正常对照比较;采用RT-PCR检测FOXP3 mRNA和Notch1 mRNA的表达水平,分析两者相关性.结果AA初发组及治疗后未恢复组患者外周血中活化CD4+ CD25+ T细胞占CD4+ T细胞比例分别为(4.3±0.7)%、(4.2±0.6)%,明显高于正常对照组[(2.4±0.8)%](P＜0.05).CsA治疗后恢复组患者比例下降为(2.6±0.7)%(P＜0.05),与对照组比较差异无统计学意义.AA初发组及未恢复组CD4+ CD25+ CD127low T细胞在CD4+ T细胞中的比例分别为(2.4±1.2)%、(2.5±1.1)%,较正常对照组[(7.1±2.7)%]及恢复组[(5.3±1.0)%]明显降低(P值均＜0.01);但后两组比较差异无统计学意义.AA初发组患者FOXP3 mRNA及Notch1 mRNA分别为(0.260±0.011)和(0.018±0.005),较正常对照[(1.307±0.011)和(0.308±0.028)]表达明显下调(P值均＜0.01),治疗后分别为(1.287±0.012)和(0.281±0.013),表达较初发组显著提高(P值均＜0.01),与对照组比较差异无统计学意义(P值均＞0.05).AA患者CD4+ CD25+ CD127low T细胞、FOXP3均与Notch1表达呈正相关性(P值均＜0.01).结论AA患者外周血CD4+ CD25+ CD127low Treg减少,其抑制作用减弱,导致自身反应性T细胞过度活化,抑制造血.其作用机制之一可能与靶细胞表面Notch1分子表达降低相关.
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Notch1和Jagged1表达与肾透明细胞癌发病及预后
目的:探讨肾透明细胞癌Notch1与Jagged1的表达及意义.方法:应用Western blot和免疫组化染色法,检测肾透明细胞癌及正常肾组织中Notch1、Jagged1的蛋白表达,分析两者与临床病理参数的相关性.随访肾透明细胞患者术后情况,分析Notch1、Jagged1蛋白的表达水平与预后的关系.结果:肾透明细胞癌组织中Notch1、Jagged1的阳性表达率高于正常肾组织(分别为95.3%比36.4%,P<0.05;93.0%比42.4%,P<0.05),Notch1和Jagged1的表达水平与肾癌的病理分级、临床分期和肿瘤的大小均有关.结论:Notch1 和Jagged1高表达可能在肾透明细胞癌发生发展中发挥作用,Notch1 和Jagged1表达水平对肾透明细胞癌预后判断具有一定价值.
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早发型子痫前期胎盘细胞侵袭相关信号通路表达及其交互作用的研究
目的:探讨细胞侵袭相关Notch1及Wnt1信号通路在早发型子痫前期患者胎盘组织中的表达以及两者的交互作用.方法:收集2016年6月—2017年12月郑州人民医院收治的176例早发型子痫前期患者(轻度组102例、重度组74例),同期60例健康孕妇为对照组.收集所有研究对象分娩后的胎盘组织样本,通过免疫组织化学法检测组织Notch1及Wnt1蛋白的表达,Western blotting检测Notch1、Jagged1、Wnt1及β-catenin蛋白表达水平,并对各蛋白表达水平进行相关性分析.结果:3组Notch1及Wnt1表达强度和阳性表达率差异均有统计学意义(P<0.05);轻度组和重度组Notch1及Wnt1阳性表达率低于对照组,重度组阳性表达率低于轻度组(P<0.05).3组Notch1、Jagged1、Wnt1及β-catenin蛋白表达水平差异有统计学意义(P<0.05);轻度组及重度组Notch1、Jagged1及Wnt1蛋白表达水平均低于对照组,重度组β-catenin表达水平低于对照组,且重度组Notch1、Jagged1及Wnt1及β-catenin均低于轻度组(均P<0.05).Notch1与Jagged1(r=0.826,P=0.000)、Wnt1与β-catenin(r=0.531,P=0.000)表达水平呈正相关,Wnt1与Notch1(r=-0.167,P=0.010)、Wnt1与Jagged1(r=-0.136,P=0.037)表达水平呈负相关.结论:Notch1及Wnt1低表达与早发型子痫前期的发生、发展相关,且在该过程中Notch及Wnt信号通路之间可能存在一定的交互作用.
