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抑制羰基应激改善老龄鼠心肌缺血预处理的保护作用
目的：本研究旨在探讨激活乙醛脱氢酶2（ALDH2）对老龄小鼠缺血预处理（IPC）心肌保护作用的影响。通过观察成年和老龄小鼠心肌沉默信息调节因子相关酶1（SIRT1）活性在IPC过程中的差异，分析老龄鼠心肌IPC保护作用减退的可能机制。方法成年（2月龄）和老龄（20月龄）雄性C57小鼠（每组各6只）在体给予3个5min缺血/5min再灌注循环的IPC处理后，以冠状动脉左前降支结扎缺血30min再灌注4h建立在体小鼠急性心肌I/R模型。离体心脏行Langendorff灌流给予3个循环的5min停流/5min再灌注以模拟全心IPC，同时记录心功能变化。在体或离体再灌注结束后取心肌组织检测ALDH2和SIRT1活性，及蛋白质羰基化程度。结果与成年组相比，IPC处理并不能有效地改善衰老心肌的I/R损伤和SIRT1活性。检测心肌ALDH2活性显示，老龄鼠心肌ALDH2的活性较成年组显著降低并导致衰老心肌在I/R后出现羰基应激增强（均P＜0.05）。IPC并不能有效改善老龄鼠心肌ALDH2活性和羰基应激程度。预先激活老龄鼠心肌的ALDH2可显著抑制衰老心肌的羰基应激，改善IPC对老龄鼠I/R心肌SIRT1有激活作用（P＜0.05），进而促进老龄鼠心肌I/R后收缩舒张功能的恢复。结论激活心肌ALDH2可显著改善老龄鼠心肌IPC的保护作用，其机制可能与抑制羰基应激引起的SIRT1失活有关。
关键词： 乙醛脱氢酶 沉默信息调节因子相关酶1 缺血预处理 蛋白质羰基化 衰老 -
17β-雌二醇对去势大鼠神经系统的作用
目的:研究补充外源性雌激素对去势大鼠海马和皮质组织中核转录因子2/血红素加氧酶1(Nrf2/HO-1)、沉默信息调节因子相关酶1(SIRT1)表达含量及大鼠海马和皮质区域神经元排列形态和数量的影响,探讨雌激素对神经系统的作用.方法:选取清洁级3个月龄Sprague-Dawley(SD)雌性大鼠40只,随机分为4组.空白组(CON组)、假手术组(SHAM组)、去势对照组(OVX组)、去势实验组(OVX+E2组),每组10只.OVX+E2组给予17β-雌二醇(E2)灌胃,其余3组予生理盐水灌胃.16周后测定各组大鼠海马和皮质组织中的Nrf2、HO-1、SIRT1表达量,同时对大脑皮质及海马CA1区域神经元行形态学检查.结果:①OVX组大鼠海马及皮质中Nrf2、HO-1水平高于SHAM组,SIRT1水平低于SHAM组;OVX+E2组大鼠海马及皮质中Nrf2、SIRT1水平高于OVX组,HO-1水平则低于OVX组;②OVX+E2组海马及皮质组织中神经元数量及排列情况与SHAM组无明显差异,而OVX组海马及皮质尼氏体数量减少,神经元排列紊乱.结论:补充外源性雌激素可下调去势大鼠海马及皮质中HO-1表达,上调Nrf2、SIRT1表达,维持神经元数量及排列结构,从而保护神经系统.
