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三七皂苷通过PPARγ调控SIRT1介导的狼疮肾炎小鼠脾淋巴细胞激素耐药及脂代谢影响的研究

丁伟森;徐峥;吴人照;童晔玲;鲁盈

摘要: [目的]观察三七皂苷(Panax notoginseng saponin,PNS)对激素耐药狼疮肾炎(lupus nephritis,LN)小鼠脾淋巴细胞过氧化物酶增殖体活化受体γ(peroxidase proliferator activated receptor gamma,PPARγ)、沉默信息调节因子相关酶1(silent information regulation factor related enzyme 1,SIRT1)和三磷酸腺苷结合盒转运体A1 (adenosine triphosphate binding cassette transporter A1,ABCA1)表达的影响,探索PNS改善激素耐药和脂代谢紊乱的双重作用,为运用活血化瘀中药提高难治性LN临床疗效提供科学依据.[方法]采用密度梯度法分离NZB/WF1小鼠的脾淋巴细胞,用小剂量甲基强的松龙诱导细胞产生激素耐药,将诱导后的细胞分为模型组、PPARγy质粒转染组、PPARγsiRNA+PNS组和PNS组,并以未诱导耐药的NZB/WF1小鼠脾淋巴细胞作为对照组,各组细胞培养72h后以Real-time PCR检测各组淋巴细胞PPARγy和SIRT1 mRNA表达,Western blot检测PPARγ和SIRT1蛋白表达,荧光分光光度法检测细胞内胆固醇酯含量,流式细胞术检测ABCA1蛋白表达.[结果](1)上调PPARγ能抑制SIRT1高表达,模型组PPARγ mRNA和蛋白表达水平均低于对照组,SIRT1 mRNA和蛋白表达水平均高于对照组(P <0.05);通过质粒转染上调PPARγ水平后,PPARγy质粒转染组的SIRT1 mRNA和蛋白表达水平均低于模型组(P<0.05);(2)PNS组PPARγ表达高于模型组,SIRT1表达则减低(P<0.05).尽管PNS组PPARγymRNA表达水平低于PPARγy质粒转染组,但两组SIRT1 mRNA表达水平无统计学差异(P>0.05);与模型组比较,PPARγ siRNA+PNS组的SIRT1 mRNA和蛋白表达水平均下降(P<0.05).(3)PNS具有调节细胞内脂代谢紊乱作用,模型组细胞内胆固醇酯含量低于对照组(P<0.05);PNS组细胞内胆固醇酯含量高于对照组,ABCA1蛋白表达则低于对照组(P<0.05).[结论](1)激素耐药的LN小鼠脾淋巴细胞内存在脂代谢紊乱.(2)PNS具有逆转激素耐药和调节细胞内脂代谢紊乱的双重效应.

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