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雷公藤内酯醇和肿瘤坏死因子α作用Raji细胞内Notch1蛋白表达的研究
目的:通过探讨雷公藤内酯醇(Triptolide,TRL)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)作用Raji细胞内Notch1蛋白表达的变化,进一步明确Notch信号途径在淋巴瘤发病中的作用.方法:采用MTT法检测雷公藤内酯醇对Raji细胞增殖的影响,RT-PCR检测Notch1 mRNA含量,流式细胞术分析Notch1蛋白表达的变化.结果:1)MTT法结果表明雷公藤内酯醇以时间和剂量依赖的方式抑制Raji细胞增殖;2)RT-PCR检测结果表明雷公藤内酯醇抑制Raji细胞内Notch1 mRNA含量,呈剂量依赖的方式,而TNF-α可促进细胞内Notch1 mRNA的表达,但此表达可部分被雷公藤内酯醇抑制;3)流式细胞术分析表明在Raji细胞内Notch1蛋白平均荧光强度在TNF-α组明显增加,而在TRL组则表达降低与空白对照组比较有极显著差异(P＜0.01).结论:1)在Raji细胞内,存在Notch1蛋白的表达;2)雷公藤内酯醇可抑制细胞内Notch1蛋白的表达,而TNF-α可上调Raji细胞内Notch1蛋白的表达;3)TNF-α和雷公藤内酯醇可通过影响Notch信号途径在淋巴瘤细胞内发挥作用.
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Notch1信号途径在食管鳞癌细胞株EC9706的作用研究
目的:研究Notch1基因在食管癌细胞株中的表达及其对食管鳞癌细胞EC9706凋亡的影响.方法:通过免疫细胞化学检测Notch1基因在EC9706细胞中的表达.通过RT-PCR扩增Notch1基因,构建真核表达载体pcDNA3.1-Notch1,转染EC9706细胞,利用Western blotting检测转染pcDNA3.1-Notch1载体12h,24h,48h,72h的食管癌细胞株与转染空载体食管癌细胞株中Notch1的表达,并观察每一时期食管癌细胞株的凋亡情况.结果:在食管癌细胞株中Notch1基因低表达,此外,转染Notch1后的细胞株Notch1表达量与转染空载体相比有明显差异(F=80.442,P＜0.05).经组间两两比较,实验组食管癌细胞株的Notch1的表达量在12h时比对照组食管癌细胞株的表达量显著增高(P＜0.01),前者约为后者的4.6倍.但48h至72h时Notch1表达量实验纽与对照组食管癌细胞株无显著性差异(P＞0.05).进一步通过倒置显微镜发现48h至72h细胞出现大量凋亡的现象.上述结果说明12h Notch1表达量的增加,使食管癌细胞EC9706中的Notch1信号途径得以激活,该途径激活后导致48h到72h时的细胞大量凋亡.结论:Notch1在食管癌细胞中的激活引起细胞大量凋亡,提示Notch1基因有可能成为治疗食管癌的新靶点.
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乳腺癌细胞Notch1蛋白表达及其与紫杉醇敏感性的关系
目的 观察Notch1蛋白的表达与乳腺癌患者对紫杉醇(paclitaxel,PAC)敏感性的相关性.方法 分别利用小RNA干扰技术和Notch1胞内片段抑制剂N-[N-(3,5-difluorophenacetyl)-1-alanyl]-S-phenylglycine t-buty lester(DAPT)降低乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞中Notch1的活性,并分别用Western blot和RT-PCR检测两种方法的抑制效果.MTT法检测经过不同浓度紫杉醇(0、1、5、10、15、20、25 μg/mL)处理24 h后,观察对照组和实验组细胞的存活情况.通过肿瘤原代细胞胶原凝胶体包埋化疗药物敏感性检测(collagen gel droplet embedded culture-drug sensitivity test,CD-DST)观察临床病例对紫杉醇的敏感性,并用免疫组织化学方法观察紫杉醇敏感病例和非敏感病例中Notch1的表达情况.结果 MDA-MB-231细胞对紫杉醇的敏感性增强,且与对照组之间的差异具有统计学意义(P<0.05),免疫组化的结果显示紫杉醇敏感病例Notch1经过抑制Notch1活性处理的蛋白的表达低于不敏感病例,差异有统计学意义(P<0.01).结论 Notch1显著影响乳腺癌患者对紫杉醇的敏感性,Notch1表达与乳腺癌紫杉醇敏感性呈负相关.
