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新西兰长耳兔作为TTV感染动物模型初步研究

王长奇;陈燕萍;伍淑云;袁绍云;周宪明

摘要: 为了探讨TTV是否能在新西兰长耳兔(以下简称兔)复制,我们进行了TTV对兔传代感染试验,证明它能感染也能传代。一、材料与方法1. 实验动物:由湖南省卫生防疫站提供成年新西兰兔。2. 第一代感染实验:收集六份非甲至非庚型肝炎TTV阳性血清,每只兔由耳静脉注射阳性血清1ml,定期采血(感染前采血,感染后每周采血一次),分离血清,当天检测生化指标,血清标本于-20℃保存备用。第二、第三代感染试验,用四只兔进行接种,其中2只兔感染成功继续接种,方法与第一代实验相同。将第二代感染成功兔血清1ml接种于第三代兔体内。3. 感染指标及测定方法:(1)标本中TTV DNA的检测,用nest-PCR方法检测血清中TTV DNA。(2)生物化学指标检测:对感染兔进行系列采样,定期测定ALT和直接、间接胆红素等各项指标的变化。(3)感染兔体内TTV DNA基因的克隆及序列测定:从感染TTV的血清标本中克隆TTV的部分基因进行序列测定,操作按常规进行,对测定序列采用Golbenkey Clustail及Blast程序软件进行序列比较。

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