关键词： 雌激素类 血红素氧化酶(脱环) 转录因子 沉默信息调节因子相关酶1 神经系统 -
老年大鼠沉默信息调节因子相关酶1的变化及其与心肌缺血预处理“失效”的关系
目的 通过观察成年和老年大鼠内源性及心肌缺血预处理沉默信息调节因子1(SIRT1)的差异,在与寿命相关的SIRT1蛋白水平揭示缺血预处理在老年大鼠中效果较成年大鼠差的可能原因.方法 雄性SD大鼠60只,成年和老年各30只,其中成年大鼠200～ 250 g,老年大鼠450～ 600 g(18月龄).两个年龄组分别采用随机数字表法随机分为3组(n=10),假手术(S组),缺血再灌注组(IR组),缺血预处理组(IPC组).通过结扎及松开冠状动脉左前降支建立在体大鼠缺血预处理及缺血再灌注模型,分别于缺血前及再灌注120 min监测血流动力学；分光光度法测定心肌组织中乳酸脱氢酶(LDH)含量、肌酸激酶同工酶(CK-MB)含量；ELISA法检测心肌组织SIRT1活性；RT-PCR法检测心肌组织中SIRT1蛋白mRNA；Western蛋白印迹检测SIRT1蛋白含量.结果 老年大鼠SIRT1蛋白基础水平较成年大鼠降低,SIRT1基础活性亦较成年大鼠下降(P＜0.05).缺血预处理时老年大鼠SIRT1含量较成年大鼠显著降低,SIRT1活性显著降低(P＜0.05).老年大鼠缺血预处理与老年大鼠缺血再灌注相比,SIRT1含量与活性均无显著改变(P＜0.05).成年大鼠缺血预处理与成年大鼠缺血再灌注相比,SIRT1含量与活性均显著升高.结论 SIRT1含量及活性随年龄增加而降低是缺血预处理在老年大鼠中丧失保护作用的原因.
关键词： 心肌缺血预处理 沉默信息调节因子相关酶1 -
头花蓼调控H.pylori相关性胃炎信号通路的作用机制
目的 NF-κB信号通路的激活在幽门螺杆菌相关性胃炎的发生发展中起到重要作用.文中旨在研究头花蓼在治疗HAG中NF-κB信号通路的作用,并观察其是否通过沉默信息调节因子1(SIRT1)调控NF-κB的乙酰化影响HAG的治疗效果. 方法 培养人永生化胃黏膜上皮细胞( GES-1),将H.pylori标准菌株ATCC700392按100∶1复制HAG细胞模型,随机分为模型组和头花蓼组,头花蓼组以80 μg/mL的头花蓼进行处理,模型组以H.pylori与GES-1细胞共培养,未做任何处理的GES-1细胞设为对照组;Real time PCR检测SIRT1、NF-κB/p65和肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA水平;Western blot检测总蛋白中SIRT1、NF-κB/p65及其乙酰化蛋白表达水平,细胞质、细胞核蛋白中SIRT1和NF-κB/p65的表达水平. 结果 H.py-lori感染GES-1细胞12h后,培养上清液中TNF-α水平较对照组升高[(2.02±0.60) vs (1.02±0.42),P<0.05].与对照组相比,模型组SIRT1表达含量下降[(1.637±0.085) vs (1.000±0.127),P<0.05],NF-κB/p65表达增加[(0.488±0.258) vs (1.000± 0.044),P<0.05],TNF-α mRNA表达增加[(0.356±0.019) vs (1.011±0.019),P<0.05];头花蓼组SIRT1mRNA水平(3.474± 0.349)上调,TNF-α表达(0.532±0.008)下调(P<0.05).与模型组相比,头花蓼组SIRT1mRNA表达升高,NF-κB/p65及TNF-α表达下降(P<0.05).与对照组比,模型组SIRT1蛋白表达水平下降,NF-κB/p65、Acetyl-NF-κB p65(Lys310)和TNF-α蛋白表达升高(P<0.05);头花蓼组SIRT1表达升高(P<0.05).与模型组进行比较,头花蓼组SIRT1表达升高,而NF-κB/p65、Acetyl-NF-κB p6(Lys310)和TNF-α蛋白表达下降(P<0.05).与对照组相比,模型组SIRT1在细胞质中表达下降(P<0.05),而在细胞核表达明显升高(P<0.05);头花蓼组SIRT1细胞质中表达下降,细胞核中表达明显升高(P<0.05),NF-κB/p65细胞质中表达上调(P<0.05).与模型组相比,头花蓼组SIRT1在细胞质无明显变化,在细胞核明显表达上调(P<0.05);NF-κB/p65细胞质中表达升高,细胞核中则表达下调(P<0.05). 结论 头花蓼能够活化胞核中的SIRT1,使胞核中活化的NF-κB/p65进行去乙酰化修饰来拮抗H.pylori诱导引发的细胞损伤.