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异甘草素增加人脑胶质瘤干细胞放射敏感性的实验研究
目的:研究异甘草素对胶质瘤干细胞(glioma stem cells,GSCs)放射敏感性的影响及作用机制.方法:无血清培养法提取SHG44人脑GSCs.检测异甘草素和X射线联合运用下GSCs活性和干细胞球形成情况.检测Notch1信号通路、NF-κB和cas?pase-3的表达情况.结果:采用10μM异甘草素在8 Gy较高剂量X射线存在的情况下,能够抑制GSCs球的数目和直径(P<0.05).20μM异甘草素杀伤GSCs的作用明显,且在4、8 Gy的X射线下联合杀伤GSCs的能力依次增强(P<0.05).异甘草素干作用48 h后Notch1的表达下调(P<0.05).4 Gy的X射线照射后,分别于6、24 h,异甘草素干预组P-NF-κB表达逐渐增高(P<0.05),而cleaved caspase-3的表达在X射线照射后的24 h开始升高(P<0.05).结论:异甘草素能够增加GSCs的放射敏感性,抑制Noch1信号通路,上调NF-κB和caspase-3的表达,参与X射线对GSCs的损伤过程.
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开口箭皂苷对人甲状腺髓样癌TT细胞的抑制作用及对Notch1的影响
[目的]研究开口箭皂苷(TST)对人甲状腺髓样癌TT细胞(MTC-rTT)的抑制作用及对Notch1表达水平的影响,探讨TST抗甲状腺髓样癌的作用机制.[方法]将不同浓度的TST作用于MTC-TT细胞,CCK8法测TST对MTC-TT细胞的增殖抑制率并计算出24、48、72h时半数抑制浓度(IC50);流式细胞术检测细胞周期;Western blot检测各组Notch 1的蛋白表达,RT-PCR检测各组Notch 1的基因表达;将TST+ DAPT(Notch1抑制剂)作用于MTC-TTr细胞48 h,Western blot测Notch1表达,CCK8法测细胞增殖抑制率.[结果]TST对MTC-TT细胞的24 h、48 h和72 h的IC50值分别为59.01、31.54和31.63 μg/mL,与对照组相比,TST对MTC-TY细胞增殖有抑制作用(P＜0.01),细胞周期阻滞在G2/M期(P＜0.05,P＜0.01);实验组Notch1的蛋白和mRNA表达水平相比于对照组均明显升高(P＜0.05,P＜0.01),表达呈浓度依赖性(P＜0.01);与TST组相比,TST+DAPT组Notch1蛋白表达显著下降(P＜0.01),细胞增殖抑制率显著下降(P＜0.01).[结论]TST可抑制MTC-TT细胞增殖,诱导MTC-TT细胞凋亡,该作用可能与上调Notch 1表达水平有关.
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丁基苯酞对缺血性脑卒中大鼠工作记忆及皮质区Notch1表达的影响
目的 探讨丁基苯酞对缺血性脑卒中大鼠工作记忆和皮质区Notch1表达的影响.方法 SD大鼠分为假手术组(对照组)、模型组、丁基苯酞高、低剂量组.参照改良的Pulsineli 4血管阻断建立大鼠缺血性脑卒中模型;HE染色观察各脑组织病理学形态的变化、免疫组化法检测Notch1的表达;八臂迷宫法和Morris水迷宫测试动物工作记忆情况.结果 与对照组比较,脑缺血后皮质区神经元死亡数量、Notch1水平增加;八臂迷宫测试的动物工作记忆错误次数增多、水迷宫测试的穿台次数明显减少,差异有统计学意义(P＜0.05).与模型组比较,丁基苯酞组中大鼠脑缺血后海马区神经元死亡数量降低、Notch1水平增加;八臂迷宫测试的动物工作记忆错误次数减少、水迷宫测试的穿台次数明显增多,差异有统计学意义(P＜0.05);上述变化在高剂量丁基苯酞组为显著(P＜0.05).结论 丁基苯酞可增加Notch1的表达、改善缺血性脑卒中大鼠工作记忆能力.
