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肾气丸通过TGF-β1/Smads/ILK信号途径干预肾小管上皮细胞间充质转分化的分子机制

陈红淑;杨元宵;周小杰;何潆;李昌煜

摘要: 目的:探讨肾气丸含药血清对转化生长因子β1 (TGF-β 1)诱导人肾小管上皮细胞株HK-2转分化的作用及其分子机制.方法:将细胞分为:无血清对照组,TGF-β1组(10ng/mL),空白血清组,肾气丸低、中、高剂量组.观察各组细胞形态学变化,ELISA法检测细胞上清液中Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)和纤维连接蛋白(FN)含量变化;荧光定量PCR法检测E-cadherin和Vimentin mRNA水平,蛋白免疫印迹法检测Smad2/3、ILK、GSK-3β等蛋白及其磷酸化水平.结果:TGF-β 1刺激后,HK-2细胞由铺路石变成长梭形状,E-cadherin基因及蛋白水平下调(P<0.01),Vimentin基因及蛋白水平显著上升(P<0.01);给予肾气丸含药血清干预后,可抑制上述改变(P<0.01,P<0.05).进一步研究发现,肾气丸能显著抑制p-Smad2/3、ILK、p-GSK-3 β和β-catenin蛋白表达(P<0.05,P<0.01).结论:肾气丸能显著抑制TGF-β1诱导HK-2细胞转分化过程,作用机制可能与其抑制TGF-β/Smads/ILK信号通路的激活有关.

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