关键词： 头花蓼 幽门螺杆菌相关性胃炎 沉默信息调节因子相关酶1 -
三七皂苷通过PPARγ调控SIRT1介导的狼疮肾炎小鼠脾淋巴细胞激素耐药及脂代谢影响的研究
[目的]观察三七皂苷(Panax notoginseng saponin,PNS)对激素耐药狼疮肾炎(lupus nephritis,LN)小鼠脾淋巴细胞过氧化物酶增殖体活化受体γ(peroxidase proliferator activated receptor gamma,PPARγ)、沉默信息调节因子相关酶1(silent information regulation factor related enzyme 1,SIRT1)和三磷酸腺苷结合盒转运体A1 (adenosine triphosphate binding cassette transporter A1,ABCA1)表达的影响,探索PNS改善激素耐药和脂代谢紊乱的双重作用,为运用活血化瘀中药提高难治性LN临床疗效提供科学依据.[方法]采用密度梯度法分离NZB/WF1小鼠的脾淋巴细胞,用小剂量甲基强的松龙诱导细胞产生激素耐药,将诱导后的细胞分为模型组、PPARγy质粒转染组、PPARγsiRNA+PNS组和PNS组,并以未诱导耐药的NZB/WF1小鼠脾淋巴细胞作为对照组,各组细胞培养72h后以Real-time PCR检测各组淋巴细胞PPARγy和SIRT1 mRNA表达,Western blot检测PPARγ和SIRT1蛋白表达,荧光分光光度法检测细胞内胆固醇酯含量,流式细胞术检测ABCA1蛋白表达.[结果](1)上调PPARγ能抑制SIRT1高表达,模型组PPARγ mRNA和蛋白表达水平均低于对照组,SIRT1 mRNA和蛋白表达水平均高于对照组(P ＜0.05);通过质粒转染上调PPARγ水平后,PPARγy质粒转染组的SIRT1 mRNA和蛋白表达水平均低于模型组(P＜0.05);(2)PNS组PPARγ表达高于模型组,SIRT1表达则减低(P＜0.05).尽管PNS组PPARγymRNA表达水平低于PPARγy质粒转染组,但两组SIRT1 mRNA表达水平无统计学差异(P＞0.05);与模型组比较,PPARγ siRNA+PNS组的SIRT1 mRNA和蛋白表达水平均下降(P＜0.05).(3)PNS具有调节细胞内脂代谢紊乱作用,模型组细胞内胆固醇酯含量低于对照组(P＜0.05);PNS组细胞内胆固醇酯含量高于对照组,ABCA1蛋白表达则低于对照组(P＜0.05).[结论](1)激素耐药的LN小鼠脾淋巴细胞内存在脂代谢紊乱.(2)PNS具有逆转激素耐药和调节细胞内脂代谢紊乱的双重效应.
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SlRT1与眼科疾病的研究进展
沉默信息调节因子相关酶1( sirtuin type1, SIRT1)是一种细胞代谢辅酶NAD+依赖的Ⅲ类组蛋白去乙酰化酶,通过转录调控,参与基因转录、能量代谢以及细胞衰老过程的调节,具有延长生物寿命和延缓多种年龄相关性疾病发展的作用,在抗衰老研究领域备受关注。近年的研究显示SIRT1在眼科多种疾病的发病机制中占有重要的地位,尤其是眼表疾病、青光眼、白内障、葡萄膜炎以及眼底病等,针对SIRT1活性的促进可能成为眼科新型药物的治疗靶点。本文将对SIRT1与眼科疾病的研究报道进行综述。
关键词： 沉默信息调节因子相关酶1 眼科疾病 调控
