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冻融和移植过程对人胎儿卵巢组织及超微结构的影响
目的 探讨冻融和移植过程对人胎儿卵巢组织超微结构的影响.方法 6例23～34w引产的胎儿卵巢慢冻速融,并移植到裸鼠肾被膜下,分别于移植后48 h、7和28 d回收移植物.卵巢组织分为新鲜对照组、冻融组、移植后48 h、7 d及28 d组.电镜和光镜下观察各组形态学改变.结果 胎儿卵巢组织冻融前后光镜下的卵泡密度(23.92±3.94)及(22.70±4.18)无显著差异,移植后48 h卵泡密度(16.70±3.98)与移植前比较显著下降(P＜0.01).各组卵泡超微结构整体上保存良好.冷冻对卵巢问质损伤较大且局部差异大,移植后48 h间质细胞稀疏,白细胞浸润;移植后7及28 d,间质内可见较多胶原纤维束,大量微小血管生长.结论 人胎儿卵巢组织的冻融损伤主要表现在间质,而移植损伤在移植后48 h内严重;结合光镜和电镜观察手段能更全面评价冻融过程和移植过程对胎儿卵巢组织的影响.
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胎儿卵巢畸胎瘤超声表现1例
患者女,26岁.孕1产0,孕32周,产前常规超声检查:顶径8.3 cm,股骨长6.4 cm,四腔心和2组房室瓣可见,心脏中央"十字"交叉存在.脊柱排列整齐,腹壁完整.胎儿胃、肝脏、双肾、及膀胱可见.胎盘前壁,Ⅱ级.胎心率158次/min,羊水指数12.5 cm.膀胱后方相当于卵巢部位探及大小约2.5 cm×2.3 cm的低中团状回声,边界清,边缘规整,CDFI:边探及少量血流信号(图1).超声提示:1)宫内单活胎、头位孕32周;(2)胎儿膀胱后方低中团状回声(考虑胎儿卵巢肿瘤).引产后病理证实为胎儿卵巢囊性畸胎瘤.
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胎儿卵巢组织移植治疗卵巢性闭经的研究
目的:评价胎儿卵巢组织移植治疗卵巢性闭经的价值.方法:收集孕20周～24周治疗性引产女性胎儿标本,获取卵巢,经程序冷冻后保存,使用前快速复温,加入RPM1640培养液进行组织培养.2003年3月至2003年8月共有3例自愿受试者在我院接受了胎儿卵巢组织移植术,其中1例为卵巢功能不良,1例为先天性卵巢发育不全,另1例为双侧卵巢切除术.结果:胎儿卵巢组织冻存后快速复温,伊红染料排斥试验检测活细胞率可达到84.5%;组织培养后卵原细胞有成熟表现,部分生长为初级卵泡.卵巢组织移植后,2例有自体卵巢患者有周期性月经来潮,其中1例术后第4个月可观察到规则排卵.1例双侧卵巢切除患者潮热症状改善,雌激素水平上升,但不能达到生育年龄水平,月经周期未能恢复.结论:胎儿卵巢组织移植可有效的治疗卵巢内分泌功能不足.
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胎儿卵巢的形态学及细胞凋亡的观察与研究
目的：探讨人胎儿卵泡的发育形成过程及卵细胞凋亡情况。方法收集2013年1~12月于广东省计划生育科学技术研究所行中期妊娠及晚期妊娠(24~32周)引产的女性胎儿卵巢组织18例。其中24~27周(孕中期)胎儿卵巢组织8例,28~32周(孕晚期)胎儿卵巢组织10例。采用免疫组化苏木精-伊红(HE)染色及原位末端标记法(TUNEL),观察胎儿卵巢卵泡发育及形成过程及该过程中卵细胞凋亡情况。结果 HE染色显微镜下观察,孕中期胎龄卵巢原始卵母细胞较多,卵巢间质少,颗粒细胞较少。随着胎龄的增加,颗粒细胞逐渐增多；围绕卵母细胞,原始卵泡逐渐形成并开始增多,卵母细胞数量减少。孕晚期原始卵母细胞明显减少,原始卵泡形成,数量进一步增多,随着孕龄增加,原始卵泡愈发完整。 TUNEL染色观察见阳性凋亡细胞多见于未形成卵泡的卵母细胞,卵细胞周围的颗粒细胞在孕晚期可见少许凋亡,卵泡内卵细胞未见阳性染色。孕中期卵巢卵母细胞凋亡明显多于孕晚期,且凋亡主要发生于未形成原始卵泡的卵母细胞。结论胎儿卵巢发育过程中,原始卵母细胞数量逐步减少,原始卵泡形成,其发育过程中原始卵母细胞不断发生凋亡,导致生殖细胞丢失。
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胎儿卵巢移植研究进展
卵巢是女性重要的生殖内分泌器官.胎儿卵巢移植为丧失卵巢功能的女性提供激素支持及可能的生育保障,其移植的方式有多种:同种异体移植、培养后移植、冷冻后移植.目前,胎儿卵巢移植技术已较成熟,虽然在应用上仍存在一些问题,但相信在不久的将来,胎儿卵巢移植技术一定会有更加广阔的应用前景.