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Notch1和细胞间黏附分子-1在原发性肝癌细胞中的作用
目的 探讨Notch1和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)在原发性肝癌中的表达及其意义.方法 采用免疫组织化学SP法检测34例原发肝癌组织、14例癌旁正常肝组织中Notch1和ICAM-1的表达情况.结果 原发性肝癌组织中Notch1和ICAM-1表达定位于细胞核和/或细胞质,Notch1的表达低于癌旁正常肝组织,ICAM-1的表达明显高于癌旁正常肝组织(P＜0.05).二者的表达与性别、年龄、肿瘤大小等没有相关性(P均＞0.05),与淋巴结转移、组织分化及癌栓等有关(P均＜0.05);二者之间阳性表达呈明显负相关(P＜0.05).结论 Notch1和ICAM-1的表达与原发性肝癌的发生、发展和转移密切相关.
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CD133及Notch1基因在上皮性卵巢癌中的表达和临床病理意义
目的 探讨卵巢癌组织中CD133及Notch1的表达及其临床意义.方法 采用免疫组化SP法检测46例上皮性卵巢癌组织、18例良性上皮性卵巢肿瘤组织及10例正常卵巢组织中CD133及Notch1的表达情况.结果 正常卵巢组织、良性上皮性卵巢肿瘤组织及卵巢癌组织中CD133及Notch1的表达呈升高趋势,组间比较有显著性差异.CD133及Notch1表达水平与卵巢癌的分期、病理分级及淋巴结转移相关,而与年龄及组织类型无关.Spearman相关性分析显示CD133表达与Notch1的表达呈正相关.结论 CD133及Notch1的高表达可能与卵巢癌的发生、发展有关.
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Notch1在非小细胞肺癌中的研究
Notch1信号通路是许多细胞信号转导通路的交汇点,不仅在正常组织、细胞的分化、发育过程中起重要作用,而且与一些肿瘤的发生、发展相关,如食管癌、胃癌、宫颈癌、结肠癌、肺癌等.Notch1在非小细胞肺癌中的作用多样.了解Notch1和非小细胞肺癌的关系有利于进一步阐明非小细胞肺癌的发生机制,为非小细胞肺癌的治疗提供一个新的有希望的治疗靶点.
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Notch1、Dll4蛋白在支气管肺癌的表达及临床意义
目的 探讨Notch1、Dll4蛋白在支气管肺癌中的表达及其临床相关指标的相关性.方法 采用免疫组化SP法分别检测30例非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)、30例小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)、正常肺组织病理标本中Notch1、Dll4蛋白的表达,并判断其与NSCLC相关临床病理指标相关性.结果 Notch1、Dll4在NSCLC表达的阳性率为73.3％、80.0％,高于正常肺组织标本(表达率分别为16.7％和13.3％)(P＜0.05);Notch1、Dll4在SCLC中表达的阳性率分别为13.3％、100.0％,其中Notch1表达与正常肺组织差异无统计学意义(P＞0.05),但Dll4表达高于正常肺组织(P ＜o.05).在NSCLC中Notch1和Dll4表达存在正相关(r=0.782,P=0.041).Notch1和Dll4蛋白的阳性表达与肿瘤大小、组织分化无相关性(P＞0.05),但与淋巴结转移、临床分期密切相关(P ＜0.05).结论 Notch1、Dll4在NSCLC表达明显上调,可能在NSCLC发生、发展中起重要作用;Dll4蛋白在SCLC中过度表达,反向抑制Notch1,从而使抑制SCLC细胞生长的作用下降,导致SCLC发生、发展.
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Notch1蛋白在人肺腺癌组织中的表达及意义
目的 研究Notch1蛋白在人肺腺癌组织中的表达及意义,探讨Notch1受体在人肺腺癌发生中的作用.方法 前期研究初步筛选出Notch1蛋白在肺腺癌组织中有强表达,本研究收集我院及新华医院2009年1月至2010年5月胸外科肺癌手术并经术后病理切片明确为肺腺癌的标本以及正常肺组织标本,以实时荧光定量PCR及Western blot方法分别检测肺癌组织中Notch1 mRNA及蛋白的表达水平,进一步探讨Notch1在肺腺癌中所发挥的作用.结果 实时荧光定量PCR分析显示,Notch1mRNA的表达在肺腺癌组织及正常肺组织中分别为1.99±1.40和1.50±1.03,组间比较差异有统计学意义(P ＜0.05)；Western blot分析显示,Notch1蛋白在肺腺癌组织及正常肺组织中分别为0.64±0.25和0.14±0.07,组间比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 Notch1信号在肺腺癌的发病机制中可能起促进作用.