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丹参对冻融人胎儿卵巢组织异种移植早期血管生成的影响
目的:研究冻融人胎儿卵巢组织移植早期血管生成过程中微血管形态和密度的改变以及血管生成相关基因mRNA的表达;探讨丹参注射液对移植物血管生成的影响.方法:冻融胎儿卵巢组织异种移植至裸鼠肾被膜下,按给药不同分为对照组(生理盐水)和丹参组(丹参注射液每只0.09g/d),分别于移植后48 h、7 d和28 d回收移植物.结果:移植后两组卵巢组织微血管密度均明显增多;对照组移植后7 d血管密度达峰,丹参组血管密度在移植后48 h即已显著上升,此后两个时间段保持相对平稳.Angiopoietim-2 mRNA表达在移植后48h两组均显著升高,丹参组上升幅度大于对照组(P＜0.05).结论:冻融人胎儿卵巢组织新血管生成开始于异种移植后48h内,移植后7 d组织内微血管密度达峰.丹参在移植早期应用可以促进移植后血管生成,其机制可能与它增加了血管生成相关因子Ang-2 mRNA的表达有关.
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人胎儿卵巢免疫原性的研究
目的:比较成人卵巢、胎儿卵巢免疫原性的差异,以及培养前后胎儿卵巢免疫原性的变化.方法:对成人及培养前后胎儿卵巢的冰冻切片用HLA-ABC及HLA-DR单克隆抗体进行免疫组织化学染色,观察其阳性细胞形态及分布并计数.结果:成人卵巢内HLA-ABC及HLA-DR抗原含量显著多于胎儿卵巢(P＜0.001),且培养后胎儿卵巢HLA-DR抗原含量显著低于培养前(P＜0.01),随培养天数的增加HLA-DR抗原含量逐渐减少(P＜0.01).结论:胎儿卵巢的免疫原性低于成人卵巢,且培养后进一步降低.以培养一段时间的胎儿卵巢作为移植供体,必将提高临床卵巢移植的成功率.
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人胎儿卵巢移植可行性的实验研究
目的探讨胎儿卵巢能否用于临床移植.方法取自流产或病理原因水囊引产的胎儿卵巢共49份.将卵巢切成碎块进行组织培养,培养后观察组织学变化,同时测定培养液中雌二醇(E2)浓度;取培养前后胎儿卵巢用免疫组化法检测 FSH-Binding、LH-Binding、LH-R、HLA-ABC、HLA-DR抗原含量;观察冷冻保存后卵泡形态发育及E2分泌.结果胎儿卵巢在体外培养条件下,能进一步发育,而且能分泌E2;胎儿卵巢早于20周出现FSH-Binding、LH-Binding、LH-R阳性表达;胎儿卵巢 HLA -ABC、HLA-DR抗原含量明显低于成人卵巢,经体外培养后HLA-DR抗原含量进一步降低;胎儿卵巢复苏培养后卵泡仍能进一步发育和产生E2.结论胎儿卵巢可用于卵巢移植,作为供体优于成人卵巢.
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移植部位和外源性激素刺激时间对人胎卵巢组织异种移植后卵泡发育的影响
目的:探讨移植部位和外源性激素刺激时间对胎儿卵巢组织异种移植后卵泡发育的影响.方法:将胎儿卵巢组织移植到裸鼠背部皮下和肾被膜下,移植1个月后开始隔天腹腔注射PMSG 5 IU,分别于移植后10～14 w、18～22 w、26-30 w取材,通过石蜡包埋切片进行组织学评价和免疫组织化学技术(增殖细胞核抗原,PCNA)分析.结果:肾被膜下组移植物回收率显著高于背部皮下组(95.8%～70.8%),但两组组织存活率比较差异无显著性(83.3%～62.5%),各个移植组中每高倍视野下的原始卵泡数与对照组相比都呈显著下降(P＜0.05),术后10 w移植物中已见初级及次级卵泡的发育,18 w有窦卵泡的发育.结论:胎儿卵巢组织异种移植后能存活且外源性促性腺激素下其原始卵泡在4个月左右发育到窦卵泡阶段;背部皮下和肾被膜下均为适合移植物中卵泡发育的部位.
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胎儿卵巢始基卵泡IGF-IR表达及临床意义
成人卵巢存在由胰岛素样生长因子Ⅰ、Ⅱ(IGF-I、IGF-Ⅱ)及相应受体和胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)组成的旁分泌-自分泌系统,参与卵泡发育和优势卵泡的选择[1,2].我们采用免疫组化方法检测了44例胎儿卵巢组织中胰岛素样生长因子I受体(IGF-IR)的表达情况,探讨了它与人类胎儿卵巢分化、发育的关系,现报道如下.
